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    GC-IMS在綠茶揮發(fā)性物質(zhì)定性分析中的應(yīng)用

    2020-04-10 12:38:58劉亞芹王輝黃建琴雷攀登
    中國茶葉加工 2020年1期
    關(guān)鍵詞:猴魁茶樣綠茶

    劉亞芹,王輝,黃建琴,雷攀登

    (安徽省農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所,安徽黃山245000)

    綠茶是我國產(chǎn)量最多、飲用最廣的一種茶類。綠茶品質(zhì)好壞一般從外形、湯色、香氣、滋味和葉底等因子來評判,其中香氣是判斷綠茶品質(zhì)的重要因子之一。綠茶的香氣實質(zhì)是由不同揮發(fā)性的化合物決定的。不同茶樹品種、不同加工方式、不同區(qū)域的綠茶,其揮發(fā)性化合物在成分及含量上都有較大差異。

    氣相離子遷移譜 (Gas Chromatography-Ion Mobility Spectrometry,GC-IMS)是以氣相為基礎(chǔ),根據(jù)氣相離子在弱電場中遷移率的不同,快速分析揮發(fā)性和半揮發(fā)性化合物的技術(shù)[1]。具有痕量檢測(ppb級)、操作簡單、響應(yīng)迅速、反應(yīng)靈敏等[2]特點,在機場廣泛用于爆炸物[3]的檢測。近年來,GCIMS被用于目標(biāo)分析物的定性和定量分析,如有毒化合物[4]、食品風(fēng)味分析[5-8]、橄欖油、芝麻油等油類的真假和等級鑒別[9-13]、肉類鑒別及儲藏時間鑒

    定[14]。

    目前用于茶葉香氣定性定量分析主要是氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用 (Gas Chromatography-Mass Spectrometer,GC-MS)技術(shù),而GC-IMS運用較少。林若川等[15]利用GC-IMS技術(shù)對云霧茶、翠尖茶和龍井茶三種綠茶中的香氣物質(zhì)進(jìn)行檢測,三種綠茶香氣成分的差異明顯?;粲昙训萚16]認(rèn)為利用GC-IMS技術(shù)能準(zhǔn)確測定茶葉揮發(fā)性成分,利于茶葉質(zhì)量評估工作的開展。與GC-MS相比,GC-IMS的樣品前處理更為簡單,從而保證了綠茶中的揮發(fā)性物質(zhì)能夠最大程度地保留。基于此,實驗擬利用GC-IMS技術(shù)對不同等級、不同區(qū)域及不同加工工藝的綠茶揮發(fā)性成分進(jìn)行定性分析研究,以探明將GC-IMS技術(shù)應(yīng)用于茶葉揮發(fā)性物質(zhì)檢測的可行性。

    1 材料與方法

    1.1 實驗材料

    10個茶葉樣品:5個不同等級的炒青綠茶(茶樣編號1~5)和5個不同區(qū)域和品種的烘青綠茶(茶樣編號 6~10),具體信息見表 1;空白樣品(茶樣編號blank A-blank C)由德國GAS公司提供。

    表1 茶樣信息表Table 1 Tea sample imformation

    1.2 儀器與設(shè)備

    1.3 GC-IMS分析方法

    茶葉樣品粉碎后過40目篩,精確稱取1 g茶樣于20 mL頂空進(jìn)樣瓶中,85℃條件下孵育20 min,60℃震蕩加熱10 min后抽取樣品注入GC分離器,進(jìn)樣器溫度 90℃,進(jìn)樣體積 600 μL;利用恒溫加熱多維毛細(xì)管柱 (5%聯(lián)苯-95%二甲基聚硅氧烷,MCC-OV5;20 cm,0.2 μm)對揮發(fā)性成分進(jìn)行分離,柱溫40℃。載氣為高純氮氣(純度≥99.999%),初始載氣流速2 mL/min,2 min后升至100 mL/min;分析時間20 min。每個樣品取兩份平行樣(標(biāo)注A、B),空白樣品取三份平行樣。

    1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

    差異譜圖、相似度匹配、出信號峰相對強度、主成分分析均利用儀器工作站內(nèi)置的功能軟件Laboratory Analytical Viewer(LAV)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 綠茶樣品中揮發(fā)性有機物的差異分析

    通過LAV軟件得到樣品揮發(fā)性有機物的遷移譜圖,如圖1所示,紅色豎線為反應(yīng)離子峰(RIP峰),RIP峰右側(cè)的每一個點代表一種揮發(fā)性有機物,白色表示濃度較少,紅色表示濃度較大,顏色越深表示濃度越大。根據(jù)信號峰的數(shù)量及強度綜合分析,可以推斷,5個炒青綠茶(茶樣1至茶樣5)與5個烘青綠茶(茶樣6至茶樣10)在揮發(fā)性有機物種類上差異較小,在揮發(fā)性有機物濃度上略有差異。

    為了更加深入分析不同茶樣中揮發(fā)性有機物含量的差異,利用Gallery Plot制出部分揮發(fā)性有機物的信號峰差異圖譜(圖2)。通過圖2Ⅰ信號峰顏色比較,1-19、1-20信號峰的2種揮發(fā)性有機物在屯綠41022(4A)中的含量較高;屯綠41022(3A) 中 2-4、2-5、2-13、2-12、2-11、2-9 信號峰的6種揮發(fā)性有機物的含量較高;2-9、2-10、1-13、1-27、1-28、1-42、1-2、1-3、1-15、1-36、2-8、3-1、3-2、3-3、3-4信號峰的15種揮發(fā)性有機物在屯綠 41022(5A) 中的含量較高;1-5、1-6、1-35、1-7信號峰的4種揮發(fā)性有機物在屯綠9371中的含量較高;1-28、1-7、1-9信號峰的3種揮發(fā)性有機物在屯綠41022(6A)中的含量較高。

    通過圖2Ⅱ信號峰顏色比較,太平猴魁(猴崗群體種)與太平猴魁(猴坑群體種)在揮發(fā)性有機物組成上相似度高,2-7、1-7、1-28、1-35、1-39、2-14、1-13信號峰的7種揮發(fā)性有機物在太平猴魁(東坑群體種)中的含量較高;在太平猴魁(顏家群體種)中,1-13、1-15、9-2信號峰的3種揮發(fā)性有機物的含量較高;1-13、1-15、10-1、2-9、2-11、2-10、2-12、2-13信號峰的8種揮發(fā)性有機物在太平猴魁(顏家柿大茶23號品種)中的含量較高。

    2.2 綠茶樣品中揮發(fā)性有機物的相似度分析

    利用LAV軟件分析每種揮發(fā)性有機物信號峰的相對強度,以樣品中某物質(zhì)濃度最大的信號峰定義為100,據(jù)此比較其它樣品中該物質(zhì)信號峰的強度,可推斷出該揮發(fā)性有機物在不同樣品中的相對濃度。綜合分析揮發(fā)性有機物的種類與相對濃度,可以推斷出樣品的相似匹配度,快速識別茶葉樣品的區(qū)別與差異。從表2可知在樣品1~5中,茶樣3屯綠41022(5A)的揮發(fā)性有機物與其他茶葉樣品差異最大、其次為茶樣2屯綠41022(3A),而屯綠 41022(4A)、屯綠 9371、屯綠 41022(6A)相似。在樣品6~10中,茶樣6太平猴魁(猴崗群體種)和茶樣7太平猴魁(猴坑群體種)相似,太平猴魁(東坑群體種)、太平猴魁(顏家群體種)、太平猴魁(顏家柿大茶23號品種)相似。推斷GCIMS技術(shù)可以作為區(qū)別不同等級、不同區(qū)域綠茶的一種方式。圖3炒青綠茶和烘青綠茶的PCA分析顯示:炒青綠茶為一類,烘青綠茶為一類,差異顯著。說明利用GC-IMS技術(shù)可以區(qū)別不同加工工藝的綠茶。

    表2 炒青綠茶和烘青綠茶相似匹配度分析Table 2 Similarity matching analysis of panfired and firing green tea

    3 結(jié)論

    GC-IMS技術(shù)具有痕量檢測、檢測流程簡單、響應(yīng)迅速、成本相對較低等特點,近幾年來,在食品風(fēng)味揮發(fā)物的定性和定量分析中運用廣泛,但在綠茶揮發(fā)物的定性定量分析中應(yīng)用較少。因此,實驗選用5個不同等級的炒青綠茶和5個不同區(qū)域的烘青綠茶作為材料,運用GC-IMS技術(shù)對這10個綠茶的揮發(fā)性成分進(jìn)行初步定性分析。根據(jù)信號峰的數(shù)量及強度綜合分析初步推斷:5個炒青綠茶與5個烘青綠茶在揮發(fā)性有機物種類上差異較小,在揮發(fā)性有機物濃度上略有差異。根據(jù)樣品的相似匹配度初步推斷:GC-IMS技術(shù)可以作為區(qū)別不同等級、不同區(qū)域的綠茶的方式。根據(jù)樣品PCA分析初步推斷:利用GC-IMS技術(shù)可以區(qū)別不同加工工藝的綠茶??芍狦C-IMS技術(shù)研究為茶葉揮發(fā)物定性分析提供一條新途徑,具有較高的可行性。

    圖1 炒青綠茶(Ⅰ)與烘青綠茶(Ⅱ)的氣相離子遷移譜圖Fig.1 GC-IMS chromatogram of panfired green tea(Ⅰ)and firing green tea(Ⅱ)

    圖2 炒青綠茶(Ⅰ)與烘青綠茶(Ⅱ)的氣相離子遷移譜信號峰差異圖譜Fig.2 Difference plot of GC-IMS chromatogram of panfired green tea(Ⅰ)and firing green tea(Ⅱ)

    圖3 炒青綠茶和烘青綠茶的PCA分析Fig.3 Principal component analysis of panfired green tea and firing green tea

    若能進(jìn)一步通過GC-IMS技術(shù)利用揮發(fā)性物質(zhì)特征圖譜對茶葉揮發(fā)物進(jìn)行定量分析,從而對關(guān)鍵香氣成分進(jìn)行呈香模型重構(gòu)與消除試驗,明確香氣成分在整體香氣中的作用與重要性,最終從香氣貢獻(xiàn)量化的角度實現(xiàn)關(guān)鍵香氣組分的準(zhǔn)確鑒定。從一定意義上來說,GC-IMS是一種具有高靈敏度、快速方便的新型研究技術(shù),有望在未來對茶葉關(guān)鍵香氣組分的研究中發(fā)揮積極作用,有一定的應(yīng)用前景。

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