硅藻檢驗推測溺亡位置1例

李崢，楊佳雯，陳冶秋，史小杰，吳天真，陳峰，陳鵬

（1.南京醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院法醫(yī)學(xué)系，江蘇 南京 211166；2.南京市公安局法醫(yī)中心，江蘇 南京 210012）

1 案 例

1.1 簡要案情

某年6月25日上午，某街道一河道中發(fā)現(xiàn)一具未知名女童尸體。該女童衣著完整，身上背一雙肩包，主袋拉鏈閉合，內(nèi)裝有兩塊水泥磚?，F(xiàn)場未見明顯打斗痕跡。

1.2 尸體檢驗

尸表檢查：尸長131cm，體表未見明顯損傷。

尸體解剖：水性肺氣腫，肺膜下見點狀出血，支氣管腔內(nèi)見泥沙，余未見明顯異常，可排除因機(jī)械性損傷死亡。

毒（藥）物檢驗：提取心血、胃內(nèi)容物、部分肝組織進(jìn)行理化檢驗，未檢出常見毒（藥）物成分，可排除因常見毒（藥）物中毒死亡。

1.3 硅藻檢驗

提取死者肺組織2g，肝和腎組織各10g，進(jìn)行硅藻檢驗。對發(fā)現(xiàn)死者的河道分段采取水樣，每個采樣點取水樣4mL進(jìn)行硅藻檢驗。比較死者肺組織與各采樣點水樣中硅藻種屬的差異。

1.3.1 采樣點的選擇

本案在選取采樣點時，結(jié)合當(dāng)時河道的水流速度，確定尸體的漂流范圍約為上游距現(xiàn)場10 km處?？紤]若采樣點相隔太近，硅藻的種類分布可能沒有明顯差別，故采樣點間隔設(shè)置為5km。同時，由于上游距現(xiàn)場4 km處有另一條河流匯入，此處的水文環(huán)境可能存在較大差異，故該河流交匯處也作為采樣點。最后，對下游距現(xiàn)場4km處也采集水樣，原因為：（1）尸體可能被船舶拖帶發(fā)生逆流；（2）作為陰性對照，在不發(fā)生逆流的情況下，下游水樣的硅藻種屬構(gòu)成應(yīng)與尸體內(nèi)部不同，但若下游水樣與現(xiàn)場水樣的硅藻種屬構(gòu)成無明顯差異，則無法排除現(xiàn)場下游落水的可能。因此，選取現(xiàn)場、上游距現(xiàn)場10km處、上游距現(xiàn)場5km處、上游河流交匯處、下游距現(xiàn)場4km處5個位置采集水樣進(jìn)行硅藻檢驗，用于落水地點的推測。

1.3.2 器官組織的硅藻檢驗

采用微波消解法消解器官組織。消解完成后，將純水與消解液按5∶1的體積比混合加至消解罐，稀釋消解液。將稀釋后的消解液合并倒入尼龍膜濾杯中抽濾；加50mL純水繼續(xù)抽濾，使濾膜表面接近中性；再加10 mL無水乙醇繼續(xù)抽濾，去除濾膜內(nèi)水分；取出濾膜，烘干。用Phenom XL臺式掃描電子顯微鏡（荷蘭飛納公司）對濾膜進(jìn)行觀察，參照硅藻圖譜等相關(guān)資料，記錄檢出硅藻的種類及每種硅藻的數(shù)量用于后續(xù)比對分析。

1.3.3 水樣的硅藻檢驗

取水樣10mL加入消解罐中，其余操作同器官組織的硅藻檢驗。涂片抽濾富集后，在電鏡下掃描并記錄結(jié)果。

1.3.4 結(jié)果比對

實驗完成后，計算肺組織中優(yōu)勢硅藻群落與5處水樣中硅藻群落的Sprensen相似系數(shù)[1]和平方弦距離（squared-chord distance，SCD）[2]，分析肺組織與周邊水體中硅藻種屬構(gòu)成的相似性。

1.4 硅藻檢驗結(jié)果及溺亡位置推斷

死者肺、肝、腎組織中均檢出硅藻（圖1），結(jié)合尸體檢驗所見，分析認(rèn)為該女童符合溺死，且肺組織中檢出的硅藻形態(tài)、種類與現(xiàn)場水樣中硅藻相同。

根據(jù)每種硅藻在所有檢出硅藻中的數(shù)量占比，得到肺組織及5處水樣的硅藻種屬構(gòu)成（表1）。分別計算5處水樣和肺組織中硅藻種屬構(gòu)成之間的Sprensen相似系數(shù)和SCD，結(jié)果見表2，發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場的水樣和肺組織中硅藻種屬構(gòu)成的SCD遠(yuǎn)小于其他幾個采樣點，且Sprensen相似系數(shù)最大，因此推測該女童的入水位置在該現(xiàn)場附近。

1.5 鑒定意見

綜合分析認(rèn)為，該女童符合溺死，且推斷落水點為發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場附近。

圖1 組織及現(xiàn)場水樣的硅藻檢驗結(jié)果Fig.1 Diatom test results of tissues and water samples collected at the scene

表1 肺組織與各采樣點的硅藻種屬構(gòu)成Tab.1 The diatom species composition of lung tissue and water samples of different sampling points （%）

表2 肺組織與各采樣點硅藻種屬構(gòu)成間的Sprensen相似系數(shù)及SCDTab.2 The Sprensen coefficient and SCD of diatom species composition between lung tissue and water samples of different sampling points

2 討 論

硅藻是一種廣泛存在于水域中的單細(xì)胞浮游植物，種類多，抗外界環(huán)境干擾能力強(qiáng)，一直以來，硅藻檢驗是業(yè)內(nèi)判斷生前溺水或死后拋尸的重要依據(jù)之一[3]。硅藻對環(huán)境敏感，其分布具有明顯的區(qū)域性特征，在確定溺死的情況下，通過分析比較水中尸體組織器官和可疑落水點水樣的硅藻種屬構(gòu)成，可輔助推測落水溺亡位置[3-10]。在統(tǒng)計學(xué)中，Sprensen相似系數(shù)是用于比較兩樣本種屬構(gòu)成相似程度的常用指標(biāo)[1]，而SCD則是判斷差異程度敏感的距離測量指標(biāo)[2]。根據(jù)Sprensen相似系數(shù)和SCD的大小，可推斷兩樣本間的相似程度，即Sprensen值越大或SCD值越小，則兩樣本間相似度越高。

本例根據(jù)死者肺組織與案發(fā)現(xiàn)場附近5處水樣（現(xiàn)場、上游距現(xiàn)場10 km處、上游距現(xiàn)場5 km處、上游河流交匯處、下游距現(xiàn)場4km處）的硅藻種類及頻率分布計算Sprensen相似系數(shù)和SCD，發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場處水樣的硅藻種屬構(gòu)成與死者肺組織最為接近，因而推測死者的實際落水點位于該現(xiàn)場附近。案件偵破后證實，該女童8歲，是在發(fā)現(xiàn)尸體現(xiàn)場附近被犯罪嫌疑人推入河中溺亡。本案采用微波消解-真空抽濾-電鏡掃描的方法進(jìn)行硅藻形態(tài)學(xué)檢驗，相較于傳統(tǒng)硅藻檢驗方法，該法硅藻檢出率更高，能對硅藻種類和數(shù)量進(jìn)行更為精確的統(tǒng)計，因此更適合落水點推斷[11-12]。本案提示，對于類似案例，在硅藻檢驗的基礎(chǔ)上，可計算案發(fā)附近水樣和尸體肺組織硅藻種屬構(gòu)成的相似程度，有助于推測實際落水點，尋找第一案發(fā)現(xiàn)場。