HPLC法測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸的含量

何書平

【摘要】目的：為測(cè)定飲片廠采購(gòu)當(dāng)歸阿魏酸含量，以當(dāng)歸為研究對(duì)象。用高效液相色譜法測(cè)定當(dāng)歸中阿魏酸含量。方法：色譜柱為C18（250mm×4.6 mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.085%磷酸溶液（17：83），流速為1.0 mL/min，柱溫為35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm。結(jié)果：結(jié)果表明，當(dāng)歸阿魏酸的含量符合2015年版《中國(guó)藥典》標(biāo)準(zhǔn)。

【關(guān)鍵詞】當(dāng)歸;阿魏酸;水分測(cè)定;含量測(cè)定;高效液相色譜法

【中圖分類號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1002-8714（2020）01-0138-02

當(dāng)歸為傘形科植物當(dāng)歸Angelica sinensis（Oliv.） Diels的干燥根。性溫味甘辛，歸心、肝、脾經(jīng)，具有補(bǔ)血和血、調(diào)經(jīng)止痛、潤(rùn)燥滑腸之功效?，F(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)當(dāng)歸的藥理作用廣泛，主要表現(xiàn)在對(duì)循環(huán)、血液、免疫等各個(gè)系統(tǒng)的作用?，F(xiàn)代化學(xué)研究認(rèn)為，當(dāng)歸主要有兩類有效成分，包括水溶性成分和脂溶性成分，其中水溶性成分有機(jī)酸類成分主要有阿魏酸、香草酸、丁二酸、煙酸等，其中以阿魏酸的為主。當(dāng)歸中的阿魏酸具有誘導(dǎo)血小板聚集、抗氧化等作用。

1實(shí)驗(yàn)材料

當(dāng)歸粉末（過(guò)三號(hào)篩）。

1.1實(shí)驗(yàn)儀器：Aglient高效液相色譜儀、101-1-S-Ⅱ型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、稱量瓶、BS/BT系列電子天平

1.2試劑：阿魏酸對(duì)照品、甲醇（色普純）、乙腈（色譜純）、磷酸（分析純）

2實(shí)驗(yàn)方法

2.1水分測(cè)定

當(dāng)歸水分測(cè)定用2015年版《中國(guó)藥典》0832水分測(cè)定法第四法（甲苯法），取供試品適量（約相當(dāng)于含水量1-4ml），精密稱定，置圓底燒瓶中，加甲苯約20ml，加入干燥、潔凈的玻璃珠數(shù)粒，自冷凝管頂端加入甲苯至充滿狹細(xì)部分，待甲苯開始沸騰時(shí)，調(diào)節(jié)溫度，使每秒餾出2滴。待水分完全餾出，即測(cè)定管刻度部分的水量不再增加時(shí)，將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗，再用飽蘸甲苯的長(zhǎng)刷，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，使水分與甲苯完全分離。檢讀水量，計(jì)算供試品中含水量（%）（表1）。

2.2色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜柱為C18（250 mm×4.6 mm，5μm），流動(dòng)相為乙腈-0.085%磷酸溶液（17：83），流速為1.0 mL/min，柱溫為35℃，檢測(cè)波長(zhǎng)為316nm。

對(duì)照品溶液的制備：取阿魏酸對(duì)照品適量，精密稱定，加70%甲醇制成每1ml含12μg的溶液，即得。

供試品制備：取2份當(dāng)歸粉末（過(guò)三號(hào)篩）約0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇20ml，密塞，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，靜置，取上清液濾過(guò)，取續(xù)濾液，既得。

測(cè)定方法：分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀測(cè)定。

3實(shí)驗(yàn)結(jié)果

3.1水分測(cè)定結(jié)果

3.2阿魏酸對(duì)照品色譜圖、當(dāng)歸樣品色譜圖（圖1、2）

圖1 阿魏酸對(duì)照品色譜圖

圖2 當(dāng)歸樣品色譜圖

3.3含量結(jié)果

測(cè)量對(duì)照品溶液和供試品溶液中待測(cè)物質(zhì)的峰面積，按下式計(jì)算含量：

含量（Cx）= C_R×A_X/A_R，見表1、表2。

表1 阿魏酸對(duì)照品峰面積

表2 當(dāng)歸中阿魏酸含量測(cè)定結(jié)果

4結(jié)論

本次實(shí)驗(yàn)對(duì)中藥飲片廠采購(gòu)當(dāng)歸對(duì)照2015年版《中國(guó)藥典》，用HPLC法對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定，按干燥品計(jì)算，含阿魏酸（C10H1004）不得少于0.050%。收購(gòu)當(dāng)歸符合藥典規(guī)定，控制該藥材的含量，保證飲片的安全發(fā)放。