白靈菇多糖對力竭運動大鼠抗疲勞及抗氧化作用探析*

續(xù)延軍

（鶴壁職業(yè)技術(shù)學(xué)院體育運動學(xué)院，河南 鶴壁 458030）

白靈菇（Pleurotus nebrodensis） 又稱為阿魏蘑、阿魏側(cè)耳、阿魏菇，具有較高的營養(yǎng)價值和藥用價值。通過相關(guān)臨床研究顯示[1]，白靈菇中浸提的白靈菇多糖，具有一定的活性成分，能起到降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)血脂的功效。依據(jù)運動學(xué)專家的相關(guān)觀點，力竭訓(xùn)練將會導(dǎo)致運動員機體釋放出大量自由基，對機體產(chǎn)生較大的不良影響，若自由基未能及時清理，則將在較大程度上影響運動能力[2]。為證明白靈菇多糖對力竭運動后的抗疲勞和清除自由基作用，研究將選取Wistar雄性大鼠作為試驗對象進行論證探討。

1 資料與方法

1.1 材料與設(shè)備

選取250只Wistar雄性大鼠，質(zhì)量為150g～170 g，平均質(zhì)量為（160.1±10.3） g，在試驗過程中使其自由飲水?dāng)z食。選購蘭考金菇園食品有限公司的白靈菇，選擇超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、巰基-SH、丙二醛（MDA）、一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）、鈣鎂離子三磷酸腺苷酶（Ca2+/Mg2+-ATPase）、鈉鉀離子三磷酸腺苷酶（Na+/K+-ATPase）等物質(zhì)的試劑盒。

使用RE型蒸發(fā)器、UV7502PCS型分光光度計、TD型離心機、GM-33A型真空抽濾泵與HH-4型恒溫水浴鍋等試驗設(shè)備。

1.2 試驗方法

1.2.1 白靈菇多糖制備

稱取一定量的白靈菇子實體清洗后，在40℃恒溫箱烘干，粉碎至160目，使用95%乙醇使其脫脂，后添加20 mL純凈水，100℃溫度下浸提2 h，過濾、濃縮得到浸提液；后添加20 mL的乙醇，置于4℃沉淀多糖，進行約2 000 r·min-1離心30 min，使用Sevage法去除多余蛋白質(zhì)，并予以濃縮、凍干，放置于-20℃冰箱中待用。

1.2.2 試驗分組

將所選大鼠分為對照組（I）、力竭組（II）、力竭休息組（III）、白靈菇多糖力竭組（IV）、白靈菇多糖力竭休息組（V）共5組，白靈菇多糖組大鼠每日灌胃80 mg的多糖水溶液30 d，I組、II組、III組分別連續(xù)灌胃30 d生理鹽水，末次灌胃30 min后進行試驗檢測。參照Bedford模型，使其進行30 d跑臺運動，前 1 d～5 d，運動速率為 16.0 m·min-1，坡度為0，運動時間為25 min；6 d～10 d，速率為16.2 m·min-1，坡度為 5°，運動時間為 25 min，耗氧量為（57.5±1.4） mL·kg-1min-1；11 d～15 d，速率為16.2 m·min-1，坡度為 5°，運動時間為 35 min，耗氧量為（57.5±1.4） mL·kg-1min-1；16 d～20 d，速率為27.8 m·min-1，坡度為 5°，運動時間為 35 min，耗氧量為（73.4±2.6） mL·kg-1min-1；21 d～25 d，速率為27.8 m·min-1，坡度為 5°，運動時間為 35 min，耗氧量為（73.4±2.6） mL·kg-1min-1；26 d～30 d，速率為27.8 m·min-1，坡度為 10°，運動時間為 25 min，耗氧量為（80.1±3.2） mL·kg-1min-1。最后 1 次運動結(jié)束后，在安靜狀態(tài)下處死I組大鼠；IV組與V組大鼠每日運動后灌胃白靈菇多糖；最后一次力竭運動后，處死II組與IV組大鼠，使III組與V組大鼠均休息12 h后再進行處死。

1.2.3 試驗材料處理

各組大鼠處死前8 h禁飲，處死后立即提取適量的肝組織破碎得到肝勻漿，后于4℃，2 000 r·min-1條件下離心20 min，除去沉淀部分，3 000 r·min-1離心20 min，獲得沉淀即為肝組織樣品，使用超聲波儀器對其予以破碎處理，待用。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

1.3.1 白靈菇多糖對大鼠抗氧化能力的影響

判斷是否力竭應(yīng)觀察大鼠運動時，速度降低，臀部在籠體后壁，后肢體隨皮帶自然轉(zhuǎn)動達 30 s，利用電刺激方法沒有效果，可判斷為力竭[3]。使用前期處理大鼠肝組織參照說明書進行GSH-Px、NOS、-SH、MDA、NO、SOD等活性物質(zhì)的測定。

1.3.2 白靈菇多糖對大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響

大鼠所獲肝組織材料按南京建成生物有限公司提供試劑盒的說明進行NO-NOS，ATPase等物質(zhì)檢測，以每毫克蛋白每小時新產(chǎn)生的無機磷的微摩爾數(shù)為一個酶的活性單位，即1 μmol·mg-1h-1。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 20.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s） 表示，兩組間比較采用t檢驗，不符合正態(tài)分布者轉(zhuǎn)換為正態(tài)分布后行統(tǒng)計學(xué)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 白靈菇多糖對大鼠抗氧化能力的影響

白靈菇多糖對大鼠抗氧化能力情況見表1。

由表1所示，運動力竭試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計后，II組、III組的GSH-Px活力、SOD活力與-SH含量明顯低于I組，MDA水平明顯高于I組，V組抗氧化指標(biāo)要比II組、III組有顯著提高，與I組相當(dāng)；與II組相比，IV組的各項指標(biāo)顯著恢復(fù)，但差于I組。

2.2 白靈菇多糖對大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響

白靈菇多糖對大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響見表2。

由表2所示，服用白靈菇多糖后，NOS活力及NO含量、線粒體Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力明顯低于I組，但高于II組；休息12 h后NOS活力、NO含量和線粒體指標(biāo)與I組一致，但人高于II組、III組與 IV 組，差異顯著（P＜0.05）。

表1 白靈菇多糖對大鼠抗氧化能力的影響Tab.1 Effect of Pleurotus nebrodensis polysaccharide on antioxidant capacity of rats

表2 白靈菇多糖對大鼠NO-NOS、ATPase活性的影響Tab.2 Effects of Pleurotus nebrodensis polysaccharide on NO-NOS and ATPase activities in rats

3 討論

依據(jù)相關(guān)的臨床研究顯示[3]，白靈菇多糖具有較強的還原力，且能夠?qū)PPH·、超氧陰離子與羥基自由基具有良好的清除效果，除此之外，還能抑制脂質(zhì)過氧化，原因在于白靈菇多糖分子上的醇羥基能夠與自由基產(chǎn)生作用，從而具有較強的還原力，醇羥基能夠傳遞質(zhì)子與電子，能與DPPH·進行結(jié)合，其活性基團能與金屬離子反應(yīng)，可清除超氧陰離子與羥基自由基[4]。當(dāng)對大鼠使用白靈菇多糖后，GSH-Px活力、SOD活力與-SH含量明顯提升，MDA含量明顯降低，表明白靈菇多糖具有良好的增強機體抗氧化的能力；肝組織線粒體Na+/K+-ATPase、Ca2+/Mg2+-ATPase活力明顯提升，休息12 h后，NOS活力、NO含量恢復(fù)正常，說明白靈菇多糖具有良好的提升機體恢復(fù)的能力，原因在于白靈菇多糖能夠在較大程度上清除DPPH·、超氧陰離子與羥基自由基，因而能夠獲得上述良好的效果。

通過研究，認為白靈菇多糖能夠增強機體抗氧化能力，并且能夠增強機體的恢復(fù)能力，可作為力竭運動后快速恢復(fù)的首選物質(zhì)，但其實際運用仍然需要進行進一步的研究。