肇慶地區(qū)婦女HPV分型檢測(cè)聯(lián)合宮頸TCT及宮頸活檢結(jié)果分析

鐘緯經(jīng),梁浩和

（廣東省肇慶市中醫(yī)院 病理科，廣東 肇慶 526020）

宮頸癌是臨床常見(jiàn)的女性生殖系統(tǒng)高發(fā)性惡性腫瘤之一，嚴(yán)重威脅女性生命健康。在我國(guó)，宮頸癌的發(fā)病率與死亡率占據(jù)了全世界總量的三分之一［1］。據(jù)有關(guān)研究統(tǒng)計(jì)，該病死亡人數(shù)在十年時(shí)間內(nèi)提升了25%。在發(fā)達(dá)國(guó)家，該病的篩查防治工作不斷完善，由此也更好地控制了發(fā)病率，但對(duì)于發(fā)展中國(guó)家而言，宮頸癌的發(fā)病率則逐年提升［2］。當(dāng)下，對(duì)于宮頸癌的篩查手段集中在TCT 檢查，然而多數(shù)檢查診斷工作中對(duì)于高危型HPV 缺乏足夠的重視，由此導(dǎo)致診斷準(zhǔn)確率下降，出現(xiàn)漏診幾率，導(dǎo)致患者錯(cuò)失最佳治療時(shí)機(jī)［3］。宮頸癌的早期診斷與治療是優(yōu)化患者生命質(zhì)量的關(guān)鍵。本研究中，主要分析肇慶地區(qū)婦女人乳頭瘤病毒（human papillomavirus, HPV）感染狀況，探討分型檢測(cè)聯(lián)合新柏氏液基細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（thinprep cytologic test,TCT）檢測(cè)的特異性、準(zhǔn)確率，并以病理活檢結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，觀察兩種檢測(cè)方法的臨床診斷價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇 2017 年6 月至2019 年6 月肇慶地區(qū)在本院行宮頸癌篩查的婦女2316 例為研究對(duì)象，行HPV 檢測(cè)，分析肇慶地區(qū)婦女HPV-DNA 感染率及基因亞型特點(diǎn)，此次研究均經(jīng)本院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者年齡17～88 歲，平均（46.33±10.64）歲；孕產(chǎn)次1～3 次，平均（1.73±0.60）次；并選取同期在本院聯(lián)合TCT 檢測(cè)的婦女2 046 例，患者年齡18～73 歲，平均（45.37±10.68）歲；孕產(chǎn)次 1～3 次，平均（1.75±0.63）次。

1.2 方法

HPV 檢測(cè)：輔助患者保持膀胱截石位，采用無(wú)菌棉將宮頸外口做全面的清潔，而后通過(guò)一次性宮頸刷經(jīng)陰道放置入宮頸管，采用順時(shí)針旋轉(zhuǎn)10 圈方式獲取宮頸分泌物。而后再將采集的分泌物放置在專業(yè)的HPV 保存液無(wú)菌封閉環(huán)境中存放，采用專用試劑盒，運(yùn)用PCR 熒光法處理，針對(duì)各分型HPV 檢測(cè)，做好全程質(zhì)控管理。

TCT 檢查：采用一次性宮頸刷在宮頸中采集分泌物，與HPV 檢測(cè)操作一致，而后將分泌物樣本放在細(xì)胞保存液內(nèi)進(jìn)行振蕩漂洗，而后再進(jìn)行密封保存送檢。通過(guò)TCT 自動(dòng)細(xì)胞制片機(jī)做好宮頸細(xì)胞涂片，進(jìn)行染色固定處理后，通過(guò)TCT 細(xì)胞學(xué)巴氏染色進(jìn)行診斷。

1.3 觀察指標(biāo)

分析肇慶地區(qū)婦女HPV-DNA 感染率及基因亞型特點(diǎn)；觀察HPV 聯(lián)合TCT 檢測(cè)聯(lián)合檢查在診斷宮頸癌及癌前病變的分布的靈敏度、特異性、符合率。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS 19.0 軟件統(tǒng)計(jì)分析。以百分比描述HPV 基因亞型感染分布情況，同時(shí)計(jì)算HPV、TCT 或聯(lián)合檢出的靈敏度、特異性、假陽(yáng)性率及假陰性率。

2 結(jié)果

2.1 HPV檢測(cè)結(jié)果及基因分布

行HPV 檢測(cè)的2316 例婦女中：共檢出414 例為陽(yáng)性結(jié)果，其中單純感染高危類型病毒327 例，單純感染低危類型病毒57 例，高危和低危病毒合并感染30 例。感染高危病毒中同時(shí)感染兩種及以上高危類型病毒60 例；感染低危類型病毒中同時(shí)感染兩種及以上低危類型病毒1 例。

2.2 HPV與TCT同時(shí)檢測(cè)的準(zhǔn)確性

宮頸癌篩查2046 例婦女：首先行HPV 篩查共檢出209 例為陽(yáng)性結(jié)果，再進(jìn)行TCT 進(jìn)一步檢查，HPV 與TCT 聯(lián)合檢出81 例為陽(yáng)性結(jié)果，宮頸活檢病理確診為宮頸癌和癌前病變者35 例，HPV 與TCT 聯(lián)合檢測(cè)方法陽(yáng)性結(jié)果與病理結(jié)果比較顯示，靈敏度為85.37%（35/41），特異性為72.62%（122/168），假陰性率為14.63%（6/41），假陽(yáng)性率為27.38%（46/168）TCT 陽(yáng)性中：不能排除高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變的非典型鱗狀上皮細(xì)胞（atypical squamous cell cannot exclude HSIL,ASC-H）9 例、低級(jí)別鱗狀細(xì)胞病變（low-grade squamous intraepithelial lesion,LSIL）21 例、意義不明確的非典型鱗狀細(xì)胞（atypical squamous cells of undetermined significance, ASC-US） 20 例、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high-grade squamous intraepithelial lesion, HSIL） 25 例、非典型腺細(xì)胞（atypical glandular cell,AGC）4 例、鱗狀細(xì)胞癌2 例。

表1 肇慶地區(qū)婦女HPV 感染狀況及基因亞型分布特點(diǎn)

3 討論

宮頸癌屬于臨床上常見(jiàn)的惡性腫瘤，對(duì)女性患者的身心構(gòu)成嚴(yán)重創(chuàng)傷。該病發(fā)病機(jī)制尚未明確，但是有關(guān)研究認(rèn)為該病與患者宮頸高危型HPV 感染有密切聯(lián)系［4］。HPV 侵入人體后，出現(xiàn)宮頸鱗狀上皮細(xì)胞感染，一般情況下機(jī)體會(huì)自行清理，但是部分患者會(huì)出現(xiàn)持續(xù)性感染。HPV 病毒感染如果長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)，則可能增加宮頸癌的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，及時(shí)治療HPV 病毒感染是挽救患者生命的有效手段。

經(jīng)病毒學(xué)、流行病學(xué)等專家研究表明，特定類型HPV 感染是引發(fā)宮頸浸潤(rùn)癌的首要因素。有99.7% 宮頸癌患者中檢驗(yàn)發(fā)現(xiàn)存在HPV-DNA 感染，基因亞型最為常見(jiàn)的是HPV16、18、45、31等亞型［5］。HPV 致病力程度與不同宮頸上皮內(nèi)瘤變（cervical intraepithelial neoplasia, CIN）、宮頸癌內(nèi)HPV 感染分布狀況，HPV 可以劃分成中國(guó)人常見(jiàn)型、低危型與高危型等情況。當(dāng)前低危型是引發(fā)低度宮頸上皮內(nèi)瘤變與扁平疣類疾病的重要原因，包括HPV6、11、42、43、44；高危型共13 種，集中在 HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68，是引發(fā)CINⅡ～Ⅲ及宮頸癌的重要原因［6］。在中國(guó)群體中，常見(jiàn)的亞型主要集中在HPV53、HPV66、CP8304。本研究單一行HPV 檢測(cè)的2316 例婦女中：共檢出414 例為陽(yáng)性結(jié)果，其中高危類型病毒357 例：基因亞型以HPV58（65 例）、HPV39（35 例）、HPV56（15 例）、HPV16（69 例）、HPV52（92 例）為主；低危類型病毒87 例：基因亞型以 HPV81（CP8304）（33 例）、HPV6（17 例）、HPV11（15 例）為主。表明肇慶地區(qū)婦女人乳頭瘤病毒（HPV）感染主要高危類型病毒為主，基因分型主要以HPV58、HPV39、HPV16 及 HPV52 較為多見(jiàn)。

有關(guān)研究表明［7］，單一性的HPV 感染所引發(fā)的宮頸癌風(fēng)險(xiǎn)提升僅僅為19.9 倍，但是多重性的HPV 感染則會(huì)讓風(fēng)險(xiǎn)性提升31.8 倍。本研究單一行HPV 檢測(cè)的2316 例婦女中：共檢出414 例為陽(yáng)性結(jié)果，其中單純感染高危類型病毒327 例，單純感染低危類型病毒57 例，高危和低危病毒合并感染30 例。感染高危病毒中同時(shí)感染兩種及以上高危類型病毒60 例；感染低危類型病毒中同時(shí)感染兩種及以上低危類型病毒1 例。可以表明本地HPV 感染主要集中在單純型為主，同時(shí)多重感染一般是性活動(dòng)相對(duì)頻繁的群體中，感染一般為一過(guò)性情況，沒(méi)有引發(fā)后續(xù)宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變。對(duì)于HPV 陽(yáng)性情況，液基細(xì)胞學(xué)屬于正常的群體，一般推薦其采用6 至9 個(gè)月的HPV-DNA 復(fù)查，如果有HPV 感染，則屬于高危群體范圍，需要用藥與定期到院復(fù)查［8］。

有關(guān)研究表明［9］，宮頸癌篩查的定期進(jìn)行可以有效的提升宮頸癌與癌前病變的及時(shí)檢出率，有效的做到早期診斷與治療，減少該病死亡率，有效的提升患者的生存率。高危型HPV 感染與宮頸癌出現(xiàn)有著密切的聯(lián)系。從CIN 轉(zhuǎn)變?yōu)閷m頸浸潤(rùn)癌，一般會(huì)有10 至15 年的過(guò)度時(shí)間。如果做到早期的診斷發(fā)現(xiàn)，可以防控疾病發(fā)展。一般在篩查的手段上，可以選擇宮頸細(xì)胞學(xué)檢查（傳統(tǒng)宮頸刮片與TCT）、陰道鏡檢查、宮頸活檢、HPV檢測(cè)［10］。宮頸刮片細(xì)胞學(xué)檢查會(huì)出現(xiàn)相對(duì)高的假陰性、漏診等情況，由此更多的采用TCT。TCT檢查可以觀察到病變宮頸細(xì)胞，具有較高的檢查特異性，但是在宮頸病變的檢查的靈敏度相對(duì)不足，無(wú)法有效的觀察宮頸病。在國(guó)外研究中，HPV 檢測(cè)靈敏度會(huì)比細(xì)胞學(xué)篩查更高，同時(shí)能夠提升與預(yù)測(cè)病情發(fā)展以及術(shù)后復(fù)發(fā)等風(fēng)險(xiǎn)，該檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值相對(duì)高，可以降低細(xì)胞學(xué)檢查陽(yáng)性患者的檢查頻次，隨訪間隔時(shí)間可以相對(duì)延長(zhǎng)，降低反復(fù)高頻率檢查導(dǎo)致的女性傷害。HPV 感染提示獲得性免疫缺陷綜合征，如果有HPV 感染，則不一定是CINⅡ或?qū)m頸癌。在HPV 的檢查上需要檢測(cè)方式的敏感度盡可能更高，但是如果HPV檢測(cè)敏感度高則會(huì)使得非病變風(fēng)險(xiǎn)低病毒載量感染者被判斷為陽(yáng)性，一般屬于一過(guò)性感染。如果屬于一過(guò)性HPV 感染被檢測(cè)為陽(yáng)性，則可能導(dǎo)致患者不必要的診治費(fèi)用、心理層面的焦躁不安等問(wèn)題，甚至?xí)l(fā)治療有關(guān)的出血、遠(yuǎn)期妊娠并發(fā)癥等風(fēng)險(xiǎn)。鑒于此，聯(lián)合檢查的方法，取長(zhǎng)補(bǔ)短，發(fā)揮協(xié)同作用，HPV 檢測(cè)的靈敏度和陰性預(yù)測(cè)值很高，假陽(yáng)性率較高；TCT 檢查的特異度較高，靈敏度較低，假陰性率較高；聯(lián)合HPV 與TCT 檢測(cè)，篩查宮頸癌變的靈敏度、特異度明顯提高，降低漏診率和誤診率。

本研究HPV 與TCT 聯(lián)合檢測(cè)方法陽(yáng)性結(jié)果與病理結(jié)果比較顯示，靈敏度為85.37%（35/41），特異性為72.62%（122/168），假陰性率為14.63%（6/41），假陽(yáng)性率為27.38%（46/168）。亦充分論證了HPV 與TCT 聯(lián)合檢測(cè)，可有效提高診斷準(zhǔn)確率，減輕患者心理負(fù)擔(dān)，具有極大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)學(xué)效益。