噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑高效液相色譜分析

劉 哲，洪德志，祁穎慧，楊金艷，王 雪，穆 卉，趙維儒

(吉林省農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣總站，吉林 長春 130033)

1 前言

噻酮磺隆是拜耳作物科學(xué)公司開發(fā)的磺酰氨基羰基三唑啉酮類除草劑，其化學(xué)名稱為甲基4-[(4，5-二氫-3-甲氧基-4-甲基-5-氧代-1H-1，2，4-三唑-1-基)羰基磺酰胺]-5-甲基噻吩-3-羧酸酯。可有效防除玉米田禾本科雜草和闊葉雜草，作用機制為乙酰乳酸合成抑制劑，具有內(nèi)吸性，能通過植物根部和葉片吸收[1]。異噁唑草酮是由羅納-普朗克公司開發(fā)異噁唑類除草劑，其化學(xué)名稱為：5-環(huán)丙基-4-(2-甲磺?；?4-三氟甲基)苯甲酰基異噁唑，主要用于防除玉米和甘蔗田闊葉雜草和禾本科雜草，作用機制為對羥基苯基丙酮酸雙氧化酶抑制劑，現(xiàn)由拜耳作物科學(xué)公司生產(chǎn)和銷售[2]。

目前國內(nèi)關(guān)于噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑的分析方法未見公開報道。本文采用高效液相色譜法對試樣中噻酮磺隆和異噁唑草酮進行定量分析，該方法操作快速、簡便、準(zhǔn)確，分離度和精密度均能達到定量分析的要求。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 乙腈：色譜純；甲醇：色譜純；水：超純水；磷酸：分析純；噻酮磺隆標(biāo)準(zhǔn)品：(98.5%)；異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)品：(99.6%)；噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑(其中噻酮磺隆含量7%、異噁唑草酮含量19%)。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：Agilent 1100，具有二極管陣列檢測器和自動進樣器，20μL定量環(huán)；Agilent色譜工作站；色譜柱：150mm ×3.9mm(id)不銹鋼柱，XTERRA RP18，5μm填充物；過濾器：濾膜0.45μm。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：甲醇：水(0.1%磷酸水溶液)=50：50(V/V)；流量：0.6mL/min；柱溫：(30±2)℃；檢測波長：220nm；進樣體積：5μL，保留時間：噻酮磺隆約為5.4min，異噁唑草酮約為12.0min。噻酮磺隆和異噁唑草酮標(biāo)樣高效液相色譜圖(圖1)和噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑試樣高效液相色譜圖(圖2)。

圖1 噻酮磺隆、異噁唑草酮標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑試樣高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取噻酮磺隆標(biāo)樣0.015g(精確至0.000 2g)和異噁唑草酮標(biāo)樣0.045g(精確至0.000 2g)，置于100mL容量瓶中，加入約80mL乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫后用乙腈稀釋定容，搖勻備用。

2.4.2 試樣溶液的配置 稱取噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑試樣0.25g(精確至0.000 2g)，置于100mL容量瓶中，加入約80mL乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫后用乙腈稀釋定容，搖勻備用。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，確認(rèn)儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對變化﹤1.5%后，即可按標(biāo)樣、試樣、試樣、標(biāo)樣溶液的順序進行測定。

2.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的峰面積分別進行平均。試樣中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)數(shù)ω(%)按下式計算

式中：A1—標(biāo)樣溶液中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的峰面積平均值；

A2—試樣溶液中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的峰面積平均值；

m1—噻酮磺隆(異噁唑草酮)標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2—噻酮磺隆(異噁唑草酮)試樣的質(zhì)量，g；

P—標(biāo)樣中噻酮磺隆(異噁唑草酮)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過Agilent 1100高效液相色譜儀的數(shù)據(jù)采集功能，對噻酮磺隆和異噁唑草酮進行掃描，獲得其紫外波長吸收光譜圖(圖3)?？梢钥闯觯缤锹≡?20nm 附近有最大吸收。異噁唑草酮在205nm附近有最大吸收(圖3)。為減少干擾，故選擇檢測波長為220nm。

圖3 噻酮磺隆和異噁唑草酮紫外吸收光譜圖

色譜柱選擇常規(guī)的反相填料XTERRA RP18柱。依據(jù)噻酮磺隆、異噁唑草酮物化性質(zhì)，用乙腈作為溶劑溶解樣品，并選擇甲醇和水(0.1%磷酸水溶液)作為流動相，為了得到更好的分離效果和峰形，按流動相甲醇和水不同比例進行試驗，當(dāng)流動相為：甲醇：水(0.1%磷酸水溶液)=50：50(V/V)，流速0.6mL/min時，得到滿意的分析結(jié)果，即有效成分之間及雜質(zhì)能得到很好的分離，峰形對稱，基線平穩(wěn)，峰保留時間適宜。

3.2 分析方法的線性相關(guān)性試驗 準(zhǔn)確稱取噻酮磺隆和異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)品0.015 4g和0.048 4g(精確至0.000 2g)于100mL容量瓶中，加入約80mL乙腈溶解，超聲10min，恢復(fù)至室溫后用乙腈稀釋定容，搖勻備用。按2.3色譜條件進行分析，進樣量分別為1、3、5、10、15μL，以質(zhì)量濃度和峰面積進行線性回歸分析，得到噻酮磺隆線性方程為Y=5 830.595 07X+14.338 215，線性相關(guān)系數(shù)R2=0.999 9；異噁唑草酮線性方程為Y=2 943.075 63X+21.081 347，線性相關(guān)系數(shù)R2=1.000 0。線性相關(guān)性具體試驗結(jié)果詳(表1)。

表1 分析方法的線性相關(guān)性試驗結(jié)果

3.3 分析方法的精密度試驗 對同一試驗樣品按照上述方法平行測定5次。測得噻酮磺隆和異噁唑草酮標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為0.03和0.04，變異系數(shù)分別為0.37%和0.19%(表2)。

表2 分析方法的精密度試驗結(jié)果

3.4 方法的準(zhǔn)確度實驗 準(zhǔn)確稱取5個一定量的試樣，分別加入10mL2.4.1中配制的標(biāo)樣溶液，在上述色譜操作條件下進行分析，測得噻酮磺隆的平均回收率為99.68%，異噁唑草酮的平均回收率為99.71%(表3)。

表3 分析方法的準(zhǔn)確度試驗結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了一種便捷、快速、靈敏的分析方法測定噻酮磺隆·異噁唑草酮懸浮劑中有效成分含量，其測試濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系符合檢測要求，同時該檢測方法具有良好的準(zhǔn)確度和精密度，是產(chǎn)品質(zhì)量控制的有效可行的分析方法。