前列腺癌組織中環(huán)氧化酶-2 和細(xì)胞周期蛋白D1 的表達(dá)水平及臨床意義

程肇平，程鈺，盧柳

安康市中心醫(yī)院病理科，陜西 安康7250000

前列腺癌是臨床上常見(jiàn)的男性惡性腫瘤，多見(jiàn)于70～80 歲老年男性，由于人口老齡化加劇，前列腺癌在中國(guó)的發(fā)病率逐年升高，嚴(yán)重威脅男性的生命健康[1-3]。為了解前列腺癌的生物學(xué)行為，目前醫(yī)學(xué)工作者在不斷尋找前列腺癌發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制[4]。本研究比較了前列腺癌組織和前列腺增生組織中環(huán)氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）和細(xì)胞周期蛋白D1（cyclin D1）的表達(dá)情況，并分析不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 和cyclin D1 的表達(dá)情況，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015 年4 月至2018 年10 月安康市中心醫(yī)院收治的前列腺癌患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①接受手術(shù)治療；②經(jīng)病理檢查確診為前列腺癌；③手術(shù)前未接受相關(guān)內(nèi)分泌治療、放療或化療。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤；②未能耐受或完成手術(shù)；③合并嚴(yán)重的心血管系統(tǒng)疾病。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入47 例前列腺癌患者。患者的年齡為58～83 歲，平均年齡為（73.97±7.34）歲；術(shù)前血清前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平為（42.73±12.55）ng/m；依據(jù)Gleason 病理分級(jí)系統(tǒng)[5]，7 分以上（低分化腺癌）19 例，7 分（中分化腺癌）16 例，4～6 分（高分化腺癌）12 例；依據(jù)Whitmore-Jewett 分期標(biāo)準(zhǔn)[6]，A 期7 例，B 期14 例，C期16 例，D 期10 例。另 選擇2015 年4 月至2018 年10 月安康市中心醫(yī)院收治的前列腺增生患者。納入標(biāo)準(zhǔn)：①接受手術(shù)治療；②經(jīng)病理檢查確診為前列腺增生；③術(shù)前未行抗前列腺增生治療；④無(wú)腫瘤病史及家族史。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他前列腺病變；②未能完成全系統(tǒng)前列腺增生治療。依據(jù)納入和排除標(biāo)準(zhǔn)，本研究共納入31 例前列腺增生患者?；颊叩哪挲g為57～81 歲，平均年齡為（71.55±6.95）歲；術(shù)前血清PSA 水平為（1.72±0.23）ng/ml。兩組患者的年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。分別收集前列腺癌患者和前列腺增生患者的前列腺癌組織47 例和前列腺增生組織31 例。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 主要試劑 鼠抗人COX-2 和cyclin D1 單克隆抗體及鏈菌素-生物素標(biāo)記（labeled streptavidin biotin，LSAB）免疫組化試劑盒均購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，均為即用型。

1.2.2 免疫組織化學(xué)染色方法 采用微波-EliVi‐sionTM（MW-EliVisionTM）免疫組織化學(xué)染色方法[7]檢測(cè)前列腺癌組織和前列腺增生組織中COX-2 和cyclin D1 的表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)步驟按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，采用H2O2-二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzi‐dine，DAB）顯色[8]。采用已知COX-2 和cyclin D1陽(yáng)性的前列腺癌組織作為陽(yáng)性對(duì)照，采用枸櫞酸緩沖液代替一抗工作液作為陰性對(duì)照。

1.2.3 結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn) COX-2 和cyclin D1 陽(yáng)性均為棕黃色，COX-2 在細(xì)胞質(zhì)中表達(dá)，cyclin D1 在細(xì)胞核中表達(dá)[9-10]。每張切片隨機(jī)選取10 個(gè)高倍視野，計(jì)算陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)。無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞為（-），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＜25%為弱陽(yáng)性（+），25%≤陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)≤50%為中等陽(yáng)性（++），陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)＞50%為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。陽(yáng)性表達(dá)率=（中等陽(yáng)性+強(qiáng)陽(yáng)性）例數(shù)/總例數(shù)×100%。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 18.0 軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)及率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，等級(jí)資料的比較采用秩和檢驗(yàn)。以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 前列腺癌組織與前列腺增生組織中COX-2 和cyclin D1 表達(dá)情況的比較

前列腺癌組織中COX-2 的陽(yáng)性表達(dá)率為80.85%（38/47），明顯高于前列腺增生組織的16.13%（5/31），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=31.632，P＜0.01）。前列腺癌組織中cyclin D1 的陽(yáng)性表達(dá)率為61.70%（29/47），明顯高于前列腺增生組織的19.35%（6/31），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=13.542，P＜0.01）。（表1、表2）

表1 前列腺癌組織與前列腺增生組織中COX-2的表達(dá)情況

表2 前列腺癌組織與前列腺增生組織中cyclin D1 的表達(dá)情況

2.2 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 表達(dá)情況的比較

不同年齡、腫瘤直徑前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 的陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同分化程度、臨床分期、轉(zhuǎn)移情況前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 的陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表3）

表3 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2表達(dá)情況的比較（n=47）

2.3 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中cyclin D1 表達(dá)情況的比較

不同年齡前列腺癌患者前列腺癌組織中cy‐clin D1 的表達(dá)情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。不同腫瘤直徑、分化程度、臨床分期、轉(zhuǎn)移情況前列腺癌患者前列腺癌組織中cyclin D1 的表達(dá)情況比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表4）

表4 不同臨床特征前列腺癌患者前列腺癌組織中cyclin D1表達(dá)情況的比較（n=47）

3 討論

前列腺癌是發(fā)生于前列腺的上皮性惡性腫瘤，包括腺癌（腺泡腺癌）、導(dǎo)管腺癌、尿路上皮癌、鱗狀細(xì)胞癌和腺鱗癌等類(lèi)型，絕大部分為腺癌[11-12]。本病起病隱匿，早期無(wú)明顯癥狀，隨著腫瘤發(fā)展，可表現(xiàn)為進(jìn)行性排尿困難、尿頻、尿急、尿失禁等，侵及膀胱可出現(xiàn)血尿，骨轉(zhuǎn)移可引起病理性骨折、截癱等。前列腺癌的治療方法主要包括手術(shù)、內(nèi)分泌治療、放化療等，但本病起病隱匿，發(fā)病時(shí)多為晚期。近年來(lái)有研究表明，COX-2 和cyclin D1在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展中具有重要作用，為臨床治療前列腺癌帶來(lái)了新的方向[13]。

本研究結(jié)果顯示，COX-2 和cyclin D1 在前列腺癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為80.85%、61.70%，分別明顯高于前列腺增生組織的16.13%、19.35%，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。表明COX-2 和cyclin D1 的表達(dá)情況均與前列腺癌的發(fā)生具有密切聯(lián)系。不同年齡、腫瘤直徑前列腺癌患者前列腺癌組織中COX-2 的陽(yáng)性表達(dá)率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。低分化、臨床分期為C～D期、腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移患者的COX-2 陽(yáng)性表達(dá)率分別為94.74%、92.31%、95.00%，腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移、分化程度越低、臨床分期越晚，COX-2 的陽(yáng)性表達(dá)率越高。不同年齡前列腺癌患者前列腺癌組織中cy‐clin D1 的表達(dá)情況比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。腫瘤直徑≥5 cm、低分化、臨床分期為C～D期、腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移患者的cyclin D1 陽(yáng)性表達(dá)率分別為76.00%、89.47%、84.62%、85.00%，腫瘤出現(xiàn)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑越大、分化程度越低、臨床分期越晚，cyclin D1 的陽(yáng)性表達(dá)率越高。表明前列腺癌的惡性程度越高，COX-2 和cyclin D1 的表達(dá)水平越高，提示在前列腺癌的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中，COX-2 和cy‐clin D1 具有協(xié)同作用。

環(huán)氧化酶（cyclooxygenase，COX）又稱(chēng)前列腺素內(nèi)氧化酶還原酶，可促進(jìn)前列腺素生成，具有參與炎癥反應(yīng)的作用，COX 有兩種同工酶COX-1 和COX-2，COX-2 定位于核膜，其產(chǎn)物可進(jìn)入核內(nèi)，對(duì)靶細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)錄具有調(diào)節(jié)作用，具有抑制免疫反應(yīng)、促進(jìn)腫瘤血管生成及抑制腫瘤細(xì)胞凋亡等作用[14]。因此，COX-2 水平升高時(shí)，機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞的免疫力下降，而腫瘤血管增多、腫瘤細(xì)胞凋亡減緩更容易促進(jìn)腫瘤組織的發(fā)展[15]。研究顯示，在前列腺癌組織中可檢測(cè)出COX-2 高表達(dá)，且惡性程度越高其表達(dá)水平越高，反映了COX-2 對(duì)前列腺癌的發(fā)展具有促進(jìn)作用[16]，與本研究結(jié)果一致。cyclin D1 是調(diào)控細(xì)胞進(jìn)行分裂增殖的蛋白，在細(xì)胞分裂由G1期進(jìn)入S 期的過(guò)程中具有重要作用，其表達(dá)異常會(huì)引起細(xì)胞周期調(diào)節(jié)失控，細(xì)胞增殖發(fā)生異常。因此當(dāng)cyclin D1 過(guò)度表達(dá)時(shí)，前列腺細(xì)胞不斷由G1期進(jìn)入S 期，發(fā)展為癌，前列腺癌細(xì)胞不斷增殖，進(jìn)一步促使腫瘤組織發(fā)展、惡化[17]。

綜上所述，前列腺癌患者中COX-2 和cyclin D1的表達(dá)水平相對(duì)較高，COX-2 和cyclin D1 可能參與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展。