康復(fù)醫(yī)院397例痰培養(yǎng)病原菌分布及藥敏分析

湯 進(jìn)

（沭陽(yáng)銘和康復(fù)醫(yī)院，江蘇 宿遷 223600）

痰培養(yǎng)為臨床常用病原微生物診斷方法，多以自然咳痰法或氣管插管吸痰法選取痰液標(biāo)本，其中自然咳痰法收集標(biāo)本時(shí)，痰液經(jīng)上呼吸道時(shí)可能受到正常菌群污染；氣管插管法多用于難以自主咳痰者。隨著抗菌藥物大量使用，呼吸道感染病原菌越發(fā)復(fù)雜，細(xì)菌耐藥性逐漸提升，因此監(jiān)測(cè)呼吸道病原菌種類(lèi)及耐藥性極為重要[1]。本文以397例痰培養(yǎng)標(biāo)本為樣本，分析病原菌分布情況及耐藥性，報(bào)告如下。

1 資料和方法

1.1 資料

時(shí)間2019年10月-2020年10月，共選取397例痰培養(yǎng)標(biāo)本。選入標(biāo)本均為合格標(biāo)本，所有樣本鱗狀上皮細(xì)胞均≤10個(gè)，白細(xì)胞均≥25個(gè)，或上述指標(biāo)比例低于1∶2.5為合格標(biāo)本。研究經(jīng)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。

1.2 方法

采集標(biāo)本方案：可自主咯痰者，收取晨起第一口痰液，隨后準(zhǔn)備清水反復(fù)漱口，指導(dǎo)患者經(jīng)氣管深處咳痰，收集標(biāo)本置入無(wú)菌痰杯內(nèi)進(jìn)行檢查，難以自主咳痰者，利用導(dǎo)管吸取病灶附近痰液進(jìn)行檢查，注意檢查需在獲取痰液標(biāo)本后2h內(nèi)進(jìn)行[2]。

細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定與藥敏實(shí)驗(yàn)方案：獲取痰標(biāo)本后開(kāi)展涂片檢查，確定涂片白細(xì)胞數(shù)量與上皮細(xì)胞數(shù)量，評(píng)判標(biāo)本是否合格。若標(biāo)本合格將痰液按無(wú)菌操作在生物安全柜中，接種到準(zhǔn)備好的哥倫比亞血瓊脂培養(yǎng)基、巧克力培養(yǎng)基、沙保羅培養(yǎng)基及麥康凱培養(yǎng)基放培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)菌培養(yǎng)成功后，挑選單個(gè)菌落制成細(xì)菌懸液加入相應(yīng)的生化藥敏鑒定條里面，培養(yǎng)18-24小時(shí)后，加入相應(yīng)的輔助試劑，35℃孵育10分鐘，利用恒星HX-21B細(xì)菌鑒定藥敏分析儀鑒定[3]。 腸桿菌、非發(fā)酵菌、腸/鏈球菌、葡萄球菌和酵母樣真菌等分別選取恒星科技開(kāi)發(fā)有限公司的相應(yīng)的藥敏條及藥敏試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)研究

SPSS 21.0對(duì)選入397例痰培養(yǎng)標(biāo)本數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算，%、±s記錄計(jì)數(shù)、計(jì)量指標(biāo)變化，檢驗(yàn)方案為x2、t。P＜0.05具備統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2 結(jié) 果

2.1 分析痰標(biāo)本內(nèi)病原菌分布

送檢397例痰培養(yǎng)標(biāo)本中，共檢查75株病原菌，占比18.89%，其中58株為革蘭陰性桿菌，占比77.33%，分別為7株鮑曼不動(dòng)桿菌、4株產(chǎn)堿假單胞菌、4株產(chǎn)氣腸桿菌、1株大腸埃希菌、2株惡臭假單胞菌、2株格高菲腸桿菌、1株聚團(tuán)腸桿菌、1株卡他莫拉菌、4株洛菲不動(dòng)桿菌、1株食神鞘氨醇桿菌、1株嗜麥芽窄食單胞菌、15株銅綠假單胞菌、7株洋蔥伯克霍爾德菌、3株液化沙雷菌、1株熒光假單胞菌、1株粘質(zhì)沙雷菌、1株尿道寡源菌、2株肺炎克雷伯菌 ；9株為革蘭陽(yáng)性球菌，占比12.00%，分別為1株腸球菌屬、1株華納葡萄球菌、2株金黃色葡萄球菌、2株藤黃微球菌、1株豬葡萄球菌、2株松鼠葡萄球菌；8株為真菌，占比10.67%，分別為5株白色念珠菌、1株季也蒙念珠菌、2株近平滑念珠菌。

2.2 前三位革蘭陰性桿菌抗生素耐藥性分析

藥敏結(jié)果顯示，大部分革蘭陰性桿菌對(duì)頭孢硫脒、慶大霉素及左氧氟沙星耐藥性較高，銅綠假單胞菌對(duì)復(fù)方新諾明及頭孢硫脒耐藥性較高，分別占比93.3%、93.3%；鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)環(huán)丙沙星及頭孢硫脒耐藥性較高，分別占比71.4%、100%；洋蔥伯克霍爾德菌對(duì)環(huán)丙沙星、慶大霉素及頭孢硫脒耐藥性較高，分別占比85.7%、71.4%、71.4%。見(jiàn)表1。

表1 前三位革蘭陰性桿菌抗生素耐藥性分析表（n,%）

2.2 前三位革蘭陽(yáng)性球菌抗生素耐藥性分析

藥敏結(jié)果顯示，革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸、苯唑西林、青霉素耐藥性較高，其中金黃色葡萄球菌，藤黃微球菌、松鼠葡萄球菌等革蘭陽(yáng)性球菌耐藥性分析見(jiàn)表2。

表2 前三位革蘭陽(yáng)性球菌抗生素耐藥性分析

3 討 論

近年來(lái)，痰培養(yǎng)診斷逐漸應(yīng)用于臨床，本次研究要求患者反復(fù)漱口后咳出深部痰液，以降低正常菌群對(duì)定值菌污染，獲取高質(zhì)量痰液標(biāo)本，提升檢出準(zhǔn)確率[4]。隨著我國(guó)抗菌藥物濫用率逐年增加，肺部病原菌菌譜與藥物敏感性隨之變化，結(jié)合本次研究分析，397例痰培養(yǎng)標(biāo)本檢出率為18.89%，病原菌多為革蘭陰性桿菌，占比77.33%，且近年來(lái)仍呈上升趨勢(shì)，其中銅綠假單胞菌菌株分離最多，其次為鮑曼不動(dòng)桿菌與洋蔥伯克霍爾德菌；檢出革蘭陽(yáng)性球菌占比12.00%，主要以金黃色葡萄球菌，藤黃微球菌、松鼠葡萄球菌為主。本次研究病原菌中檢出率最高菌株為銅綠假單胞菌，耐藥機(jī)制復(fù)雜，因此治療此類(lèi)病菌時(shí)，需結(jié)合藥敏結(jié)果進(jìn)行聯(lián)合抗菌藥物治療，嚴(yán)格遵循藥物分級(jí)原則選取藥物治療。此外，本次研究中，檢出真菌占比10.67%，分析原因可知，真菌感染與抗生素濫用率增加、患者自身免疫力降低導(dǎo)致致病性真菌感染或服用激素及免疫抑制劑類(lèi)藥物導(dǎo)致器官損傷有關(guān)，因此臨床需重視鑒別真菌感染，降低患者死亡風(fēng)險(xiǎn)[5]。

綜上所述，痰培養(yǎng)標(biāo)本中革蘭陰性桿菌占比較高，常見(jiàn)類(lèi)型為銅綠假單胞菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、洋蔥伯克霍爾德菌，對(duì)頭孢硫脒、慶大霉素及左氧氟沙星耐藥性較高，而革蘭陽(yáng)性球菌對(duì)阿莫西林/克拉維酸、苯唑西林、青霉素耐藥性較高，與濫用抗生素類(lèi)藥物密切相關(guān)。因此要求臨床醫(yī)師掌握細(xì)菌多變性，未明確病原菌時(shí)謹(jǐn)慎用藥，同時(shí)密切配合檢驗(yàn)科人員，及時(shí)獲取病原菌報(bào)告及藥敏試驗(yàn)結(jié)果，以便為臨床安全用藥提供依據(jù)，進(jìn)而減少耐藥菌株、降低菌群失調(diào)情況[6]。