“競(jìng)速”試劑盒，藥企與時(shí)間賽跑

趙建琳 朱耘

2020年1月20日，謝宣（化名）帶著16日開始發(fā)低燒、18日出現(xiàn)呼吸困難的媽媽到了湖北省人民醫(yī)院，當(dāng)天的CT報(bào)告里顯示“雙肺感染，不排除病毒性肺炎”，及至她三天后輾轉(zhuǎn)五家醫(yī)院復(fù)診，都沒能用到試劑盒。

從那開始，試劑盒短缺成了大眾最關(guān)注的話題之一。國(guó)內(nèi)生物制藥公司也都相繼加快生產(chǎn)步伐，有公司生產(chǎn)核酸檢測(cè)試劑盒的產(chǎn)量從日均2萬人份，提高到日均10萬人份。

核酸檢測(cè)試劑盒的誕生

目前醫(yī)院在進(jìn)行新冠肺炎篩查時(shí)，除了檢查血項(xiàng)、CT外，還要從咽喉部采樣做核酸檢測(cè)，通過核酸檢測(cè)試劑盒進(jìn)行PCR反應(yīng)后的結(jié)果進(jìn)行確診。湖北省某人民醫(yī)院護(hù)士羅一南（化名）告訴記者，由于新冠病毒容易發(fā)生在胸膜下和下呼吸道，有時(shí)上呼吸道病毒量少，以及病毒性肺炎痰少多干咳，導(dǎo)致咽喉部取樣測(cè)試出現(xiàn)假陰性，這也與各個(gè)廠家做出的試劑盒敏感度有關(guān)。

三優(yōu)生物醫(yī)藥（上海）有限公司（以下簡(jiǎn)稱三優(yōu)生物）研發(fā)副總監(jiān)閆閏向《商學(xué)院》記者表示，不同公司研發(fā)制造的試劑盒可能會(huì)出現(xiàn)精確度不同，“這是由配套溶液的一致性、聚合酶的活性、PCR儀器的穩(wěn)定性、病人樣品情況和從樣品中提取核酸的方式等因素造成的?！?/p>

羅一南認(rèn)為，最準(zhǔn)確的是做支氣管鏡和肺泡灌洗液檢測(cè)，“但是太麻煩?！毕鄬?duì)來說，核酸檢測(cè)在咽喉部取材，做完即走，比CT便捷迅速，不容易交叉感染，風(fēng)險(xiǎn)也主要集中在PCR檢測(cè)的反應(yīng)環(huán)節(jié)。

在國(guó)家藥監(jiān)局通過應(yīng)急審批的7個(gè)新冠病毒檢測(cè)產(chǎn)品對(duì)應(yīng)企業(yè)中，上海輝睿生物科技有限公司（以下簡(jiǎn)稱輝睿生物）是被國(guó)家衛(wèi)健委在1月18日發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案（試行）》和《全國(guó)各省（區(qū)、市）首例新型冠狀病毒感染的肺炎病例確認(rèn)程序》里點(diǎn)名提到的各省級(jí)疾控中心檢測(cè)試劑盒可選擇的三家企業(yè)之一。

“其實(shí)做疾病防控工作，最主要的是快速反應(yīng)，說實(shí)話，最開始我沒想到（疫情）會(huì)這么嚴(yán)重，在中國(guó)疾控中心沒有公布測(cè)序結(jié)果的時(shí)候，我們參與的只是技術(shù)服務(wù)，全序測(cè)序完成后，我們就在24小時(shí)之內(nèi)完成了熒光定量PCR的引物探針合成，因?yàn)槲覀冇凶约旱暮铣善放?，不用去外面下訂單?！陛x睿生物總經(jīng)理李輝向《商學(xué)院》記者回憶道。

對(duì)于輝睿生物來說，這不是第一次參與重大突發(fā)的公共衛(wèi)生事件了，李輝介紹，從早前的H1N1甲型流感病毒開始，一直到H7N9型禽流感、MERS-CoV中東呼吸綜合征，他們都參與了熒光定量PCR的引物探針合成?！耙锾结樉褪侨斯ず铣傻腄NA，是PCR的重要組成部分。”

李輝告訴記者，拿到基因序列，在其上設(shè)計(jì)引物探針，是核酸檢測(cè)試劑盒研發(fā)的基礎(chǔ)，也就是篩選更合適的引物探針和更合適的條件的過程。“整個(gè)過程沒有很難，就是基礎(chǔ)工作要做扎實(shí)，基因序列一公布，流程其實(shí)很簡(jiǎn)單?！?/p>

在閆閏看來，核酸試劑盒的研發(fā)生產(chǎn)技術(shù)門檻不高，相關(guān)技術(shù)成熟，主要看產(chǎn)能，即“化工原料供應(yīng)能力、原料合成能力?！遍Z閏接著說：“主要是酶和引物探針，酶需要生物技術(shù)公司去提供，一般春節(jié)前，生產(chǎn)酶的工廠都會(huì)多供應(yīng)出一些，但這個(gè)量與疫情下所需要的量是無法相比的，再加上工人春節(jié)放假，有些工人能召回，有些召不回，產(chǎn)能需要有個(gè)恢復(fù)過程，只是現(xiàn)在最要緊的是擴(kuò)大產(chǎn)能。”

只是，要做到靈敏度高的試劑盒并不容易，中科院半導(dǎo)體研究所研究員任魯風(fēng)向記者介紹，當(dāng)前市場(chǎng)上最新的有96家企業(yè)推出核酸檢測(cè)試劑盒，但到現(xiàn)在為止，僅有7個(gè)產(chǎn)品拿到國(guó)家藥監(jiān)局應(yīng)急審批，其中6個(gè)采用熒光定量PCR法。

任魯風(fēng)告訴記者，影響試劑盒精確度的因素太多，光是檢測(cè)靶點(diǎn)，被WHO（世界衛(wèi)生組織）推薦的就有6套，即便使用同一套檢測(cè)靶點(diǎn)，也會(huì)因試劑盒的成分組成差異導(dǎo)致生化反應(yīng)存在細(xì)微差別，此外，酶、離子用量和溶液、底物濃度配比都會(huì)影響試劑盒的靈敏度。這也是對(duì)廠家技術(shù)實(shí)力的考驗(yàn)。

“目前國(guó)內(nèi)對(duì)試劑盒的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)主要是通過臨床對(duì)比實(shí)驗(yàn)來看檢測(cè)效果，就新冠病毒而言，只有陰性陽性符合性標(biāo)準(zhǔn)，并無試劑原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，配方也只規(guī)定了組成成分，并不規(guī)定具體比例，公開標(biāo)準(zhǔn)也均是推薦性，而非強(qiáng)制性，因?yàn)檫@些標(biāo)準(zhǔn)其實(shí)并無必要去統(tǒng)一，這更多是技術(shù)問題，也是市場(chǎng)機(jī)制下優(yōu)勝劣汰的一部分?！比昔旓L(fēng)認(rèn)為，要提高檢測(cè)精確度，企業(yè)只能不斷修煉內(nèi)功，提高對(duì)業(yè)務(wù)的認(rèn)識(shí)和理解，從系統(tǒng)上全面積累經(jīng)驗(yàn)。

試劑盒“加速度”

新冠肺炎疫情引起重大關(guān)注的時(shí)候，也正是人們準(zhǔn)備回家過年的時(shí)候。那時(shí)，輝睿生物進(jìn)口購買的酶等原材料只夠提供5萬人份到10萬人份的試劑盒，并已全部貢獻(xiàn)到市場(chǎng)上。彼時(shí)，許多員工已買好回家的車票，小年夜那天，李輝決定做一個(gè)動(dòng)員。

同樣通過國(guó)家藥監(jiān)局審批的華大基因也是早在2020年1月初就緊急組織科研及生產(chǎn)力量研制相關(guān)試劑盒。華大基因表示，為確保準(zhǔn)確鑒定，避免形成交叉誤判，公司在用72小時(shí)完成初步研發(fā)后，進(jìn)行了試劑盒工藝和質(zhì)量控制等環(huán)節(jié)穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性的嚴(yán)格評(píng)估，最終在1月14日宣布完成試劑盒的全部研制工作。

華大補(bǔ)充道：“由于此次新冠病毒屬于RNA病毒，單鏈病毒發(fā)生變異的概率更高。采用基于高通量測(cè)序的宏基因組檢測(cè)，可以有效監(jiān)測(cè)病毒在傳播過程中可能發(fā)生的變異情況，并覆蓋更廣的檢測(cè)范圍?！?/p>

為加快生產(chǎn)進(jìn)度，輝睿生物的員工把原先所做的其他產(chǎn)品一一暫停，全部精力投入生產(chǎn)針對(duì)此次新冠病毒的核酸檢測(cè)試劑盒。這樣的改變是顯著的，疫情最初，公司的試劑盒產(chǎn)能也就2萬多人份，到了1月底，產(chǎn)能已達(dá)日均5萬人份，現(xiàn)在日均10萬多人份，甚至李輝已經(jīng)記不清這些數(shù)據(jù)的拐點(diǎn)具體出現(xiàn)在哪天，“反正公司天天都在做這個(gè)。”

華大基因表示截至2月4日，試劑盒日均產(chǎn)能已達(dá)10萬人份，同時(shí)已加緊安排增加30萬人份的試劑盒生產(chǎn)，新儲(chǔ)備了30萬人份的試劑盒原料。華大基因相關(guān)負(fù)責(zé)人告訴記者，目前公司已經(jīng)完成了約30萬人份的新冠病毒核酸檢測(cè)試劑盒，并隨著疫情防控進(jìn)入關(guān)鍵時(shí)期，將全力服務(wù)疫情防控需要，讓每一位疑似病例都能盡快確診。

等候檢測(cè)結(jié)果漫長(zhǎng)的秘密

隨著試劑盒生產(chǎn)企業(yè)產(chǎn)能不斷提高，幾十萬甚至上百萬的核酸檢測(cè)試劑盒最終成為疑似病例確診的重要依據(jù)。但記者注意到，國(guó)家衛(wèi)健委1月18日發(fā)布的《全國(guó)各?。▍^(qū)、市）首例新型冠狀病毒感染的肺炎病例確認(rèn)程序》里規(guī)定，各?。▍^(qū)、市）首例病例樣品需交由省疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，再由中國(guó)疾病預(yù)防控制中心實(shí)驗(yàn)室復(fù)核，最后結(jié)合病例臨床表現(xiàn)、流行病學(xué)史，以及省級(jí)醫(yī)療救治專家組會(huì)診研判得出最終結(jié)果。

李輝告訴記者，這是最早期的檢測(cè)流程，以前的傳染病也是按照這個(gè)方法實(shí)施的。他告訴記者：“對(duì)傳染病的檢測(cè)，是要非常謹(jǐn)慎的，誰都怕報(bào)上去假陽性，就像埃博拉病毒從非洲傳入到中國(guó)時(shí)，也要由國(guó)家來復(fù)核，他們更專業(yè)。同時(shí)，省里首例得到確診也就證明省里的檢測(cè)方法得到了認(rèn)可，隨著疫情的發(fā)展，國(guó)家也調(diào)整了檢測(cè)流程，后續(xù)省里就可以自己報(bào)了，甚至市里也可以自己報(bào)?！?/p>

閆閏也認(rèn)為這種謹(jǐn)慎是非常必要的，“畢竟，如果出現(xiàn)誤診，就相當(dāng)于將一個(gè)沒有感染的人置身于感染群中，而謹(jǐn)慎之后怎么提高效率，是值得討論的問題?！?/p>

羅一南前幾日在跟記者聊天時(shí)就提到，病人在發(fā)熱門診接受完評(píng)估，就去門診二樓耳鼻喉科采樣，當(dāng)天就能出結(jié)果。由醫(yī)院來完成檢測(cè)，大大提高了工作效率。

“國(guó)家要求病毒檢測(cè)必須在P2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，檢測(cè)人員要采取生物安全三級(jí)個(gè)人防護(hù)，因?yàn)槟玫降氖菢悠防锸菦]有滅活的病毒，一旦處理不小心就會(huì)被感染?！遍Z閏告訴記者，除了省級(jí)疾病預(yù)防控制中心，通常只有三甲醫(yī)院才配有這種實(shí)驗(yàn)室，所以地方上的檢測(cè)也基本以三甲醫(yī)院為主。

具體而言，臨床PCR檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室最少需要三個(gè)具有獨(dú)立空調(diào)系統(tǒng)的房間來避免操作時(shí)的交叉污染，第一個(gè)房間用來提取樣品核酸，第二個(gè)房間用來配制檢測(cè)試劑，然后將加入了核酸的試管拿到第三個(gè)房間做熒光定量PCR反應(yīng)（如果是非定量PCR，還需在第四個(gè)房間做產(chǎn)物分析）。

這不僅要求每個(gè)房間具備獨(dú)立通風(fēng)、負(fù)壓環(huán)境，還要求檢驗(yàn)人員經(jīng)受過嚴(yán)格的分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)操作訓(xùn)練，“要達(dá)到可靠的操作水平，至少需要半年至一年的培訓(xùn)，且醫(yī)院檢驗(yàn)科的分子檢測(cè)往往占比很低，即使是三甲醫(yī)院，能做該工作的人可能也只有兩三個(gè)，而一個(gè)人操作最快也要三四個(gè)小時(shí)，如果樣品多，時(shí)間就更長(zhǎng)?！比昔旓L(fēng)告訴記者。為什么新冠肺炎疑似病例久久等不到檢測(cè)結(jié)果，這或許就是答案。

隨著新冠肺炎認(rèn)識(shí)的深入和診療經(jīng)驗(yàn)累積，2020年2月2日，湖北省的病例診斷分類中增加“臨床診斷”，當(dāng)日湖北省新增14840例病例。

還有更多的病毒待攻關(guān)

2月7日，國(guó)家衛(wèi)健委高級(jí)別專家組組長(zhǎng)鐘南山在參加廣東省衛(wèi)生健康委員會(huì)會(huì)議后表示，疫情拐點(diǎn)的到來還得有幾天，關(guān)鍵仍要做好早發(fā)現(xiàn)、早隔離，新增病例是一個(gè)重要的指標(biāo)。目前試劑盒廠家也都繼續(xù)趕工生產(chǎn)，那么到疫情結(jié)束時(shí)是否會(huì)出現(xiàn)產(chǎn)能過剩？到時(shí)將如何解決？

在李輝看來，產(chǎn)能過剩其實(shí)并不太擔(dān)心，因?yàn)檫€可以用到其他傳染病系列中，他現(xiàn)在最希望的就是第二天就用不上這些試劑盒了?！翱吹浆F(xiàn)在大街上店鋪都不開業(yè)，經(jīng)濟(jì)這么蕭條，真不想賺這個(gè)錢，這幾天我也買了一些消毒用品，準(zhǔn)備捐掉，也不希望看到有人在炒這些東西，大家應(yīng)該全力以赴一同對(duì)抗病毒?！?/p>

閆閏也同樣不太擔(dān)心該問題，“其實(shí)這個(gè)病是有一定趨勢(shì)性的，當(dāng)疑似病例數(shù)量陸續(xù)下降，疫情出現(xiàn)拐點(diǎn)，就可以調(diào)整產(chǎn)能提前減產(chǎn)?！倍?，“現(xiàn)在PCR法試劑盒里的大部分原料也可以做其他試劑盒的原料，只是引物探針不一樣?！?/p>

疫情終有結(jié)束的一天，對(duì)于試劑盒研發(fā)生產(chǎn)廠商來說，他們還有太多的事情要做，因疫情而暫時(shí)被忽視的流感等病毒還等著企業(yè)們?nèi)スタ恕?/p>