糖尿病腎病患者血清碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白水平變化及臨床意義

韓兵 陳燁 齊麗

[摘要] 目的 研究2型糖尿?。═2DM）患者血清碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（ChREBP）水平變化及與糖尿病腎病（DN）的關(guān)系。 方法 選取2016年2月～2018年12月遼寧省阜新市第二人民醫(yī)院（婦產(chǎn)醫(yī)院）（以下簡稱“我院”）收治的T2DM患者193例，根據(jù)尿白蛋白肌酐比值（UACR）結(jié)果進(jìn)行分組，UACR≤30的患者為單純T2DM組（123例），UACR>30的患者為DN組（70例）。另取同期在我院接受體檢的50名健康人作為對照組。比較三組臨床資料，酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清ChREBP水平，logistic回歸分析DN影響因素，受試者工作特征曲線分析血清ChREBP診斷DN的能效。 結(jié)果 DN組糖尿病病程長于T2DM組（P < 0.05）;T2DM組、DN組的空腹血糖（FBG）、糖化血紅蛋白（HbA1c）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）水平均高于對照組，而高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）低于對照組（均P < 0.05）;DN組24 h尿白蛋白排泄率（24 h UAER）、ChREBP水平高于對照組、T2DM組，腎小球濾過率（eGFR）低于對照組、T2DM組（均P < 0.05）;T2DM組24 h UAER、ChREBP水平高于對照組，eGFR低于對照組（均P < 0.05）。糖尿病病程、24 h UAER以及ChREBP均是DN的獨立危險因素。截斷值為154.36 ng/mL時，靈敏度為0.872，特異度為0.834。 結(jié)論 血清ChREBP水平在DN患者中異常高表達(dá)，臨床可檢測血清ChREBP水平用于早期DN的診斷。

[關(guān)鍵詞] 2型糖尿病;糖尿病腎病;碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白;診斷

[中圖分類號] R587.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A? ? ? ? ? [文章編號] 1673-7210（2020）03（c）-0173-04

[Abstract] Objective To study the changes of serum carbohydrate response element binding protein（ChREBP） level in patients with type 2 diabetes mellitus （T2DM） and its relationship with diabetic nephropathy （DN）. Methods From February 2016 to December 2018， 193 cases with T2DM patients who admitted to the Second People′s Hospital and Gynecology and Obstetrics Hospital of Fuxin City of Liaoning Province （“our hospital” for short） were selected. According to the results of urinary albumin creatinine ratio （UACR）， the patients whose UACR≤30 were in simple T2DM group （123 cases）， and the patients with UACR>30 were in DN group （70 cases）， and 50 healthy people receiving physical examination in our hospital during the same period were selected as control group. Clinical data in three group were compared. The serum ChREBP level was detected by enzyme-linked immunosorbent assay and logistic regression analysis was conducted DN influencing factors. The energy efficiency of serum ChREBP in the diagnosis of DN was analyzed by the receiver operating characteristic curve of subjects. Results The duration of diabetes in DN group was longer than that of simple T2DM group （P < 0.05）. The levels of fasting blood-glucose （FBG）， glycosylated hemoglobin （HbA1c）， total cholesterol （TC），triglyceride （TG） and low density lipoprotein cholesterin （LDL-C） in simple T2DM group and DN group were higher than those of control group， while the level of high density lipoprotein cholesterol （HDL-C） was lower than that of control group （all P < 0.05）. The 24 h urinary albumin excretion rate （24 h UAER） and ChREBP levels of DN group were higher than those of control group and simple T2DM group， and the glomerular filtration rate （eGFR） was lower than that of control group and simple T2DM group （all P < 0.05）. The levels of 24 h UAER and ChREBP insimple T2DM group were higher than those in control group， and the eGFR was lower than that in control group （all P < 0.05）. Duration of diabetes， 24 h UAER and ChREBP levels were independent risk factors for DN. The cut-off value was 154.36 ng/mL， the sensitivity was 0.872， and the specificity was 0.834. Conclusion Serum ChREBP level is abnormally highly expressed in DN patients， and clinical detection of serum ChREBP level can be used for early diagnosis of DN.

[Key words] Type 2 diabetes mellitus; Diabetic nephropathy; Carbohydrate response element binding protein; Diagnosis

糖尿病腎?。―N）是糖尿病患者微血管并發(fā)癥之一，也是導(dǎo)致腎功能衰竭的重要原因之一[1]。我國DN的發(fā)病率呈逐年升高的趨勢，嚴(yán)重威脅著居民的生命健康安全[2]。臨床早期有效診斷并及時治療，可有效逆轉(zhuǎn)腎功能損傷，提高患者生存質(zhì)量及預(yù)后[3]。碳水化合物反應(yīng)元件結(jié)合蛋白（ChREBP）是響應(yīng)葡萄糖的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子之一，在機(jī)體多種器官中均有表達(dá)，肝臟、小腸、腎臟等組織中的表達(dá)較高，其主要作用于乙酰輔酶A羧化酶、磷酸果糖激酶、脂肪酸合成酶等靶基因，介導(dǎo)脂質(zhì)合成以及糖酵解過程[4]。高糖激活ChREBP途徑，且在腎系膜細(xì)胞中引起多種信號，這些信號導(dǎo)致糖尿病腎小球病變，提示ChREBP可能與DN的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[5]。本文通過研究2型糖尿?。═2DM）患者血清ChREBP水平變化，旨在探討其與DN的關(guān)系，現(xiàn)報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年2月～2018年12月遼寧省阜新市第二人民醫(yī)院（婦產(chǎn)醫(yī)院）（以下簡稱“我院”）收治的T2DM患者193例。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合中華醫(yī)學(xué)會糖尿病學(xué)分會《中國2型糖尿病防治指南（基層版）》[6]中T2DM相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)，空腹血糖（FBG）水平≥7.0 mmol/L，口服糖耐量試驗2 h時血糖水平≥11.1 mmol/L，糖化血紅蛋白水平≥6.5%;②受試者對本研究知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并慢性感染、免疫系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)疾病者;②妊娠期或哺乳期婦女;③合并其他類型慢性腎臟疾病或泌尿系感染者;④合并糖尿病酮癥酸中毒或糖尿病高血糖高滲性綜合征者;⑤臨床病歷資料缺失者;⑥心、肺、肝等重要臟器發(fā)生病變者。

根據(jù)尿白蛋白肌酐比值（UACR）進(jìn)行分組，UACR≤30的患者為單純T2DM組（123例），UACR>30的患者為DN組（70例）。另取同期于我院接受體檢的50名健康人作為對照組。本研究經(jīng)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

1.2 方法

①收集受試者一般資料，包括年齡、性別、身高、體重、體重指數(shù)（BMI）、吸煙以及糖尿病病程。②采用7060型全自動生化分析儀檢測FBG、糖化血紅蛋白（HbA1c）、三酰甘油（TG）、總膽固醇（TC）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、24 h尿白蛋白排泄率（24 h UAER），計算估算腎小球濾過率（eGFR）。③血清ChREBP水平檢測：抽取空腹靜脈血5 mL，3000 r/min離心15min，離心半徑10 cm，取血清，置于-80℃冰箱中備用，采用酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測血清ChREBP水平（長沙達(dá)爾峰科技有限公司，批號：20160126），按照試劑盒說明書進(jìn)行規(guī)范操作。

1.3統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗，兩組間比較采用t檢驗;計數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗;logistic回歸分析DN影響因素;ROC曲線分析血清ChREBP診斷DN的價值。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組一般資料及臨床資料比較

三組年齡、性別、BMI及吸煙人數(shù)比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。DN組的糖尿病病程長于T2DM組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。T2DM組、DN組FBG、HbA1c、TC、TG、LDL-C水平均高于對照組，而HDL-C水平低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P < 0.05）。且DN組24 h UAER、ChREBP水平高于對照組、T2DM組，eGFR低于對照組、T2DM組;T2DM組24 h UAER、ChREBP水平高于對照組，eGFR低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（均P < 0.05）。見表1。

2.2 logistic回歸分析

糖尿病病程、24 h UAER及ChREBP均是DN的獨立危險因素。見表2。

2.3 ROC曲線分析

血清ChREBP診斷DN的截斷值為154.36 ng/mL，曲線下面積為0.796，95%CI：0.684～0.895，靈敏度為0.872，特異度為0.834。見圖1。

3 討論

隨著糖尿病發(fā)病率的不斷上升以及人民生活方式的改變，DN的發(fā)病率不斷增加，目前已成為我國引起慢性腎臟病和終末期腎臟病最常見的病因[7]。隨著糖尿病病程的延長，以及非酶性糖基化終末產(chǎn)物形成、蛋白激酶C信號通路的激活、氧化應(yīng)激反應(yīng)、多元醇通路激活和己糖胺通路活性增高等機(jī)制的共同參與，導(dǎo)致糖尿病微血管病變，繼而引起包括DN在內(nèi)的一系列并發(fā)癥[8]。DN的臨床表現(xiàn)為蛋白尿和/或eGFR下降，因此與糖尿病未累及腎臟的患者比較，DN患者腎臟功能指標(biāo)如血肌酐、24 h UAER和蛋白尿水平較高。此外，F(xiàn)BG、HbAlC等生化指標(biāo)不僅可以反應(yīng)患者血糖控制水平，還可以反應(yīng)DN的發(fā)生風(fēng)險[9-13]。糖尿病患者多伴有脂肪代謝異常，易引發(fā)高甘油三酯血癥，影響腎小球濾過，最終導(dǎo)致腎臟損傷[14]。

本研究結(jié)果顯示，DN組糖尿病病程長于T2DM組，并且隨著糖尿病病程的不斷延長，T2DM患者發(fā)生DN的風(fēng)險越高，是DN發(fā)生的獨立危險因素，與國內(nèi)相關(guān)研究結(jié)果一致[15]。UAER升高是DN患者最常見的特征[16-17]，是目前臨床廣泛用于反映機(jī)體尿白蛋白的敏感指標(biāo)，具有較高的可靠性以及穩(wěn)定性。本研究結(jié)果顯示，與T2DM組及對照組比較，DN組24 h UAER水平較高，且是DN發(fā)生的獨立危險因素。因此，美國糖尿病協(xié)會（ADA）最新發(fā)布的指南[18]推薦，病程≥5年的T1DM和所有T2DM患者應(yīng)每年進(jìn)行UAER的評估。

ChREBP是2001年被發(fā)現(xiàn)的一種新的葡萄糖信號通路中的轉(zhuǎn)錄因子，與其形成的化合物可以與糖酵解和脂肪合成相關(guān)基因啟動子區(qū)的序列結(jié)合，直接激活糖、脂代謝基因的轉(zhuǎn)錄，調(diào)控機(jī)體內(nèi)糖、脂代謝[19-20]。糖尿病患者異常的葡萄糖和胰島素有可能通過調(diào)節(jié)ChREBP的活性造成腎臟糖、脂代謝紊亂，導(dǎo)致腎臟纖維化及腎功能受損。經(jīng)過高血糖處理過的腎系膜細(xì)胞，ChREBP蛋白表達(dá)顯著上升，同時會增加ChREBP去磷酸化程度以及糖基化程度，且轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核，進(jìn)一步促進(jìn)基因的轉(zhuǎn)錄。ChREBP是一種堿性/環(huán)-螺旋-環(huán)/亮氨酸拉鏈（bHLH/LZ）轉(zhuǎn)錄因子，在肝臟內(nèi)大量表達(dá)，同時也是糖、脂代謝過程中的重要因子[21]。而ChREBP于高糖狀態(tài)下，其蛋白表達(dá)明顯上調(diào)，增加去磷酸化程度以及糖基化程度，進(jìn)入細(xì)胞核后，進(jìn)一步促進(jìn)基因的轉(zhuǎn)錄[22-23]。有研究發(fā)現(xiàn)[5，24]，高糖可能是通過激活ChREBP的途徑，促進(jìn)低氧因子HIF1以及脂質(zhì)合成基因與纖維化相關(guān)基因的表達(dá)，參與DN的發(fā)生、發(fā)展過程。本研究結(jié)果顯示，DN組ChREBP水平高于T2DM組及對照組，且ChREBP是DN的獨立危險因素，ChREBP水平越高，DN的發(fā)生風(fēng)險越大。因此，其可以作為DN的風(fēng)險評估指標(biāo)。ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，血清ChREBP診斷DN具有較高的特異度和敏感度，診斷價值相對更高，可作為DN的臨床診斷指標(biāo)之一，有助于DN的早期診斷。

綜上所述，血清ChREBP水平在DN患者中明顯高表達(dá)，且能夠反應(yīng)糖尿病進(jìn)展至DN的風(fēng)險，臨床可通過檢測患者的血清ChREBP水平用于早期DN的診斷。

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