失血性休克大鼠腸缺血再灌注損傷后靜脈復(fù)蘇同時(shí)丙酮酸鈉腹腔復(fù)蘇的臨床觀察

蔣琳琳，張婧婧，王焱林

武漢大學(xué)中南醫(yī)院，武漢 430071

失血性休克是臨床常見(jiàn)的危重癥，快速失血是創(chuàng)傷后患者早期死亡的主要原因[1]。液體復(fù)蘇為治療失血性休克必不可少的方法，如失血性休克患者得不到有效的液體治療，接近一半的患者會(huì)死于多器官功能障礙[2]。早期的靜脈液體復(fù)蘇，雖然維持了重要臟器，如心、腦等重要器官的血流，但內(nèi)臟器官循環(huán)仍處于持續(xù)收縮缺血狀態(tài)，易發(fā)生缺血再灌注損傷，如脾、腎、小腸等，尤其是小腸[3]。腹腔復(fù)蘇可改善靜脈復(fù)蘇后內(nèi)臟血管收縮、保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞、調(diào)節(jié)微循環(huán)功能、減少液體轉(zhuǎn)移，能有效提高復(fù)蘇后患者的生存率，改善預(yù)后[4,5]。腹腔復(fù)蘇對(duì)于復(fù)蘇后的臟器保護(hù)作用，不僅與液體復(fù)蘇途徑相關(guān)，其所用的液體性質(zhì)也尤為重要，例如離子成分、高滲透壓或者高糖等[6]。丙酮酸是糖代謝過(guò)程中重要的中間代謝產(chǎn)物，多項(xiàng)研究[7,8]表明，其不僅能改善細(xì)胞供能，還能緩解氧化應(yīng)激反應(yīng)，減少炎癥因子釋放，起到多器官及細(xì)胞保護(hù)作用。作為腹腔復(fù)蘇液體成分，丙酮酸對(duì)缺血再灌注損傷多器官功能尤其是小腸的保護(hù)作用十分顯著[9]。近年有研究探討丙酮酸鈉腹腔復(fù)蘇在小腸缺血再灌注損傷中作用的研究，但將組織生化指標(biāo)聯(lián)合病理形態(tài)，尤其針對(duì)亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)的研究較少。2018年3月～2019年5月，本研究通過(guò)觀察失血性休克大鼠靜脈復(fù)蘇的同時(shí)加用丙酮酸鈉溶液后的血流動(dòng)力學(xué)、生化指標(biāo)、組織病理及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化，以進(jìn)一步探討丙酮酸鈉在小腸缺血再灌注損傷中的作用。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物、試劑、儀器 40只Sprague-Dawley大鼠，SPF級(jí)，雄性，250～300 g,由武漢大學(xué)動(dòng)物中心提供(Wuhan,China)。實(shí)驗(yàn)前，動(dòng)物于武漢大學(xué)中南醫(yī)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心適應(yīng)性喂養(yǎng)1周,自由攝取水和食物。動(dòng)物喂養(yǎng)于標(biāo)準(zhǔn)條件下溫度22 ℃±1 ℃，濕度55%±5%和12-h/12-h晝夜循環(huán)。丙酮酸鈉、葡萄糖、戊巴比妥鈉均購(gòu)于美國(guó)sigma公司,丙二醛(MDA)、髓過(guò)氧化物酶(MPO)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、IL-6、TNF-α試劑盒購(gòu)于南京建成生物工程研究所，2.5%葡萄糖乳酸鈉腹膜透析液(2.5% Lac-PDS)購(gòu)于廣州百特醫(yī)療用品有限公司，F(xiàn)M-8P全自動(dòng)冰點(diǎn)滲透壓計(jì)購(gòu)置于上海京工事業(yè)有限公司。實(shí)驗(yàn)前現(xiàn)配丙酮酸鈉溶液，將丙酮酸鈉粉劑溶于蒸餾水中，配制為1.1%(100 mmol/L)的丙酮酸鈉溶液，采用FM-8P全自動(dòng)冰點(diǎn)滲透壓計(jì)測(cè)量滲透壓，利用葡萄糖調(diào)節(jié)丙酮酸鈉溶液滲透壓均到達(dá)400 mOsm/L,并且使用HCl及NaOH調(diào)節(jié)溶液pH為5.4，過(guò)濾除菌，使用前待至室溫。

1.2 大鼠失血性休克模型制作及丙酮酸鈉腹腔復(fù)蘇 40只SPF級(jí)Sprague-Dawley雄性大鼠隨機(jī)分為4組：PY組、Lac組、Sham組、VR組，各10只。實(shí)驗(yàn)前均禁食12 h，禁水4 h。采用1%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉大鼠，劑量為40 mg/kg,整個(gè)過(guò)程采用0.7%異氟迷維持麻醉，保持動(dòng)物自主呼吸。于右側(cè)頸總動(dòng)脈穿刺置管，連接生物監(jiān)測(cè)儀，用于平均動(dòng)脈壓(MAP)持續(xù)監(jiān)測(cè)。分別于右側(cè)股靜脈、左側(cè)股動(dòng)脈穿刺置管，左側(cè)股動(dòng)脈用于放血，右側(cè)股靜脈用于血液及液體回輸。穿刺均在無(wú)菌條件下進(jìn)行，穿刺完畢后，根據(jù)質(zhì)量給予300 U/kg肝素鈉進(jìn)行全身肝素化，留置管內(nèi)均預(yù)充100 U/mL肝素鹽水，動(dòng)物術(shù)后均適應(yīng)15～20 min。采用保溫設(shè)施保持整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所有動(dòng)物肛溫維持在36 ℃。除Sham組外，其他3組在10 min內(nèi)，通過(guò)左側(cè)股動(dòng)脈回抽血液使MAP下降至40 mmHg，采用回輸或者放血方式維持MAP在(40±5)mmHg水平持續(xù)60 min，建立失血性休克模型。在休克造模結(jié)束后，除Sham組以外，其他3組在回輸所放血液后，再由靜脈輸入等于兩倍放血量的乳酸鈉林格液。Lac組與PY組，在靜脈復(fù)蘇同時(shí)分別經(jīng)腹腔泵入20 mL的5%葡萄糖乳酸腹透液和1.1%丙酮酸鈉溶液；血液與復(fù)蘇液體的回輸在30 min內(nèi)完成，腹腔復(fù)蘇同時(shí)進(jìn)行，采用微量泵完成。從放血開(kāi)始到液體復(fù)蘇后3 h,持續(xù)監(jiān)測(cè)記錄MAP,并分別記錄基礎(chǔ)值，休克造模開(kāi)始,造模完畢,復(fù)蘇后5、10、30、60、90、120、150、180 min的MAP值。液體復(fù)蘇后3 h，截取小腸組織標(biāo)本5 cm浸泡于4% 甲醛溶液中，1 cm腸組織置于2.5%戊二醛電鏡液中，10 cm放于凍存管內(nèi)用液氮快速凍存,剩余小腸組織-80 ℃凍存。

1.3 小腸組織MDA、MPO、iNOS、IL-6、TNF-α檢測(cè) 取出凍存的小腸組織，制作組織勻漿4 ℃離心后,按照試劑盒說(shuō)明分別采用硫巴比妥酸法(TBA)檢測(cè)MDA，化學(xué)比色法檢測(cè) MPO和 iNOS，ELISA法檢測(cè)小腸組織內(nèi)IL-6、TNF-α。

1.4 小腸黏膜光鏡下細(xì)胞形態(tài)學(xué)及電鏡下超微結(jié)構(gòu)改變 取出之前經(jīng)4%多聚甲醛固定的小腸組織，使用乙醇由低濃度到高濃度(70%～100%)逐級(jí)脫水，經(jīng)過(guò)二甲苯透明，浸蠟包埋。使用伊紅蘇木精染色后，在光鏡下觀察小腸絨毛形態(tài)。取出之前于2.5%戊二醛電鏡液中固定的小腸組織，使用緩沖液每隔15 min清洗樣品,共3次，過(guò)夜。向樣品中加入0.2 mL緩沖液及0.2 mL鋨酸，2 h后再次使用緩沖液清洗樣品，經(jīng)過(guò)丙酮脫水及丙酮樹(shù)脂浸透后2 h,進(jìn)行樹(shù)脂包埋。連續(xù)3 d聚合后，制成半薄切片，在光鏡下進(jìn)行定位。最后用醋酸雙氧鈾避光染色和檸檬酸鉛染色,在透射電鏡下觀察亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。

2 結(jié)果

2.1 各組不同時(shí)間MAP比較 PY組基礎(chǔ)值(C0)，造模開(kāi)始,造模完畢,復(fù)蘇后5、10、30、60、90、120、150、180 min時(shí)MAP分別為(118.40±3.84)、(39.90±0.31)、(39.90±1.29)、(118.90±7.74)、(118.60±4.03)、(118.10±6.31)、(114.50±3.10)、(113.40±3.60)、(114.10±2.02)、(114.10±1.97)、(112.20±3.94)mmHg，Lac組分別為(114.80±4.64)、(40.10±0.74)、(40.10±1.66)、(116.80±4.08)、(114.80±2.30)、(115.20±4.29)、(114.80±3.88)、(118.20±5.14)、(113.70±2.31)、(110.80±4.42)、(111.90±3.63)mmHg，VR組分別為(119.60±5.50)、(39.90±0.57)、(39.90±1.20)、(120.30±4.24)、(111.10±2.38)、(108.20±2.04)、(107.00±2.16)、(106.50±2.46)、(106.30±3.06)、(106.10±2.02)、(104.30±2.45)mmHg，Sham組分別為(117.60±4.03)、(117.70±1.89)、(116.10±2.38)、(118.60±2.07)、(119.00±3.30)、(119.90±3.38)、(119.20±4.47)、(118.20±2.10)、(117.70±3.65)、(118.40±2.63)、(116.70±2.71)mmHg。4組MAP基礎(chǔ)值比較，P均﹥0.05。除Sham組外，造模開(kāi)始、造模完畢及復(fù)蘇后5 min，3個(gè)實(shí)驗(yàn)組MAP比較，P均﹥0.05。從復(fù)蘇后5 min至復(fù)蘇后30 min,PY組與Sham組MAP比較，P均﹥0.05。復(fù)蘇后60 min直至復(fù)蘇后180 min,PY與Lac組MAP比較，P均﹥0.05。從復(fù)蘇后10 min直至復(fù)蘇后180 min,VR組MAP低于Lac組及PY組(P均<0.05)。

2.2 復(fù)蘇后180 min各組小腸組織MDA、MPO、iNOS、IL-6、TNF-α比較 復(fù)蘇后180 min，各組MDA、MPO、TNF-α比較：Sham組< PY組

表1 復(fù)蘇后180 min，各組小腸組織內(nèi) MPO、MDA、iNOS、TNF-α、IL-6水平

2.3 復(fù)蘇后180 min各組光鏡下小腸黏膜形態(tài)學(xué)及電鏡下小腸黏膜細(xì)胞亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)變化 光鏡下，Sham組：小腸絨毛上皮細(xì)胞排列緊密，存在明顯細(xì)胞極性，固有層少有淋巴細(xì)胞和白細(xì)胞浸潤(rùn);VR組：小腸絨毛嚴(yán)重水腫，大部分壞死斷裂，固有層大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn);Lac組：部分絨毛斷裂，紋狀緣連續(xù)性破壞嚴(yán)重，黏膜上皮細(xì)胞丟失，絨毛完整性受到破壞;PY組：小腸絨毛形態(tài)基本保持完整，紋狀緣連續(xù)性破壞較輕，少部分絨毛固有層輕度水腫，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)少。詳見(jiàn)圖1。電鏡下，Sham組：微絨毛數(shù)量正常，排列緊密，細(xì)胞器結(jié)構(gòu)正常;VR組：微絨毛斷裂脫落，線粒體高度水腫或消失，細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)濃聚邊集;Lac組：微絨毛稀疏，部分線粒體高度水腫;PY組：微絨毛緊密排列，細(xì)胞器結(jié)構(gòu)基本正常。詳見(jiàn)圖2。

注：A、B、C、D分別為Sham組、VR組、Lac組、PY組。

圖1 各組小腸光鏡下形態(tài)(×40)

注：A、B、C、D分別為Sham組、VR組、Lac組、PY組小腸組織亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)；在B,C,中，寬箭頭所示為微絨毛，細(xì)箭頭所示為高度水腫或已消失的線粒體。

圖2 各組小腸組織透射電鏡下亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)(×500)

3 討論

失血性休克在短時(shí)間內(nèi)，有效循環(huán)血量急劇減少，造成的直接結(jié)果就是容量及氧供減少，由此引起的低氧低灌注可引起內(nèi)臟損傷，加上機(jī)體的自身調(diào)節(jié)，內(nèi)臟血管持續(xù)收縮及血流重新分布，小腸由于能量消耗大及內(nèi)皮細(xì)胞的更新，尤其易受到低氧和低灌注的影響[10]。在足夠持續(xù)的應(yīng)激下，內(nèi)毒素可降低機(jī)體防御能力，增加腸黏膜滲透性，小腸屏障功能紊亂使腸道菌群或內(nèi)毒素移位至腸系膜淋巴結(jié)[11]，由于細(xì)菌和非細(xì)菌因素，機(jī)體的免疫系統(tǒng)被激活，釋放炎癥介質(zhì)，通過(guò)作用網(wǎng)絡(luò)及反饋系統(tǒng)，產(chǎn)生了局部和系統(tǒng)炎癥反應(yīng)，促進(jìn)細(xì)菌移位至遠(yuǎn)隔器官如肝、脾等和血液循環(huán)內(nèi),此極有可能是發(fā)生多器官功能障礙綜合征的關(guān)鍵因素之一[12]。

臨床上，有時(shí)采用限制性甚至低容量液體復(fù)蘇，允許性低壓可避免早期液體復(fù)蘇時(shí)，激進(jìn)的液體治療帶來(lái)的不良影響，當(dāng)出血控制后，可通過(guò)優(yōu)化毛細(xì)循環(huán)來(lái)改善微循環(huán)狀態(tài)，但這種用情況只出現(xiàn)在微循環(huán)調(diào)節(jié)功能正常的時(shí)候[13]。在傳統(tǒng)靜脈復(fù)蘇的基礎(chǔ)上，聯(lián)合應(yīng)用高滲的腹腔復(fù)蘇液體，從細(xì)胞水平及血管水平防止液體轉(zhuǎn)移，通過(guò)高滲作用，使得水流入腹腔內(nèi)，加強(qiáng)與腹膜腔周圍組織，尤其是腹部肌肉的液體交換，改善淋巴循環(huán)，建立一個(gè)緩慢、持續(xù)的復(fù)蘇腔，補(bǔ)充血管容量，可有效改善微循環(huán)功能，增加小腸、脾、胰、肺、肝等內(nèi)臟器官的灌注，甚至可以增加肌肉血流[14]。同時(shí)，還可以抑制炎癥因子的表達(dá)和中性粒細(xì)胞的作用，防止產(chǎn)生液體隔離作用[15]。

丙酮酸對(duì)多個(gè)重要器官均有保護(hù)作用，例如，發(fā)生急性心梗時(shí)，冠脈內(nèi)應(yīng)用丙酮酸，可通過(guò)加強(qiáng)ATP水解，增加肌漿網(wǎng)鈣泵能量，增加質(zhì)子同向轉(zhuǎn)運(yùn)體，降低細(xì)胞內(nèi)pH，增加收縮蛋白對(duì)鈣離子的敏感性，有效提高心指數(shù)、心搏出量[16]。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，丙酮酸能通過(guò)調(diào)節(jié)人低氧誘導(dǎo)因子1α及促紅細(xì)胞生成素在腦部神經(jīng)元及神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá)，活化蛋白激酶B，減少細(xì)胞內(nèi)DNA裂解，改善腦卒中動(dòng)物模型腦細(xì)胞缺血再灌注損傷，并且通過(guò)增強(qiáng)糖代謝及氧化磷酸化作用，增加ATP產(chǎn)生減輕創(chuàng)傷后認(rèn)知功能缺失程度[17,18]。丙酮酸作為堿性緩沖劑，可能糾正失血性休克液體復(fù)蘇中的乳酸酸中毒，改善預(yù)后，提高生存率[19]。在休克時(shí)，血管調(diào)節(jié)功能障礙，丙酮酸在液體復(fù)蘇時(shí)，可改善微循環(huán)功能，提高碳酸氫根離子和剩余堿，抑制硝化物形成，達(dá)到抑制全身炎癥反應(yīng)的作用[20]。

關(guān)于丙酮酸在失血性休克液體復(fù)蘇后腸缺血再灌注損傷中的作用研究逐漸展開(kāi)，早先各項(xiàng)研究探索表明，無(wú)論是靜脈注射或者口服丙酮酸均對(duì)小腸缺血再灌注黏膜損傷起到了減輕作用，主要與其清除ROS、抑制炎癥等有關(guān)[21]。Zakariael等[4,22]認(rèn)為，腹腔復(fù)蘇時(shí)內(nèi)臟器官擴(kuò)張及微循環(huán)的改善主要是由于腹膜透析液的高滲作用。Hu等[23]研究將兩種含丙酮酸的腹透液與臨床常用的2.5% Lac-PDS進(jìn)行比較，排除了滲透壓的影響，丙酮酸鈉溶液對(duì)內(nèi)臟器官、尤其是小腸損傷的減輕作用顯示出了明顯優(yōu)勢(shì)，說(shuō)明，在滲透壓一定時(shí)，腹透液所含的成分對(duì)復(fù)蘇效果的影響也十分明顯。

失血性休克特點(diǎn)是有效循環(huán)血量減少，組織灌注不足，血壓快速下降，因血管調(diào)節(jié)能力下降，缺氧組織間的氧氣傳遞障礙，微循環(huán)發(fā)生功能障礙，毛細(xì)血管有效濾過(guò)壓上升，局部炎癥使得微循環(huán)內(nèi)皮滲透性增加，毛細(xì)血管逸出率提高，組織間隙液體過(guò)多造成組織水腫。在低氧甚至缺氧狀態(tài)，丙酮酸的補(bǔ)充，加速氧化磷酸化，且可刺激產(chǎn)生人低氧誘導(dǎo)因子1α，從而激活一系列糖代謝關(guān)鍵酶，如乳酸脫氫酶，6-磷酸葡萄糖脫氫酶，通過(guò)糖酵解途徑，維持一定的NAD/NADH比例，還能逆轉(zhuǎn)失活的丙酮酸脫氫酶，加強(qiáng)缺氧條件下三羧酸循環(huán)的運(yùn)轉(zhuǎn)及回補(bǔ)途徑，加快乳酸氧化及氫離子消耗，改善細(xì)胞內(nèi)酸中毒，產(chǎn)生線粒體ATP，產(chǎn)生足夠的ATP維持細(xì)胞基本功能，避免細(xì)胞內(nèi)鈣離子的丟失，維持血管張力，改善微循環(huán)。同時(shí)抑制失血性休克后心肌的硝化應(yīng)激，增加心輸出量，提高心功能[20]。本研究結(jié)果顯示，與VR組及LA組比較，PY組具有良好的血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性。在復(fù)蘇早期，復(fù)蘇5 min時(shí),3個(gè)實(shí)驗(yàn)組MAP比較未表現(xiàn)出明顯差異。從復(fù)蘇后10 min直至復(fù)蘇后180 min，VR及Lac組的MAP均低于Sham組，而PY組直至復(fù)蘇后60 min才低于Sham組。雖然出現(xiàn)降低，但總體而言，PY組及Lac組均表現(xiàn)為MAP高于VR組，這表明腹腔復(fù)蘇聯(lián)合靜脈復(fù)蘇的血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定性強(qiáng)于單純通過(guò)靜脈復(fù)蘇的效果。PY組在早期的復(fù)蘇中，MAP穩(wěn)定性好于Lac組，表明丙酮酸改善血流動(dòng)力學(xué)的效果優(yōu)于乳酸。

因胃腸道富含嘌呤氧化酶，在液體治療后，小腸易發(fā)生缺血再灌注損傷，腸腔內(nèi)的胰酶能加重這種損傷，腸壁滲透性增加，使得小腸屏障功能降低，腸道內(nèi)菌群及有毒物質(zhì)移位，到達(dá)遠(yuǎn)隔器官造成靶器官損傷，引起系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)綜合征甚至多器官功能障礙。腸組織發(fā)生缺血再灌注損傷，大量的活性氧和自由基產(chǎn)生，可出現(xiàn)氧化應(yīng)激、發(fā)生氧化反應(yīng)破壞質(zhì)膜及亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生具有細(xì)胞毒性作用的MDA，最終腸屏障系統(tǒng)功能紊亂。腸組織的缺血再灌注損傷使得iNOS的活性增加，研究表明，iNOS可能使線粒體功能紊亂，釋放出細(xì)胞色素C，使得腸黏膜細(xì)胞過(guò)度凋亡，增加小腸黏膜屏障的滲透性。IL-6與TNF-α是常見(jiàn)的前炎癥因子，IL-6表達(dá)增多時(shí)，回腸緊密連接破壞，腸壁滲透性增加，細(xì)菌移位，TNF-α在機(jī)體缺血再灌注時(shí)的炎癥失控有著重要作用，在離體實(shí)驗(yàn)中又對(duì)緊密連接蛋白ZO-1的表達(dá)有影響[24,25]。IL-6的釋放在一定程度上依賴于腫瘤壞死因子。使用anti-TNFα抗體英孚利昔，可緩解因炎癥引起的腸滲透性增加，保護(hù)腸黏膜屏障功能。MPO主要是由中性粒細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白酶，其含量高低可以用來(lái)衡量中性粒細(xì)胞的激活情況。MDA是常見(jiàn)的脂類過(guò)氧化指標(biāo)。iNOS是由炎性細(xì)胞,主要是巨噬細(xì)胞在炎癥早期合成釋放。本研究結(jié)果顯示，PY組小腸組織的MPO、MDA及iNOS明顯低于VR與Lac組。因?yàn)楸崮馨l(fā)生去碳酸基反應(yīng)，與過(guò)氧化氫直接反應(yīng)生成水和二氧化碳，清除自由基；抑制細(xì)胞因子及黏附因子、趨化因子的釋放，減少中性粒細(xì)胞的浸潤(rùn)，降低MPO活性。丙酮酸可以在不耗能的情況下，在乳酸脫氫酶的作用下轉(zhuǎn)變?yōu)槿樗?，在丙酮酸減少的反應(yīng)中，提高胞液內(nèi)氧化還原電位即NAD+/NADH 的比例，對(duì)于維持糖酵解、產(chǎn)生糖酵解ATP十分重要[19]，減少反應(yīng)性活性氧及超氧化物的形成，間接地提高谷胱甘肽含量[20],防止生物膜系統(tǒng)被氧化，減少M(fèi)DA的產(chǎn)生。丙酮酸在抑制前炎癥因子IL-6及TNF-α釋放的同時(shí)也抑制NF-κB途徑的激活，調(diào)節(jié)組織炎癥反應(yīng)。所以丙酮酸既能清除自由基、減少活性氧的形成、減少氧化應(yīng)激對(duì)腸組織的破壞、抑制iNOS的活性、防止腸黏膜上皮細(xì)胞過(guò)度凋亡，又能通抑制炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及前炎癥因子的釋放，調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)，從而起到抗氧化抗炎的作用。

本研究中，光鏡下可看出，PY組的腸組織損傷明顯小于VR組和Lac組，因?yàn)楸崮苡行Ц纳萍?xì)胞ATP消耗情況，起到了良好的細(xì)胞保護(hù)作用;且抑制了炎癥細(xì)胞激活及炎癥介質(zhì)釋放，使得腸組織炎癥減輕。在透射電鏡下，PY組的小腸微絨毛基本保持完整，排列緊密，細(xì)胞器結(jié)構(gòu)，尤其是線粒體的結(jié)構(gòu)未見(jiàn)明顯異常，與Sileri等[26]研究結(jié)果丙酮酸能維持腸缺血再灌注損傷后小腸動(dòng)力及吸收功能相符。提示丙酮酸鈉溶液腹腔復(fù)蘇聯(lián)合靜脈復(fù)蘇對(duì)失血性休克復(fù)蘇后腸缺血再灌注損傷有明顯減輕作用。

綜上所述，與單純靜脈復(fù)蘇及靜脈復(fù)蘇同時(shí)葡萄糖乳酸鈉腹腔復(fù)蘇比較，失血性休克大鼠腸缺血再灌注損傷后靜脈復(fù)蘇同時(shí)丙酮酸鈉溶液腹腔復(fù)蘇能維持血流動(dòng)力學(xué)穩(wěn)定，有效地抑制小腸氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)，保護(hù)腸黏膜。