三種不同儀器檢測超敏C反應(yīng)蛋白結(jié)果的一致性分析

何廣營 林曉玲 李馮堅(jiān)

超敏C反應(yīng)蛋白（hs-CRP）是一種常見的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（acute phase proteins，APR），因其能與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖發(fā)生沉淀反應(yīng)而得名，在組織損傷、炎癥或感染時(shí)，由肝受細(xì)胞素產(chǎn)生物刺激產(chǎn)生，臨床上主要作為一種非特異性炎癥指標(biāo)。hs-CRP不僅用于一般感染性疾病的監(jiān)測，還用于心肌梗死、急性胰腺炎、多發(fā)創(chuàng)傷、腫瘤、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等多種疾病引起的全身炎癥綜合征的評估[1]。因此，及早、反復(fù)監(jiān)測hs-CRP對疾病的診斷、療效判斷及監(jiān)測具有重要意義。隨著疾病越來越復(fù)雜化、種類多化且來勢兇猛，為了及時(shí)、準(zhǔn)確地提供hs-CRP結(jié)果，目前很多實(shí)驗(yàn)室購置了多臺檢測hs-CRP儀器。根據(jù)ISO15189的規(guī)定，同一實(shí)驗(yàn)室中不同儀器檢測相同項(xiàng)目時(shí)，需要對檢測結(jié)果的一致性進(jìn)行評估，確保結(jié)果的一致性。本研究對3種不同儀器檢驗(yàn)hs-CRP結(jié)果的一致性進(jìn)行了比較分析，現(xiàn)將報(bào)告報(bào)道如下。

材料與方法

1 標(biāo)本來源 選取2018年3～7月來深圳龍華區(qū)人民醫(yī)院門診就診的感染發(fā)燒患者156例，年齡12～57歲，平均28±21.03歲，其中男89例，女67例。所有研究對象均知情并簽定知情同意書，且經(jīng)同醫(yī)院倫理委員會同意批準(zhǔn)。

2 儀器與試劑強(qiáng)生VITROS5600全自動(dòng)干片生化免疫分析儀、hs-CRP試劑盒及校準(zhǔn)品由美國強(qiáng)生公司提供；貝克曼AU5800全自動(dòng)生化分析儀、hs-CRP試劑盒及校準(zhǔn)品由美國Bankman公司提供；BC-5390全自動(dòng)血球儀-超敏C反應(yīng)蛋白一體機(jī)、hs-CRP試劑盒及校準(zhǔn)品均由深圳邁瑞公司提供。

3 方法

3.1 標(biāo)本采集：所有研究對象均采集靜脈血2管，一管2 mL加入EDTA-K2抗凝管內(nèi)，充分混勻；另一管3～5 mL于一次性無抗凝劑的干燥管內(nèi)，及時(shí)送檢。

3.2 標(biāo)本處理：無抗凝劑靜脈血室內(nèi)靜置30 min后于3 500 r/min離心機(jī)離心5 min，分離血清及時(shí)進(jìn)行檢測，不能及時(shí)檢測的標(biāo)本置于2℃～8℃冰箱內(nèi)保存并盡快檢測；全血標(biāo)本充分混勻后及時(shí)進(jìn)行檢測，2 h內(nèi)必須完成檢測。

3.3 hs-CRP檢測：檢測前對VITROS5600、AU5800及5390分析儀進(jìn)行保養(yǎng)、定標(biāo)及校正，然后進(jìn)行各儀器配套的室內(nèi)質(zhì)控物進(jìn)行檢測，待結(jié)果在控后再進(jìn)行研究標(biāo)本檢測，確保檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。VITROS5600和AU5800生化分析儀器檢測患者血清中hs-CRP濃度，BC-5390血球-超敏C反應(yīng)蛋白一體機(jī)檢測全血中hs-CRP濃度，所有操作均嚴(yán)格按儀器、試劑盒說明書及科室SOP文件進(jìn)行。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用GraphPad Prism 5及EXCEL對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析及作圖，計(jì)量資料采用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差（ ±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 三種不同儀器檢測hs-CRP濃度比較 156例患者血清中hs-CRP濃度參考儀器檢測結(jié)果為93.64±79.74 mg/L，邁瑞B(yǎng)C-5390全自動(dòng)血球-超敏C反應(yīng)蛋白一體機(jī)檢測的結(jié)果為87.98±76.57 mg/L，兩者差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.912 4，P＞0.05），而VITROS5600干片生化免疫分析儀檢測的結(jié)果為182.38±158.79 mg/L，明顯高于參考儀器，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=6.805 6，P＜0.05）。

2 三種不同儀器檢測hs-CRP濃度相關(guān)性 3種儀器檢測hs-CRP濃度之間均呈正向相關(guān)性，5390血球-超敏C反應(yīng)蛋白一體機(jī)與AU5800生化分析儀檢測hs-CRP結(jié)果之間相關(guān)系數(shù)（r2）為0.968 536；VITROS5600干片生化免疫分析儀與AU5800之間相關(guān)系數(shù)（r2）為0.952 974，結(jié)果見圖1、2。

圖1 BC5390和AU5800檢測hs-CRP結(jié)果相關(guān)性

圖2 VITROS5600和AU5800檢測hs-CRP結(jié)果相關(guān)性

討 論

C反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）是由白細(xì)胞介素-6（IL-6）誘導(dǎo)肝臟合成的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白[2]，各種急性和慢性感染、組織損傷、惡性腫瘤、手術(shù)創(chuàng)傷等均可導(dǎo)致CRP水平迅速升高，4～6 h開始升高，36～50 h達(dá)到峰值，病變好轉(zhuǎn)時(shí)又迅速降至正常[3]，且不受年齡、血型、體溫、貧血、妊娠等因素的影響，是可靠和靈敏的炎性反應(yīng)急性期反應(yīng)指標(biāo)[4，5]，且術(shù)后CRP檢測有助于感染、深靜脈血栓及彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）等并發(fā)癥的監(jiān)測[6，7]。hs-CRP 超敏C反應(yīng)蛋白是臨床實(shí)驗(yàn)室采用超敏感檢測技術(shù)，能準(zhǔn)確檢測低濃度C反應(yīng)蛋白，提高了試驗(yàn)的靈敏度和準(zhǔn)確度，是診斷低水平炎癥狀態(tài)的靈敏指標(biāo)[8，9]，血清hs-CRP水平與動(dòng)脈粥樣硬化及急性腦梗死（ACI） 的發(fā)生、嚴(yán)重程度及預(yù)后密切相關(guān)[10，11]。因此，及時(shí)、快速為臨床提供準(zhǔn)確的hs-CRP結(jié)果，對臨床疾病的診斷、療效的判斷及并發(fā)癥的發(fā)生監(jiān)控具有十分重要的意義。

目前，實(shí)驗(yàn)室檢測CRP的方法很多，如酶聯(lián)免疫分析、放射免疫分析、免疫比濁法（速率散射比濁法和免疫透射比濁法）、免疫層析法及免疫速率法[12-14]，檢測儀器從單機(jī)到多用機(jī)，儀器和試劑盒的檢測靈敏度也越來越高，速度也越來越快，為臨床快速地提供了準(zhǔn)確的hs-CRP結(jié)果。但不同儀器、試劑及方法學(xué)原理不同及檢測系統(tǒng)的差異，相同項(xiàng)目經(jīng)不同儀器實(shí)際檢測的結(jié)果存在明顯差異[15-20]，給治療帶來一定困難。本研究結(jié)果顯示，貝克曼AU5800全自動(dòng)生化分析儀檢測的hs-CRP結(jié)果稍高于邁瑞B(yǎng)C-5390全自動(dòng)血球-超敏C反應(yīng)蛋白一體機(jī)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），兩者結(jié)果具有良好的一致性，這可能與這兩種不同儀器檢測hs-CRP都采用免疫比濁法有關(guān)，兩者之間的細(xì)微差異可能與這兩種不同儀器的性能上存在一定差異有關(guān)。而強(qiáng)生VITROS5600干片生化免疫分析儀檢測hs-CRP結(jié)果明顯高于AU5800和BC-5390分析儀，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），這可能與VITROS5600分析儀采用免疫速率法檢測hs-CRP，檢測方法學(xué)原理不同于另外2種儀器等有關(guān)。但3種不同儀器所檢測hs-CRP結(jié)果之間具有良好的正相關(guān)（r=0.953 0～0.968 5），這也說明了不同方法學(xué)所導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不一致性，屬于系統(tǒng)性誤差，可以通過調(diào)節(jié)相關(guān)系數(shù)來加以校正，達(dá)到不同儀器檢測相同項(xiàng)目結(jié)果的一致性。

綜上所述，不同儀器、試劑及方法學(xué)檢測相同項(xiàng)目時(shí)會影響結(jié)果的一致性，但結(jié)果之間相關(guān)性很好，可通過調(diào)節(jié)系數(shù)達(dá)到結(jié)果的一致性。確保實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果一致性最理想的方法是同一實(shí)驗(yàn)室最好采購相同的儀器和試劑，否則要對不同儀器、試劑及方法學(xué)對檢測結(jié)果一致性的影響進(jìn)行評估，并加以校正。