β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級(jí)的關(guān)聯(lián)性分析

韓 智 鋒

(鄭州美康盛德醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所 病理科 鄭州 450000)

腦膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性腫瘤疾病，作為常見的顱內(nèi)惡性腫瘤，明確診斷腫瘤惡性程度，并進(jìn)行病理分級(jí)，對(duì)患者的臨床治療有積極的影響作用。Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對(duì)腫瘤細(xì)胞分化、轉(zhuǎn)移與增殖等有重要作用，且β-catenin通路對(duì)腫瘤的形成有影響[2]。因此，本研究以采取體檢的健康人群與腦膠質(zhì)瘤患者為觀察對(duì)象，檢測(cè)兩者的β-catenin與B7-H3蛋白表達(dá)水平，分析β-catenin與B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)患者病理分級(jí)的相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1 基本資料

研究將2015年1月～2018年1月進(jìn)行正常體檢的健康者和腦膠質(zhì)瘤患者作為觀察對(duì)象，并對(duì)其進(jìn)行分組，各45例。其中，A組男25例，女20例；年齡31～65歲，平均年齡(46.8±6.2)歲。B組男27例，女18例；年齡32～67歲，平均年齡(47.2±6.1)歲。研究納入的患者均確診為腦膠質(zhì)瘤，所有患者都符合相關(guān)醫(yī)學(xué)倫理審核條件，并對(duì)研究?jī)?nèi)容知情；排除合并有嚴(yán)重的心、腎、肝功能不全或有其他惡性腫瘤疾病者。

1.2 方法

B7-H3檢測(cè)：將石蠟樣本置入56℃培養(yǎng)箱中融蠟1h后，將融蠟后標(biāo)本放入二甲苯溶液中脫蠟3次，5min/次，選取從高而低濃度的乙醇進(jìn)行清洗，將其置入5min后，再采用PBS法清洗。將玻片放進(jìn)抗原修復(fù)液中使用高壓煮沸并直至完全冷卻后進(jìn)行PBS清洗，再將3%過氧化氫滴入樣本表面，在室溫條件下孵育15min，PBS清洗3min后再清除PBS，在37℃BAS培養(yǎng)箱中封閉1h除去封閉液，加入稀釋一抗放入4℃保濕水槽中，并在次日進(jìn)行3次PBS清洗，每次5min。再進(jìn)行稀釋二抗，在37℃下孵育半小時(shí)，并采取PBS清洗，5min/次，清洗3次。最后，滴入DAB染液，在5℃～15℃室溫條件下使用顯微鏡觀察顯色。β-catenin檢測(cè)：采用免疫組化法檢測(cè)β-catenin水平，采用S-P法染色(萊爾生物公司S-P試劑盒)，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行操作，使用免疫組化光鏡分析，由兩名以上醫(yī)師在雙盲的條件下進(jìn)行雙評(píng)分半定量法測(cè)評(píng)，獲取檢測(cè)數(shù)據(jù)。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察、記錄兩組研究對(duì)象的B7-H3、β-catenin水平，并對(duì)其與腦膠質(zhì)瘤患者的病理分級(jí)相關(guān)性進(jìn)行分析。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象B7-H3、β-catenin陽(yáng)性表達(dá)率比較

B組β-catenin、B7-H3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯A組，兩組對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組研究對(duì)象B7-H3、β-catenin陽(yáng)性表達(dá)率對(duì)比[n(%)]

組別例數(shù)B7-H3β-catenin陽(yáng)性陽(yáng)性A組458(17.8)0(0.0)B組4529(64.4)36(80.0)χ220.2460.00P0.000.00

2.2 B組患者β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級(jí)相關(guān)性

β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與高、低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤患者病理分級(jí)有直接關(guān)聯(lián)，且高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤患者β-catenin、B7-H3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤患者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

3 討論

腦膠質(zhì)瘤作為顱內(nèi)腫瘤疾病中比較常見的病癥類型，是一種發(fā)病率較高的惡性腫瘤，一般情況下，患者經(jīng)臨床治療后，生存期通常不超過1年時(shí)間[3]。因此，針對(duì)腦膠質(zhì)瘤的危害性，盡早選取科學(xué)、有效的治療方式，以免病情繼續(xù)惡化，以維持患者的生命，是臨床治療的關(guān)鍵。有相關(guān)的研究認(rèn)為β-

表2 B組患者β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者病理分級(jí)相關(guān)性[n(%)]

病理分級(jí)例數(shù)B7-H3蛋白陽(yáng)性表達(dá)率β-catenin陽(yáng)性表達(dá)率低級(jí)別腦膠質(zhì)瘤2214(63.6)9(40.9)高級(jí)別腦膠質(zhì)瘤2322(95.7)20(87.0)χ27.2010.41P0.010.00

catenin作為絲蘇氨酸蛋白酶(PKC)磷酸化底物，可通過β-catenin信號(hào)通路抑制腫瘤細(xì)胞增殖[4]。因此，腦膠質(zhì)瘤的形成與β-catenin存在相應(yīng)的關(guān)聯(lián)性。

此次研究以健康體檢者和腦膠質(zhì)瘤患者為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，通過檢測(cè)其β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)水平，分析腦膠質(zhì)瘤患者的病理分級(jí)與β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)間的相關(guān)性。研究結(jié)果顯示腦膠質(zhì)瘤患者β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)陽(yáng)性率明顯高于健康體檢者，且兩者在腦膠質(zhì)瘤組織中呈異常高表達(dá)狀態(tài)，表明β-catenin、B7-H3蛋白表達(dá)與腦膠質(zhì)瘤患者的病理分級(jí)存在直接關(guān)聯(lián)。體檢結(jié)果顯示健康的A組患者β-catenin陽(yáng)性率為0.0%，腦膠質(zhì)瘤患者的β-catenin陽(yáng)性率則高達(dá)80.0%，表示β-catenin蛋白在正常腦組織無表達(dá)，而膠質(zhì)瘤惡性程度的增加，β-catenin蛋白表達(dá)水平會(huì)不斷上升，說明β-catenin進(jìn)入核內(nèi)，會(huì)促使膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖，從而反映出膠質(zhì)瘤惡性程度與病理分級(jí)狀況[5]。B7-H3作為促使腫瘤免疫逃逸的重要負(fù)性B7家族分子，在眾多腫瘤組織中，諸如腦膠質(zhì)瘤中表現(xiàn)為異常表達(dá)，且B7-H3對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲與轉(zhuǎn)移有重要的調(diào)控作用[6]。因此，本次研究顯示B7-H3蛋白在高、低級(jí)腦膠質(zhì)瘤中的陽(yáng)性表達(dá)率都高于β-catenin蛋白陽(yáng)性表達(dá)率。

綜上所述，腦膠質(zhì)瘤患者的B7-H3、β-catenin蛋白表達(dá)呈異常高狀態(tài)，對(duì)腦膠質(zhì)瘤患者病理分級(jí)有重要影響。