RUNX3和VEGF在宮頸癌組織中的表達(dá)分析

戴云峰

（營口市婦產(chǎn)兒童醫(yī)院 病理科，遼寧 營口 115000）

宮頸癌是一種十分常見的婦科惡性腫瘤，當(dāng)前關(guān)于宮頸癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全明確。宮頸癌的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)多基因參與的復(fù)雜過程。人類runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3（RUNX3）屬于RUNT家族的重要成員，主要參與胚胎發(fā)育細(xì)胞基因表達(dá)的調(diào)控。近些年的研究顯示[1]，在多種腫瘤中均可發(fā)現(xiàn)RUNX3基因的異常。基因表達(dá)下調(diào)與腫瘤新生血管的形成是宮頸癌發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。VEGF是腫瘤刺激血管生長的一個(gè)重要細(xì)胞因子，與腫瘤的生長、侵襲、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等生物學(xué)行為密切相關(guān)。本研究旨在探討RUNX3、VEGF在宮頸癌組織中的表達(dá)，以期為宮頸癌的診治提供實(shí)踐依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料：將我院2015年1月至2018年10月所有行宮頸活檢病理檢查患者的病理標(biāo)本進(jìn)行統(tǒng)計(jì)整理，被選取標(biāo)本的患者年齡波動在25～55歲。其中宮頸病理組織提示正常為10例，CINⅠ8例，CIN Ⅱ～Ⅲ9例，宮頸癌24例。宮頸癌分期：Ⅰ～Ⅱa期10例，Ⅱb～Ⅳ期14例；病理分級：G1級13例，G2～G3級11例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：否16例，是8例。所有宮頸癌病例手術(shù)前均未進(jìn)行生物治療、化療、放療等，其中病理結(jié)果提示正常的患者取自同期因其他病變進(jìn)行自動全切治療的非癌變患者，其組織標(biāo)本經(jīng)病理學(xué)進(jìn)一步診斷。

1.2 方法：采用免疫組化法檢測正常宮頸組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變（CIN）組織和宮頸癌組織中RUNX3、VEGF蛋白的表達(dá)情況。對收集來的手術(shù)組織標(biāo)本或活檢組織進(jìn)行常規(guī)固定，通過石蠟包埋、切片、貼片、脫蠟等系列常規(guī)操作后采用免疫組化法對標(biāo)本進(jìn)行檢測。結(jié)果判定：染色結(jié)果通過半定量積分法進(jìn)行判定。因?yàn)镽UNX3、VEGF蛋白多在胞質(zhì)中表達(dá)，因此當(dāng)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)黃色或者棕褐色顆粒時(shí)則判定該結(jié)果為陽性。積分以實(shí)際染色強(qiáng)度為依據(jù)：無色計(jì)為0分，淺黃色計(jì)為1分，棕黃色計(jì)為2分，棕褐色計(jì)為3分。然后以陽性細(xì)胞所占百分比為依據(jù)進(jìn)行計(jì)分：陰性計(jì)為0分，陽性細(xì)胞＜10%計(jì)為1分，10%≤陽性細(xì)胞＜50%計(jì)為2分，50%≤陽性細(xì)胞＜75%計(jì)為3分，陽性細(xì)胞≥75%計(jì)為4分。將兩項(xiàng)最終得分結(jié)果的乘積作為免疫組化結(jié)果，當(dāng)總分為0～4分時(shí)結(jié)果為（-），＞4分為（+）。病理學(xué)分級判定標(biāo)準(zhǔn)：①G1級：非桑葚樣或非鱗狀生長類型＜5%；②G2級：5%≤非桑葚樣或非鱗狀生長類型＜50%；③G3級：非桑葚樣或非鱗狀生長類型≥50%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：本研究所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)均采用SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，進(jìn)行t或卡方檢驗(yàn)，以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在正常宮頸組織、CINⅠ組織、CINⅡ-Ⅲ組織、宮頸癌組織中VEGF的表達(dá)呈上升趨勢，而RUNX3蛋白和mRNA的表達(dá)呈下降趨勢，P＜0.05，見表1。

3 討論

VEGF對癌細(xì)胞的增殖生長和轉(zhuǎn)移均均有一定的促進(jìn)作用，它能夠加速血管生成并誘發(fā)血管內(nèi)皮細(xì)胞增生，還能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的脫落，在腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤環(huán)節(jié)中扮演著重要角色[2]。本研究結(jié)果提示，VEGF在正常人體宮頸組織中表達(dá)量很少，不過隨著占位病變的進(jìn)一步發(fā)展，VEGF陽性表達(dá)增加，結(jié)果提示，VEGF可增加腫瘤血管的通透性，并能加大宮頸癌發(fā)生轉(zhuǎn)移的風(fēng)險(xiǎn)。RUNX3在TGF-β信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中可激活Smad復(fù)合物，并促進(jìn)Smad復(fù)合物與靶位點(diǎn)的結(jié)合，從而對細(xì)胞的分化、凋亡及惡性轉(zhuǎn)化產(chǎn)生調(diào)控作用。本研究結(jié)果顯示，RUNX3蛋白在正常宮頸組織、CIN組織和宮頸癌組織中的表達(dá)呈遞減趨勢。結(jié)果表明，RUNX3可能作為一種抑癌基因參與宮頸癌的發(fā)生。本研究結(jié)果表明，從正常宮頸組織發(fā)展至宮頸癌RUNX3的陽性表達(dá)呈逐漸下降趨勢，VEGF則與之相反，宮頸癌組織中RUNX3和VEGF表達(dá)水平存在明顯負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示在宮頸癌的發(fā)生發(fā)展中RUNX3和VEGF可能發(fā)揮拮抗作用[3]。因此，在臨床實(shí)踐中，可通過聯(lián)合檢測宮頸癌組織中的VEGF和RUNX3表達(dá)水平，用于宮頸癌的早期診斷以及腫瘤進(jìn)展、轉(zhuǎn)移和浸潤的生物學(xué)指標(biāo)。同時(shí)，RUNX3可能作為一個(gè)腫瘤的基因治療新靶點(diǎn)，下一步研究應(yīng)進(jìn)一步探討RUNX3蛋白的表達(dá)調(diào)控與宮頸病變的關(guān)系，從而為宮頸癌的診療提供有價(jià)值的線索。

表1 RUNX3、VEGF蛋白的表達(dá)及其與臨床病理資料的相關(guān)性[n(%)]

綜上所述，VEGF可反映宮頸癌細(xì)胞的增殖能力，RUNX3可能作為抑癌基因參與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展。