聚乙二醇電解質(zhì)口服溶液聯(lián)合二甲基硅油對(duì)UC患者腸道清潔效果及血清hs-CRP水平的影響

羅云春，易文

（宜昌市中心醫(yī)院 肛腸科，湖北 宜昌 443000）

潰瘍性結(jié)腸炎（ulcerative colitis, UC）是臨床較為常見的慢性非特異性腸道疾病，主要表現(xiàn)為腹痛、腹瀉，對(duì)患者的生活質(zhì)量產(chǎn)生影響[1]。UC 的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜，有研究表明免疫功能紊亂和炎癥因子水平異常的患者UC 發(fā)病率較高[2]。結(jié)腸鏡檢查是診斷UC的重要手段，可使醫(yī)師直觀地觀察患者腸道炎癥情況，而較好的腸道清潔有利于結(jié)腸鏡檢查的效果。有研究表明UC 患者在經(jīng)腸道清潔后，腹痛、腹瀉等臨床癥狀得到緩解，生活質(zhì)量有一定的提高[3]。因此，探討腸道清潔方案對(duì)UC 患者的治療有重要價(jià)值。本研究探討聚乙二醇電解質(zhì)口服溶液聯(lián)合二甲基硅油對(duì)UC患者腸道清潔效果，并評(píng)估其對(duì)患者血清炎癥因子的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年3月—2017年7月宜昌市中心醫(yī)院接受治療的UC 患者96 例。其中，男性45 例，女性51 例；年齡56～71 歲，平均（63.2±6.7）歲?；颊唠S機(jī)分為對(duì)照組和觀察組，每組48 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者符合UC 標(biāo)準(zhǔn)[4]；②患者均首次接受UC 治療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患者有消化道手術(shù)史；②重要器官（如心臟、肝臟等）功能不全者；③患有惡性腫瘤、炎癥感染的患者。

1.2 方法

1.2.1 腸道準(zhǔn)備 本研究患者清腸前1 天食用流質(zhì)飲食，同時(shí)清腸結(jié)束前禁止飲食，對(duì)照組在0.5 h 內(nèi)服用1 L 甘露醇溶液（10%）；觀察組2 h 內(nèi)服用2 L 的聚乙二醇電解口服溶液（北京圣永制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20090226），同時(shí)服用50 ml 二甲基硅油溶液（4 mg/ml）。所有患者均適量走動(dòng)，以加快清腸液體的排泄。

1.2.2 腸道準(zhǔn)備效果評(píng)價(jià) 腸道清潔程度參考波士頓腸道準(zhǔn)備評(píng)分量表[5]。Ⅰ級(jí)：結(jié)腸沒有或存在較少的殘留固體糞質(zhì)，腸道黏膜較為清晰；Ⅱ級(jí)：結(jié)腸存在少量固體糞質(zhì)，有一定量氣泡影響觀察腸道黏膜；Ⅲ級(jí)：全結(jié)腸存在伴固體殘留糞便較多，腸道黏膜視野較差；Ⅳ級(jí)：全結(jié)腸見固體及伴固體殘留糞塊，無(wú)法對(duì)患者腸鏡檢查；Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)標(biāo)準(zhǔn)表示清潔度較好?？偳鍧嵚?（腸道準(zhǔn)備評(píng)分Ⅰ級(jí)+腸道準(zhǔn)備評(píng)分Ⅱ級(jí)）/總例數(shù)×100%。腸道內(nèi)氣泡量評(píng)分，Ⅰ級(jí)：腸道內(nèi)無(wú)氣泡，或存在少量氣泡不影響觀察；Ⅱ級(jí)：腸腔存在一定量氣泡，少部分腸道觀察受影響；Ⅲ級(jí)：腸腔氣泡較多，影響腸道觀察；Ⅳ級(jí)：氣泡在腸腔中非常多，影響腸道觀察；Ⅰ級(jí)和Ⅱ級(jí)標(biāo)準(zhǔn)表示氣泡較少?？傡钆萋?（腸道內(nèi)氣泡量評(píng)分Ⅰ級(jí)+腸道內(nèi)氣泡量評(píng)分Ⅱ級(jí)）/總例數(shù)×100%。

1.3 炎癥因子指標(biāo)檢測(cè)和觀察不良反應(yīng)

所有UC 患者在腸道清潔前1 天和后1 天空腹靜脈采血6 ml，采用EDTA 抗凝后以1 200 r/min 離心10 min，收集血清（保存離心后的血細(xì)胞），采用ELISA 法檢測(cè)患者血清腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor α, TNF-α）、白細(xì)胞介素-10（interleukin -6, IL-10）、超敏C 反應(yīng)蛋白（hypersensitive C-reactive protein, hs-CRP）水平。按照實(shí)驗(yàn)說(shuō)明書處理96 孔板，并按要求稀釋血清樣本，每孔加入血清樣本40 μl，然后酶標(biāo)抗體60 μl，室溫反應(yīng)20 min，加入15 μl底物液反應(yīng)15 min，然后終止反應(yīng)，采用酶標(biāo)儀在450 nm 波長(zhǎng)檢測(cè)光密度（OD）值。同時(shí)每孔設(shè)置3復(fù)孔。記錄患者不良反應(yīng)發(fā)生情況，包括腹痛、腹瀉、嘔吐和腹脹。

1.4 Western blotting 檢測(cè)外周血單個(gè)核細(xì)胞白細(xì)胞介素-23（IL-23）受體的表達(dá)

收集檢測(cè)血清炎癥因子后保存的血細(xì)胞，加入淋巴細(xì)胞分離液，以1 500 r/min 離心10 min，中間白色云霧狀細(xì)胞即為外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cell, PBMC），吸取該層細(xì)胞后經(jīng)磷酸鹽緩沖液（PBS）清洗3 次（2 min/次），采用RIPA 裂解液提取其細(xì)胞的總蛋白質(zhì)，并采用BCA 法檢測(cè)蛋白質(zhì)濃度。蛋白樣本置于沸水10 min 以充分變性，20 μg蛋白加入上樣孔后進(jìn)行SDS-PAGE 電泳，采用濕轉(zhuǎn)法將蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)至PVDF 膜上，再移入含5%脫脂奶粉的含吐溫的磷酸鹽緩沖液（PBST）中1.5 h，加入抗IL-23 受體一抗（1 ∶500 稀釋）和抗甘油醛-3-磷酸脫氫酶（GAPDH）抗體后4℃孵育過夜，經(jīng)PBST清洗3 次后再用HRP 標(biāo)記的二抗室溫孵育2 h，增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法（ECL）顯色發(fā)光，經(jīng)凝膠系統(tǒng)拍照后用Image J 軟件分析各條帶灰度值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0軟件，計(jì)量資料以均數(shù)± 標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較采用LSD-t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者腸道清潔程度

兩組腸道總清潔率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），觀察組高于對(duì)照組。見表1。

2.2 兩組不同氣泡量分級(jí)數(shù)

兩組總祛泡率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜ 0.05），觀察組高于對(duì)照組。見表2。

2.3 兩組患者炎癥因子變化

兩組治療后TNF-α、hs-CRP 及IL-10 水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組TNF-α、hs-CRP 水平低于對(duì)照組，IL-10 水平高于對(duì)照組。見表3。

2.4 兩組患者不良反應(yīng)情況

兩組患者均未發(fā)生嚴(yán)重的不良反應(yīng)。兩組患者各不良反應(yīng)數(shù)比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；觀察組患者不良反應(yīng)總數(shù)低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表4。

2.5 兩組患者PBMC 中IL-23 受體表達(dá)水平

兩組患者PBMC 中IL-23 受體表達(dá)水平比較，治療前差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），觀察組高于對(duì)照組。見表5和圖1。

表1 兩組患者腸道總清潔率的比較 [n =48，例（%）]

表2 兩組患者總祛泡率比較 [n =48，例（%）]

表3 兩組患者炎癥因子比較 （n =48，±s）

表3 兩組患者炎癥因子比較 （n =48，±s）

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表4 兩組患者總不良反應(yīng)發(fā)生率比較 [n =48，例（%）]

表5 兩組患者治療前后PBMC 的IL-23 受體表達(dá)比較 （n =48，±s）

表5 兩組患者治療前后PBMC 的IL-23 受體表達(dá)比較 （n =48，±s）

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圖1 兩組患者治療前后PBMC 的IL-23 受體表達(dá)

3 討論

目前臨床常用甘露醇、聚乙二醇電解質(zhì)作為腸道清潔的藥物。甘露醇是一類低聚糖，可有效提高腸道的滲透壓，誘發(fā)水分滲入腸腔，刺激腸道蠕動(dòng)，但其可誘發(fā)患者體內(nèi)電解質(zhì)紊亂，并可能出現(xiàn)一定的不良反應(yīng)。有研究表明甘露醇易被腸道細(xì)菌降解產(chǎn)生酸性物質(zhì)和氣體[6]。因此不宜用于老年體弱者或需行腸道手術(shù)的患者。聚乙二醇電解質(zhì)口服溶液是以聚乙二醇為主要溶質(zhì)，并添加氯化鈉、硫酸鈉等多種鹽類。聚乙二醇分子量較大，可通過氫鍵結(jié)合較多的水分子，使水分大量聚集再腸道，有利于固體糞便的軟化及排出[7]。聚乙二醇化學(xué)穩(wěn)定性較好，不易被腸道細(xì)菌降解，同時(shí)氯化鈉等溶質(zhì)有利于維護(hù)患者體內(nèi)電解質(zhì)的平衡。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組的腸道清潔效果較好，這與已有研究一致[8]。已有研究發(fā)現(xiàn)聚乙二醇腸道清潔后患者腸腔仍存在一定量的氣泡，干擾醫(yī)師的觀察視野，影響鏡檢效果[9]。二甲基硅油可使腸腔內(nèi)氣泡破裂，進(jìn)而減少氣泡干擾，使內(nèi)鏡視野清晰。因此，觀察組在服用聚乙二醇電解質(zhì)口服溶液的基礎(chǔ)上給予二甲基硅油。林五連等[10]研究發(fā)現(xiàn)，78 例患者在腸道清潔過程中輔助服用二甲硅油，腸腔氣泡減少明顯，鏡檢視野較為清晰。本研究發(fā)現(xiàn)觀察組腸腔氣泡少于對(duì)照組，說(shuō)明該組清腸方案效果較好。

炎癥反應(yīng)異常與UC 發(fā)病密切相關(guān)，TNF-α、hs-CRP 是體內(nèi)促炎因子，IL-10 是抑炎因子，兩類炎癥因子分泌異?？杉又匮装Y反應(yīng)程度。有研究表明UC患者的血清中促炎因子TNF-α、hs-CRP 水平高于健康人群[11]。本研究UC 患者清腸后血清TNF-α、hs-CRP 水平低于清腸前，而IL-10 水平上升。同時(shí)觀察組的不良反應(yīng)下降，這可能是腸道清潔可有效清除腸道毒性物質(zhì)和細(xì)菌，同時(shí)增強(qiáng)血管通透性，并刺激腸道血液循環(huán)，減輕體內(nèi)炎癥反應(yīng)。IL-23 受體主要是位于外周血淋巴細(xì)胞膜表面，可傳遞相關(guān)炎癥因子信號(hào)激活T 淋巴細(xì)胞功能，抑制體內(nèi)hs-CRP 等促炎因子的表達(dá)。本研究發(fā)現(xiàn)，觀察組治療后IL-23 受體表達(dá)水平高于對(duì)照組，這提示觀察組的清腸方案有助于減輕患者體內(nèi)的炎癥反應(yīng)程度，但清腸方案在減輕炎癥反應(yīng)的具體機(jī)制仍需要進(jìn)一步探討。類似的研究顯示[12]，外源性給予IL-23 可迅速改善小鼠腸道受損的恢復(fù)情況。

綜上所述，聚乙二醇電解質(zhì)口服溶液聯(lián)合二甲基硅油清腸效果較好，抑制hs-CRP 的分泌，減輕UC 患者臨床癥狀。