竹節(jié)參皂苷類成分的研究

王 玎

（遼寧中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，遼寧 沈陽 110016）

竹節(jié)參為五加科人參屬植物竹節(jié)參Panax japonicusC．A．Mey的干燥根莖。性溫，味甘、微苦，具有滋補強壯，散瘀止痛，止血祛痰等功效?，F(xiàn)代研究表明，竹節(jié)參在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)，均表現(xiàn)出不同程度的藥理活性[1-2]。為進一步研究藥物有效成分，對中藥竹節(jié)參進行了提取、分離、純化，得到3個化合物，根據(jù)其理化性質(zhì)并綜合運用波譜技術(shù)，鑒定這3個化合物分別為人參皂苷-Rg2（1）、人參皂苷-Rh1（2）、人參皂苷-Rk3（3）。其中，化合物3為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

X-4顯微熔點測定儀（北京泰克公司）；Bruker-ARX-400 型核磁共振儀，Bruker AV-600 型核磁共振儀（瑞士Bruker公司）；D101大孔吸附樹脂（滄州寶恩公司）；Sephedex LH-20（瑞典Pharmacia Biotech公司）；Shimadzu LC-10ATvp 型分析型高效液相色譜儀；Shimadzu LC-8A 型制備型高效液相色譜儀（日本島津公司）；反相ODS填料（德國Merck公司）；柱色譜硅膠（青島海洋化工有限公司）；薄層色譜硅膠（青島海洋化工有限公司）。

1.2 試藥

分析純甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、氯仿，色譜純甲醇（北京化學(xué)試劑廠）；氘代試劑（美國CIL公司）。

2 分離

干燥竹節(jié)參根莖3 kg，切片，粉碎，用95 %乙醇 30 L冷浸提取3次，3次提取液分別濃縮后合并。依次用乙酸乙酯、正丁醇分別萃取3次，濃縮得到乙酸乙酯部位120 g，正丁醇部位144 g。取乙酸乙酯提取浸膏26 g，經(jīng)反復(fù)大孔吸附樹脂（乙醇-水系統(tǒng)洗脫）、硅膠柱色譜（氯仿-甲醇系統(tǒng)洗脫）、Sephadex LH-20柱色譜（甲醇-水系統(tǒng)洗脫）、制備HPLC（甲醇-水系統(tǒng)）進行分離純化，得到化合物1～3。

圖1 UPLC色譜圖

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末（甲醇），mp 187～189℃（EtOH）。1H-NMR（300 MHz，C5D5H）中，δH： 0.93（3H，s），0.95（3H，s），1.18（3H，s），1.34（3H，s），1.38（3H，s），1.62（3H，s），1.67（3H，s），2.13（3H，s）為8個角甲基單峰，1.78（3H，d，J=6.0 Hz）為鼠李糖特有的甲基信號。6.51（1H，br.s），5.28（1H，d，J=7.0 Hz）為兩個糖端基質(zhì)子信號，以及3.25（1H，m，H-3）推測為達瑪烷型三萜皂苷化合物。13C-NMR（75 MHz，C5D5N）譜中，δC：130.8，126.4為烯碳信號，而60.75（C-5）為原人參三醇型化合物的特征信號，δC：101.8，78.4，79.5，72.3，78.3，63.1為一組葡萄糖信號，δC：102.0，72.3，74.2，72.4，69.5，18.8為一組鼠李糖信號。1H-NMR（300 MHz，C5D5H），δH：0.93（3H， s），0.95（3H，s），1.18（3H，s），1.34（3H，s），1.38（3H，s），1.62（3H， s），1.67（3H，s），2.13（3H，s），1.78（3H，d，J=6.0 Hz），6.51（1H，br.s），5.28（1H，d，J=7.0 Hz），3.25（1H，m，H-3）?；衔?的碳信號數(shù)據(jù)如表1所示。其碳氫數(shù)據(jù)與文獻[3]報道一致，確定化合物1為人參皂苷-Rg2。

化合物2：白色粉末（甲醇），mp 199～201 ℃（EtOH）。1H-NMR （300 MHz， C5D5H）中，δH：0.83（3H，s），1.03（3H，s），1.19（3H，s），1.39（3H，s），1.58（3H，s），1.63（3H，s），1.66（3H，s），2.06（3H，s）為8個角甲基單峰，5.04（1H，d，J=7.5 Hz）為一個糖端基質(zhì)子信號，及3.54（1H，m，H-3）推測為達瑪烷型三萜皂苷化合物。13C-NMR（75 MHz，C5D5H）譜中，δC：130.8，126.0 為烯碳信號，而61.4（C-5）為原人參三醇型化合物的特征信號，δC：106.1，75.5，80.1，72.0，79.7，63.2為一組葡萄糖信號。1H-NMR（300 MHz， C5D5H），δH：0.83（3H，s），1.03（3H，s），1.19（3H，s），1.39（3H，s），1.58（3H，s），1.63（3H，s），1.66（3H，s），2.06（3H，s），5.04（1H，d，J=7.5 Hz），3.54（1H，m，H-3）。化合物2的碳信號數(shù)據(jù)如表1所示。其碳氫數(shù)據(jù)與文獻[4]報道一致，確定化合物2為人參皂苷-Rh1。

化合物3：無定形粉末（甲醇），mp 145～147℃（EtOH）。1H-NMR（300 MHz， C5D5H）中，δH： 0.82（3H，s），1.04（3H，s），1.23（3H，s），1.58（3H，s），1.61（3H，s），1.65（3H，s），2.09（3H，s）為7個角甲基單峰，4.89（1H，br.s，H-21a），5.27（1H，br.s，H-21b），5.58（1H，br.t，H-24）為雙鍵上氫信號，5.03（1H，d，J=7.8 Hz）為一個糖端基質(zhì)子信號，以及3.52（1H，m，H-3）推測為達瑪烷型三萜皂苷化合物。13C-NMR（75 MHz，C5D5H）譜中，δC：155.4，131.2，125.4，108.7為烯碳信號，而δC61.4（C-5）為原人參三醇型化合物的特征信號，δC：106.0，75.5，79.7，71.8，78.6，63.1為一組葡萄糖信號。1H-NMR（300 MHz，C5D5H），δH：0.82（3H，s），1.04（3H，s），1.23（3H，s），1.58（3H，s），1.61（3H，s），1.65（3H，s），2.09（3H，s），4.89（1H，br.s，H-21a），5.27（1H，br.s，H-21b），5.58（1H，br.t，H-24），5.03（1H，d，J=7.8 Hz），3.52（1H，m，H-3）?；衔?的碳信號數(shù)據(jù)如表1所示。其碳氫數(shù)據(jù)與文獻[5]報道一致，確定化合物3為人參皂苷-Rk3。

表1 化合物1-3的 13C-NMR 數(shù)據(jù) （C5D5N）