中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油組分對(duì)比研究

★ 解衛(wèi)星 蔡?hào)|明 張忠立 劉亞 張曉琳 馬建瑞 王建輝*（.威爾芬（北京）科技發(fā)展有限公司 北京 0300；.江西中醫(yī)藥大學(xué)芳香植物健康研究所 南昌 30004）

苦橙（Citrus aurantiumL.）是蕓香科（Rutaceae）柑橘屬（Citrus）植物，原產(chǎn)自阿爾及利亞、摩洛哥、突尼斯、西班牙等許多國(guó)家［1］，如今突尼斯和摩洛哥的產(chǎn)量最高，品質(zhì)也相當(dāng)［2］。橙花精油是從苦橙花中萃取出來的天然活性物質(zhì)，具有淡雅的花香和果香，被廣泛應(yīng)用于食品、化妝品和法系芳香療法等領(lǐng)域［3］。在日化產(chǎn)品中，橙花精油是香水配方中一個(gè)重要原料，可以修飾素蘭香型的頂香，同時(shí)也是花香配料中的秘密武器；在食品中，橙花精油被廣泛用在許多軟飲料香精中［4］，同時(shí)因其溫和、安全的特征，在兒童食品中也可廣泛應(yīng)用。在法系芳香療法領(lǐng)域，橙花精油可以緩解神經(jīng)緊張、壓力、失眠、焦慮等癥狀。橙花精油除其獨(dú)特的香氣優(yōu)勢(shì)外，還具有多種功效，研究表明橙花精油能鎮(zhèn)痛和抗炎［1，5］，同時(shí)橙花精油具有較強(qiáng)的抑菌功能，能夠廣泛的抑制細(xì)菌和真菌。

甜橙（Citrus sinensis（L.） Osbeck）是蕓香科（Rutaceae）柑橘屬（Citrus）植物。我國(guó)栽培的甜橙品種主要有臍橙、夏橙、血橙和錦橙，目前種植面積和產(chǎn)量位居世界第一，具有很高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值［6-7］。中國(guó)江西贛南有180 萬畝甜橙種植地，有70%～80%的花為雄性退化的不育花和畸形花，如果直接丟掉，會(huì)大大造成資源的浪費(fèi)。國(guó)內(nèi)應(yīng)用廣泛的摩洛哥苦橙花精油存在運(yùn)輸不便、供貨時(shí)間長(zhǎng)和高成本等問題，因甜橙與苦橙為同一種屬的植物，為了合理的利用資源，彌補(bǔ)摩洛哥苦橙花精油的市場(chǎng)不足，開拓國(guó)內(nèi)甜橙花精油的市場(chǎng)。本研究以中國(guó)江西贛南甜橙花為原料，通過制備其精油，研究其與摩洛哥苦橙花精油成分和功效的異同，為后續(xù)開拓中國(guó)的橙花精油市場(chǎng)及提高中國(guó)橙花的利用率提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑與儀器 美國(guó)安捷倫7890A-5977E

氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。摩洛哥的苦橙花精油，水為雙蒸餾水。采集中國(guó)江西贛南橙樹（美國(guó)紐荷爾橙與本地橙雜交所培育，產(chǎn)地：江西信豐）上的新鮮甜橙花，過夜晾干，備用。

1.2 中國(guó)江西贛南甜橙花精油制備 采用水蒸氣

蒸餾裝置，準(zhǔn)確稱取一定量的中國(guó)江西贛南甜橙花置于蒸餾瓶上，按固液比1∶2 加入雙蒸餾水，蒸餾6h 后，分離收集，得到橙花精油。

1.3 GC-MS 檢測(cè)精油成分 分別取0.5μL 的中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油進(jìn)行GCMS 測(cè)試。GC 條件：HP-INNOWAX 型毛細(xì)管柱（30m× 0.25mm×0.25μm）；升溫程序：初始溫度60℃，以4℃/min 的速率升至 100℃，然后以2℃/min 的速率升至 200℃，保持5min，最后以4℃/min 的速率升至240℃，保持30min。載氣流速為1mL/min，分流進(jìn)樣，分流比40∶1，進(jìn)樣量 0.12μL，進(jìn)樣口溫度250℃。MS 條件：EI 源電子能量為70eV；電子倍增器電壓為1.00kV，質(zhì)量掃描范圍30～500；離子源溫度230℃，接口溫度為250℃。利用NIST11 標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)譜庫和公司自建譜庫對(duì)采集到的質(zhì)譜圖進(jìn)行檢索，采用色譜峰面積歸一化法定量。

1.4 「精油四象限」論述精油功效特點(diǎn) 法國(guó)芳香療法專家法蘭貢在1990 年與潘威爾醫(yī)師合著《精確芳療學(xué)》一書，此書基于醫(yī)學(xué)臨床與芳香分子研究的證據(jù)，結(jié)合古希臘著名醫(yī)生希波克拉底的氣質(zhì)體液說，將精油當(dāng)中的化學(xué)分子做了分類即化學(xué)型的分類，并發(fā)展出一套稱為「精油四象限」的精油化學(xué)結(jié)構(gòu)模型［8］。本研究采用「精油四象限」，論述中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油功效特點(diǎn)。

2 結(jié)果與分析

圖1～2 分別為中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油總離子流圖。兩張圖譜只對(duì)大于3 倍噪音信號(hào)的峰進(jìn)行積分。從兩張圖中可以直觀看出，兩種橙花精油的化合物種類和相對(duì)百分含量是有差異的。

圖1 中國(guó)江西贛南甜橙花精油總離子流

圖2 摩洛哥苦橙花精油總離子流

表1 是對(duì)中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油化合物的直觀統(tǒng)計(jì)，由表1 數(shù)據(jù)可知，兩種橙花精油總揮發(fā)性化合物個(gè)數(shù)為59 種，通過譜庫檢索和人工解析，可以鑒定出55 種化合物，占總離子流圖的93.22%。其中江西贛南甜橙花精油揮發(fā)性化合物為45 種，鑒定出43 種化合物，占總離子流圖的95.55%；摩洛哥苦橙花精油總揮發(fā)性化合物為40 種，鑒定出38 種化合物，占總離子流圖的95.00%。江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油共有化合物個(gè)數(shù)為26 種，占總化合物種類的44.07%。江西贛南甜橙花精油主要化合物為檜烯（17.168%）和芳樟醇（12.632%）；摩洛哥苦橙花精油主要化合物為芳樟醇（33.121%）和乙位蒎烯（10.796%）。

表1 中國(guó)江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油成分構(gòu)成

（續(xù)表）

表2 中國(guó)江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油成分對(duì)比表

表2 為江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油的成分對(duì)比表，從表中數(shù)據(jù)可知，江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油成分組成主要為單萜烯、單萜烯醇、倍半萜烯、酯類化合物、倍半萜烯醇、單萜烯醇和氧化物7 大類化合物。在7大類成分對(duì)比中各有異同。中國(guó)江西贛南甜橙花精油含量最高的為單萜烯化合物（52.010%），摩洛哥苦橙花精油含量最高的為單萜烯醇化合物（43.154%）。在7 大類化合物中差異最為明顯的主要為單萜烯、單萜烯醇和酯類化合物。兩種橙花精油在單萜烯化合物種類相似度為93.333%，但是江西贛南甜橙花精油較摩洛哥苦橙花精油的單萜烯總含量高14.812%，差異較大，且江西贛南甜橙花精油的主單萜烯成分為檜烯（17.168%）、檸檬烯（6.255%）和羅勒烯（6.113%），而摩洛哥苦橙花精油的主單萜烯成分為檸檬烯（15.300%）、乙位蒎烯（10.796%）和羅勒烯（4.918%）；江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油單萜烯醇化合物種類上相似度為66.667%，但摩洛哥苦橙花精油總單萜烯醇的相對(duì)百分含量較江西贛南甜橙花精油高18.231%，差異較大，其主要差異來自于芳樟醇含量的差異。酯類化合物在兩種精油的差異最為明顯，摩洛哥苦橙花精油的酯類化合物種類為4 種，總含量為9.899%，而在江西贛南橙花精油中未檢出。兩種橙花精油的在倍半萜烯、單萜烯醛、倍半萜烯醇和氧化物的差異較小，兩種精油的倍半萜烯化合物種類個(gè)數(shù)一致，且化合物種類相似度為66.67%，但是總含量上江西贛南甜橙花精油較摩洛哥苦橙花精油高2.266%；江西贛南甜橙花精油的單萜烯醛較摩洛哥苦橙花精油的個(gè)數(shù)多2 個(gè)，且總含量高2.008%；兩種橙花精油在倍半萜烯醇的總含量和單個(gè)化合物的相對(duì)百分含量是非常接近的，差異在摩洛哥苦橙花精油只比江西贛南甜橙花精油多一個(gè)桉油烯醇（0.095%）；兩種橙花精油的氧化物種類和個(gè)數(shù)都一致，只是相對(duì)百分含量上略微有差異。從整體上來看，江西贛南甜橙花精油與摩洛哥苦橙花精油的異同主要體現(xiàn)在，化合物種類大體相同，在7 大類化合物中，整體相似度為67.568%，差異主要體現(xiàn)在化合物的相對(duì)百分含量上。

精油化合物的組成與其功效息息相關(guān)。通過兩種精油七大類化合物的異同，借助法系芳香療法「精油四象限」理論，繪得圖3～4。

圖3 中國(guó)江西贛南甜橙花精油成分四象限

圖4 摩洛哥苦橙花精油成分四象限圖

在「精油四象限」中，橫坐標(biāo)左側(cè)，是極性分子，越向左親水性越好；橫坐標(biāo)右側(cè)，是非極性分子，越向右親油性越好；縱坐標(biāo)上方，帶負(fù)電，越向上安撫舒緩效果越好；縱坐標(biāo)下方，帶正電，越向下提振和激勵(lì)效果越好［8］。通過圖3 和圖4 縱坐標(biāo)上方的數(shù)據(jù)對(duì)比得出，摩洛哥苦橙花精油在上方的成分高于中國(guó)江西贛南甜橙花精油，尤其是差異比較突出的酯類化合物（9.899%），因此推測(cè)出摩洛哥苦橙花精油在安撫舒緩上的效果比中國(guó)江西贛南甜橙花精油好。從「精油四象限」圖下方數(shù)據(jù)對(duì)比分析，可以清晰的看出，中國(guó)江西贛南甜橙花精油在四象限的下方總含量（84.582%）和摩洛哥苦橙花精油（86.927%）是很接近的，從而推測(cè)兩款精油在提振和激勵(lì)整體效果上是比較接近的；但是中國(guó)江西贛南甜橙花精油在下方成分的分布上，右側(cè)單萜烯的含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于左側(cè)單萜烯醇的含量，而摩洛哥苦橙花精油在下方左右兩側(cè)的成分含量分布較均勻。單萜烯的主要生理功效為抗病毒、抗菌，激勵(lì)、溫暖、止痛及消炎，而單萜烯醇的主要生理功效為強(qiáng)大的免疫調(diào)節(jié)劑，保護(hù)免疫系統(tǒng)，促進(jìn)皮膚細(xì)胞修復(fù)及再生［7］。摩洛哥苦橙花精油的單萜烯醇含量較江西贛南甜橙花精油高18.231%，且其含量差異主要來自具有調(diào)理素作用的芳樟醇的差異，因此推測(cè)摩洛哥苦橙花精油在調(diào)節(jié)、保護(hù)免疫系統(tǒng)作用和幫助生物良好的適應(yīng)環(huán)境的變化上要優(yōu)于中國(guó)江西贛南甜橙花精油。江西贛南甜橙花精油的單萜烯含量較摩洛哥苦橙花精油高14.812%，且其差異主要來自具有抗菌、抗炎的檜烯含量上［9-10］，因此推測(cè)江西贛南甜橙花精油在抗菌、抗病毒和抗炎的功效上優(yōu)于摩洛哥苦橙花精油。從極性上分析兩種精油的差異可知，在「精油四象限」橫坐標(biāo)右側(cè)是非極性分子，越向右親油性越好，而具有親油特性的精油可以輕易的滲入皮膚，由此可以推測(cè)，中國(guó)江西贛南甜橙花精油比摩洛哥苦橙花精油的皮膚滲透性好，在化妝品中更利于吸收。

3 討論

通過中國(guó)江西贛甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油成分對(duì)比可知，中國(guó)江西贛南甜橙花精油揮發(fā)性化合物為45 種；摩洛哥苦橙花精油揮發(fā)性化合物為40 種，兩種精油成分種類不盡相同，兩種橙花精油共有化合物為26 種，在總化合物種類的占比為44.07%。江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油成分組成主要為單萜烯、單萜烯醇、倍半萜烯、酯類化合物、倍半萜烯醇、單萜烯醇和氧化物7 大類化合物。其中單萜烯、單萜烯醇和酯類化合物的在兩種橙花精油中的差異較為明顯。單萜烯化合物在中國(guó)江西贛南甜橙花精油含量最高，而單萜烯醇化合物在摩洛哥苦橙花精油含量最高。兩種橙花精油在單萜烯化合物種類相似度為93.333%，但是含量差異較大；在單萜烯醇化合物種類上相似度和相對(duì)百分含量上都差異較大，其主要差異來自于芳樟醇含量的差異。酯類化合物在兩種精油的差異最為明顯，摩洛哥苦橙花精油的酯類化合物含量為9.899%，在江西贛南橙花精油中卻未檢出。其余四種化合物（倍半萜烯、單萜烯醛、倍半萜烯醇和氧化物）的總含量和單個(gè)化合物的相對(duì)百分含量是較為接近的。從整體上來看，江西贛南甜橙花精油與摩洛哥橙花苦精油的異同主要體現(xiàn)在，化合物種類大體相同，在7 大類化合物中，整體相似度為67.568%，差異主要體現(xiàn)在化合物的相對(duì)百分含量上。通過兩種橙花精油所含化合物在「精油四象限」分布對(duì)比可知，摩洛哥苦橙花精油因其比較突出的酯類化合物在安撫舒緩上的效果優(yōu)于中國(guó)江西贛南甜橙花精油。因兩種橙花精油在「精油四象限」的下方總含量比較接近，因此中國(guó)江西贛南甜橙花精油和摩洛哥苦橙花精油在提振和激勵(lì)整體效果上是比較類似的。但是因?yàn)閮煞N橙花精油在下方左右兩側(cè)的分布存在差異，導(dǎo)致了中國(guó)江西贛南甜橙花精油在抗菌、抗病毒、抗炎和皮膚滲透性的功能上優(yōu)于摩洛哥苦橙花精油，而摩洛哥苦橙花精油在調(diào)節(jié)、保護(hù)免疫系統(tǒng)作用和幫助生物良好的適應(yīng)環(huán)境的變化上要優(yōu)于中國(guó)江西贛南甜橙花精油。目前為止，國(guó)內(nèi)橙花精油市場(chǎng)較少，本研究對(duì)于江西贛南甜橙花資源的利用和打開中國(guó)橙花精油的市場(chǎng)奠定了理論基礎(chǔ)。