蛋黃油和豆油的提取工藝及成分對(duì)比分析

朱慧蒙，黎 敏，韋能丹,曹曉琴

（江漢大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系，湖北 武漢 430056）

蛋黃油是雞蛋黃中脂溶性物質(zhì)的總稱，其含有的脂肪類成分主要有磷脂類(32.8%)、脂肪酸類(62.3%)、少量的固醇(4.9%)和微量腦磷脂[1]，具有清熱解毒、收斂、止血、止痛等功效，多用于燒傷、濕疹、耳膿、瘡瘍等癥，還具有殺菌、消炎、止痛和修復(fù)表皮細(xì)胞的功能。因此，對(duì)蛋黃油的開發(fā)利用一直是國(guó)內(nèi)外學(xué)者研究的熱點(diǎn)[2]。

大豆油中含棕櫚酸7%～10%，硬脂酸2%～5%，油 酸22%～30%，亞 油 酸50%～60%，亞 麻 油 酸5%～9%，脂肪酸構(gòu)成較好。豆油含有豐富的亞油酸，有顯著降低血清膽固醇含量、預(yù)防心血管疾病的功效，此外還含有大量的維生素E、維生素D 及豐富的卵磷脂，對(duì)人體健康非常有益。大豆油的人體消化吸收率高達(dá)98%，是一種營(yíng)養(yǎng)價(jià)值很高的優(yōu)良食用油，具有研究?jī)r(jià)值[3]。

文獻(xiàn)檢索表明，對(duì)蛋黃油成分含量的研究甚少，故筆者以蛋黃油和豆油為材料，采用正交實(shí)驗(yàn)法，探究蛋黃油萃取的最佳工藝，再對(duì)蛋黃油和大豆油中的脂肪酸成分進(jìn)行分析對(duì)比，以期能夠優(yōu)化蛋黃油的萃取方法，提高蛋黃油中脂肪酸成分的含量，為蛋黃油在臨床的實(shí)際利用以及良好劑型制備提供一定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 材料與試劑

蛋黃，豆油（外購）。

乙酸乙酯、正己烷、氫氧化鈉、無水甲醇、醋酸（均為分析純）。超純水（自制）。

1.2 儀器設(shè)備

圓底燒瓶、水浴鍋、冷凝管、布氏漏斗、抽濾瓶、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、錐形瓶（若干）、ME104E 電子天平、氣相色譜儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 蛋黃油的萃取

參照文獻(xiàn)[4]的方法，將蛋黃干燥處理后得到蛋黃粉，按蛋黃粉∶萃取劑=1∶4 的比例，分別稱取蛋黃粉10g，乙酸乙酯40mL 于圓底燒瓶中，水浴1h，控制溫度為50℃。反應(yīng)結(jié)束后立即抽濾2 次，合并2 次萃取液進(jìn)行減壓蒸餾，水浴溫度50～60℃，轉(zhuǎn)速120r·min-1，至冷凝出口沒有萃取劑滴出，即為蒸餾終點(diǎn)。取出裝瓶，密封，0℃儲(chǔ)藏，備用。

1.3.2 油樣組分分析

按照1.3.1 的方法制得油樣，將油樣進(jìn)行甲酯化處理。稱取蛋黃油樣品0.05g，加入1.0g·L-1的甲醇鈉溶液0.5mL，室溫下靜置反應(yīng)0.5h，然后加入10%乙酸溶液和2mL 正己烷?；旌暇鶆蚝螅芤?000r·min-1離心10min，取上清液過濾，再取1μL上機(jī)檢測(cè)，記錄色譜峰。

豆油同法處理后，取1μL 上機(jī)檢測(cè)，記錄色譜峰。

色譜條件：HP-5MS 彈性石英毛細(xì)管柱，5% phenylmethyl siloxane，30m×0.25mm，0.25μm；氣化室溫度260℃。程序升溫：初始溫度40℃，保持1min，然后以5℃·min-1的速率升至210℃，保持2min后再以5℃·min-1的速率升至240℃，保持1min，檢測(cè)結(jié)束。載氣氦氣流量為1.0mL·min-1，進(jìn)樣量1μL，分流比15∶1。

2 結(jié)果與討論

2.1 蛋黃油的萃取工藝優(yōu)化

經(jīng)查閱相關(guān)文獻(xiàn)，蛋黃油的萃取工藝分為傳統(tǒng)制備工藝和現(xiàn)代化制備工藝[6]。傳統(tǒng)工藝多采用干餾法、烘焙法和減壓蒸餾法；現(xiàn)代化制備工藝多采用溶劑萃取法、超臨界CO2萃取法和酶法。各工藝的具體出油率見表1。根據(jù)表1 的總結(jié)及實(shí)驗(yàn)操作的可行性，綜合考慮后，本次實(shí)驗(yàn)采用有機(jī)溶劑萃取法，并通過正交實(shí)驗(yàn)找出最佳實(shí)驗(yàn)條件。

表1 不同制備方法蛋黃油的出油率比較Table 1 comparison of oil yield of egg butter by different preparation methods

2.2 萃取條件的確定

2.2.1 不同萃取劑對(duì)蛋黃油提取率的影響

分別選取95%乙醇、環(huán)己烷、乙酸乙酯為萃取劑，按照1∶4 的比例，在50℃、1h 的條件下，按照

表2 不同萃取劑下蛋黃油的出油率Table 2 oil yield of egg butter with different extractants

1.3.1 的步驟進(jìn)行提取，結(jié)果見表2。由表2 可知，各萃取劑的出油率大小為：乙酸乙酯＞環(huán)己烷＞95%乙醇，表明乙酸乙酯為最佳萃取劑。

2.2.2 不同萃取溫度對(duì)蛋黃油提取率的影響

按照蛋黃粉∶乙酸乙酯=1∶4的比例，按照1.3.1的步驟，分別在40℃、50℃、60℃下萃取1h，結(jié)果見表3。由表3 可知，出油率的大小為50℃＞40℃＞60℃，表明50℃為最佳萃取溫度。

表3 不同萃取溫度下蛋黃油的出油率Table 3 oil yield of egg butter at different extraction temperatures

2.2.3 不同萃取時(shí)間對(duì)蛋黃油提取率的影響

按照蛋黃粉∶乙酸乙酯=1∶4 的比例，按照1.3.1的步驟，在50℃下分別萃取50min、60min、70min，結(jié)果見表4。由表4 可知，出油率的大小為60min ＞70min ＞50min，表明最佳萃取時(shí)間為60min。

表4 不同萃取時(shí)間下蛋黃油的出油率Table 4 oil yield of egg butter at different extraction times

2.2.4 正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝

選取萃取劑、萃取時(shí)間、萃取溫度為因素，以各單因素實(shí)驗(yàn)最優(yōu)取值點(diǎn)為中心，上下區(qū)域各取1 個(gè)水平值作為正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)水平，以出油率（%）為評(píng)價(jià)指標(biāo)，設(shè)計(jì)三因素三水平的正交分析，進(jìn)行優(yōu)化組合[13]，實(shí)驗(yàn)方案的因素及水平見表5 所示，實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表6。

表5 因素水平表Table 5 Factor level table

由表6 可以看出最優(yōu)組合為A2B2C2,且該組合在正交實(shí)驗(yàn)中的蛋黃油萃取率最高，由此確定蛋黃油萃取的最佳條件為：萃取劑為乙酸乙酯，萃取溫度為50℃，萃取時(shí)間為60min。

2.3 油樣分析結(jié)果

將在最佳實(shí)驗(yàn)條件下獲得的蛋黃油和豆油甲酯化后，在最佳色譜條件下，測(cè)定蛋黃油和豆油中脂肪油的組成，結(jié)果見圖1、圖2。

表6 提取蛋黃油的正交試驗(yàn)結(jié)果Table 6 orthogonal test results of extracting golden egg butter

圖1 蛋黃油脂肪酸組成譜圖Fig.1 Fatty acid composition spectra of egg butter

圖2 豆油脂肪酸組成譜圖Fig.2 Fatty acid composition spectra of soybean oil

將蛋黃油和豆油甲酯化后，對(duì)蛋黃油與豆油的成分進(jìn)行比較。得到的氣相色譜圖，經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索并與標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照后，得到兩者的主成分，結(jié)果見表7、表8。

由表7、表8 可知，蛋黃油中，亞油酸＞油酸＞棕櫚酸＞硬脂酸＞亞麻酸；豆油中，油酸＞亞油酸＞棕櫚酸＞亞麻酸＞硬脂酸。在相同的實(shí)驗(yàn)條件下，蛋黃油中油酸的占比最大，豆油中亞油酸的占比最大。蛋黃油中的油酸比豆油高18.9%，棕櫚酸比豆油高6.75%，硬脂酸比豆油高3.66%，亞油酸比豆油高27.21%，亞麻酸比豆油低4.94%。

表7 蛋黃油中各脂肪酸的相對(duì)含量Table 7 The relative amount of fatty acids in egg butter

表 8 豆油中所含脂肪酸相對(duì)含量Table 8 The relative amount of fatty acids in soybean oil

2.4 方法學(xué)考察

2.4.1 方法的精密度

用蛋黃油做6 個(gè)平行樣品處理，進(jìn)行6 次重復(fù)性檢測(cè)，以硬脂酸、棕櫚酸、油酸、亞油酸、棕櫚油酸的峰面積結(jié)果為代表，分析各組數(shù)據(jù)之間的變異系數(shù)。經(jīng)計(jì)算，棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和棕櫚油酸的6次測(cè)量結(jié)果的變異系數(shù)分別為1.58%、1.28%、1.00%、0.21%、1.31%，表明本實(shí)驗(yàn)的精密度良好[14]。

2.4.2 理論塔板數(shù)n

在本實(shí)驗(yàn)的色譜條件下，注入處理后的油樣，記錄色譜圖，測(cè)出油樣主成分峰的保留時(shí)間tR（以min或長(zhǎng)度計(jì)，但應(yīng)取相同單位）和半高峰寬（Wh/2），得到結(jié)果分別為：棕櫚酸24×103，硬脂酸22×103，油酸22×103，亞油酸 22×103、亞麻酸21×103，均符合規(guī)定[15]。

2.4.3 分離度R

按上述方法檢測(cè)，記錄保留時(shí)間及面積，經(jīng)計(jì)算，棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和亞麻酸能夠良好分離，相鄰峰的分離度分別為40.4、4.83、8.65、13.65，均大于2.0，符合要求。

2.4.4 重復(fù)性

取同一樣品重復(fù)測(cè)定 5 次，測(cè)得各個(gè)組分的 RSD 值分別為2.04%、1.90%、2.59%、2.32%、2.78%，均符合規(guī)定。

3 結(jié)論

本實(shí)驗(yàn)采用正交實(shí)驗(yàn)法，確定蛋黃油的最佳提取工藝，以乙酸乙酯為萃取劑，在萃取溫度50℃、萃取時(shí)間60min 的實(shí)驗(yàn)條件下提取蛋黃油。對(duì)蛋黃油及豆油進(jìn)行衍生化提取后，用GC 檢測(cè)出蛋黃油及豆油中的脂肪酸含量，對(duì)結(jié)果進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)蛋黃油主要含有油酸，且含量明顯高于豆油。油酸在人和動(dòng)物的新陳代謝過程中起著重要作用，但人體自身合成的油酸不能滿足需要，要從食物中攝取，故食用油酸含量較高的蛋黃油有益健康，因此蛋黃油具有很好的應(yīng)用發(fā)展前景。