白苞蒿地上部分化學(xué)成分的研究

陳 曦，李喜安，南澤東，宋成英，張 紅，任華忠

（樂(lè)山職業(yè)技術(shù)學(xué)院，四川 樂(lè)山 614000）

白苞蒿Artemisia lactifloraWall.ex DC.為菊科蒿屬多年生草本植物，主產(chǎn)于福建、廣東、四川等地，收載于2015 年版《中國(guó)藥典》四部附錄中，是中藥劉寄奴的基原植物之一。其全草入藥，具有清熱、解毒、止咳、消炎、活血、健胃等功效，可用于慢性肝炎、肝硬化、腎炎等肝、腎疾病，以及血絲蟲病的治療［1-3］。目前，對(duì)白苞蒿化學(xué)成分的研究較少，主要含有倍半萜、木脂素、黃酮等成分［4-7］。為進(jìn)一步闡明該藥材的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本實(shí)驗(yàn)采用硅膠、Sephadex LH-20、MCI、ODS 等現(xiàn)代分離技術(shù)，從其地上部分95%乙醇提取物中分離得到14 個(gè)化合物，其中，化合物1～6 為首次從蒿屬中分離得到，化合物7～14 為首次從該植物中分離得到。

1 材料

INOVA-500 MHz-FT 核磁共振儀（美國(guó)Varian公司），TMS 為內(nèi)標(biāo)物；Agilent 6320 型質(zhì)譜儀（美國(guó)Agilent 公司）；薄層色譜和柱色譜用硅膠（青島海洋化工廠）；十八烷基硅烷鍵合硅膠（ODS）柱色譜材料（日本YMC 公司）；Sephadex LH-20（瑞士 Pharmacia 公司）；MCI（日本 Mitsubishi Chemical Industries Ltd.）。乙醇、三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、丙酮為分析純。

白苞蒿在2016 年7 月購(gòu)于廣東茂名，由四川省食品藥品學(xué)校秦運(yùn)潭副教授鑒定為白苞蒿Artemisia lactifloraWall.ex DC.的地上部分，標(biāo)本保存于樂(lè)山職業(yè)技術(shù)學(xué)院藥學(xué)系（No.20160701）。

2 提取與分離

取干燥白苞蒿地上部分15 kg，粉碎后用95%乙醇回流提取3 次，每次2 h，合并3 次提取液，減壓濃縮得浸膏，加適量水混懸，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑后分別得到相應(yīng)萃取部位75、210、160 g。

乙酸乙酯萃取部分（210 g）進(jìn)行硅膠柱（200～300 目）色譜分離，用二氯甲烷-甲醇（10∶1、5∶1、3∶1、1∶1）梯度洗脫，得到6 個(gè)流份（Fr.1～Fr.6）。Fr.2 經(jīng)硅膠柱色譜，用乙酸乙酯-丙酮（10∶1～3∶1）梯度洗脫，得化合物1（22 mg）；Fr.3 經(jīng)硅膠柱色譜（石油醚-丙酮，5∶1～1∶1）梯度洗脫，得5 個(gè)亞流份（Fr.3-1～Fr.3-5）；Fr.3-1 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱反復(fù)分離純化（二氯甲烷-甲醇，1∶1）得化合物3（32 mg）、4（15 mg）。Fr.3-2 經(jīng)MCI（甲醇-水，20%～80%）及Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（二氯甲烷-甲 醇，1∶1）分離純化，得化合物 5（50 mg）。Fr.3-3 經(jīng)ODS（甲醇-水，20%～80%）及Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（二氯甲烷-甲醇，1∶1）分離純化，得化合物7（22 mg）、8（8 mg）。Fr.3-4 經(jīng)ODS（甲醇-水，50%～80%）及Sephadex LH-20 凝膠柱色譜（二氯甲烷-甲醇，1∶1）分離純化，得化合物10（150 mg）。Fr.3-5 經(jīng)ODS（甲醇-水，40%～80%）柱色譜及制備薄層色譜（二氯甲烷-丙酮，1∶1）分離純化，得化合物11（6 mg）；Fr.5 經(jīng)硅膠柱色譜（乙酸乙酯-丙酮，3∶1～1∶1）梯度洗脫，并經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠柱（二氯甲烷-甲醇，1∶1）進(jìn)一步分離純化，得化合物6（17 mg）。

正丁醇部位（160 g）經(jīng)硅膠柱（200～300目），二氯甲烷-甲醇（20∶1～0∶1）梯度洗脫，得到5 個(gè)流份Fr.D1～Fr.D5。Fr.D3 經(jīng)硅膠柱色譜（乙酸乙酯-甲醇，20∶1～2∶1）梯度洗脫，得到6個(gè)亞流份Fr.D3-1～Fr.D3-6。Fr.D3-2 經(jīng)ODS（甲醇-水，20%～80%）和Sephadex LH-20 凝膠分離，得化合物2（15 mg）、9（14 mg）；Fr.D3-3 經(jīng)Sephadex LH-20 凝膠分離，得到3 個(gè)流份Fr.D3-3-1～Fr.D3-3-3。Fr.D3-3-2 經(jīng)制備薄層色譜（石油醚-二氯甲烷-甲醇，3∶3∶1）純化，得化合物12（15 mg）、13（10 mg）；Fr.D3-4 經(jīng)MCI（甲醇-水，20%～80%）及Sephadex LH-20 凝膠純化，得化合物14（17 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：黃色粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：377.1［M ＋Na］＋。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：6.75（1H，brd，J＝8.0 Hz，H-5），6.45（1H，d，J＝8.0 Hz，H-3），6.62（1H，brs，H-6），3.85（1H，dd，J＝9.0，7.0 Hz，H-9a），4.15（1H，t，J＝7.0 Hz，H-9b），5.92（2H，s，H-10），6.72（1H，d，J＝7.5 Hz，H-2′），6.47（1H，d，J＝7.5 Hz，H-3′），6.59（1H，brs，H-6′），5.94（2H，s，H-10′）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：131.3（C-1），122.3（C-2），108.3（C-3），147.8（C-4），146.5（C-5），109.4（C-6），38.5（C-7），41.3（C-8），71.3（C-9），101.1（C-10），139.7（Cl′），121.5（C-2′），108.0（C-3′），146.0（C-4′），147.5（C-5′），108.7（C-6′），34.7（C-7′），46.5（C-8′），178.3（C-9′），101.1（C-10′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］基本一致，故鑒定為hinokinin。

化合物2：白色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：575.2［M ＋Na］＋。1H-NMR（pyridine-d5，500 MHz）δ：7.27（1H，d，J＝7.5 Hz，H-5′），7.14（2H，s，H-2，6），7.06（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2′），6.93（1H，dd，J＝7.5，1.5 Hz，H-6′），5.78（1H，d，J＝7.5 Hz，Glc-1），5.49（1H，d，J＝5.0 Hz，H-7），3.82（6H，s，3，5-OCH3），3.81（3H，s，3′-OCH3）；13C-NMR（pyridine-d5，125 MHz）δ：141.8（C-1），104.8（C-2，C-6），154.1（C-3，5），135.5（C-4），83.6（C-7），53.8（C-8），60.4（C-9），132.6（C-1′），113.5（C-2′），149.2（C-3′），146.7（C-4′），116.8（C-5′），122.0（C-6′），33.6（C-7′），43.7（C-8′），73.7（C-9′），105.6（Glc-1），76.3（Glc-2），78.9（Glc-3），71.9（Glc-4），78.6（Glc-5），62.7（Glc-6），56.8（3，5-OCH3），56.2（3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［9］基本一致，故鑒定為conicaoside。

化合物3：白色晶體（甲醇）。ESI-MSm／z：222.2［M ＋H］＋。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：7.19（1H，dd，J＝10.0，15.0 Hz，H-3），6.15（1H，dd，J＝10.0，15.0 Hz，H-4），6.07（1H，dt，J＝15.0，6.0 Hz，H-5），5.75（1H，d，J＝15.0 Hz，H-2），5.46（1H，dqt，J＝11.0，7.0，1.0 Hz，H-9），5.36（1H，dtq，J＝11.0，7.0，1.0 Hz，H-8），3.16（2H，dd，J＝6.0，7.0 Hz，H-2′），2.19（4H，m，H-6，7），1.80（1H，seqt，J＝7.0 Hz，H-3′），1.60（3H，br d，J＝7.0 Hz，H-10），0.92（6H，d，J＝7.0 Hz，H-4′，5′）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：166.4（C-1），121.7（C-2），141.3（C-3），128.2（C-4），143.2（C-5），32.9（C-6），28.5（C-7），131.2（C-8），126.9（C-9），14.0（C-10），46.9（C-2′），28.6（C-3′），20.1（C-4′，5′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［10］基本一致，故鑒定為8，9-dehydropellitorine。

化合物4：白色晶體（三氯甲烷）。ESI-MSm／z：224.2［M ＋H］＋。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：7.19（1H，m，H-3），6.03～6.15（2H，m，H-4，5），5.76（1H，d，J＝15.0 Hz，H-2），5.70（1H，brs，-NH），3.16（2H，t，J＝5.0 Hz，H-1′），2.14（2H，m，H-6），1.80（1H，m，H-2′），1.36（6H，m，H-7，8，9），0.92（6H，d，J＝7.0 Hz，H-3′，4′），0.88（3H，t，J＝10.0 Hz，H-10）；13CNMR（CDCl3，125 MHz）δ：166.8（C-1），122.1（C-2），143.4（C-3），128.6（C-4），141.6（C-5），32.2（C-6），31.6（C-7），28.8（C-8），22.8（C-9），14.3（C-10），47.2（C-l′），28.9（C-2′），20.4（C-3′，4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］基本一致，故鑒定為墻草堿。

化合物5：白色片狀結(jié)晶（三氯甲烷）。ESIMSm／z：351.2［M ＋H］＋。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：5.23（1H，dd，J＝4.5，1.0 Hz，H-1），5.18（1H，dd，J＝4.5，1.5 Hz，H-3），5.16（1H，dd，J＝10.5，4.5 Hz，H-9），4.76（1H，d，J＝10.0 Hz，H-6），4.72（1H，d，J＝10.0 Hz，H-5），2.71（1H，m，H-11），2.55（1H，m，H-2α），2.30（1H，m，H-2β），2.10（3H，s，-OCOCH3），2.03（3H，s，-OCOCH3），1.86（2H，m，H-8）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：127.9（C-l），31.2（C-2），78.5（C-3），137.3（C-4），125.6（C-5），79.3（C-6），45.8（C-7），31.4（C-8），80.6（C-9），136.4（C-10），40.4（C-11），178.6（C-12），10.9（C-13），11.6（C-14），12.3（C-15），169.8（C-l′），20.9（C-2′），169.7（C-l″），20.8（C-2″）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［12］基本一致，故鑒定為sintenin。

化合物6：白色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：573.2［M ＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.15（1H，d，J＝8.0 Hz，H-5″），7.03（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2″），6.92（1H，dd，J＝1.5，8.0 Hz，H-6″），6.66（2H，s，H-2′，6′），4.76（1H，d，J＝4.0 Hz，H-6），4.72（1H，d，J＝4.0 Hz，H-2），3.87，3.85（9H，s，-OCH3×3），3.14（2H，brs，H-1，5）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：55.6（C-1），87.7（C-2），72.8（C-4），55.6（C-5），87.1（C-6），72.8（C-8），133.3（C-1′），104.8（C-2′，6′），149.5（C-3′，5′），137.7（C-4′），137.6（C-1″），111.8（C-2″），147.8（C-3″），151.1（C-4″），118.2（C-5″），119.8（C-6″），103.0（C-1?），75.1（C-2?），78.0（C-3?），71.5（C-4?），78.3（C-5?），62.6（C-6?），57.0（3′，5′-OCH3），56.9（3″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［13］基本一致，故鑒定為（＋）-isoeucommin A。

化合物7：白色粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：359.2［M ＋H］＋。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：6.95（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2′），6.91（1H，dd，J＝2.0 Hz，H-2），6.89（2H，d，J＝8.0 Hz，H-5，5′），6.84（1H，dd，J＝8.0，2.0 Hz，H-6），6.78（1H，ddd，J＝8.0，2.0，1.0 Hz，H-6′），4.86（1H，d，J＝5.5 Hz，H-7′），4.43（1H，d，J＝7.0 Hz，H-7），3.92（3H，s，OCH3-10′），3.90（3H，s，OCH3-10）；13C-NMR（CDCl3，125 MHz）δ：133.1（C-1），108.1（C-2），146.7（C-3），145.4（C-4），114.3（C-5），119.2（C-6），87.8（C-7），54.5（C-8），70.9（C-9），55.9（OCH3-10），130.3（C-1′），108.4（C-2′），146.5（C-3′），144.6（C-4′），114.3（C-5′），118.3（C-6′），82.1（C-7′），50.2（C-8′），69.7（C-9′），55.9（OCH3-10′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［14］基本一致，故鑒定為（＋）-表松脂素。

化合物8：黃色粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：331.1［M ＋H］＋。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：9.83（1H，s，-CHO），7.52（1H，d，J＝1.0 Hz，H-6′），7.42（1H，d，J＝1.0 Hz，H-2′），7.05（1H，d，J＝2.0 Hz，H-2），6.84（1H，dd，J＝8.0，2.0 Hz，H-6），6.79（1H，d，J＝8.0 Hz，H-5），5.69（1H，d，J＝7.0 Hz，H-7），3.88（2H，m，H-9），3.62（1H，m，H-8），3.82（3H，s，OCH3-3），3.92（3H，s，OCH3-3′）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：133.6（C-1），110.8（C-2），149.3（C-3），148.1（C-4），116.3（C-5），119.9（C-6），90.7（C-7），54.4（C-8），64.5（C-9），132.7（C-1′），113.9（C-2′），146.3（C-3′），155.6（C-4′），131.3（C-5′），122.3（C-6′），192.8（C-7′），56.6（OCH3-3），56.8（OCH3-3′）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［15］基本一致，故鑒定為榕醛。

化合物9：白色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：573.2［M ＋Na］＋。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）δ：6.99（2H，s，H-2″，6″），6.96（2H，s，H-2′，6′），5.82（1H，dd，J＝7.0，4.0 Hz，Glc-1），4.99（2H，t，J＝5.0 Hz，H-2，6），3.81，3.84（each 6H，s，-OCH3×4）；13C-NMR（C5D5N，125 MHz）δ：55.0（C-1），86.7（C-2），72.5（C-4），55.2（C-5），86.7（C-6），72.5（C-8），132.2（C-1′，1″），105.1（C-2′，2″，6′，6″），154.2（C-3′，5′），138.5（C-4′），149.6（C-3″，5″），137.6（C-4″），105.3（Glc-1），76.2（Glc-2），78.5（Glc-3），71.8（Glc-4），79.0（Glc-5），62.8（Glc-6），57.1，56.9（3′，3″，5′，5″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［16］基本一致，故鑒定為（＋）-丁香脂素-4′-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物10：白色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：137.1［M＋H］＋。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：7.92（2H，d，J＝8.5 Hz，H-2，6），6.94（1H，d，J＝8.5 Hz，H-3，5），2.59（3H，s，H-8）；13CNMR（CDCl3，125 MHz）δ：198.4（C-7），161.2（C-4），131.1（C-2，6），129.7（C-1），115.5（C-3，5），26.3（C-8）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［17］基本一致，故鑒定為對(duì)羥基苯乙酮。

化合物11：白色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESI-MSm／z：557.2［M ＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：6.80～7.27（6H，m，苯環(huán)H），3.71～4.42（4H，m，H-4，8），3.81，3.83，3.86（9H，s，-OCH3×3），2.96～3.27（2H，m，H-1，5）；13CNMR（CD3OD，125 MHz）δ：53.5（C-1，5），84.9（C-2，6），70.9（C-4，8），135.3（C-1′），110.6（C-2′），149.0（C-3′），145.7（C-4′），115.2（C-5′），118.2（C-6′），133.8（C-1″），110.0（C-2″），148.8（C-3″），148.2（C-4″），111.7（C-5″），118.2（C-6″），100.2（Glc-1），73.2（Glc-2），76.9（Glc-3），69.6（Glc-4），76.8（Glc-5），60.7（Glc-6），55.4（3′，4′-OCH3），55.6（3″-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［18］基本一致，故鑒定為松脂素單甲基醚-β-D-葡萄糖苷。

化合物12：淡黃色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESIMSm／z：545.2［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.09（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5′），6.91（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2），6.88（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5），6.78（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2′），6.75（1H，dd，J＝8.5，1.5 Hz，H-6），6.72（1H，dd，J＝8.5，1.5 Hz，H-6′），4.85（1H，d，J＝8.0 Hz，Glc-1），4.75（1H，d，J＝6.5 Hz，H-7），3.84（6H，s，3，3′-OCH3）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：135.8（C-1），110.8（C-2），149.2（C-3），147.3（C-4），116.2（C-5），120.0（C-6），84.2（C-7），54.2（C-8），60.6（C-9），137.3（C-1′），114.5（C-2′），151.0（C-3′），146.5（C-4′），118.5（C-5′），122.4（C-6′），33.9（C-7′），43.9（C-8′），73.6（C-9′），103.2（Glc-1），75.1（Glc-2），78.0（Glc-3），71.5（Glc-4），78.3（Glc-5），62.7（Glc-6），56.9（3′-OCH3），56.6（3-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［19］基本一致，故鑒定為落葉松脂醇-4′-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物13：淡黃色無(wú)定形粉末（甲醇）。ESIMSm／z：545.2［M＋Na］＋。1H-NMR（CD3OD，500 MHz）δ：7.10（1H，d，J＝8.5 Hz，H-5），6.88（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2），6.78（1H，brs，H-6），6.89（1H，d，J＝1.5 Hz，H-2′），6.77（1H，brs，H-5′），6.76（1H，brs，H-6′），4.88（1H，d，J＝7.5 Hz，Glc-1），3.86（3H，s，3-OCH3），3.83（3H，s，3′-OCH3）；13C-NMR（CD3OD，125 MHz）δ：137.4（C-1），114.5（C-2），152.0（C-3），146.3（C-4），118.4（C-5），122.4（C-6），33.7（C-7），43.8（C-8），73.6（C-9），135.6（C-1′），110.6（C-2′），149.2（C-3′），147.0（C-4′），116.1（C-5′），119.9（C-6′），84.2（C-7′），54.2（C-8′），60.6（C-9′），103.0（Glc-1），75.1（Glc-2），78.0（Glc-3），71.5（Glc-4），78.0（Glc-5），62.7（Glc-6），56.6（3-OCH3），56.9（3′-OCH3）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［20］基本一致，故鑒定為落葉松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物14：無(wú)色針晶（甲醇）。ESI-MSm／z：369.1［M＋Na］＋。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：6.63（2H，s，H-2，6），5.15（1H，t，J＝6.0 Hz，-OH），4.98（1H，brs，-OH），4.96（1H，d，J＝4.0 Hz，-OH），4.92（1H，brs，-OH），4.86（1H，d，J＝7.0 Hz，H-1′），4.42（2H，brd，J＝5.0 Hz，H-7），4.26（1H，t，J＝5.0 Hz，-OH），3.74（6H，s，-OCH3×2），3.58（1H，m，H-5′），3.41（1H，q，J＝6.0 Hz，H-1′），3.20（2H，m，H-2′，6′a），3.15（1H，t，J＝7.0 Hz，H-4′），3.02（1H，dq，J＝2.0，5.0 Hz，H-6′b）；13C-NMR（DMSO，125 MHz）δ：133.8（C-1），153.2（C-2，6），105.3（C-3，5），138.9（C-4），63.6（C-7），103.5（C-1′），74.9（C-2′），77.8（C-3′），70.7（C-4′），77.3（C-5′），61.6（C-6′），57.0（-OCH3×2）。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［21］基本一致，故鑒定為3，5-二甲氧基苯甲醇-4-O-β-D-葡萄糖苷。

4 討論

本研究對(duì)白苞蒿地上部分進(jìn)行了較為系統(tǒng)的研究，共分離得到14 種成分，包括8 種木脂素及木脂素苷、2 種酰胺、1 種倍半萜、3 種苯酚。木脂素類具有較好的保肝、抗氧化作用，酰胺類具有較好的神經(jīng)保護(hù)作用，苯酚類具有較好的抗氧化、抗炎活性，倍半萜類具有較好的抗炎活性，以上藥理作用與《中華本草》記載的白苞蒿具有清熱、解毒、消炎、活血、健胃、保肝等功效基本一致。本研究豐富了白苞蒿的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，可為該藥材進(jìn)一步開(kāi)發(fā)利用提供了一定的科學(xué)依據(jù)。