顯微鏡在高校醫(yī)學(xué)檢驗實驗教學(xué)中的重要作用

卓曉潔

[摘 ? ? ? ? ? 要] ?顯微鏡作為檢驗專業(yè)實驗教學(xué)中重要的儀器之一，其操作是檢驗專業(yè)學(xué)生必須掌握的一項技能，在實驗教學(xué)中具有舉足輕重的作用。結(jié)合實驗教學(xué)中存在的問題，對顯微鏡的正確使用、重要作用規(guī)范管理加以補(bǔ)充。

[關(guān) ? ?鍵 ? 詞] ?顯微鏡;實驗教學(xué);操作技能;正確使用;規(guī)范管理

[中圖分類號] ?G712 ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)志碼] ?A ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?[文章編號] ?2096-0603（2020）17-0206-02

顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器，已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡，人們看到了過去看不到的許多微小生物和構(gòu)成生物的基本單元——細(xì)胞。不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡，而且有放大幾十萬倍的電子顯微鏡，使我們對生物體的生命活動規(guī)律有了更進(jìn)一步的認(rèn)識。檢驗專業(yè)作為一門實踐性很強(qiáng)的專業(yè)，學(xué)生的實驗操作技能至關(guān)重要。而顯微鏡是開展實驗教學(xué)的重要儀器之一，對保證實驗課正常進(jìn)行、提高教學(xué)質(zhì)量起著重要作用。可以說檢驗一個檢驗專業(yè)學(xué)生是否真的掌握實驗操作技能，顯微鏡技能是必不可少的考核內(nèi)容。但是，大部分的在校檢驗專業(yè)學(xué)生在實驗教學(xué)中，對待顯微鏡態(tài)度隨意，操作不規(guī)范，不愛護(hù)顯微鏡，對顯微鏡的重視程度不夠，也不清楚顯微鏡在本專業(yè)中所起的重要作用，現(xiàn)就如何正確使用顯微鏡及顯微鏡的重要作用等方面作出以下總結(jié)。

一、正確認(rèn)識顯微鏡

要想熟練掌握顯微鏡的使用方法，首先要熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)。由于檢驗專業(yè)的學(xué)生對顯微鏡不夠了解、不夠重視，在實驗過程中隨意操作、動作粗魯，導(dǎo)致顯微鏡耗損嚴(yán)重。顯微鏡作為精密儀器，任何錯誤的操作都會影響它的使用，所以，顯微鏡結(jié)構(gòu)認(rèn)識和入門基礎(chǔ)操作必須加入實驗的教學(xué)課程中，而且必須是開學(xué)第一課。學(xué)生掌握了顯微鏡的結(jié)構(gòu)和基本的顯微鏡操作方法，才能為后續(xù)的專業(yè)操作奠定基礎(chǔ)，同時減少顯微鏡在實驗教學(xué)中不必要的損壞，延長使用年限。目前的高校的檢驗實驗教學(xué)中，最常用也是最需要掌握的是光學(xué)顯微鏡。雖然顯微鏡種類繁多，但是就光學(xué)顯微鏡來說，它們的作用機(jī)理基本是相同的，因而其結(jié)構(gòu)組成也是相通的。

（一）機(jī)械部分

機(jī)械部分中占主要作用的有鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、粗細(xì)調(diào)節(jié)螺旋。其中，鏡筒上連接目鏡，下連物鏡轉(zhuǎn)換器;物鏡轉(zhuǎn)換器上有3～5個螺旋孔，安裝了不同放大倍數(shù)的物鏡;載物臺中央帶有通光孔，載物臺旁邊有一個彈簧壓片夾，在載物臺下方還有前后左右推進(jìn)器;鏡臂上有一大一小兩個粗細(xì)調(diào)節(jié)螺旋，旋動時可使鏡筒上升或下降，粗螺旋主要在使用低倍鏡觀察時，可快速調(diào)節(jié)清楚物象，而細(xì)螺旋一般是在使用高倍鏡或者油鏡時，對看到的物象進(jìn)行微調(diào)，使物象更加清晰。

（二）光學(xué)部分

光學(xué)部分中主要有目鏡、物鏡、反光鏡和聚光器。目鏡上標(biāo)著的數(shù)字表示放大的倍數(shù)，如“5×”表示放大5倍，以此類推，目鏡的長度與放大的倍數(shù)成反比，教師在指導(dǎo)實驗的過程中，可以根據(jù)鏡頭的長度來判斷學(xué)生是否正確選用了正確的鏡頭;每個物鏡上都標(biāo)有數(shù)字，10、40、100表示放大的倍數(shù)，物鏡越長，表示放大的倍數(shù)越大，鏡頭與玻片的距離就越近;聚光器位于載物臺下方，主要起到會聚光線的作用，聚光器上的光圈是用來調(diào)節(jié)光的強(qiáng)弱;反光鏡位于載物臺最下方，不同的顯微鏡的光源不同，型號比較舊的顯微鏡還是用反光鏡采光，反光鏡分平面鏡和凹面鏡，一般日光燈采光用凹面鏡，自然光源用平面鏡，目前高校實驗室用的光學(xué)顯微鏡大部分都是燈泡直接采光，不需要另外對光。

二、正確使用顯微鏡

認(rèn)識顯微鏡的最終目的是為了更好地了解和使用顯微鏡，只有清楚顯微鏡每個結(jié)構(gòu)的作用，才能更好地掌握顯微鏡的使用方法。技能的學(xué)習(xí)往往與認(rèn)知學(xué)習(xí)交織在一起，動作技能是一種習(xí)得的能力，是按一定技術(shù)要求，通過練習(xí)獲得的精確、嫻熟的運動能力。

（一）低倍鏡和高倍鏡的使用方法

在檢驗實驗教學(xué)的顯微鏡使用中，最先也是用的較多的是低倍鏡和高倍鏡。觀察標(biāo)本時，在光源確定的情況下，先配合粗調(diào)節(jié)螺旋用低倍鏡找到亮且清楚的視野。在低倍鏡下，視線最亮，范圍廣，觀察的標(biāo)本數(shù)也多。選好觀察目標(biāo)后，用載物臺推進(jìn)器將目標(biāo)移到視野正中央，然后轉(zhuǎn)高倍鏡，觀察目標(biāo)更精細(xì)的結(jié)構(gòu)。在高倍鏡觀察的同時，輕微調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋，就能看到清晰的物象。

（二）油鏡的使用方法

為了將高倍鏡下的物象進(jìn)一步放大，這時就要用到油鏡。將高背景下觀察到的目標(biāo)移到視野中央，在玻片上滴一滴香柏油，然后旋轉(zhuǎn)物鏡轉(zhuǎn)換器，將油鏡轉(zhuǎn)過來。這時應(yīng)稍微側(cè)過頭觀察，油鏡的鏡頭是否浸泡在油滴里。由于這時候視野變暗，物象可能會模糊或者看不到，可以將光圈打開、升高聚光器、調(diào)亮光源，然后輕微調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)節(jié)螺旋，直到調(diào)到清晰的物象結(jié)構(gòu)。使用結(jié)束后，應(yīng)用擦鏡紙將鏡頭上的油擦拭干凈，再用滴加過油鏡清潔液的擦鏡紙把油鏡清潔一遍。

三、顯微鏡實驗教學(xué)中常出現(xiàn)的問題

在顯微鏡實驗教學(xué)中，特別是學(xué)生剛接觸顯微鏡，對顯微鏡操作還不夠熟練，似懂非懂，總會出現(xiàn)一些在他們看來很難解決的問題。

（一）使用低倍鏡時

在使用低倍鏡時，物鏡與標(biāo)本的距離較遠(yuǎn)，一般不會出現(xiàn)壓碎玻片的情況。但是由于低倍鏡的視野比較亮，所以根據(jù)觀察的標(biāo)本不同，會出現(xiàn)找不到物象的情況。比如在使用牛鮑計數(shù)板計數(shù)白細(xì)胞時，很多學(xué)生就會抱怨找不到牛鮑計數(shù)板的線條格子，或者找不到白細(xì)胞，這些情況一般是由于光線太強(qiáng)的緣故。這時候可以采用聚光器、光圈或者光源來調(diào)節(jié)光的強(qiáng)度。聚光器是將光線聚集在一起，可以將聚光器升高或者降低來改變光線強(qiáng)弱;也可將光圈開大開小來調(diào)節(jié)，還可以將光源調(diào)強(qiáng)調(diào)弱，直到找到目標(biāo)物象為止。

（二）使用高倍鏡時

低倍鏡觀察到目標(biāo)物象后，可以直接轉(zhuǎn)高倍鏡觀察。這時候很多學(xué)生會出視野模糊或者物象不見的情況，在觀察臨檢體液標(biāo)本（白帶、精液、尿液等）時，還會出現(xiàn)高倍鏡鏡頭碰觸到標(biāo)本的情況。究其原因，主要是在低倍鏡下，還沒有調(diào)好焦就直接轉(zhuǎn)高倍鏡。部分學(xué)生沒弄清楚自己要觀察的物象，比如在觀察尿液時，尿液中的細(xì)胞、細(xì)菌等懸浮的高度不同，學(xué)生不清楚自己看到的是什么東西，在沒有確認(rèn)清楚是否為目標(biāo)物體時就將高倍鏡轉(zhuǎn)過去觀察，這時候就可能會出現(xiàn)高倍鏡碰觸體液標(biāo)本，污染鏡頭的情況。

（三）使用油鏡時

高倍鏡下觀察到清晰物象后，可以在玻片需要觀察的位置上滴加一滴香柏油，直接轉(zhuǎn)油鏡觀察。這時會出現(xiàn)以下幾種情況：（1）油鏡鏡頭沒有浸泡在香柏油里。（2）油鏡鏡頭刮花標(biāo)本（如血膜片或細(xì)菌染色片）。（3）油鏡壓碎玻片。以上幾種情況究其原因都是因為在高倍鏡下沒有調(diào)好焦，錯誤地理解清晰物象的概念。比如在觀察染色標(biāo)本時，有些學(xué)生在高倍鏡下看到有顏色出現(xiàn)，就以為找到目標(biāo)物象，沒有進(jìn)一步對所看到物象進(jìn)行調(diào)節(jié)就直接轉(zhuǎn)油鏡。

四、顯微鏡在檢驗實驗教學(xué)中的應(yīng)用

檢驗專業(yè)課程中最為重要的幾門課程，如臨床檢驗技術(shù)、微生物檢驗技術(shù)、臨床血液學(xué)、寄生蟲檢驗等，都是需要頻繁使用顯微鏡的課程。只有掌握了顯微鏡的操作技能，才能為學(xué)好每門課程奠定基礎(chǔ)。

（一）在臨床血液學(xué)檢驗和微生物檢驗技術(shù)中的應(yīng)用

臨床血液學(xué)主要是研究血液和骨髓中各種細(xì)胞的結(jié)構(gòu)變化和檢驗方法，微生物檢驗主要是研究病毒、細(xì)菌的結(jié)構(gòu)和檢測方法。除病毒無法用光學(xué)顯微鏡看到外，各種細(xì)胞和細(xì)菌都能在光學(xué)顯微鏡下清楚地觀察到。微生物的顯微鏡實驗教學(xué)中，主要是將所需檢測的細(xì)菌進(jìn)行染色，再利用顯微鏡對其進(jìn)行觀察，確定它的屬性、結(jié)構(gòu)、大小、排列等。血液學(xué)的顯微鏡實驗教學(xué)中同樣是將染過色的血膜片或者骨髓片進(jìn)行觀察，觀察其中細(xì)胞的主要結(jié)構(gòu)，如染色質(zhì)、細(xì)胞核、胞漿等，根據(jù)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的改變，從而對血液疾病進(jìn)行輔助診斷。

（二）在臨床檢驗技術(shù)和寄生蟲檢驗技術(shù)中的應(yīng)用

臨床檢驗技術(shù)主要是對人體中的體液進(jìn)行檢驗，從而對疾病提供輔助診斷。寄生蟲檢驗主要是對人體健康有害的寄生蟲進(jìn)行研究，從而對寄生蟲疾病進(jìn)行診斷和防治。體液主要包括血液、尿液、腦脊液、精液、白帶等，臨床檢驗顯微鏡教學(xué)中主要是利用顯微鏡對體液中有存在的物質(zhì)進(jìn)行檢測，例如白帶中的膿球、紅細(xì)胞、霉菌、滴蟲等。寄生蟲檢驗的顯微鏡實驗教學(xué)中，主要是對寄生蟲生活史的各個階段（蟲卵、幼蟲、成蟲）進(jìn)行觀察，從而了解寄生蟲的結(jié)構(gòu)特征。

五、規(guī)范顯微鏡的管理

近年來，由于醫(yī)學(xué)檢驗在臨床中的地位越來越重要，各高校對檢驗專業(yè)的招生數(shù)量也越來越多。學(xué)生數(shù)量的增多，對實驗室顯微鏡的使用頻率也越來越高，顯微鏡的耗損也更加嚴(yán)重。為了確保學(xué)生實驗中能順利使用顯微鏡，如何提高實驗室顯微鏡的規(guī)范管理就成為一項重中之重的工作。

（一）規(guī)范學(xué)生對顯微鏡的管理

學(xué)生進(jìn)入顯微鏡室的第一節(jié)課，我就著重強(qiáng)調(diào)顯微鏡對檢驗專業(yè)的重要作用和顯微鏡在他們學(xué)業(yè)生涯中的重要地位。對待顯微鏡要像對愛人一樣，呵護(hù)備至，關(guān)愛有加，對顯微鏡的熟悉程度要閉著眼也能摸出各個結(jié)構(gòu)的位置。為了責(zé)任落實到個人，首先，每臺顯微鏡都標(biāo)好號，學(xué)生進(jìn)入顯微鏡室要按照學(xué)號落座，自己負(fù)責(zé)自己的顯微鏡，且沒有實驗老師的允許，每節(jié)課的座位和顯微鏡的位置都不能改變，直到學(xué)期結(jié)束;其次，每臺顯微鏡都配一本“學(xué)生顯微鏡使用情況登記表”，學(xué)生在實驗過程中，顯微鏡出現(xiàn)的任何問題，在實驗課結(jié)束后，都要對當(dāng)日顯微鏡的使用情況進(jìn)行登記;同時，要求學(xué)生每次顯微鏡實驗課都要提前十五分鐘到達(dá)實驗室，用老師準(zhǔn)備的顯微鏡清洗液和擦鏡紙，對自己所負(fù)責(zé)顯微鏡的每個結(jié)構(gòu)進(jìn)行清潔，實驗課結(jié)束后也要對顯微鏡進(jìn)行清潔維護(hù)，同時規(guī)范收好顯微鏡蓋好防塵罩。這樣，能夠增強(qiáng)學(xué)生的責(zé)任心和警惕心，在使用顯微鏡時也會更加謹(jǐn)慎。

（二）規(guī)范實驗室顯微鏡的管理

影響顯微鏡性能的原因有很多，空氣濕度，光照強(qiáng)度都會影響顯微鏡的使用壽命。首先，南方的天氣濕度高，梅雨天氣時間段長，濕氣附在顯微鏡鏡頭，會導(dǎo)致鏡頭鏡片發(fā)霉，附在零件上會導(dǎo)致生銹，這些都會大大影響顯微鏡的使用效果，因此顯微鏡一定要放在通風(fēng)干燥的地方;其次，實驗教師一定要對實驗室顯微鏡的情況心中有數(shù)，課前課后都要認(rèn)真檢查，該調(diào)整的調(diào)整，該更換零配件的及時更換，定期請專業(yè)人員對所有顯微鏡進(jìn)行維護(hù);同時對實驗過程中學(xué)生發(fā)現(xiàn)的顯微鏡問題要做好統(tǒng)計，及時解決，課后對學(xué)生使用過的顯微鏡再一一進(jìn)行檢查，看學(xué)生是否有規(guī)范收納。

顯微鏡的實驗教學(xué)有它的特殊性，是培養(yǎng)學(xué)生操作技能的必要環(huán)節(jié)，教導(dǎo)學(xué)生了解顯微鏡的重要性，學(xué)會使用它、愛護(hù)它是檢驗專業(yè)課程必不可少的一部分。因此，加強(qiáng)顯微鏡的管理，對顯微鏡進(jìn)行科學(xué)、精心的保養(yǎng)和及時維修，對延長使用壽命，充分發(fā)揮其作用和效益是十分必要的。

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編輯 陳鮮艷