■章 霞 徐志進(jìn) 李凌剛 柳敏海 李偉業(yè) 殷小龍
(浙江省舟山市水產(chǎn)研究所,浙江舟山316000)
大黃魚(yú)(Pseudosciaena crocea)屬硬骨魚(yú)綱(Osteichthyes)、鱸形目(Perciformes)、石首魚(yú)科(Sciaenidae)、黃魚(yú)屬,主要分布在我國(guó)的南海、東海和黃海南部,有“海水國(guó)魚(yú)”之稱(chēng)[1]。20 世紀(jì)70 年代,大黃魚(yú)因過(guò)度捕撈而資源日漸枯竭[2]。自1985 年大黃魚(yú)魚(yú)苗培育成功以來(lái),大黃魚(yú)養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)迅速發(fā)展,目前為浙江和福建沿海城市主要養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)魚(yú)類(lèi),在漁業(yè)經(jīng)濟(jì)和漁業(yè)資源恢復(fù)中發(fā)揮重要作用[3-4]。
迄今為止,關(guān)于大黃魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)健康研究有不少報(bào)道,主要集中在養(yǎng)殖模式、飼料營(yíng)養(yǎng)及遺傳育種等三個(gè)方面。韓坤煌等[5]的研究表明,圍網(wǎng)養(yǎng)殖大黃魚(yú)的氨基酸總量、粗蛋白、鮮味氨基酸、呈味氨基酸含量明顯高于普通網(wǎng)箱大黃魚(yú)(P<0.05),可通過(guò)改變養(yǎng)殖模式如圍網(wǎng)養(yǎng)殖提高大黃魚(yú)肉質(zhì);高有領(lǐng)等[6]的研究表明,投喂配合飼料與投喂鮮雜魚(yú)相比可顯著降低大黃魚(yú)全魚(yú)的粗脂肪含量(P<0.05),顯著提高總氨基酸含量(P<0.05),投喂配合飼料提高大黃魚(yú)肌肉的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;林利民等[7]的研究結(jié)果表明通過(guò)家系選育育種可改良大黃魚(yú)的肉質(zhì)等。但對(duì)產(chǎn)后大黃魚(yú)親魚(yú)營(yíng)養(yǎng)復(fù)健影響的研究目前尚無(wú)報(bào)道。
在日常育苗生產(chǎn)中,大黃魚(yú)親魚(yú)一般會(huì)在產(chǎn)后的2個(gè)月或者更短的時(shí)間內(nèi)進(jìn)入網(wǎng)箱養(yǎng)殖,儲(chǔ)備作為來(lái)年的親魚(yú)。此階段中大黃魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)健康是影響大黃魚(yú)產(chǎn)后成活率及來(lái)年繁育性能的重要條件,因此探究不同餌料對(duì)產(chǎn)后大黃魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)健康影響具有重要實(shí)際意義。
本研究結(jié)合當(dāng)前育苗種的生產(chǎn)實(shí)際,通過(guò)投喂冰鮮或鮮活餌料進(jìn)行產(chǎn)后大黃魚(yú)的營(yíng)養(yǎng)強(qiáng)化,并通過(guò)大黃魚(yú)肌肉氨基酸和脂肪酸含量分析來(lái)評(píng)價(jià)幾種常見(jiàn)餌料對(duì)大黃魚(yú)營(yíng)養(yǎng)效果的影響,以此作為今后生產(chǎn)育苗中的參考依據(jù)。
2017年4月,選自浙江華興水產(chǎn)科技有限公司同一批產(chǎn)后大黃魚(yú)雌性親魚(yú)作為本試驗(yàn)的試驗(yàn)對(duì)象,試驗(yàn)共設(shè)4組,每組各選取100尾大黃魚(yú)雌性親魚(yú)[平均體重(437.43±65.10) g,平均體長(zhǎng)(27.33±0.57) cm]養(yǎng)殖于4 m×4 m的水池中,換水量每天200%,每天投餌量為魚(yú)體總重量的2%,投喂次數(shù)為每天2 次,組A每天投喂中華管鞭蝦(Solenocera crassicornis)(以下簡(jiǎn)稱(chēng)紅蝦)0.5 kg/次,組B 投喂沙蠶(Nereis succinea)0.5 kg/次,組C 投喂黃占魚(yú)(Trachurus japonicus)魚(yú)塊+強(qiáng)化劑(簡(jiǎn)稱(chēng)魚(yú)強(qiáng),親魚(yú)強(qiáng)化劑購(gòu)自青島越洋進(jìn)出口有限公司,填充量為80 ml/kg)0.5 kg/次,組D 投喂黃占魚(yú)魚(yú)塊(簡(jiǎn)稱(chēng)魚(yú)塊)0.5 kg/次。復(fù)健2 個(gè)月后取樣,試驗(yàn)各組取樣,每組設(shè)3個(gè)重復(fù),3尾魚(yú)1個(gè)重復(fù)。臨催產(chǎn)前的親魚(yú)肌肉氨基酸和脂肪酸含量數(shù)據(jù)記為原始對(duì)照組O。
取樣前對(duì)樣品魚(yú)進(jìn)行饑餓處理24 h后,依次將養(yǎng)殖池中各組試驗(yàn)魚(yú)適量撈出,用丁香酚(上海化學(xué)試劑公司產(chǎn)品,1∶10 000)麻醉,各組大黃魚(yú)取背部肌肉40 g,腹部肌肉50 g,分別混合各組樣品,凍存至-80 ℃冰箱用于測(cè)定魚(yú)肉中的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)成分——粗蛋白、粗脂肪、灰分、水分以及氨基酸和脂肪酸含量。
各個(gè)餌料和魚(yú)肉營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定:粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、灰分、水分的含量分別采用凱氏定氮法(GB 5009.5—2016)、索氏抽提法(GB/T 6433—2006)、550 ℃燃燒后稱(chēng)量殘余物的方法(GB 5009.4—2016)、直接干燥法(GB 5009.3—2016)測(cè)定。采用GB/T 5009.124—2003測(cè)定肌肉中的氨基酸含量,脂肪酸含量采用水解提取-氣相色譜法(GB/T 22223—2008)測(cè)定。
試驗(yàn)儀器采用IE363 氨基酸分析儀(日本日立L-8900)和氣相色譜儀(日本島津GC-2010)。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件開(kāi)展單因素方差分析(ANOVA),差異性顯著分析采用Duncan's 法多重比較。
2.1.1 四種餌料的基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)測(cè)定(見(jiàn)表1)由表1可知,不同餌料之間,水分含量差別較大,由多到少依次是沙蠶、紅蝦、魚(yú)塊、魚(yú)強(qiáng),各種餌料間差異顯著(P<0.05);粗蛋白含量由多到少依次是魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊、紅蝦、沙蠶,其中魚(yú)強(qiáng)粗蛋白含量顯著高于魚(yú)塊、紅蝦和沙蠶(P<0.05),魚(yú)塊和紅蝦差異不大;粗脂肪含量由大到小為魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊、沙蠶、紅蝦,其中魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊顯著高于沙蠶和紅蝦(P<0.05);粗灰分含量由大到小紅蝦、沙蠶、魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊,紅蝦顯著高于沙蠶、魚(yú)塊和魚(yú)強(qiáng)(P<0.05),魚(yú)塊和魚(yú)強(qiáng)無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
表1 不同餌料的基本營(yíng)養(yǎng)成分比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
2.1.2 四種餌料的氨基酸含量(見(jiàn)表2)
表2 不同餌料的氨基酸含量比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
由表2可知,四種餌料的氨基酸總含量最高為魚(yú)強(qiáng)(16.99±0.68)%,超過(guò)紅蝦1.22個(gè)百分點(diǎn)、魚(yú)塊2.35個(gè)百分點(diǎn)、沙蠶7.87 個(gè)百分點(diǎn),紅蝦和魚(yú)塊差異不顯著(P>0.05);沙蠶的非必需氨基酸總量(4.57±1.01)%顯著低于紅蝦、魚(yú)塊、魚(yú)強(qiáng)(P<0.05),其他三組之間差異不顯著(P>0.05);魚(yú)強(qiáng)的必需氨基酸總量(9.22±0.25)%,顯著高于紅蝦、魚(yú)塊和沙蠶(P<0.05),紅蝦和魚(yú)塊差異不顯著(P>0.05),呈味氨基酸總量紅蝦顯著高于魚(yú)塊和沙蠶。
2.1.3 四種餌料的脂肪酸含量(見(jiàn)表3)
表3 不同餌料的脂肪酸含量比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
由表3可知,四種餌料的脂肪酸總含量最高為魚(yú)強(qiáng)(3.077±0.616)%,超過(guò)魚(yú)塊0.696 個(gè)百分點(diǎn)、沙蠶1.309 個(gè)百分點(diǎn)、紅蝦2.664 個(gè)百分點(diǎn),魚(yú)強(qiáng)總脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦(P<0.05);魚(yú)強(qiáng)的飽和脂肪酸含量顯著高于魚(yú)塊、沙蠶和紅蝦,魚(yú)塊、沙蠶的飽和脂肪酸含量差異不顯著(P>0.05);魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊的不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦(P<0.05);魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊的單不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦(P<0.05),沙蠶和紅蝦之間差異不顯著(P>0.05)。魚(yú)強(qiáng)的多不飽和脂肪酸和高不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶和紅蝦;EPA+DHA的含量魚(yú)強(qiáng)高于魚(yú)塊(P>0.05),顯著高于沙蠶和紅蝦,且沙蠶顯著高于紅蝦(P<0.05)。
2.2.1 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)背部氨基酸含量
通過(guò)投喂不同餌料復(fù)健的產(chǎn)后雌性大黃魚(yú)親魚(yú)背部氨基酸含量見(jiàn)表4 所示。復(fù)健2 個(gè)月后,各組總氨基酸含量組C>組A>組O>組D>組B,各組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。非必需氨基酸含量為組C>組A>組D>組O>組B,各組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。必需氨基酸含量為組O>組A>組C>組D>組B,各組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。呈味氨基酸含量為組C>組A>組O>組D>組B,各組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。組A、B、C、D的各種氨基酸含量存在差異的為谷氨酸、蛋氨酸和脯氨酸;谷氨酸含量組C顯著高于組A、B、D(P<0.05);蛋氨酸組A 顯著高于組B、C、D,脯氨酸組D顯著高于組C(P<0.05)。
表4 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)背部氨基酸含量比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
2.2.2 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)腹部氨基酸含量
通過(guò)投喂不同餌料復(fù)健的產(chǎn)后雌性大黃魚(yú)親魚(yú)腹部氨基酸含量見(jiàn)表5 所示。復(fù)健2 個(gè)月后,各組總氨基酸含量組A>組C>組D>組O>組B,其中組A 顯著高于對(duì)照組O 及組C、D、B(P<0.05)。非必需氨基酸含量為組A>組C>組O>組D>組B。必需氨基酸含量為組A>組D>組C>組B>組O,其中組A 顯著高于對(duì)照組O(P<0.05)。呈味氨基酸總含量為組C>組A>組O>組D>組B,各組之間無(wú)顯著性差異。相對(duì)于對(duì)照組,各組的氨基酸含量有變化的為天門(mén)冬氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、脯氨酸、酪氨酸、賴(lài)氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸和纈氨酸。組A 和組C的天門(mén)冬氨酸和谷氨酸顯著高于組B、D(P<0.05),組A 的蛋氨酸含量顯著高于組B、D(P<0.05)。
2.3.1 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)背部脂肪酸含量
通過(guò)投喂不同餌料復(fù)健的產(chǎn)后雌性大黃魚(yú)親魚(yú)背部脂肪酸含量如表6 所示。在大黃魚(yú)親魚(yú)復(fù)健期間通過(guò)不同的餌料對(duì)大黃魚(yú)進(jìn)行投喂效果不同。在大黃魚(yú)復(fù)健2 個(gè)月后,各組總脂肪酸含量組D>組C>組B>組O>組A,其中組B、C、D 顯著高于組A(P<0.05)。飽和脂肪酸含量組D>組B>組O>組C>組A,組D 顯著高于組O、A、B、C(P<0.05)。不飽和脂肪酸含量組C>組D 組B>組O>組A,組C 顯著高于組B、A和組O(P<0.05)。多不飽和脂肪酸含量組C>組D>組O>組B>組A,組C顯著高于組O、A、B(P<0.05)。高不飽和脂肪酸、EPA+DHA 含量A、B、C 三組差異不顯著,但組O、D顯著高于組A、B、C餌料組。
2.3.2 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)腹部脂肪酸含量
通過(guò)投喂不同餌料復(fù)健的產(chǎn)后雌性大黃魚(yú)親魚(yú)腹部脂肪酸含量見(jiàn)表7 所示。在投喂不同的餌料對(duì)大黃魚(yú)進(jìn)行復(fù)健2個(gè)月后,各組總脂肪酸含量組C>組D>組B>組O>組A,其中組D、組C顯著高于組A,但組O、B 和組A 之間無(wú)顯著性差異。飽和脂肪酸含量組B>組C>組D>組O>組A,其中組B 顯著高于組O、A(P<0.05)。不飽和脂肪酸含量組C>組O>組D>組B>組A,其中組C、D、O無(wú)顯著性差異,顯著高于組A(P<0.05)。多不飽和脂肪酸含量組O>組C>組D>組B>組A,其中組O 與組B、C、D 無(wú)顯著性差異(P>0.05)。高不飽和脂肪酸含量組O>組D>組C>組B>組A,其中組O顯著高于其他4組,其他四組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。EPA+DHA含量組O>組C>組D>組B>組A,其中組O 顯著高于其他4 組(P<0.05),其他四組之間無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
表5 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)腹部氨基酸含量比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
表6 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)背部脂肪酸含量比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
表7 產(chǎn)后復(fù)健雌性大黃魚(yú)親魚(yú)腹部脂肪酸含量比較(n=3,以鮮基計(jì),%)
水生動(dòng)物的繁殖性能與餌料的蛋白質(zhì)水平具有密切關(guān)系[8-9]。Luo等[10]和孫瑞建[11]的研究表明隨著飼料中蛋白質(zhì)水平的升高,魚(yú)體蛋白質(zhì)會(huì)逐漸升高。本研究結(jié)果中,紅蝦、沙蠶、魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊四種餌料中粗蛋白含量由多到少依次是魚(yú)強(qiáng)、魚(yú)塊、紅蝦、沙蠶,總氨基酸含量依次為魚(yú)強(qiáng)、紅蝦、魚(yú)塊、沙蠶;在營(yíng)養(yǎng)復(fù)健2個(gè)月后,大黃魚(yú)背部的總氨基酸、非必需氨基酸含量組C>組A>組D>組B,但差異不顯著,與吳雷明等[12]的研究結(jié)果基本相似。另結(jié)果表明,復(fù)健后各組大黃魚(yú)背部的總氨基酸、非必需氨基酸、必需氨基酸、呈味氨基酸結(jié)果相較于組O均不顯著,這與本試驗(yàn)室先前研究結(jié)果親魚(yú)強(qiáng)化對(duì)大黃魚(yú)雌性親魚(yú)肌肉的必需氨基酸和氨基酸總含量影響不大的結(jié)果相一致[13]。此外本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn),餌料中紅蝦、魚(yú)強(qiáng)和魚(yú)塊的天門(mén)冬氨酸、谷氨酸顯著高于沙蠶,沙蠶的蛋氨酸含量顯著低于其他3 組。在復(fù)健后,背部肌肉中的谷氨酸組C顯著高于其他3組,組A的蛋氨酸顯著高于組B、C、D;大黃魚(yú)腹部肌肉組A和組C的天門(mén)冬氨酸和谷氨酸顯著高于其他兩組,組A的蛋氨酸含量顯示高于組B、D,這表明餌料中的氨基酸組成差異可能是影響?hù)~(yú)類(lèi)肌肉氨基酸組成差異的原因[14]。但研究發(fā)現(xiàn)餌料中沙蠶的纈氨酸含量顯著低于魚(yú)強(qiáng)和魚(yú)塊,在復(fù)健后,大黃魚(yú)背部和腹部的肌肉中,組A、B、C、D的纈氨酸含量無(wú)顯著性差異,這可能與大黃魚(yú)的限制性氨基酸有關(guān)。郭全友等[15]的研究表明纈氨酸為大黃魚(yú)的第一限制性氨基酸,但也可能與大黃魚(yú)的養(yǎng)殖模式[16]、餌料營(yíng)養(yǎng)配比[17]、餌料的適口性[18]、養(yǎng)殖階段[19]等相關(guān),因此闡明氨基酸的吸收利用機(jī)制還需要更加科學(xué)精細(xì)的試驗(yàn)。
脂肪是在魚(yú)類(lèi)機(jī)體代謝中的能源,是維持魚(yú)類(lèi)正常生長(zhǎng)、發(fā)育、繁殖所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),而飼料中的脂肪酸是影響?hù)~(yú)類(lèi)脂肪及脂肪酸的重要因子[20-21]。由研究結(jié)果可知四種餌料的總脂肪酸含量、飽和脂肪酸、不飽和脂肪酸含量、單不飽和脂肪酸含量、多不飽和脂肪酸含量、高不飽和脂肪酸含量以及EPA+DHA 含量魚(yú)強(qiáng)組>魚(yú)塊組>沙蠶組>紅蝦組,其中魚(yú)強(qiáng)組和魚(yú)塊組顯著高于紅蝦組。在大黃魚(yú)復(fù)健2個(gè)月后,大黃魚(yú)背部總脂肪酸含量組D>組C>組B>組A,腹部脂肪酸,組C>組D>組B>組A,其中組D、C差異不顯著,但顯著高于組A(P<0.05)。魚(yú)體肌肉的脂肪酸組成基本上符合餌料脂肪酸的組成[22]。這與陳家林等[23]的研究異育銀鯽肌肉脂肪酸受餌料脂肪酸正相關(guān)關(guān)系影響的結(jié)果相符。在本研究中發(fā)現(xiàn),餌料中魚(yú)強(qiáng)組多不飽和脂肪酸含量顯著高于沙蠶組和紅蝦組;在大黃魚(yú)復(fù)健后,大黃魚(yú)背部、腹部肌肉脂肪酸中的多不飽和脂肪酸組C>組D>組B>組A,這與高堅(jiān)等[24]、諶芳等[25]的研究結(jié)果相符,魚(yú)油可以顯著提高魚(yú)體中n-3系列脂肪酸的含量。此外在本研究發(fā)現(xiàn),餌料中EPA+DHA含量魚(yú)強(qiáng)組高于魚(yú)塊組,顯著高于沙蠶組和紅蝦組。復(fù)健后,大黃魚(yú)背部肌肉中EPA+DHA 含量組D>組C>組B>組A,其中組D 顯著高于其他3 組(P<0.05),與原始對(duì)照組組O 無(wú)顯著差異,大黃魚(yú)腹部肌肉中EPA+DHA 含量組C>組D>組B>組A,各組差異不顯著,但均顯著低于原始對(duì)照組O。產(chǎn)后大黃魚(yú)腹部肌肉脂肪酸顯著低于產(chǎn)前大黃魚(yú)腹部肌肉脂肪酸,此結(jié)果推測(cè)可能與大黃魚(yú)養(yǎng)殖階段及餌料脂肪酸均衡配比組成有關(guān)[26],但具體的影響機(jī)制目前尚未有具體報(bào)道,可作為今后的研究方向。