氣相色譜檢測果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留的方法

楊 紅

（云南省新平縣農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢驗檢測站，云南新平 653400）

農(nóng)業(yè)是我國的重要產(chǎn)業(yè)，在經(jīng)濟(jì)發(fā)展中發(fā)揮著十分重要的作用。近年來，隨著經(jīng)濟(jì)的不斷發(fā)展，各種新技術(shù)、新工藝被引入農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，進(jìn)一步提高了我國的農(nóng)業(yè)發(fā)展水平。然而，農(nóng)業(yè)迅速發(fā)展的同時也帶來了農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留的問題，制約了農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，需要采取有效措施來解決這一問題。目前，在種植果蔬的過程中，所使用的農(nóng)藥主要有有機磷農(nóng)藥、有機氯農(nóng)藥、氨基甲酸酯類農(nóng)藥和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等。

1 有機磷農(nóng)藥與氣相色譜法

有機磷農(nóng)藥因為具有效果好、起效快的優(yōu)勢，使其在農(nóng)產(chǎn)品施肥中被廣泛應(yīng)用。大部分有機磷，結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定，具有較強的揮發(fā)性，在自然環(huán)境條件下容易分解，即使這部分有機磷進(jìn)入生物體內(nèi)，生物體內(nèi)的酶也會對其有一定程度上的分解作用，因此這部分有機磷在食物中殘留的時間相對較短，攝入者一般以急性中毒居多[1]。但是，也存在部分有機磷在特定的環(huán)境下會存留較長的時間，甚至?xí)谏矬w內(nèi)不斷積累。例如馬拉硫磷，該農(nóng)藥對于水生生物而言具有很高的毒性，同時也會對人體的免疫功能造成一定程度的影響。果蔬中的有機磷有多種檢測方法，主要有氣相色譜法、液相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜法等。在這些檢測方法中，氣相色譜法具有較大的優(yōu)勢，主要表現(xiàn)在以下3方面：首先，氣相色譜法有著較高的分離效率，分析檢測對象的速度快，對于樣品的要求也不高；其次，氣相色譜法具有很高的檢測靈敏度，操作起來相對便捷；最后，氣相色譜法的成本相對較低，有著較高的經(jīng)濟(jì)效益，正是因為這些優(yōu)勢，使其在果蔬有機磷農(nóng)藥的檢測中被廣泛應(yīng)用。

2 基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法

2.1 原理將采集好的含有有機磷農(nóng)藥的樣品置于富氫焰上進(jìn)行一定程度的燃燒，然后在此基礎(chǔ)上以HPO碎片的形式放射出波長為526 nm的特性光；將放射出的光經(jīng)過濾片選擇處理，并用光電倍增管接收，在接收到放射出的特性光之后，對其進(jìn)行一定程度的轉(zhuǎn)換，使其成為電信號，之后將轉(zhuǎn)換而成的電信號經(jīng)過微電流放大器放大并進(jìn)行有效記錄。經(jīng)過一系列的處理后，便能夠獲得樣品的峰面積，將其與標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積進(jìn)行有效的對比分析，并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行檢測[2]。

2.2 試劑實驗試劑包含丙酮、二氯甲烷、氯化鈉、無水硫酸鈉以及農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環(huán)磷、馬拉硫磷各100 ug/mL）。

2.3 設(shè)備實驗中所用到的儀器設(shè)備有組織搗碎機、勻漿機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、電動振蕩器以及Agilent 7890A（FPD）氣相色譜儀等。

2.4 樣品處理將樣品按照要求除去非可食部分后搗碎，裝瓶備用。選取25 g的樣品置于燒杯中，加入50 mL的水和100 mL的丙酮，放進(jìn)勻漿機勻漿2 min，將勻漿液經(jīng)濾紙和布氏漏斗過濾后移入分液漏斗中。向濾液（取100 mL）中加入15 g氯化鈉，并進(jìn)行劇烈振搖，振搖時間控制在2 min左右，然后再靜置10 min，使有機相與水相分層。然后在水相中加入50 mL二氯甲烷再振蕩2 min，靜置待分層。將丙酮和二氯甲烷提取液混合后經(jīng)玻璃漏斗（裝有25 g無水硫酸鈉）脫水后濾入燒瓶中，可用二氯甲烷多次洗滌容器，洗滌液并入燒瓶中一起處理。最后運用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀對濾液進(jìn)行濃縮，直到近干狀態(tài)，并在此基礎(chǔ)上運用丙酮定容至5 mL，放置備用。

3 AOAC萃取法

3.1 原理將經(jīng)過提取和進(jìn)化操作后的樣品濾液注入氣相色譜儀中，農(nóng)藥組分經(jīng)毛細(xì)管柱分離，并運用火焰光度檢測器對其進(jìn)行有效檢測，保留時間定性，利用外標(biāo)法定量。

3.2 試劑實驗所用試劑有丙酮、AOAC萃取填料、乙酸乙腈（濃度為1%）以及農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品（敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環(huán)磷、馬拉硫磷各100 ug/mL）。

3.3 設(shè)備實驗所用儀器有純化管、組織搗碎機、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、勻漿機、電動振蕩器以及Agilent 7890A（FPD）氣相色譜儀等。

3.4 樣品處理將樣品按照要求除去非可食部分后搗碎，裝瓶備用。稱取15 g待測樣品置于離心管中，然后在離心管中加入15 mL濃度為1%的乙酸乙腈。將其放置在電動振蕩器上進(jìn)行振蕩操作，振蕩時間控制在1 min左右。隨后再將AOAC萃取填料也放置其中，進(jìn)行振搖操作，振搖完成后將所有的有機相轉(zhuǎn)移到純化管中，再次進(jìn)行振搖。最后，吸取2 mL的提取液放到旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上氮吹至近干，并在此基礎(chǔ)上使用丙酮定容至2 mL，放置備用。

4 氣相色譜測定

首先，選取1 ul標(biāo)準(zhǔn)溶液以及試樣凈化液，將其注入氣相色譜儀中，根據(jù)農(nóng)藥組分的保留時間和峰面積進(jìn)行有效定性及定量[3]。

在式（1）中，X指試樣中的有機磷含量；A1指實驗中待測樣品中被測組分的峰面積；A2指農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液中被測組分的峰面積；V1與V3分別指試樣提取的總體積以及試樣最后的定容體積；V2指吸取出用于檢測的提取溶液的體積；C指標(biāo)準(zhǔn)液的濃度；m則指試樣的質(zhì)量。

5 結(jié)果與分析

經(jīng)過檢測分析，發(fā)現(xiàn)4種有機磷農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)液在特定的環(huán)境下得到了有效分離，分析過程消耗時間較短，經(jīng)過檢測得到的色譜峰峰形較好，分離度較為理想。根據(jù)實驗與分析發(fā)現(xiàn)：敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環(huán)磷、馬拉硫磷這4種有機磷標(biāo)準(zhǔn)溶液在特定的范圍內(nèi)具備較為良好的線性關(guān)系，這一范圍具體為0.04～0.5 ng。具體線性測定結(jié)果如表1所示。

表1 線性測定結(jié)果

首先，對樣品中的農(nóng)藥殘留量進(jìn)行一定程度的檢測，檢測計算出樣品中待測組分農(nóng)藥殘留量的本底值。這一操作完成后，可以向其中添加一定量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，然后運用基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法以及AOAC萃取法對其加標(biāo)回收率進(jìn)行有效測定。實驗結(jié)果表明：采用基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法測出4種有機磷農(nóng)藥的加標(biāo)回收率大致在86%～92%，而采用AOAC萃取法得出的4種有機磷農(nóng)藥的加標(biāo)回收率則在88%～93%。

6 結(jié)語

本文主要針對氣相色譜檢測果蔬中有機磷農(nóng)藥殘留方法進(jìn)行研究與分析，首先介紹了有機磷農(nóng)藥與氣相色譜法，然后在此基礎(chǔ)上闡述了基于GB/T 5009.20-2003的檢測方法與AOAC萃取法[4]，指出了兩種方法的原理、所用試劑、設(shè)備以及試樣的處理流程，并分別針對這兩種常用的氣相色譜檢測方法進(jìn)行了實驗分析。實驗結(jié)果表明：運用這兩種方法進(jìn)行處理，敵敵畏、特丁硫磷、甲基硫環(huán)磷、馬拉硫磷4種有機磷的回收率都相對較高，但是AOAC萃取法操作簡單，能夠達(dá)到更高的效果，安全性也更好，適合廣泛使用與推廣[5]。