牛布氏桿菌病鑒別診斷與預(yù)防

王世有

河南省南陽(yáng)市臥龍區(qū)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，河南南陽(yáng)473000

布氏桿菌病是一種主要侵害牛、豬、綿羊、山羊和犬的接觸性傳染病，病原為布氏菌屬的一些成員。牛布氏桿菌病的特征為母牛流產(chǎn)，還可表現(xiàn)為公牛的睪丸炎或副性腺感染，該病在世界上大多數(shù)養(yǎng)牛國(guó)家和地區(qū)都有流行。下面筆者就牛布氏桿菌病的病原學(xué)、流行病學(xué)、臨床癥狀、鑒別診斷和預(yù)防措施進(jìn)行介紹，旨在為牛布氏桿菌病的綜合預(yù)防提供參考。

1 病原學(xué)

布氏桿菌屬包含有6 個(gè)成員，它們是：流產(chǎn)布氏桿菌、馬爾他布氏桿菌、豬布氏桿菌、森林鼠型布氏布桿菌、綿羊附睪型布氏桿菌和犬型布氏桿菌。牛布氏桿菌病由流產(chǎn)布氏桿菌感染引起，有時(shí)與豬布氏桿菌、馬爾他布氏桿菌也有關(guān)。這6 種布氏桿菌的同源性非常高，但與其他種屬間的同源性較差。流產(chǎn)布氏桿菌有5 個(gè)亞型，在顯微鏡下觀察，其是一種較小、革蘭氏染色呈陰性的桿菌或球桿菌，常呈單個(gè)分布。不同來源的菌株大小變化很大，但一般都在（0.4～0.8）μm×（0.6～3.0）μm 之間。

2 流行病學(xué)

未經(jīng)免疫的牛群，本病的傳播很快并引起大批流產(chǎn)。布氏桿菌病的潛伏期通常為14～180 d，多數(shù)情況下為30 d[1]。通常在本病流行的牧場(chǎng)，感染后僅出現(xiàn)1 次流產(chǎn)，以后的妊娠和泌乳都表現(xiàn)正常。許多牛在感染后出現(xiàn)短時(shí)期的菌血癥，并產(chǎn)生凝集素和其他抗體，其余絕大多數(shù)?？赡褪芨腥?，少數(shù)感染牛能夠康復(fù)。通常在流產(chǎn)以前可出現(xiàn)血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性，但有些感染?？赡茉诹鳟a(chǎn)后出現(xiàn)。病牛經(jīng)奶和子宮排泄物向外排菌，并且造成暫時(shí)性不孕。在妊娠期和子宮復(fù)位期，可在子宮內(nèi)分離到該病菌，少數(shù)情況下，未妊娠子宮也可長(zhǎng)時(shí)間帶菌。有些曾經(jīng)流產(chǎn)的感染牛在以后的正常分娩時(shí)也能從子宮向外排菌。

自然條件下，牛布氏桿菌可經(jīng)消化道傳播。在流產(chǎn)的胎兒、胎膜和子宮排泄物中含有大量細(xì)菌，牛食入后可造成感染。還可以通過食入污染的飼料及飲水或舔其它牛帶菌的生殖器而感染。感染的公?？赏ㄟ^性交傳染給敏感的母牛，但這種情況比較少見。人工授精可傳播本病，但只有將布氏桿菌污染的精液輸入子宮才能造成感染，而輸入子宮頸中部不會(huì)引起感染。布氏桿菌可經(jīng)黏膜、結(jié)膜、傷口甚至完好的皮膚進(jìn)入體內(nèi)。

3 臨床癥狀

牛感染布氏桿菌病在早期無明顯癥狀，不容易被人們所察覺，當(dāng)病情發(fā)展到一定階段時(shí)，病牛的生殖系統(tǒng)會(huì)受到嚴(yán)重的損害[2]。牛布氏桿菌的臨床最明顯的癥狀為流產(chǎn)，另外還可引起死產(chǎn)、胎衣不下和產(chǎn)奶量下降，若流產(chǎn)后無并發(fā)癥則一般不影響奶牛的健康狀況。細(xì)菌可感染公牛的精囊、壺腹部、睪丸和附睪，因此，病牛的精液中存在該菌，從感染牛的精清中可查到凝集素。公牛感染后還可發(fā)生睪丸膿腫。

4 鑒別診斷

本病可以根據(jù)細(xì)菌分離和血清學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行診斷。從胎盤可以分離到流產(chǎn)布氏桿菌，從流產(chǎn)胎兒的胃和肺更容易分離到很純的細(xì)菌。子宮復(fù)位后多數(shù)母牛不經(jīng)生殖道向外排菌，但網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)和乳房仍存在感染灶，從牛乳及非泌乳乳房的分泌物中?？煞蛛x到流產(chǎn)布氏桿菌。

血清凝集試驗(yàn)作為一種標(biāo)準(zhǔn)的診斷方法，也可用于檢測(cè)牛奶、乳清和血漿中的抗體。最近有人采用ELISA 方法檢測(cè)乳汁和血清中的抗體及陰道排泄物中的布氏桿菌抗原。檢測(cè)陰道黏液中的布氏桿菌凝集素也具有診斷意義。平板或試管血清凝集試驗(yàn)的判定標(biāo)準(zhǔn)是：對(duì)未經(jīng)免疫的牛，完全凝集價(jià)在1∶100 或更高時(shí)為陽(yáng)性，3～9月齡免疫過的牛，1∶200或更高時(shí)判為陽(yáng)性。

5 預(yù)防措施

5.1 檢測(cè)預(yù)防

目前牛布氏桿菌乳環(huán)試驗(yàn)（BRT）和市場(chǎng)檢驗(yàn)（MCT）是建立和保持無布氏桿菌病地區(qū)的有效而經(jīng)濟(jì)的方法。BRT 是檢測(cè)牛奶中凝集素的簡(jiǎn)便、快速、比較準(zhǔn)確的方法[3]。在某個(gè)地區(qū)內(nèi)控制和消滅牛布氏桿菌病，BRT 是一種有效的方法。對(duì)某一牛場(chǎng)的奶牛間隔3～4 個(gè)月進(jìn)行1 次BRT 可以監(jiān)測(cè)布氏桿菌病的發(fā)病情況。首先采集某一牛場(chǎng)的奶樣，可以在牛場(chǎng)采集，也可以在牛奶加工廠或乳品店收集，然后混合并作BRT。對(duì)BRT 陽(yáng)性場(chǎng)的牛逐個(gè)進(jìn)行血液檢查，屠宰陽(yáng)性牛。在一個(gè)地區(qū)進(jìn)行BRT 的花費(fèi)只是血清學(xué)檢測(cè)的10%左右，而兩者在降低牛群感染率方面具有同樣的效果。

市場(chǎng)檢驗(yàn)（MCT）是對(duì)非泌乳牛場(chǎng)布氏桿菌病的檢疫，可以在交易市場(chǎng)或屠宰場(chǎng)采血后進(jìn)行。檢查陽(yáng)性牛的來源，并對(duì)該場(chǎng)所有牛只進(jìn)行檢查。這樣就不必對(duì)所有牛場(chǎng)進(jìn)行檢查，費(fèi)用也就大大降低。其他檢測(cè)方法，如卡片試驗(yàn)和平板試驗(yàn)，可以用來確定假性感染牛，這樣可以降低診斷費(fèi)用。

如果使用上述2 種標(biāo)準(zhǔn)方法仍不能消滅布氏桿菌病，可以再進(jìn)行附加試驗(yàn)。在作為疫源地的牛場(chǎng)，應(yīng)用一整套檢驗(yàn)方法可提高檢出率，特別是對(duì)免疫牛群還可用于進(jìn)一步鑒定平板試驗(yàn)或紙片試驗(yàn)的結(jié)果。這些方法（包括補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和利凡諾沉淀試驗(yàn)）主要用來檢測(cè)牛布氏桿菌特異性抗體。

5.2 引種管理

加強(qiáng)牛場(chǎng)的引種管理，在未感染的牛場(chǎng)必須小心，最危險(xiǎn)的就是引入新牛。最好是引入經(jīng)過免疫的犢?；蛭磻言械男∧概?。如果必須引入懷孕?；虍a(chǎn)后母牛，則應(yīng)從無布氏桿菌病的地區(qū)或牛場(chǎng)購(gòu)買并且血清學(xué)檢驗(yàn)為陰性。新購(gòu)入的牛應(yīng)隔離觀察30 d 以上，在混群前再進(jìn)行1 次檢驗(yàn)。

5.3 疫苗預(yù)防

目前，適用的牛布氏桿菌苗種類較多，免疫效果最佳是流產(chǎn)布氏桿菌19 株菌苗[4]，使用流產(chǎn)布氏桿菌19 株免疫犢?？商岣呖垢腥灸芰?。但這種抵抗力是不完全的，有些牛仍會(huì)遭受感染，這與感染程度有關(guān)。少部分牛經(jīng)免疫后產(chǎn)生的抗體可持續(xù)幾年，對(duì)該病的診斷有影響。為減少這種影響，建議牛場(chǎng)可以給犢牛使用一種菌苗，這種菌苗含30～100億活流產(chǎn)布氏桿菌19 株/2 rnL（頭份）。

流產(chǎn)布氏菌素45/20 佐劑苗也可用于免疫，該疫苗已在很多牛場(chǎng)中應(yīng)用。45/20 苗可以產(chǎn)生與19株相似的免疫力，其用法是先進(jìn)行2 次注射，間隔一定時(shí)間，然后每年加強(qiáng)免疫1 次。其優(yōu)點(diǎn)是用疫苗免疫后很少出現(xiàn)血清凝集試驗(yàn)陽(yáng)性，缺點(diǎn)是需要反復(fù)注射，疫苗和勞動(dòng)力費(fèi)用增加，并且在注射部位有局部反應(yīng)。