基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的桂枝甘草湯抗失眠作用的潛在機(jī)制研究

黃強(qiáng)　汪亞楠　韓飛　劉明

〔摘要〕 目的 利用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù)對桂枝甘草湯抗失眠的潛在作用機(jī)制進(jìn)行探討研究。方法 首先，利用TCMSP、Swiss、SuperPred和Stitch數(shù)據(jù)庫尋找與桂枝甘草湯方中2味中藥材有關(guān)的化學(xué)成分及其可能的作用靶點(diǎn)，并設(shè)定OB≥30%、DL≥0.18為閾值對化學(xué)成分進(jìn)行篩選，再利用文獻(xiàn)檢索加以補(bǔ)充;同時，通過OMIM、TTD、Gene Card、 Pharm Gkb等數(shù)據(jù)庫獲取與失眠癥相關(guān)的靶標(biāo)，并進(jìn)一步建立桂枝甘草湯抗失眠作用的靶點(diǎn);然后，利用DAVID數(shù)據(jù)庫對失眠癥相關(guān)的作用靶點(diǎn)進(jìn)行GO及KEGG富集分析;最后，采用Cytoscape軟件構(gòu)建“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)并進(jìn)行度值和介數(shù)值分析，確認(rèn)關(guān)鍵靶點(diǎn)和關(guān)鍵通路。結(jié)果 在桂枝甘草湯中，共篩選出101個與失眠相關(guān)的潛在活性成分，主要涉及MAPT、ESR1、CYP19A1等85個潛在作用靶點(diǎn);GO 生物功能分析共包含293條富集結(jié)果，主要涉及蛋白結(jié)合、質(zhì)膜等;KEGG富集分析得到18條代謝通路，主要包括神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路、鈣信號通路、5-羥色胺能突觸通路等。結(jié)論 本研究揭示了桂枝甘草湯治療失眠癥的“多成分-多靶點(diǎn)-多途徑”的作用特點(diǎn)，并預(yù)測了其可能的活性成分、關(guān)鍵靶點(diǎn)和作用通路，為其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制研究提供了理論基礎(chǔ)。

〔關(guān)鍵詞〕 失眠;桂枝甘草湯;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué);靶點(diǎn);作用機(jī)制

〔中圖分類號〕R256.23? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ?〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2020.04.013

Potential Mechanism of Anti-insomnia Effect of Guizhi Gancao Decoction Based on

Network Pharmacology

HUANG Qiang1， WANG Yanan2， HAN Fei2， LIU Ming1*

（1. Patent Examination Cooperation Jiangsu Center of the Patent Office， State Intellectual Property Office， Suzhou， Jiangsu 215163， China; 2. Shenyang Pharmaceutical University， Shenyang， Liaoning 110016， China）

〔Abstract〕 Objective To study the potential mechanism of the anti-insomnia effect of Guizhi Gancao Decoction （GGD） by using network pharmacological technology. Methods Firstly， TCMSP， Swiss， SuperPred and Stitch databases were used to search for the chemical compounds and the possible targets related to the 2 herbs in GGD. OB ≥ 30%， DL ≥ 0.18 were set as screening conditions to screen for chemical compounds. Literatures were searched for supplement. Meanwhile， the targets related to insomnia were screened through OMIM， TTD， Gene Card and Pharm Gkb databases. Moreover， the interactive targets of GGD and insomnia were further constructed. Then， GO analysis and KEGG enrichment analysis of insomnia related targets were performed using DAVID database. Finally， degree and betweenness analysis were performed to find key targets and key pathways after the “single herb-active compounds-acting targets” interaction network was constructed by Cytoscape software. Results A total of 101 potential active compounds related to insomnia were screened in GGD， which mainly involved 85 potential targets such as MAPT， ESR1 and CYP19A1. A total of 293 enrichment results were obtained by GO analysis， mainly involving protein binding， plasma membrane， etc. 18 metabolic pathways were obtained through KEGG analysis， mainly including neuroactive ligand-receptor interaction pathway， calcium signaling pathway， serotonergic synapse and etc. Conclusion This study revealed the action characteristics of GGD with “multi-compounds， multi-targets and multi-pathways” in the treatment of insomnia and predicted its possible active ingredients， key targets and action pathways， which provided a theoretical basis for the study of its pharmacodynamic material basis and action mechanism.

〔Keywords〕? insomnia; Guizhi Gancao Decoction; network pharmacology; targets; action mechanism

失眠通常是指患者對睡眠時間和（或）質(zhì)量不滿足而影響日間社會功能的一種主觀體驗(yàn)，臨床表現(xiàn)為入睡困難、睡眠維持障礙、早醒、睡眠質(zhì)量下降、總睡眠時間減少并同時伴有日間功能障礙等[1-2]。近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的生活壓力越來越大，我國失眠群體正趨于年輕化。2018年中國睡眠研究會數(shù)據(jù)顯示，我國超過60%的重度失眠患者為90后[3]。而且已有多項(xiàng)研究表明，失眠往往與人體多個系統(tǒng)的生理功能紊亂和多種疾病的發(fā)生發(fā)展具有密切的關(guān)系[4-5]。然而，失眠的形成原因多樣、發(fā)生機(jī)制復(fù)雜、臨床研究尚不充分，針對其治療的藥物也多以鎮(zhèn)靜催眠類西藥為主，且這些藥物普遍具有成癮性，患者長期服用易產(chǎn)生藥物依賴性，在治療過程中往往難以取得理想的療效[6-7]。因此，研究開發(fā)可有效防治失眠且毒副作用小的藥物具有重大意義。

傳統(tǒng)中醫(yī)認(rèn)為人的睡眠是營衛(wèi)之氣正常循行，陰陽之氣規(guī)律轉(zhuǎn)化的結(jié)果，當(dāng)這種規(guī)律性遭到破壞時，人體就會出現(xiàn)睡眠障礙，而中醫(yī)藥可通過辨證論治補(bǔ)其不足，瀉其有余，調(diào)其虛實(shí)，使氣血調(diào)和，陰陽平衡，從根本上對機(jī)體進(jìn)行調(diào)節(jié)達(dá)到痊愈的目的[8]。而且，中醫(yī)藥治療失眠既不會產(chǎn)生成癮性、依賴性和耐藥性，且不良反應(yīng)少，毒副作用小，故用中醫(yī)藥辨證治療失眠具有很大的優(yōu)勢。中藥桂枝甘草湯出自漢代張仲景名著《傷寒論》，是由桂枝和甘草兩味中藥組成，具有溫補(bǔ)心陽、生陽化氣之功效，是治療心陽虛之祖方[9]。近期，我們通過研究桂枝甘草湯對腹腔注射氯苯丙氨酸所致失眠模型大鼠的影響發(fā)現(xiàn)，桂枝甘草湯可通過調(diào)控大鼠血漿和腦組織內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)5-HT、NE、DA的平衡而達(dá)到抗失眠的藥理作用。由此可見，桂枝甘草湯具有潛在的抗失眠作用。

英國藥理學(xué)家Hopkins[10]于2007年在系統(tǒng)生物學(xué)與多向藥理學(xué)的基礎(chǔ)上首次提出了網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的概念。該技術(shù)是利用生物分子網(wǎng)絡(luò)分析方法，通過網(wǎng)絡(luò)中節(jié)點(diǎn)的連接和節(jié)點(diǎn)之間的相互作用關(guān)系來分析網(wǎng)絡(luò)的特征，從多維度視角探索藥物干預(yù)疾病的分子機(jī)制，特別適用于多成分、多靶點(diǎn)、多途徑的中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制的研究[11-13]。因此，本研究嘗試采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法和思維，通過構(gòu)建“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)模型系統(tǒng)地預(yù)測桂枝甘草湯抗失眠癥“多成分-多靶點(diǎn)-多途徑”的作用特點(diǎn)，以期為進(jìn)一步研究其抗失眠的藥效物質(zhì)和作用機(jī)制提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1? 軟件與數(shù)據(jù)庫

TCMSP數(shù)據(jù)庫（http：//lsp.nwu.edu.cn/）;ChemBioDraw軟件;Swiss數(shù)據(jù)庫（http：//www.swisstargetprediction.ch/）;SuperPred數(shù)據(jù)庫（http：//prediction.charite.de/）;Stitch數(shù)據(jù)庫（http：//stitch.embl.de/）;? ? ?String數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org/）;OMIM數(shù)據(jù)庫（http：//www.omim.org/）;TTD數(shù)據(jù)庫（http：//bidd.nus.edu.sg/BIDD-Databases/TTD/）;PharmGkb數(shù)據(jù)庫（https：//www.pharmgkb.org/）;Gene Card數(shù)據(jù)庫（https：//www.genecards.org/）;Uniprot數(shù) 據(jù) 庫（http：//www.unipr？鄄ot.org/）;DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫（https：//david. ncifcrf.gov/）;Cytoscape軟件（Version 3.4.0）;OriginPro軟件（Version 8.0）;Omicshare平臺（http：//www.omicshare.com/tools/index.php/）。

1.2? 方法

1.2.1? 桂枝甘草湯化學(xué)成分信息的歸納和整理? 利用TCMSP數(shù)據(jù)庫并結(jié)合文獻(xiàn)檢索收集與桂枝甘草湯中的2味藥材相關(guān)的化學(xué)成分信息并保存其化學(xué)結(jié)構(gòu)，然后采用ChemBioDraw軟件得到化學(xué)成分結(jié)構(gòu)的Smiles格式。

1.2.2? 活性成分的篩選? 收集的化學(xué)成分中，以同時滿足OB≥30%、DL≥0.18為條件進(jìn)行化合物篩選，得到桂枝甘草湯的潛在活性成分。同時，通過結(jié)合文獻(xiàn)挖掘和整理，對篩選結(jié)果進(jìn)行補(bǔ)充，盡可能全面地獲得桂枝甘草湯的主要活性成分。

1.2.3? 靶點(diǎn)的預(yù)測? 在Swiss、SuperPred、Stitch數(shù)據(jù)庫中上傳桂枝甘草湯潛在活性成分的Smiles結(jié)構(gòu)進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測，將所得靶點(diǎn)去重后即得活性成分相關(guān)靶點(diǎn)信息。以“insomnia”為關(guān)鍵詞在OMIM、TTD、Gene Card、PharmGkb數(shù)據(jù)庫中進(jìn)行檢索獲取相關(guān)靶點(diǎn)信息，將得到的靶點(diǎn)利用Uniprot矯正并去除假陽性基因，合并去重后即得疾病相關(guān)靶點(diǎn)信息。最后，將活性成分相關(guān)靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)進(jìn)行對比分析，得交互靶標(biāo)，即桂枝甘草湯抗失眠的潛在作用靶點(diǎn)。

1.2.4? 靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建? 通過String數(shù)據(jù)庫獲得交互靶標(biāo)的靶點(diǎn)相互作用關(guān)系，并保存為TSV格式[14]。然后，將該文件中的node1、node2和combined score信息導(dǎo)入到Cytoscape軟件中，構(gòu)建靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)。

1.2.5? 網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建? 利用Cytoscape 3.4.0軟件對“1.2.4”數(shù)據(jù)進(jìn)行可視化處理，即構(gòu)建桂枝甘草湯抗失眠的“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)模型，再利用度值、介數(shù)值等參數(shù)對上述模型進(jìn)行分析。節(jié)點(diǎn)的度值和介數(shù)值越大，在網(wǎng)絡(luò)中的重要性就越強(qiáng)[15]。

1.2.6? GO生物功能富集分析? 將上述潛在作用靶點(diǎn)輸入到DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫中，獲得GO生物功能富集分析，然后限定P<0.05，使用OriginPro軟件將結(jié)果繪制條形圖展示。

1.2.7? KEGG代謝通路富集分析? 利用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對潛在作用靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG代謝通路富集分析。將基因物種和背景限定為人，并設(shè)定P<0.05，得富集結(jié)果，再通過Omicshare平臺進(jìn)行可視化處理。

2 結(jié)果

2.1? 桂枝甘草湯潛在活性成分篩選

通過TCMSP數(shù)據(jù)庫收集桂枝甘草湯中2味藥材的化合物，再根據(jù)OB和DL值共篩選得到99個成分，但因甘草中g(shù)lycyroside與疾病靶點(diǎn)無關(guān)聯(lián)性而被剔除。因此，共得到98個潛在活性成分，其中甘草中包含91個，桂枝中包含7個。另外，通過文獻(xiàn)挖掘和整理發(fā)現(xiàn)，在桂枝和甘草中仍可能含有一些其它的活性成分，因其不滿足OB、DL值而被刪除。比如，桂枝中桂皮醛具有降壓、降糖、抗炎、抗抑郁、神經(jīng)保護(hù)等藥理作用[16];甘草中甘草甜素可能通過調(diào)控cyclin D1和P21蛋白表達(dá)以及PI3K/AKT信號通路激活來抑制前列腺癌細(xì)胞株P(guān)C3的生長[17];而18β-甘草次酸可通過抑制炎癥反應(yīng)及氧化應(yīng)激，從而減輕腦組織細(xì)胞凋亡及腦損傷[18]。故將上述3個活性成分納入，最終獲得101個潛在活性成分，其基本信息見表1。

2.2? 桂枝甘草湯抗失眠的靶點(diǎn)預(yù)測

通過Swiss、SuperPred、Stitch數(shù)據(jù)庫對101個潛在活性成分進(jìn)行靶點(diǎn)預(yù)測，得甘草潛在作用靶點(diǎn)452個、桂枝201個;將靶點(diǎn)進(jìn)行合并去重得活性成分相關(guān)靶點(diǎn)491個。然后，利用OMIM、TTD、GAD、PharmGkb數(shù)據(jù)庫以“insomnia”為關(guān)鍵詞進(jìn)行檢索，篩選得疾病相關(guān)靶點(diǎn)668個。最后，將潛在活性成分靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)進(jìn)行對比匹配，最終獲得與桂枝甘草湯抗失眠癥相關(guān)的潛在作用靶點(diǎn)85個。

2.3? 靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)分析

利用String數(shù)據(jù)庫獲得85個潛在作用靶點(diǎn)的相互作用關(guān)系。該網(wǎng)絡(luò)中包含84個節(jié)點(diǎn)和567條邊，平均局部聚類系數(shù)為0.557，平均節(jié)點(diǎn)度值為13.3。（SLC28A2因與其它靶點(diǎn)沒有相聯(lián)性而未體現(xiàn)在該網(wǎng)絡(luò)中）從圖1可以直觀的看出，度值較大的靶點(diǎn)是ALB、BDNF、SLC6A4、HTR3A、ACHE，分別為48、40、27、27、27，說明這些靶點(diǎn)在整個網(wǎng)絡(luò)中發(fā)揮重要作用。提示這些靶點(diǎn)可能是桂枝甘草湯治療失眠癥的關(guān)鍵靶點(diǎn)。

2.4? 桂枝甘草湯單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)分析

利用Cytoscape軟件構(gòu)建桂枝甘草湯中2味藥材、101個潛在活性成分、85個潛在作用靶點(diǎn)的“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)（圖2）。在該網(wǎng)絡(luò)中，共包含188個節(jié)點(diǎn)和616條邊。表1中列出了101個潛在活性成分的度值。據(jù)表1可知，化合物cinnamaldehyde（桂皮醛）度值最大，與40個靶點(diǎn)相連，介數(shù)值為0.105 8;其次是glycyrrhizin（甘草甜素），與38個靶點(diǎn)相連，介數(shù)值為0.122 6;然后是quercetin（槲皮素），與37個靶點(diǎn)相連，介數(shù)值為0.160 3。這些擁有較高度值和介數(shù)值的潛在活性成分可能在桂枝甘草湯抗失眠的功效中發(fā)揮著重要的作用。此外，靶點(diǎn)MAPT、ESR1、CYP19A1也擁有較高的度值（79、42、39）和介數(shù)值（0.239 3、0.064 8、0.034 3）。由此推斷，這些靶點(diǎn)可能與桂枝甘草湯抗失眠的藥理作用密切相關(guān)。對網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行系統(tǒng)分析可知，整個網(wǎng)絡(luò)的平均度值為6.54，其中每個化合物平均與6.09個靶點(diǎn)相互作用，每個靶點(diǎn)平均與6.05個化合物相互作用，說明在桂枝甘草湯中存在著不同活性成分作用于不同靶點(diǎn)或作用于同一靶點(diǎn)的現(xiàn)象，充分體現(xiàn)出桂枝甘草湯以“多成分、多靶點(diǎn)”協(xié)同治療失眠癥的作用機(jī)制。

2.5? GO生物功能富集分析

采用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對85個潛在作用靶點(diǎn)進(jìn)行GO基因本體富集分析，確定了293個GO條目。其中，相關(guān)條目最多的是生物學(xué)過程（BP）211個，主要涉及氧化還原過程、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、G蛋白偶聯(lián)受體信號通路等;其次是分子功能（MF）相關(guān)條目53個，主要涉及蛋白結(jié)合、酶結(jié)合、氧化還原酶活性等;最后是細(xì)胞組成（CC）相關(guān)條目29個，主要涉及質(zhì)膜、膜的組成、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等;然后限定P<0.05，利用OriginPro8.0繪制條形圖展示前20條富集結(jié)果（圖3）。顯然，與桂枝甘草湯抗失眠相關(guān)的關(guān)鍵靶標(biāo)主要與氧化還原過程、蛋白結(jié)合、質(zhì)膜等生物功能有關(guān)。

2.6? KEGG代謝通路富集分析

利用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對85個潛在作用靶點(diǎn)進(jìn)行KEGG代謝通路富集分析，限定P<0.05，共獲得18條KEGG代謝通路及其相關(guān)信息，再通過Omicshare平臺對富集分析結(jié)果進(jìn)行可視化處理，得氣泡圖（圖4）。從圖中可以看出，涉及基因數(shù)較多的代謝通路主要包括：神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路（neuroactive ligand-receptor interaction）、鈣信號通路（calcium signaling pathway）、5-羥色胺能突觸通路（serotonergic synapse）、cAMP信號通路（cAMP signaling pathway）等。以上數(shù)據(jù)表明，桂枝甘草湯的潛在活性成分可能主要通過作用于上述代謝通路發(fā)揮治療失眠癥的療效。

3 討論

本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究策略，構(gòu)建了桂枝甘草湯“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”交互網(wǎng)絡(luò)模型，最終共篩選出101個潛在活性成分，85個作用靶點(diǎn)，18條與失眠癥相關(guān)的KEGG代謝通路，基本闡明了桂枝甘草湯治療失眠癥的“多成分-多靶點(diǎn)-多通路”的可能作用機(jī)制。

從桂枝甘草湯“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)中分析可知，桂皮醛是與失眠癥相關(guān)靶點(diǎn)作用最多的化學(xué)成分。鄭芳昊等[19]采用行為藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，通過高架十字迷宮和曠場實(shí)驗(yàn)證明了桂皮醛可使大鼠睡眠潛伏期縮短，睡眠持續(xù)時間增加。肖剛等[20]通過研究甘草甜素對大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血后血腦屏障損傷的影響發(fā)現(xiàn)，甘草甜素可降低腦組織中的IL-6細(xì)胞因子。而IL-6是一種與睡眠/剝奪關(guān)系密切的細(xì)胞因子，IL-6能夠抑制IL-1的合成，降低IL-6細(xì)胞因子，則IL-1合成增多，進(jìn)而增強(qiáng)患者非快眼動睡眠的時間[21]?？梢?，以上化學(xué)成分極有可能是桂枝甘草湯抗失眠的藥效物質(zhì)。

靶點(diǎn)分析結(jié)果表明，靶點(diǎn)MAPT其度值最大，可能是重要的關(guān)鍵靶點(diǎn)。相關(guān)研究[22-23]表明，MAPT基因主要負(fù)責(zé)編碼神經(jīng)元微管相關(guān)蛋白tau，當(dāng)MAPT基因突變時則會加劇tau蛋白的聚集，引起神經(jīng)元細(xì)胞功能障礙和神經(jīng)元數(shù)目減少，導(dǎo)致γ-氨基丁酸（GABA）、多巴胺（DA）等神經(jīng)遞質(zhì)釋放異常，進(jìn)而引發(fā)睡眠障礙。因此，靶點(diǎn)MAPT可能是桂枝甘草湯治療失眠癥的關(guān)鍵作用靶點(diǎn)。靶點(diǎn)ESR1也在“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”相互作用網(wǎng)絡(luò)中顯示出突出的地位。Helen等[24]認(rèn)為雌激素可以通過作用于表達(dá)ER的GABA能中間神經(jīng)元，促進(jìn)鄰近神經(jīng)元腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（brain derived neur？鄄otrophic factor，BDNF）的表達(dá)，或者通過與位于BDNF基因上的雌激素反應(yīng)元件相互作用，誘導(dǎo)BDNF的表達(dá)。同時，已有多項(xiàng)臨床研究表明BDNF的神經(jīng)營養(yǎng)功能參與了睡眠的自我平衡調(diào)節(jié)過程[25]。

KEGG代謝通路結(jié)果顯示，涉及靶點(diǎn)最多的代謝通路是神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路，該通路包含質(zhì)膜上所有與細(xì)胞內(nèi)外信號通路相關(guān)的受體和配體[26]。A類生物胺類是一種對多種行為有潛在效應(yīng)的神經(jīng)遞質(zhì)，其中包括與失眠癥密切相關(guān)的DA、NE、5-HT等神經(jīng)遞質(zhì)，當(dāng)腦內(nèi)5-HT升高，NE、DA降低時，將有助于失眠癥的治療。其次，在桂枝甘草湯發(fā)揮抗失眠的藥理過程中鈣信號通路可能也發(fā)揮著重要的作用。眾所周知，神經(jīng)遞質(zhì)的釋放離不開鈣離子通道，而N型和P/Q型鈣離子通道則主要存在于神經(jīng)元內(nèi)，影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)DA、NE、Glu、GABA等神經(jīng)遞質(zhì)的釋放和傳遞，臨床上治療失眠癥的西藥多是GABA復(fù)合受體拮抗劑，其作用機(jī)制就是通過促進(jìn)中樞抑制性神經(jīng)遞質(zhì)GABA的釋放或突觸的傳遞而發(fā)揮抗失眠的藥理作用[27]。所以，桂枝甘草湯可能通過調(diào)節(jié)上述這些代謝通路而影響中樞神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)遞質(zhì)的釋放及突觸傳遞，最終達(dá)到良好的治療效果。

綜上所述，本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法剖析了桂枝甘草湯治療失眠癥的潛在藥效物質(zhì)和可能的作用機(jī)制，構(gòu)建了“單味藥-活性成分-作用靶點(diǎn)”和靶點(diǎn)相互作用網(wǎng)絡(luò)，并進(jìn)行了生物功能和代謝通路富集分析。結(jié)果表明，桂枝甘草湯中的101個潛在活性成分可能主要是通過作用于MAPT、ESR1、CYP19A1等85個與失眠癥相關(guān)的潛在作用靶點(diǎn)，富集于蛋白結(jié)合、質(zhì)膜、神經(jīng)活性配體-受體相互作用通路、鈣信號通路等多種生物功能和代謝通路中，以緩解神經(jīng)元損傷、調(diào)控神經(jīng)遞質(zhì)釋放、調(diào)節(jié)突觸傳遞等多種途徑來增加不同時期的睡眠時間，發(fā)揮良好的抗失眠藥理作用。該研究體現(xiàn)出桂枝甘草湯“多成分、多靶點(diǎn)、多途徑”協(xié)同治療失眠癥的復(fù)雜機(jī)制，為后續(xù)更精準(zhǔn)的研究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制提供了理論基礎(chǔ)。

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〔收稿日期〕2019-08-28

〔作者簡介〕黃? 強(qiáng)，男，副研究員，研究方向：醫(yī)藥領(lǐng)域的專利申請審查。

〔通訊作者〕*劉? 明，男，助理研究員，E-mail：liuming_2@cnipa.gov.cn。