在中醫(yī)腫瘤學(xué)基礎(chǔ)研究中運(yùn)用系統(tǒng)生物學(xué)方法的芻議

王院春， 吳勉華， 惠建榮， 王希勝， 朱葉萍

1.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210023；2.陜西中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院，陜西 咸陽(yáng) 712000

在20世紀(jì)生物醫(yī)學(xué)取得巨大成就的背景下，美國(guó)科學(xué)院院士Leroy Hood[1]于1999年提出“系統(tǒng)生物學(xué)”的概念，并于2000年創(chuàng)立了第一個(gè)系統(tǒng)生物學(xué)研究所，他把這一學(xué)科描述為“研究一個(gè)生物系統(tǒng)中所有組成要素(如基因、mRNA、蛋白質(zhì)及代謝產(chǎn)物等）的構(gòu)成，以及在特定干擾條件下，如遺傳、環(huán)境等因素改變時(shí)，所有要素之間相互關(guān)系的學(xué)科”[2，3]。系統(tǒng)生物學(xué)不是研究單個(gè)基因或蛋白質(zhì)，而是利用高通量基因組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)等平臺(tái)，引入計(jì)算機(jī)科學(xué)、數(shù)學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)等方法，研究生物系統(tǒng)在遺傳或環(huán)境等因素的干擾下，基因組、蛋白質(zhì)組等各要素和他們之間關(guān)系的變化，同時(shí)，將這種變化的信息整合起來(lái)，建立以數(shù)學(xué)或圖畫(huà)來(lái)描述生物系統(tǒng)各要素及其關(guān)系的模型，從整體上幫助人們理解生命的邏輯和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的秘密。系統(tǒng)生物學(xué)的核心特質(zhì)是多變量的整合，力圖實(shí)現(xiàn)不同干擾條件下對(duì)生物體從基因到細(xì)胞、組織、個(gè)體的多層次研究，從整體上解析生物系統(tǒng)的本質(zhì)規(guī)律。中醫(yī)學(xué)也是從先天、環(huán)境及社會(huì)等整體上研究人體和疾病，以聯(lián)系的、運(yùn)動(dòng)的觀點(diǎn)分析健康和疾病，辨證論治，與系統(tǒng)生物學(xué)在思維上有“異曲同工”之處[4]。有學(xué)者認(rèn)為系統(tǒng)生物學(xué)的理念和方法可助力中醫(yī)藥學(xué)的研究發(fā)展，已有不少學(xué)者在此領(lǐng)域取得一定成果[5-7]。中醫(yī)腫瘤學(xué)是中醫(yī)理論指導(dǎo)下，研究人類腫瘤，特別是惡性腫瘤類疾病的流行特點(diǎn)、學(xué)術(shù)沿革、病因病機(jī)、臨床表現(xiàn)、診斷規(guī)律、辨證論治體系及預(yù)防康復(fù)等科學(xué)的一門(mén)臨床學(xué)科[8]。相較于中醫(yī)其它臨床學(xué)科和現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的腫瘤學(xué)科，中醫(yī)腫瘤學(xué)雖已具備理論體系、學(xué)術(shù)特征和診治技術(shù)，但在醫(yī)學(xué)日新月異的當(dāng)下，其學(xué)術(shù)體系仍需不斷完善，方法技術(shù)也需創(chuàng)新發(fā)展，筆者基于系統(tǒng)生物學(xué)思想與方法之考量，在中醫(yī)腫瘤學(xué)發(fā)展方面略有淺識(shí)，茲述于下。

1 中醫(yī)腫瘤學(xué)概況

1.1 發(fā)展歷史概述

國(guó)醫(yī)大師周岱翰認(rèn)為中醫(yī)腫瘤學(xué)是一門(mén)“古老”而又“年輕”的中醫(yī)臨床分科[8]。隋唐以前是中醫(yī)腫瘤學(xué)的奠基時(shí)期。甲骨文中即有“瘤”之記載，《山海經(jīng)》記載有治療“惡瘡、癭瘤、噎食”等類似腫瘤疾病的藥物，《黃帝內(nèi)經(jīng)》奠定了中醫(yī)學(xué)的基本理論，也奠定了中醫(yī)腫瘤學(xué)形成與發(fā)展的基礎(chǔ)，《難經(jīng)》區(qū)分了“積”和“聚”，并對(duì)“五臟之積”的特點(diǎn)進(jìn)行描述，《本經(jīng)》記載治療“癥瘕、惡瘡、癭瘤”等抗癌中藥并沿用至今；《傷寒雜病論》創(chuàng)“六經(jīng)”辨證體系、方證體系和抗癌方藥，至今仍有鱉甲煎丸、大黃?蟲(chóng)丸等許多方劑應(yīng)用于腫瘤臨床[9]；《諸病源候論》最早將癥瘕單獨(dú)作為一類疾病設(shè)專候論述，并重視脾胃功能，注意顧護(hù)正氣，為現(xiàn)代中醫(yī)診治提供了寶貴經(jīng)驗(yàn)[10]。宋金元時(shí)期是中醫(yī)腫瘤學(xué)的全面發(fā)展時(shí)期[11]。這一時(shí)期病名、病因、發(fā)病、病機(jī)、證治、預(yù)防都有了新的發(fā)展，如提出了“癌”的概念，并認(rèn)為“毒根深藏”是其形成的主要原因；病因?qū)W說(shuō)注意到“情志”因素，辨證論治逐漸形成；有官修方書(shū)載有大量方藥，至今仍為腫瘤臨床組方的參考；在治療原則方面，易水學(xué)派、補(bǔ)土派強(qiáng)調(diào)養(yǎng)正，提出“養(yǎng)正積自除”的觀點(diǎn)，攻邪派強(qiáng)調(diào)“達(dá)”“發(fā)”“奪”“泄”“折”五法，滋陰派推崇從痰論治等。明清時(shí)期是中醫(yī)腫瘤學(xué)的成熟時(shí)期[12]。此時(shí)中醫(yī)腫瘤學(xué)從病因病機(jī)、診斷鑒別、治則方藥、技術(shù)手段等均已形成體系，許多醫(yī)家在其專著中多有論述，如《外科正宗》等外科專著注重內(nèi)外合治，已初具綜合治療的思想，《醫(yī)宗必讀》提出“初、中、末三法”分期論治，并明確攻補(bǔ)兼施用于治療各類腫瘤，成為現(xiàn)今中醫(yī)腫瘤學(xué)重要的理論和實(shí)踐淵源。晚清以來(lái)，是中醫(yī)腫瘤學(xué)的現(xiàn)代化時(shí)期。如同中醫(yī)學(xué)一樣，中醫(yī)腫瘤學(xué)經(jīng)歷了近代以來(lái)的百年滄桑，但西學(xué)東漸也給中醫(yī)腫瘤學(xué)注入新的血液。新中國(guó)成立以來(lái)，中醫(yī)腫瘤學(xué)經(jīng)歷了五六十年代的總結(jié)凝練、七八十年代的“減毒增效”，進(jìn)入上世紀(jì)90年代，中醫(yī)腫瘤學(xué)逐漸具備了相對(duì)完整的現(xiàn)代學(xué)術(shù)體系、人才隊(duì)伍和臨床分科的實(shí)踐基礎(chǔ)，從中醫(yī)內(nèi)、外、婦、兒等學(xué)科中脫穎而出，成為現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)體系中一門(mén)獨(dú)立的臨床學(xué)科，結(jié)合現(xiàn)代科技，走上快速的現(xiàn)代化道路。曰其“古老”，確系歷史悠久，源遠(yuǎn)流長(zhǎng)；曰其“年輕”，實(shí)因規(guī)矩方才，宏途肇啟。

1.2 優(yōu)勢(shì)、特色與局限

中醫(yī)腫瘤學(xué)具有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)和鮮明特色，在當(dāng)前腫瘤治療研究中具有不可替代的地位[8]。首先，整體觀念，強(qiáng)調(diào)人體自身、人與自然、人與社會(huì)均是不同層次的“整體”，發(fā)生腫瘤均是由于不同層次“統(tǒng)一性”的破壞，如人體局部發(fā)生腫瘤是因?yàn)槿黻庩?yáng)失衡，人與自然不相和諧會(huì)導(dǎo)致人群腫瘤患病率的升高，不同社會(huì)環(huán)境中人群腫瘤發(fā)病率也不同，在預(yù)防、治療腫瘤時(shí)從整體出發(fā)，注重聯(lián)系，調(diào)整、恢復(fù)整體的穩(wěn)態(tài)或平衡。其次，辨證論治強(qiáng)調(diào)個(gè)體化、個(gè)性化治療，主張“因人、因時(shí)、因地”制宜，需根據(jù)患者的性別、年齡、體質(zhì)等特點(diǎn)，結(jié)合季節(jié)、時(shí)令、地域、氣候等各種特定條件確定治療原則；還需根據(jù)腫瘤的類型、分期、證候等特點(diǎn)制定相應(yīng)的治法、方劑和藥物；近年還有結(jié)合現(xiàn)代影像、組織類型、分子檢測(cè)等手段確定優(yōu)勢(shì)人群及選擇特異方藥等方法，也是辨證論治的具體體現(xiàn)。再者，中醫(yī)腫瘤學(xué)具有以人為本的特色。診斷辨證注重正氣，強(qiáng)調(diào)“正氣存內(nèi)、邪不可干”，“治病”與“治人”緊密結(jié)合；療效評(píng)價(jià)首先考慮人的生存狀態(tài)和適應(yīng)能力，如生活質(zhì)量、生存期、心理健康等；在診療過(guò)程中注重醫(yī)患之間的信息溝通，采用“望聞問(wèn)切”等傳統(tǒng)方法診察疾病，通過(guò)藥物、針灸、推拿、導(dǎo)引等方法治療疾病，診療過(guò)程中充分調(diào)動(dòng)患者的主體能動(dòng)性，同時(shí)將醫(yī)者的治療目的、信息和能量傳遞給患者，這在針刺補(bǔ)瀉中尤為突出。第四，道法自然的認(rèn)識(shí)論強(qiáng)調(diào)世間萬(wàn)物都有其客觀規(guī)律，認(rèn)識(shí)生命和腫瘤都要遵循自然規(guī)律，以自然之理可以闡發(fā)生命和腫瘤的奧秘；由此而形成的“順勢(shì)思維”方法論強(qiáng)調(diào)在治療腫瘤時(shí)要遵循邪正盛衰，順勢(shì)而為，如早期腫瘤，正氣強(qiáng)盛，邪氣尚弱，可強(qiáng)攻邪氣，邪去正安；而晚期腫瘤，正氣大虧，邪氣鴟張，則需補(bǔ)養(yǎng)正氣，扶正祛邪；又如，肝氣以條達(dá)為補(bǔ)，胃氣以和降為補(bǔ)，均需順勢(shì)而為[13]。

當(dāng)然，事物總有其發(fā)展的局限性，中醫(yī)腫瘤學(xué)也不例外。例如，中醫(yī)腫瘤學(xué)的基礎(chǔ)理論和經(jīng)驗(yàn)方法均脫胎于中醫(yī)基礎(chǔ)及臨床各科，理論的系統(tǒng)性有待完善[8]，解釋實(shí)踐相對(duì)充分，但對(duì)具體實(shí)踐的指導(dǎo)性有待加強(qiáng)；理論或經(jīng)驗(yàn)方法多為定性，定量不足，精準(zhǔn)不夠[14]，缺乏用現(xiàn)代科學(xué)語(yǔ)言如數(shù)據(jù)等描述界定的標(biāo)準(zhǔn)，可操作性還需提高；臨床診療多為經(jīng)驗(yàn)性，普遍接受或適用的規(guī)范體系尚未形成，包括療效評(píng)價(jià)體系；科學(xué)研究不能體現(xiàn)整體性，缺乏系統(tǒng)性，中醫(yī)屬性弱化[15]。在科學(xué)技術(shù)迅速發(fā)展的今天，唯有不斷突破局限、完善自身，中醫(yī)腫瘤學(xué)才能更好地發(fā)揮優(yōu)勢(shì)與特色，實(shí)現(xiàn)新的蛻變。

2 系統(tǒng)生物學(xué)可為中醫(yī)腫瘤學(xué)發(fā)展的借鑒和補(bǔ)充

相對(duì)于還原論為基礎(chǔ)的研究體系，系統(tǒng)生物學(xué)更強(qiáng)調(diào)整體思維，注重各要素的整合，其研究思想、方法體系可以成為中醫(yī)腫瘤學(xué)保持中醫(yī)屬性，發(fā)揮優(yōu)勢(shì)、特色，快速發(fā)展的借鑒和補(bǔ)充。

2.1 基因組學(xué)與中醫(yī)腫瘤學(xué)

基因組學(xué)是對(duì)所有基因進(jìn)行基因組作圖、核苷酸序列分析、基因定位和功能分析的科學(xué)。檢測(cè)腫瘤基因組的突變?cè)陬A(yù)測(cè)腫瘤發(fā)生、選擇治療方案和判斷預(yù)后方面意義重大。Brunner等[16]利用全基因組測(cè)序技術(shù)，對(duì)收集到的5例正常肝臟和9例肝硬化肝臟的組織樣本構(gòu)建出482個(gè)全基因組序列，發(fā)現(xiàn)肝硬化肝組織含有的突變數(shù)量是健康肝組織和肝細(xì)胞癌組織的兩倍，相比于健康肝組織，肝硬化和肝癌組織中突變類型的多樣性更大，解釋了慢性肝病人群的肝癌風(fēng)險(xiǎn)增加是因?yàn)槠渲写罅緿NA損傷突變促進(jìn)了有潛力癌變細(xì)胞的出現(xiàn)，對(duì)未來(lái)利用基因組學(xué)數(shù)據(jù)預(yù)測(cè)慢性肝病患者患肝癌的風(fēng)險(xiǎn)成為可能。WEDGE等[17]對(duì)前列腺癌標(biāo)本進(jìn)行全基因組測(cè)序(whole genome sequencing，WGS）分析，新發(fā)現(xiàn)了5個(gè)編碼驅(qū)動(dòng)突變的基因，同時(shí)發(fā)現(xiàn)CDH12和ANTXR2基因的丟失與不良的生存預(yù)后相關(guān)。黃清潔等[18]基于二代測(cè)序技術(shù)(next generation sequencing，NGS）對(duì)300例肺癌患者腫瘤組織中的驅(qū)動(dòng)基因進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)EGFR可與其他驅(qū)動(dòng)基因突變共存，這些突變與患者年齡、性別、吸煙史、組織類型等有關(guān)，還發(fā)現(xiàn)了一些低頻突變的基因，改變了以往驅(qū)動(dòng)突變獨(dú)立、互斥等認(rèn)識(shí)，對(duì)肺癌驅(qū)動(dòng)突變的深入研究和臨床治療都有重大指導(dǎo)意義。

中醫(yī)腫瘤學(xué)也從稟賦、體質(zhì)、行為習(xí)慣等預(yù)測(cè)腫瘤的發(fā)生、決定治療法則及判斷預(yù)后等，如“壯人無(wú)積，虛人則有之”、“過(guò)飲滾酒，多成膈證”等。我們可借鑒基因組學(xué)的方法和技術(shù)，把中醫(yī)學(xué)的稟賦、體質(zhì)等概念進(jìn)行結(jié)構(gòu)化描述，賦予客觀的基因組信息，實(shí)現(xiàn)從宏觀到微觀的同一性，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)預(yù)測(cè)腫瘤發(fā)生、選擇治法方藥、判斷預(yù)后等的客觀可操作性。有學(xué)者論述基因組學(xué)技術(shù)已經(jīng)在中醫(yī)藥基于體質(zhì)的精準(zhǔn)預(yù)防、個(gè)體化診斷等方面有較多應(yīng)用，期待在中醫(yī)腫瘤學(xué)領(lǐng)域?qū)⒂懈嗌钊氲难芯亢蛻?yīng)用[19]。

2.2 轉(zhuǎn)錄組學(xué)與中醫(yī)腫瘤學(xué)

轉(zhuǎn)錄組學(xué)是研究細(xì)胞內(nèi)所有基因轉(zhuǎn)錄情況和轉(zhuǎn)錄調(diào)控規(guī)律的科學(xué)[20]?；虻霓D(zhuǎn)錄產(chǎn)物稱為轉(zhuǎn)錄組，廣義上指全部從基因轉(zhuǎn)錄的RNA總和，包括編碼蛋白的信使RNA(messenger RNA，mRNA）和非編碼RNA(non-coding RNA，ncRNA）。通過(guò)轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究，可以揭示基因表達(dá)與生命現(xiàn)象的內(nèi)在聯(lián)系，解釋基因調(diào)控機(jī)制和不同表達(dá)信息，對(duì)不同時(shí)間或環(huán)境條件下的生理病理現(xiàn)象提供基因表達(dá)譜的差異和調(diào)控信息。劉文琛等[21]通過(guò)高通量的轉(zhuǎn)錄組學(xué)檢測(cè)和生信分析，發(fā)現(xiàn)急性缺血性中分陰類證、陽(yáng)類證的lncRNA，miRNA，mRNA表達(dá)存在差異，并研究了不同類證的分子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。王階等[22]以冠心病血瘀證為切入點(diǎn)，采集312例患者外周血基因信息，運(yùn)用轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究技術(shù)，確立了冠心病血瘀證lncRNA-miRNA-mRNA 3個(gè)層面的潛在生物標(biāo)志物，構(gòu)建了冠心病血瘀證miRNA-mRNA及l(fā)ncRNA-miRNA-mRNA 2個(gè)水平的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，基于差異基因和調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，對(duì)202例活血化瘀中藥治療前后共計(jì)400余人次的基因檢測(cè)結(jié)果結(jié)合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，從基因-蛋白-功能3個(gè)層面揭示了活血化瘀中藥干預(yù)冠心病血瘀證的基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)機(jī)制。黃卉等[23]對(duì)小鼠腦腫瘤組織樣本進(jìn)行基因芯片檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)金龍膠囊組共有37個(gè)差異基因(倍數(shù)＞2），106個(gè)拓?fù)浠?，其靶點(diǎn)主要集中在細(xì)胞粘附和凋亡、免疫應(yīng)答、神經(jīng)發(fā)育等，金龍膠囊通過(guò)誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞特有基因表達(dá)發(fā)揮抗腦腫瘤作用。

惡性腫瘤具有病史相對(duì)較長(zhǎng)、演變復(fù)雜、異質(zhì)性突出的特點(diǎn)，“證”的演變復(fù)雜多樣，借鑒轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究平臺(tái)可探索中醫(yī)腫瘤學(xué)病證聯(lián)系規(guī)律、“證”的本質(zhì)及演變調(diào)控規(guī)律，研究“證”的客觀化或確定標(biāo)志物，提供“證候差異、同病異證、同證異病”的分子依據(jù)等。轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究還可以對(duì)中藥復(fù)方、針灸等復(fù)雜體系的抗腫瘤作用機(jī)制研究提供技術(shù)支持[24]。

2.3 蛋白質(zhì)組學(xué)與中醫(yī)腫瘤學(xué)

細(xì)胞或組織的基因組所表達(dá)的全部蛋白質(zhì)稱為蛋白質(zhì)組，相對(duì)于固定的基因組而言，蛋白質(zhì)組因時(shí)間、地點(diǎn)和環(huán)境等各種條件的影響而呈動(dòng)態(tài)變化，蛋白質(zhì)組學(xué)[25]即是研究蛋白質(zhì)組的構(gòu)成、表達(dá)水平、功能和調(diào)控關(guān)系的科學(xué)，與中醫(yī)學(xué)“整體觀”和“動(dòng)態(tài)觀”趨同。蛋白質(zhì)組是生物功能的執(zhí)行體，其動(dòng)態(tài)變化能全面反映生物體功能的改變。李曉亮等[26]利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)比較了人肺腺癌和癌旁遠(yuǎn)端正常組織的差異蛋白，發(fā)現(xiàn)癌組織和遠(yuǎn)端正常組織的蛋白質(zhì)存在顯著差異，并鑒定了14種肺腺癌相關(guān)的蛋白質(zhì)，為肺癌的早期診斷和預(yù)后判斷奠定基礎(chǔ)。丁峰等[27]利用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)比較了肝郁證肝癌患者、非肝郁證肝癌患者和健康人唾液樣本中蛋白質(zhì)組的差異，發(fā)現(xiàn)3組人群唾液標(biāo)本中蛋白質(zhì)存在顯著差異，以此建立了肝郁證肝癌特異的蛋白數(shù)據(jù)庫(kù)，篩選出肝郁證肝癌演變可能相關(guān)的差異蛋白，為肝癌肝郁證證候本質(zhì)及臨床辨證提供客觀證據(jù)。饒希午等[28]通過(guò)血清蛋白差異表達(dá)研究，發(fā)現(xiàn)益氣養(yǎng)陰組與模型組差異表達(dá)的蛋白共116個(gè)，通過(guò)功能鑒定，明確這些蛋白與肝癌進(jìn)展的多個(gè)環(huán)節(jié)和多條通路有關(guān)，確定益氣養(yǎng)陰法的多靶點(diǎn)、多中心調(diào)控的作用。袁枝花等[29]學(xué)者認(rèn)為蛋白質(zhì)組學(xué)從整體研究的策略可顯著提高中藥作用靶點(diǎn)的發(fā)現(xiàn)效率，在中藥現(xiàn)代研究中具有明顯優(yōu)勢(shì)，并指出3種蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在中藥作用靶點(diǎn)研究中的具體應(yīng)用，為中藥作用機(jī)制的研究提供新思路、新方法。

中醫(yī)學(xué)“司外揣內(nèi)”的診察方法有利于惡性腫瘤的早期診斷，但缺乏客觀指標(biāo)，我們可利用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法，以差異蛋白將外露的“象”與內(nèi)在的“臟”之間建立客觀聯(lián)系，實(shí)現(xiàn)腫瘤的早期診斷；同一癌癥不同“證”的演變規(guī)律對(duì)我們整體把握疾病、確定治則治法至關(guān)重要，我們可利用蛋白質(zhì)組的整體性、動(dòng)態(tài)性、多樣性與中醫(yī)學(xué)整體觀、動(dòng)態(tài)觀、辨證觀建立聯(lián)系，對(duì)研究癌癥病程中的證候本質(zhì)和建立辨證體系很有意義；中醫(yī)的治法治則多具有多靶點(diǎn)、多中心的調(diào)控作用，復(fù)方、針灸等的作用靶點(diǎn)非常復(fù)雜，蛋白質(zhì)組學(xué)可以為治法治則、藥物及穴位的調(diào)控靶點(diǎn)、作用機(jī)制研究提供思路借鑒和技術(shù)支持。

2.4 代謝組學(xué)與中醫(yī)腫瘤學(xué)

代謝組學(xué)是從整體上全面、動(dòng)態(tài)研究生物體或組織器官的小分子代謝產(chǎn)物的科學(xué)[30，31]，主要關(guān)注基因調(diào)控、酶活性改變和代謝變化。代謝組學(xué)把研究對(duì)象看做整體，跳過(guò)體內(nèi)具體環(huán)節(jié)，通過(guò)全面分析生物體或組織器官代謝物的種類、數(shù)量及動(dòng)態(tài)變化，尋找差異，揭示生理或病理過(guò)程，發(fā)現(xiàn)其中的可能機(jī)制，具有活體研究、無(wú)創(chuàng)傷、與生理或病理過(guò)程相似等特點(diǎn)。江文俊等[32]利用代謝組學(xué)技術(shù)檢測(cè)了中分化胃癌細(xì)胞系、低分化胃癌細(xì)胞系和正常胃上皮細(xì)胞系的代謝譜，發(fā)現(xiàn)了9種差異性代謝產(chǎn)物，有望成為胃癌潛在的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)胃癌的早期診斷和療效評(píng)價(jià)具有重要的意義。鞏振東等[33]運(yùn)用代謝組學(xué)技術(shù)檢測(cè)模型動(dòng)物唾液中代謝物的變化，發(fā)現(xiàn)與正常體質(zhì)組比較，腎虛體質(zhì)組唾液中3種代謝物含量升高，腎虛證候組唾液中5種代謝物含量下降，與腎虛體質(zhì)組比較，腎虛證候組唾液中1種代謝物含量升高，表明在“正常體質(zhì)-腎虛體質(zhì)-腎虛證候”的演變中，唾液中代謝物成分發(fā)生變化，這些物質(zhì)可能成為腎虛相關(guān)疾病的生物標(biāo)志物，對(duì)闡明“腎虛”的實(shí)質(zhì)提供客觀依據(jù)，也有助于腎虛的早期診斷和防治研究奠定基礎(chǔ)。方婷等[34]利用代謝組學(xué)技術(shù)比較了正常組、乳腺癌荷瘤組和乳腺癌荷瘤薏苡仁油治療組小鼠的血清代謝譜，發(fā)現(xiàn)與正常組比較，荷瘤組小鼠有15種代謝物水平降低，1種代謝物水平升高，這些代謝物在薏苡仁油給藥后均有顯著回調(diào)的趨勢(shì)，表明薏苡仁油可能通過(guò)調(diào)控體內(nèi)花生四烯酸等4類物質(zhì)代謝發(fā)揮抗腫瘤作用。

中醫(yī)學(xué)素有通過(guò)“望、聞”排泄物與分泌物診察疾病的方法，可以說(shuō)是代謝組學(xué)診察疾病的雛形，故可通過(guò)代謝組學(xué)技術(shù)對(duì)“望、聞”的內(nèi)容繼續(xù)延伸，建立中醫(yī)腫瘤早期診斷和療效評(píng)價(jià)的新體系；代謝組學(xué)技術(shù)還可助力確立惡性腫瘤及其不同階段證候的生物標(biāo)志物，賦予證候以代謝組學(xué)實(shí)質(zhì)；代謝組學(xué)技術(shù)同樣對(duì)研究中藥復(fù)方、針灸等復(fù)雜體系的作用機(jī)制具有借鑒和補(bǔ)充作用。另外，代謝組學(xué)在發(fā)現(xiàn)新藥[35，36]或新的治療方法[37]，預(yù)測(cè)腫瘤治療效果等方面均已顯示出優(yōu)勢(shì)，其對(duì)中醫(yī)腫瘤學(xué)今后的發(fā)病機(jī)制探索、腫瘤預(yù)防和治療、藥物發(fā)現(xiàn)和機(jī)制研究等領(lǐng)域均有重大借鑒和補(bǔ)充作用。

2.5 多組學(xué)策略與中醫(yī)腫瘤學(xué)

腫瘤是一類多因素、多環(huán)節(jié)、多階段發(fā)生發(fā)展的復(fù)雜疾病，可能涉及到基因組、轉(zhuǎn)錄組、蛋白質(zhì)組、代謝組等一個(gè)或多個(gè)水平的異常，且不同水平之間可能還存在相互作用關(guān)系。因此，單組學(xué)研究對(duì)全面闡釋腫瘤所涉及的問(wèn)題具有局限性，多組學(xué)的研究策略可以從不同水平闡釋腫瘤發(fā)生、演化、進(jìn)展等復(fù)雜問(wèn)題，現(xiàn)代高通量技術(shù)正好為多組學(xué)研究策略奠定基礎(chǔ)，現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)已經(jīng)開(kāi)始實(shí)踐[38]。通過(guò)多組學(xué)研究還可以發(fā)現(xiàn)藥物的作用靶點(diǎn)、治療起效的物質(zhì)基礎(chǔ)等，這種研究策略與方法正好同中醫(yī)腫瘤學(xué)整體觀念及復(fù)法大方治療實(shí)踐相吻合，借鑒這種策略和方法可以補(bǔ)充中醫(yī)腫瘤學(xué)目前發(fā)展中的不足，啟發(fā)新的研究思路，有助于學(xué)科快速發(fā)展。

多組學(xué)研究可以全面闡釋腫瘤發(fā)生發(fā)展的具體機(jī)制。LI等[38]利用多組學(xué)分析不同類型非小細(xì)胞肺癌組織，發(fā)現(xiàn)在肺癌組織中絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶2表達(dá)上調(diào)，這一上調(diào)與染色體12q14.1位點(diǎn)的擴(kuò)增有關(guān)，同時(shí)絲氨酸羥甲基轉(zhuǎn)移酶2也與肺腺癌的轉(zhuǎn)移和不良預(yù)后有關(guān)。苗華等[39]基于系統(tǒng)生物學(xué)整合技術(shù)挖掘發(fā)現(xiàn)細(xì)胞周期和增殖信號(hào)通路是結(jié)直腸癌發(fā)生中的核心通路，UBE2C和AURKA等11個(gè)基因是該通路的驅(qū)動(dòng)基因。中醫(yī)腫瘤病因病機(jī)的研究同樣可以借鑒這種多組學(xué)策略或賦予多組學(xué)內(nèi)涵。

在腫瘤診斷中，“見(jiàn)微知著”是中醫(yī)診斷疾病的一種思維方式，多組學(xué)整合有望在“微”上實(shí)現(xiàn)客觀化和定量化，有學(xué)者綜述近年來(lái)多組學(xué)技術(shù)在口腔癌和其它腫瘤診斷中的優(yōu)勢(shì)和應(yīng)用現(xiàn)狀，提出多組學(xué)整合可成為口腔癌診斷的系統(tǒng)生物學(xué)研究借鑒，是實(shí)現(xiàn)口腔癌早期診斷的有效途徑[40]。充分利用現(xiàn)代多組學(xué)高通量技術(shù)，賦予望、聞、問(wèn)、切等診查技術(shù)客觀標(biāo)準(zhǔn)，是實(shí)現(xiàn)中醫(yī)腫瘤學(xué)對(duì)高危人群早期診斷的有效途徑，可使中醫(yī)學(xué)“司外揣內(nèi)”等診察方法更具可操作性。

在疾病分型和精準(zhǔn)治療方面，國(guó)醫(yī)大師王琦提出將系統(tǒng)生物學(xué)的研究方法引入中醫(yī)體質(zhì)學(xué)的研究，有助于從微觀上探討體質(zhì)的本質(zhì)，有利于建立量化的體質(zhì)分類標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)為辨體治療提供依據(jù)[41]。張繼玲等[42]研究發(fā)現(xiàn)大腸癌患者最常見(jiàn)的體質(zhì)類型為氣虛質(zhì)，其次為濕熱質(zhì)與氣郁質(zhì)，男性患者濕熱質(zhì)比例較高，女性患者氣郁質(zhì)比例較高，且體質(zhì)分布情況與年齡及TNM分期密切相關(guān)。引入多組學(xué)技術(shù)有望實(shí)現(xiàn)體質(zhì)、證型、陰陽(yáng)、五行等疾病分類屬性的系統(tǒng)化和客觀化，也為腫瘤的現(xiàn)代中醫(yī)精準(zhǔn)治療提供依據(jù)。

在研究中藥、方劑的作用機(jī)制方面，多組學(xué)整合策略同樣顯示絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。柳潤(rùn)輝[43]團(tuán)隊(duì)在國(guó)際上率先采用系統(tǒng)生物學(xué)的多組學(xué)方法進(jìn)行中藥方劑的多成分、多靶點(diǎn)作用機(jī)制研究，闡明麝香保心丸中藥效成分之間的增效、減毒、維持血藥濃度等相互作用關(guān)系，實(shí)現(xiàn)在分子水平整體闡明方劑的作用特點(diǎn)。半枝蓮是臨床最常用的抗癌中藥之一，胡晨駿等[44]利用復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)算法篩選出與半枝蓮最相關(guān)聯(lián)的前100個(gè)基因、4個(gè)基因族和前10條KEGG信號(hào)通路，從系統(tǒng)生物學(xué)的角度挖掘半枝蓮的潛在作用機(jī)制，并經(jīng)過(guò)文獻(xiàn)研究分析驗(yàn)證，相關(guān)結(jié)果與半枝蓮的藥理研究和臨床應(yīng)用高度一致，為研究人員利用多組學(xué)策略從整體水平研究半枝蓮或其它抗癌中藥的藥理活性提供方法學(xué)參考。

此外，多組學(xué)研究方法還有助于中醫(yī)腫瘤學(xué)的特殊概念客觀細(xì)化、科學(xué)界定，對(duì)診斷、治療的方法技術(shù)確定生物標(biāo)志物、整體上闡明藥物等的作用機(jī)制，對(duì)預(yù)后判斷確定科學(xué)依據(jù)、便于臨床操作。高通量的研究方法還有助于提高藥物、腧穴等的篩選效率，發(fā)現(xiàn)新的治療靶點(diǎn)。

3 結(jié)語(yǔ)

中醫(yī)腫瘤學(xué)已形成較為完整的理論體系和獨(dú)特的思維方式，在生命觀、疾病觀、治療觀、預(yù)防康復(fù)觀等方面均具有不可替代的優(yōu)勢(shì)和鮮明特色。然而，面對(duì)近代以來(lái)的西學(xué)東漸，特別是當(dāng)代科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展和生物醫(yī)學(xué)取得的巨大成就，中醫(yī)腫瘤學(xué)在理論創(chuàng)新、研究方法迭代、技術(shù)精準(zhǔn)化以及與現(xiàn)代科學(xué)的相容性方面均表現(xiàn)出局限或不足，遇到新的挑戰(zhàn)。系統(tǒng)生物學(xué)全面、動(dòng)態(tài)的研究策略和方法體系與中醫(yī)腫瘤學(xué)整體觀念、動(dòng)態(tài)變化、辨證論治等思維方式具有趨同性，許多學(xué)者將系統(tǒng)生物學(xué)引入中醫(yī)學(xué)各領(lǐng)域的研究，并且取得了相應(yīng)成果。借鑒系統(tǒng)生物學(xué)的研究體系可推動(dòng)中醫(yī)腫瘤學(xué)的全面發(fā)展，特別是現(xiàn)代高通量的組學(xué)技術(shù)有助于開(kāi)展中醫(yī)腫瘤學(xué)病因、病機(jī)、診斷、治療、機(jī)制探索等多層次的研究，提供給中醫(yī)腫瘤學(xué)前所未有的發(fā)展機(jī)遇?；蚪M學(xué)研究可為中醫(yī)腫瘤學(xué)的病因與發(fā)病學(xué)說(shuō)提供客觀的基因組數(shù)據(jù)，指導(dǎo)腫瘤預(yù)防、治療和判斷預(yù)后，還為中醫(yī)藥的個(gè)體化治療提供依據(jù)。轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究可助力中醫(yī)腫瘤學(xué)發(fā)病規(guī)律研究、證候本質(zhì)研究，為不同的中醫(yī)證候確定生物標(biāo)志物，闡明證候演變的調(diào)控關(guān)系，為同病異治和中醫(yī)藥預(yù)防提供轉(zhuǎn)錄組依據(jù)。蛋白質(zhì)組學(xué)和代謝組學(xué)可幫助確定中醫(yī)診斷信息的標(biāo)志物，在腫瘤的早期診斷、預(yù)后判斷、證候本質(zhì)、中醫(yī)藥的作用靶點(diǎn)等研究方面均可實(shí)現(xiàn)客觀量化，也為發(fā)現(xiàn)新的中醫(yī)藥療法或治療靶點(diǎn)、闡明中醫(yī)藥的作用機(jī)制提供支持。多組學(xué)策略完全適應(yīng)中醫(yī)腫瘤學(xué)整體觀、動(dòng)態(tài)觀、辨證觀的優(yōu)勢(shì)，在中醫(yī)腫瘤發(fā)病機(jī)制、診斷辨證、腫瘤分型、精準(zhǔn)施治、機(jī)制探索等各方面均可提供多層次的信息支持，并賦予中醫(yī)腫瘤學(xué)新的科學(xué)內(nèi)涵，實(shí)現(xiàn)現(xiàn)代化或與現(xiàn)代科學(xué)溝通、相融的基礎(chǔ)。

盡管系統(tǒng)生物學(xué)的策略與方法已經(jīng)在醫(yī)學(xué)研究中開(kāi)始應(yīng)用，高通量技術(shù)也取得了一些成果，但仍需克服以下幾點(diǎn)：第一，組學(xué)分析將大量的數(shù)據(jù)進(jìn)行整合，復(fù)雜的海量數(shù)據(jù)對(duì)生物信息平臺(tái)的分析能力提出了更高的要求，況且要去粗取精、去偽存真更是對(duì)分析平臺(tái)的考驗(yàn)；第二、組學(xué)技術(shù)產(chǎn)生的預(yù)測(cè)分析模型、診斷治療方法和作用靶標(biāo)距離在臨床中實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥預(yù)防、早期診斷、精準(zhǔn)醫(yī)療等還有很大的距離，還需不斷地探索求證；第三，組學(xué)技術(shù)有利于全面實(shí)現(xiàn)中醫(yī)腫瘤學(xué)概念、理論、方法、技術(shù)等的客觀量化和機(jī)制闡釋，但要保持中醫(yī)學(xué)屬性、強(qiáng)化中醫(yī)學(xué)特征、發(fā)揮中醫(yī)藥優(yōu)勢(shì)仍然面臨挑戰(zhàn)；最后，系統(tǒng)生物學(xué)及高通量組學(xué)技術(shù)是一匹“寶馬良駒”，對(duì)中醫(yī)腫瘤學(xué)科隊(duì)伍的駕馭能力同樣提出挑戰(zhàn)。當(dāng)然，系統(tǒng)生物學(xué)的可貴之處在于其多變量整合、整體解析，中醫(yī)腫瘤學(xué)發(fā)展的根本動(dòng)力主要源于其自身實(shí)踐。筆者認(rèn)為，隨著技術(shù)局限性的突破和分析平臺(tái)的進(jìn)步，大膽借鑒系統(tǒng)生物學(xué)的研究策略和方法體系，不斷補(bǔ)充短板、發(fā)揮優(yōu)勢(shì)，將使中醫(yī)腫瘤學(xué)取得更好的發(fā)展，在人類攻克癌癥的道路上發(fā)揮更大作用。