派特靈與奧平栓治療宮頸高危型、低危型HPV感染的療效及對免疫功能的影響

劉 吉，陳 輝

(1.無錫市第五人民醫(yī)院婦產(chǎn)科,江蘇無錫 214073;2.無錫市第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科，江蘇無錫 214002)

人乳頭瘤病毒(HPV)屬于常見的DNA環(huán)狀病原體，常經(jīng)性交的方式感染人體黏膜和皮膚上皮細(xì)胞，偶可經(jīng)母嬰傳播。女性宮頸HPV感染臨床表現(xiàn)通常不明顯，且大部分為自限性，可自我清除，而持續(xù)感染狀態(tài)下則可導(dǎo)致尖銳濕疣或癌前病變等。臨床上HPV可分為高危型與低危型，低危型常導(dǎo)致宮頸腫瘤、生殖器疣等，而高危型則可導(dǎo)致癌前病變、宮頸癌等[1-2]。奧平栓屬于干擾素栓,可激活人體抗病毒基因，并與人體靶細(xì)胞受體合成具有抗病毒作用的蛋白，常用于婦科疾病的治療，但對潛伏期HPV清除效果有限，且預(yù)防復(fù)發(fā)效果亦不理想[3]。派特靈作為中藥類制劑，對感染HPV的人體皮膚黏膜有良好的抑制和清除作用，可提高持續(xù)HPV感染患者轉(zhuǎn)陰率[4]。此外，人體免疫調(diào)節(jié)功能在HPV相關(guān)的宮頸疾病中亦有重要作用[5]。在此背景下，本文主要探討派特靈聯(lián)合奧平栓對宮頸高危型、低危型HPV感染患者的治愈效果以及對機(jī)體免疫功能的影響，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年10月至2019年4月于無錫市第五人民醫(yī)院婦科門診就診的HPV感染患者168例為研究對象，根據(jù)HPV檢測結(jié)果，高危型108例，低危型60例，將高危型和低危型分別按照隨機(jī)數(shù)字表法分為高危型的觀察組和對照組各54例，低危型的觀察組和對照組各30例。其中，高危型觀察組患者年齡44～52歲，平均(47.87±1.39)歲；平均病程(3.02±0.34)個月；慢性宮頸炎(CCS)13例，宮頸柱狀上皮異位(CE)10例，CINⅠ期(宮頸輕度非典型增生)15例，CINⅡ期(宮頸中度非典型增生)8例，CINⅢ期(宮頸重度非典型增生)8例。高危型對照組年齡44～52歲，平均(48.02±1.33)歲；平均病程(3.10±0.29)個月；CCS 12例，CE者11例，CINⅠ期16例，CINⅡ期7例，CINⅢ期8例。低危型觀察組患者年齡39～50歲，平均年齡(43.55±1.76)歲；平均病程(3.27±0.56)個月；CCS 10例，CE 12例，CINⅠ期8例。低危型對照組患者年齡38～48歲，平均年齡(42.97±1.81)歲；平均病程(3.31±0.51)個月；CCS 11例，CE 12例，CINⅠ期7例。高危型與低危型兩組患者年齡、病程及病理分型等一般資料差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。本次試驗(yàn)方案經(jīng)本院倫理委員會審核并批準(zhǔn)通過，所有受試者均了解試驗(yàn)方案并簽署知情同意書。

1.2納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1入組標(biāo)準(zhǔn) (1)HPV檢測為陽性，且宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)(TCT)檢測未見癌細(xì)胞；(2)均為首次就診患者;(3)年齡為39～52歲，有規(guī)律性生活史和月經(jīng)史，且無生育及哺乳需求;(4)可積極配合至試驗(yàn)結(jié)束，治療期間確保無性生活，且自愿簽署知情同意書。

1.2.2排除標(biāo)準(zhǔn) (1)惡性腫瘤患者；(2)嚴(yán)重的臟器病變性疾??；(3)有生殖系統(tǒng)急慢性炎癥；(4)有免疫缺陷性疾病。

1.3方法

1.3.1治療方法 高危型與低危型對照組：采用奧平栓(重組人干擾素α2a栓，武漢維奧制藥有限公司，國藥準(zhǔn)字10980006，6萬IU/粒)進(jìn)行治療，清潔治療人員雙手和患者外陰部后，用指套置藥物于患者陰道后穹窿及宮頸表面，每次一粒，間隔1 d使用，連續(xù)使用21 d，經(jīng)期不使用。高危型與低危型觀察組：觀察組在對照組基礎(chǔ)上將北京派特博恩生物技術(shù)開發(fā)有限公司提供的派特靈(產(chǎn)品批號：20120118)于月經(jīng)結(jié)束后第3天宮頸部給藥，方法為將陰道分泌物清潔干凈，利用無菌紗條充分浸潤派特靈原液并于宮頸管內(nèi)約2 cm處置入,然后利用尾線棉球充分浸潤原液放于宮頸部，每天1次，濕敷3 h，然后取出，連續(xù)使用4 d，停用3 d，共計(jì)16次，經(jīng)期不使用。

1.3.2觀察指標(biāo) (1)臨床療效評價：高危型患者均于治療前及治療結(jié)束1周后采用宮頸刷于患者宮頸口旋轉(zhuǎn)6～8圈，將收集的分泌物置于專用脫落細(xì)胞保存液中，進(jìn)行病毒載量檢測，其中高危型HPV DNA低于1.0 ng/L即為轉(zhuǎn)陰；高危型HPV DNA高于1.0 ng/L且高危型HPV DNA 改善率在33%以上即為有效；高危型HPV DNA改善率低于33%或高危型HPV DNA較治療前升高即為無效。有效率=(轉(zhuǎn)陰例數(shù)+有效例數(shù))/總例數(shù)×100%。(2)患者免疫因子監(jiān)測：所有患者均于治療前及治療結(jié)束后1周采集空腹靜脈血，制備外周血單個核細(xì)胞，經(jīng)避光孵育后采用流式細(xì)胞儀分別對患者Th17、Treg、骨髓來源的抑制性細(xì)胞(MDSC)水平進(jìn)行檢測。(3)不良反應(yīng)：觀察所有患者治療期間出現(xiàn)低熱、腰部酸痛、陰部不適、肝腎功能異常等不良反應(yīng)狀況，對比總發(fā)生率。

2 結(jié) 果

2.1高危型患者治療前后HPV病毒載量對比 治療前，高危型觀察組和對照組患者HPV病毒載量差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，經(jīng)治療，各組表達(dá)水平均較治療前明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且高危型和低危型觀察組的HPV病毒載量均明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2高危型與低危型各組患者治療后有效率對比 經(jīng)治療，高危型與低危型觀察組患者治療有效率高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表1 高危型患者治療前后病毒載量比較

2.3高危型與低危型各組患者治療前后免疫因子表達(dá)水平對比 治療前，高危型與低危型觀察組和對照組患者Th17、Treg、MDSC水平差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，經(jīng)治療，各組Th17、Treg、MDSC表達(dá)水平均較治療前明顯下降，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，且高危型和低危型觀察組Th17、Treg、MDSC水平均明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

2.4高危型與低危型各組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況對比 治療期間，高危型與低危型觀察組患者不良反應(yīng)總發(fā)生率普遍低于對照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表4。

表2 高危型與低危型各組患者治療后有效率比較

表3 高危型與低危型各組患者治療前后免疫因子表達(dá)水平比較

表4 高危型與低危型各組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

3 討 論

宮頸是女性重要的生理屏障，當(dāng)機(jī)體受致病菌侵襲時起一定的防御作用，但長期接觸致病菌則可導(dǎo)致宮頸炎、宮頸癌等慢性疾病,其中HPV感染是宮頸疾病發(fā)生的重要危險(xiǎn)因素。HPV誘發(fā)的宮頸疾病主要經(jīng)歷兩個階段，通常情況下HPV感染為一過性，人體自身免疫可將其清除，當(dāng)宮頸處于與HPV長期接觸的環(huán)境中，可導(dǎo)致宿主細(xì)胞被感染，HPV復(fù)制轉(zhuǎn)錄加劇，而病毒復(fù)制轉(zhuǎn)錄后可于細(xì)胞核聚集，進(jìn)而導(dǎo)致更多周圍宿主細(xì)胞被感染，使患者宮頸HPV發(fā)生免疫逃逸(因HPV不參與血液循環(huán)，臨床無病毒血癥)，宮頸處于持續(xù)感染狀態(tài)，最終導(dǎo)致器質(zhì)性病變產(chǎn)生[6-8]。HPV基因型較多，不同的基因型導(dǎo)致的臨床病變亦有差異。根據(jù)其分型檢測，分為高危型(如16、18、31型等15種)和低危型(如6、11、14型等12種)兩種，其中高危型多與癌前病變、癌變相關(guān)，而低危型則多導(dǎo)致宮頸濕疣、鱗狀上皮病變等，部分能自然逆轉(zhuǎn)[9-11]。奧平栓是宮頸病毒感染性疾病常用藥物，對宮頸糜爛、慢性宮頸炎及宮頸癌的預(yù)防均有一定作用，其主要成分為重組人干擾素α2a，是廣譜抗病毒藥物，盡管取得了一定的療效，但對高危型HPV感染的阻斷作用不明顯，且當(dāng)前尚無針對HPV感染的治療手段，因此如何進(jìn)行有效治療廣受醫(yī)務(wù)人員重視，中醫(yī)藥在此領(lǐng)域治療空間巨大[12-13]。派特靈是由傳統(tǒng)中藥大青葉、金銀花、苦參等經(jīng)15%～25%的乙醇提取而成，通過作用于人體皮膚表面，加速表皮細(xì)胞的更新，促使受感染的細(xì)胞迅速脫落，且對HPV有殺滅作用，可防止機(jī)體進(jìn)一步感染，進(jìn)而發(fā)揮治療作用[14-16]。姚麗[17]通過對80例宮頸高危型HPV感染患者進(jìn)行分組對照研究，結(jié)果表明派特靈聯(lián)合宮頸環(huán)形電切術(shù)對高危型宮頸HPV感染患者臨床治療效果優(yōu)越，可有效清除病毒感染，改善患者宮頸微生態(tài)環(huán)境。本文中，觀察組通過聯(lián)合使用派特靈，高危型與低危型患者病毒載量顯著降低，且治療有效率較對照組均有明顯提高,這說明派特靈無論是對高危型HPV還是低危型HPV均有良好的殺滅作用。

盡管近90%的HPV感染能自行恢復(fù)，但當(dāng)患者免疫功能存在缺陷時，HPV的基因片段可整合到宮頸部上皮細(xì)胞染色體上，使其基因調(diào)節(jié)功能紊亂，進(jìn)而導(dǎo)致持續(xù)感染，誘使細(xì)胞加速分裂、惡性增生甚至導(dǎo)致癌變。因此，通過免疫功能的監(jiān)測可輔助推斷人體HPV感染的嚴(yán)重程度與疾病進(jìn)展。MDSC作為骨髓源性有免疫抑制功能的細(xì)胞，可抑制人體樹突狀細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞免疫活性的發(fā)揮，在機(jī)體炎性反應(yīng)、感染、免疫逃逸等病變過程中有重要作用。此外，同為T細(xì)胞亞群的Th17與Treg亦參與了宮頸HPV免疫逃逸。Treg 細(xì)胞為CD4細(xì)胞類型亞群，可分泌轉(zhuǎn)化生長因子-β(TGF-β)、白細(xì)胞介素(IL)-10等抑制性細(xì)胞因子，可產(chǎn)生穿孔素以及顆粒酶等殺傷效應(yīng)細(xì)胞，對效應(yīng)細(xì)胞正常代謝進(jìn)行干擾，使其自身功能受抑制，并通過對樹突狀細(xì)胞的調(diào)節(jié)使Treg細(xì)胞正常分化與增殖活動受影響，Treg細(xì)胞過度表達(dá)進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體免疫識別功能下降。而Th17作為新近發(fā)現(xiàn)的效應(yīng)T細(xì)胞，是重要的炎性介導(dǎo)細(xì)胞，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生炎性介質(zhì)(如IL-17)加重炎性反應(yīng)。IL-17是重要的炎性介質(zhì)與趨化因子，可使機(jī)體細(xì)胞組織出現(xiàn)炎性受損。一般情況下， Treg與Th17細(xì)胞保持一定的平衡，一旦平衡功能被打破，機(jī)體出現(xiàn)惡變的概率隨即加大[18-24]。余花艷等[25]通過對120例宮頸HPV陽性患者和20例陰性患者進(jìn)行分組對照研究發(fā)現(xiàn)，Th17、Treg、MDSC的表達(dá)水平與患者病情嚴(yán)重程度呈明顯正相關(guān)。本次研究中，治療前宮頸高危型患者的MDSC、Treg以及Th17表達(dá)水平普遍高于低危型患者，經(jīng)過治療，高危型與低危型各組患者各指標(biāo)均較治療前明顯下降，但觀察組通過派特靈與奧平栓的聯(lián)合使用，其表達(dá)水平下降效果更加明顯，考慮其作用機(jī)制主要在于派特靈在自身細(xì)胞毒作用下，可促使HPV感染后病變組織的特異性壞死脫落，其抗病毒作用廣泛，細(xì)胞異常增殖抑制作用顯著，有良好的免疫調(diào)節(jié)作用，進(jìn)一步表明派特靈通過局部用藥對宮頸HPV感染有良好的治療效果[26]。

4 結(jié) 論

派特靈與奧平栓聯(lián)合使用，可有效降低宮頸高危型、低危型患者HPV病毒載量，提高治療有效率，提高機(jī)體免疫功能，減輕炎性反應(yīng)，且不良反應(yīng)少，安全性較高，值得臨床應(yīng)用推廣。