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    從脲酶活性探討不同海拔高度下豆?jié){機(jī)的健康安全

    2020-04-02 12:45:44孟曉山張曉
    家電科技 2020年2期
    關(guān)鍵詞:豆?jié){機(jī)弱陽性脲酶

    孟曉山 張曉

    中國家用電器研究院 北京 100053

    1 引言

    豆?jié){含有豐富的植物蛋白和磷脂等營養(yǎng)物質(zhì),經(jīng)常服用不僅能夠加快新陳代謝,還能夠降低膽固醇、抑制動脈粥樣硬化和血壓上升,十分利于身體健康。然而,由于大豆中含有少量抗?fàn)I養(yǎng)因子,如:胰蛋白酶抑制劑能抑制人體內(nèi)胃蛋白酶、胰蛋白酶等幾十種蛋白酶的活性,破壞或阻礙營養(yǎng)物質(zhì)消化與吸收,大量飲用后容易發(fā)生惡心、嘔吐、腹瀉等中毒癥狀。只有經(jīng)過充分的熬煮,才能將豆?jié){中此類酶蛋白滅活,消除其生物毒性,并以脲酶活性來判斷豆?jié){的煮熟度。

    GB/T 26176-2010《豆?jié){機(jī)》提出了煮熟度要求,測試方法參照QB/T 2132-2008《植物蛋白飲料 豆奶(豆?jié){)和豆奶飲料》的附錄A進(jìn)行,試樣中脲酶呈陰性則說明煮熟度合格。脲酶定性原理是:脲酶在合適的溫度和酸堿度下催化尿素分解,生成的銨離子在堿性條件下可與納氏試劑發(fā)生顯色反應(yīng),具體過程如下列方程式所示。如果試樣中的脲酶已經(jīng)失活,則顯色反應(yīng)不會發(fā)生。然而在實際測試過程中,通過肉眼判定陽性(黃色)、弱陽性(微黃色)和陰性(與對照管同色或更淺)時,很容易因為測試人員的色覺差異和主觀意識造成誤判。此外,GB/T 26176明確要求豆?jié){機(jī)的正常工作環(huán)境所處海拔高度不超過1000m。因為海拔每升高1km,水的沸點平均下降3℃,嚴(yán)重削弱廚房電器的煮熟功能,給多達(dá)1億高海拔地區(qū)居民造成了極大困擾。市售的豆?jié){機(jī)在高海拔地區(qū)是否還能達(dá)到煮熟度要求尚不清楚,亟需開展相關(guān)研究。

    本研究針對上述問題,測試了3款主流品牌豆?jié){機(jī)在制備豆?jié){過程中脲酶活性的變化,考查了針對不同海拔時水沸點對脲酶活性的影響,并采用分光光度法對上述判定結(jié)果進(jìn)行驗證,以期發(fā)現(xiàn)目前市售豆?jié){機(jī)在高海拔地區(qū)使用存在的問題,為企業(yè)開發(fā)適用于高海拔地區(qū)的豆?jié){機(jī)提供參考依據(jù),并推動相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的修訂和完善。

    圖1 試驗用豆?jié){機(jī)

    2 材料與方法

    2.1 豆?jié){制作方法

    選用當(dāng)季、無蟲、無霉、顆粒飽滿的大豆作為制漿原材料,并分別用干大豆和濕大豆進(jìn)行試驗。大豆與水的總質(zhì)量比固定為1:15,濕大豆先按1:3的比例自然浸泡8h,制漿時再補(bǔ)足水量,3臺豆?jié){機(jī)同時工作。生豆?jié){則通過破壁機(jī)按同樣的配料比制備,再在不同水浴溫度下進(jìn)行熱處理試驗。

    2.2 儀器及方法

    3臺不同品牌的豆?jié){機(jī)(具有破壁功能,如圖1所示)用于制備豆?jié){、智能恒溫循環(huán)器(知信儀器,ZX-20A)控制生豆?jié){的煮制溫度;UV-Vis分光光度計(島津,UV-2600)在420nm最大吸收波長下測定待測試樣的吸光度。

    按照豆?jié){機(jī)說明書制備豆?jié){,取樣要求遵循GB/T 26176-2010《豆?jié){機(jī)》的規(guī)定;參照QB/T 2132-2008《植物蛋白飲料 豆奶(豆?jié){)和豆奶飲料》附錄A對脲酶活性進(jìn)行定性;在吸光度測定之前需對待測試樣進(jìn)行過膜處理,所得濾液盡快檢測。

    表1 干大豆、濕大豆在豆?jié){制備過程中脲酶活性的變化

    表2 不同溫度(海拔)下脲酶活性隨加熱時間的變化

    3 結(jié)果與分析

    3.1 脲酶活性在豆?jié){制備過程中的變化

    不同于依賴定時功能的傳統(tǒng)豆?jié){機(jī),此3款豆?jié){機(jī)均配有智能控制系統(tǒng),按照:加熱至微沸→保溫→多次間歇打漿→延時煮漿→完成的順序進(jìn)行,不受冷水制漿或熱水打漿影響,即消費(fèi)者使用時無需特意使用溫水或開水。對于1L、8℃的水,A、B、C這三款豆?jié){機(jī)完成一次豆?jié){制備所需時間分別為28min50s、29min和31min30s,制漿周期彼此相差不大。分別在第一次打漿后和延煮完成后取樣,對其中脲酶的活性進(jìn)行判定,結(jié)果如表1所示。

    第一次打漿后,干大豆豆?jié){中脲酶活性比濕大豆的要高些,甚至出現(xiàn)陽性,可能是大豆浸泡后,脲酶釋放更快,并很快在高溫下被滅活,而干大豆在檢測過程中仍有少量的釋放。此外,A款豆?jié){機(jī)所制豆?jié){中脲酶活性普遍要強(qiáng)于其他兩款,這與機(jī)器程序設(shè)計中打漿頻次、打漿時溫度及延煮時間等不同有關(guān)。不過,經(jīng)過充分的延煮,豆?jié){中脲酶活性最終均呈陰性,煮熟度均達(dá)標(biāo),說明大豆浸泡與否不影響豆?jié){機(jī)的煮熟度性能。

    3.2 海拔高度對脲酶活性變化的影響

    當(dāng)海拔升高至1500m、3000m和4500m,水的沸點分別降至95℃、90℃和85℃左右。將同等濃度的生豆?jié){分別置于這三個溫度下恒溫加熱(3組平行),并跟蹤豆?jié){中脲酶活性隨加熱時間的變化,結(jié)果如表2所示。

    由表2可知,經(jīng)過95℃水浴處理3min后,生豆?jié){中脲酶活性已從初始的強(qiáng)陽性降至陽性,到6min時徹底轉(zhuǎn)陰,說明豆?jié){機(jī)若在1500m的海拔高度下使用,只需將豆?jié){煮沸6min即可將脲酶滅活。當(dāng)水浴的溫度降至90℃,熱處理3min后脲酶活性降至次強(qiáng)陽性;繼續(xù)加熱至6min,脲酶活性進(jìn)一步下降,但是試樣顏色較對照組的明顯要深,不好判定是黃色還是淡黃色,暫定為陽性或弱陽性;到12min時,試樣的顏色與對照組的基本相同,說明此時豆?jié){中脲酶活性已經(jīng)轉(zhuǎn)陰。由此可見,豆?jié){機(jī)若在海拔高度3000m左右的地區(qū)(如:西藏林芝3100m)使用,豆?jié){經(jīng)12min煮沸處理后,豆?jié){中的脲酶就可被失活,不會再對人體健康構(gòu)成影響,但該溫度下熬煮時間較95℃下的明顯延長。熱處理溫度進(jìn)一步降至85℃時,處理3min后,豆?jié){中脲酶的活性仍為強(qiáng)陽性,說明此時的脲酶活性居高不下;當(dāng)處理至6min,試樣的顏色有所變淺,對比后可判定為次強(qiáng)陽性或陽性,脲酶活性仍然較高;當(dāng)熱處理的時間達(dá)到12min時,從試樣的顏色來看,脲酶活性進(jìn)一步下降,但是很難判定是陽性還是弱陽性;時間進(jìn)行至20min,試樣的顏色再次變淺,但是相比對照組又明顯有淡黃色跡象,脲酶活性可能仍未轉(zhuǎn)陰,暫判定為弱陽性或陰性;當(dāng)熬煮時間到30min后,試樣顏色有所變淺,接近對照組,主觀上較難判定是否真正達(dá)到陰性,但可以推斷脲酶基本已經(jīng)滅活。

    總的來說,持續(xù)的高溫?zé)崽幚砜梢灾饾u降低豆?jié){中脲酶的活性,但是隨著熱處理溫度的逐漸降低,滅活所需的時間明顯延長,即隨著海拔的提升,豆?jié){保持沸騰的時間需要不斷地延長。高海拔下,長時間熱處理最終能將豆?jié){中脲酶基本滅活,但是煮制時間的延長是否會造成其他營養(yǎng)物的流失還有待進(jìn)一步研究。

    3.3 分光光度法判定脲酶活性

    由于QB/T 2132-2008中提供的脲酶定性方法沒有明確限定脲酶定性等級間的界限,僅通過肉眼來區(qū)分磚紅色、橘紅色、深金黃色或黃色、淡黃色或黃色、與對照組同色或更淺進(jìn)而判定脲酶活性等級,容易受到測試人員的主觀意識和色覺差異影響而造成誤判。上述試驗中的所有試樣經(jīng)過過濾處理后,通過分光光度計測定各個試樣在420nm下的吸光度,所得數(shù)據(jù)分別見表1和表2,并與標(biāo)準(zhǔn)中“目視比較法”的判定結(jié)果進(jìn)行比較。

    表1中的A款豆?jié){機(jī)在用濕大豆制漿試驗中,第一次打漿后樣品被判定為弱陽性,而根據(jù)吸光度的大小,此樣品吸光度與對照組的相當(dāng),應(yīng)該被判定為陰性。類似的,C款豆?jié){機(jī)在用干大豆制漿的試驗中,第一次打漿后所采集的樣品中脲酶活性也被誤判。表2中,出于嚴(yán)謹(jǐn),將不同顏色深淺的樣品相互比較后再做判定,但仍有較多的樣品難以判定具體等級,特別是在85℃下熱處理20min和30min后脲酶活性難以準(zhǔn)確判定,此類肉眼難以甄別的微小色差將影響高海拔地區(qū)豆?jié){達(dá)到安全飲用水平所需煮制時間的確定以及煮熟度是否合格的評判。通過吸光度大小比較,這兩個樣品的吸光度確實十分接近對照組的吸光度,與對照組的差值分別為:0.134和0.067,比12min時0.620的差值要小很多,吸光度大幅降低說明尿素分解的更少,脲酶活性在不斷下降。綜合表2中“目視比較法”和分光光度法對脲酶活性的判定結(jié)果考慮,建議按如下規(guī)則對脲酶活性的等級界限進(jìn)行明確劃分:對照組的吸光度為A,待測試樣的為B,若兩者差值(B-A),不大于0.1則判定為是陰性;若介于0.1~0.5則為弱陽性;若介于0.5~1.5則為陽性;若介于1.5~3.0則為次強(qiáng)陽性;若大于3.0則為強(qiáng)陽性。

    4 結(jié)論

    研究結(jié)果表明,所用的3款豆?jié){機(jī)完成一次制漿程序后均能將豆?jié){中的脲酶充分滅活,不受干大豆或濕大豆材料的影響。豆?jié){保持沸騰的時間隨著豆?jié){機(jī)工作環(huán)境海拔的提升需要不斷延長,但仍可在半小時內(nèi)將豆?jié){中脲酶基本滅活?;诜止夤舛确?,能克服“目視比較法”個體主觀意識和色覺差異的弊端,并可根據(jù)吸光度來劃定脲酶活性的等級界限。通過模擬不同海拔下的沸點溫度,考查了豆?jié){煮制過程中脲酶活性的變化,獲得了基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù),從而為適用不同海拔高度豆?jié){機(jī)的設(shè)計和安全使用提供技術(shù)支撐,保障了我國高原地區(qū)豆?jié){機(jī)消費(fèi)者的身體健康安全。為此,建議在豆?jié){機(jī)的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中,規(guī)定豆?jié){機(jī)明示出適用海拔高度,并提出相應(yīng)煮制時間的技術(shù)要求。

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