文冠木化學成分的研究

楊 倩 王曉琴 丁艷霞

（內(nèi)蒙古醫(yī)科大學藥學院， 內(nèi)蒙古呼和浩特010110）

文冠果Xanthoceras sorbifoliaBunge 始載于《救荒本草》，又名文冠花、崖木瓜，主產(chǎn)于內(nèi)蒙古［1?2］。文冠木為文冠果的干燥莖干，為常用特色蒙藥，可以入單方或復方使用，蒙藥名為“西拉·森登”，具有祛風除濕、消腫止痛的功效，主治風濕熱痹、筋骨疼痛。為進一步豐富文冠木的化學成分類型，也為下一步藥理活性研究富集單體化合物，本實驗對其進行系統(tǒng)的化學成分研究，從文冠木的乙酸乙酯部位和正丁醇部位中分離并鑒定了17 個單體化合物，其中化合物1、4～6、9～12、15均為首次從該植物中分離得到。

1 材料

Bruker AVANCE Ⅲ500 MHz 核磁共振儀（德國Bruker 公司）；LCQ Advantage MAX 液質(zhì)聯(lián)用儀（美國Thermo Fisher 公司）；EYELA N?1300 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（東京理化器械株式會社）；KQ?3200DV 數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；DK?98?ⅡA 恒溫水浴箱（天津泰斯特儀器）；HP?20 型大孔吸附樹脂、MCI （北京綠百草科技發(fā)展有限公司）；Sephadex LH?20 （德國Pharmacia 公司）。所用試劑均為分析純。

文冠木藥材2018 年3 月購買于內(nèi)蒙古自治區(qū)呼和浩特市蒙藥材公司，經(jīng)內(nèi)蒙古醫(yī)科大學藥學院王曉琴教授鑒定為正品，藥材標本保存于內(nèi)蒙古醫(yī)科大學藥學院。

2 提取與分離

4.8 kg 藥材，打碎后用70% 乙醇加熱回流提取，每次2 h，共提取3 次，提取液合并后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓濃縮得到無醇味的小體積浸膏。將浸膏用蒸餾水溶解，依次用醋酸乙酯、水飽和正丁醇分別萃取5 次，各萃取液經(jīng)減壓濃縮合并得醋酸乙酯、正丁醇、水部位浸膏306.2、88.4、111.5 g。

醋酸乙酯萃取部位進行常壓硅膠柱色譜，流動相用三氯甲烷?甲醇梯度洗脫（100% ∶0～ 0 ∶100%），每150 mL 收集1 個流分，TLC 檢識后，合并相同流分。對下面的一些組分，采用Sephadex LH?20 凝膠柱色譜，反復數(shù)次分離和純化，由Fr.40～45 得到化合物16 （28 mg）；Fr.86～88 得到化合物4 （32 mg）；Fr.89～96 得到化合物1（96 mg）；Fr.97～101 得到化合物6 （67 mg）、5（22 mg）；Fr.102～112 得到化合物12 （24 mg）、2 （1.01 g）；Fr.113～ 127 得到化合物 7（600 mg）、10 （15 mg）、11 （10 mg）；Fr.128～165 得到化合物17 （27 mg）、8 （624 mg）、9（89 mg）；Fr.177～249 得到化合物3 （453 mg）、14 （148 mg）、13 （357 mg）。

正丁醇萃取部位進行HP?20 型大孔吸附樹脂柱色譜，流動相用乙醇?水，梯度洗脫（10%～95%乙醇），減壓回收，分別得到10%、30%、50%、70%、95%乙醇部位浸膏。將30%乙醇部位（15.6 g），經(jīng)Sephadex LH?20 柱色譜和反相柱色譜，反復分離純化得到化合物13 （12 mg）、14 （15 mg）、15 （10 mg）。

3 結構鑒定

化合物1： 黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色呈黃色。ESI?MSm／z： 287 ［M ＋H］＋，分子式 C15H10O6。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 6.18 （1H，d，J＝1.5 Hz，H?6），6.39（1H，d，J＝2.0 Hz，H?8），6.91 （2H，d，J＝9.0 Hz，H?3′，5′），8.08 （2H，d，J＝8.5 Hz，H?2′，6′）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ： 148.1（C?2），137.3 （C?3），177.5 （C?4），162.6 （C?5），99.4 （C?6），165.7 （C?7），94.5 （C?8），158.4 （C?9），104.6 （C?10），123.8 （C?1′），130.7 （C?2′），116.4 （C?3′，5′），160.6 （C?4′），130.7 （C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［3］ 一致，故鑒定為山柰酚。

化合物2： 黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色呈黃色。ESI?MSm／z： 303 ［M ＋H］＋，分子式C15H10O7。1H?NMR （500 MHz，DMSO?d6）δ： 12.49 （1H，s，5?OH），10.78 （1H，s，7?OH），9.59 （1H，s，3?OH），9.37 （1H，s，3′?OH），9.32 （1H，s，4′?OH），7.68 （1H，d，J＝2.5 Hz，H?2′），7.54 （1H，dd，J＝8.5，2.0 Hz，H?6′），6.88 （1H，d，J＝8.5 Hz，H?5′），6.41 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?8），6.19 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6）；13C?NMR （125 MHz，DMSO?d6）δ： 148.2 （C?2），136.2 （C?3），176.3 （C?4），161.2 （C?5），98.6 （C?6），164.4 （C?7），93.8 （C?8），156.6 （C?9），103.5 （C?10），122.4 （C?1′），115.5 （C?2′），145.5 （C?3′），147.3 （C?4′），116.1 （C?5′），120.4（C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［4?5］ 一致，故鑒定為槲皮素。

化合物3： 黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色呈黃色。ESI?MSm／z： 319 ［M ＋H］＋，分子式C15H10O8。1H?NMR （500 MHz，DMSO?d6）δ： 12.50 （1H，s，5?OH），10.78 （1H，s，7?OH），9.34 （2H，s，3′，5′?OH），9.22 （1H，s，3?OH），8.82 （1H，s，4′?OH），7.24 （2H，s，H?2′，6′），6.37 （1H，d，J＝1.5 Hz，H?8），6.18 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6）；13C?NMR （125 MHz，DMSO?d6）δ： 147.3 （C?2），136.3 （C?3，3′，5′），176.2（C?4），161.2 （C?5），98.6 （C?6），164.3 （C?7），93.6 （C?8），156.5 （C?9），103.4 （C?10），121.2（C?1′），107.6 （C?2′，6′），146.2 （C?4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［6?7］ 一致，故鑒定為楊梅素。

化合物4： 無色透明針狀晶體 （CH3OH）。UV254下有暗斑，UV365下無熒光，10% 硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z： 273 ［M ＋H］＋，分子式C15H12O5。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ：5.34 （1H，dd，J＝13.0，2.5 Hz，H?2），3.11 （1H，dd，J＝17.0，13.0 Hz，H?3α），2.70 （1H，dd，J＝17.0，3.0 Hz，H?3β），5.89 （2H，dd，J＝7.5，2.0 Hz，H?6，8），7.31 （2H，d，J＝8.5 Hz，H?2′，6′），6.81 （2H，d，J＝8.5 Hz，H?3′，5′）；13C?NMR（125 MHz，CD3OD）δ： 80.6 （C?2），44.1 （C?3），197.8 （C?4），165.5 （C?5），97.1 （C?6），168.5（C?7），96.2 （C?8），165.0 （C?9），103.4 （C?10），131.2 （C?1′），129.1 （C?2′，6′），116.4 （C?3′，5′），159.1 （C?4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［8?9］ 一致，故鑒定為柚皮素。

化合物5： 黃色透明針狀晶體 （CH3OH）。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z： 287 ［M ? H］?，分子式C15H12O6。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 5.28 （1H，dd，J＝13.0，3.0 Hz，H?2），3.07 （1H，dd，J＝17.0，12.5 Hz，H?3α），2.69 （1H，dd，J＝17.0，3.0 Hz，H?3β），5.87 （1H，d，J＝2.5 Hz，H?6），5.89（1H，d，J＝2.0 Hz，H?8），6.91 （1H，s，H?2′），6.77 （1H，d，J＝8.0 Hz，H?5′），6.79 （1H，d，J＝8.0 Hz，H?6′）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ：80.6 （C?2），44.2 （C?3），197.8 （C?4），165.5（C?5），97.1 （C?6），168.4 （C?7），96.2 （C?8），164.9 （C?9），103.4 （C?10），131.8 （C?1′），114.7 （C?2′），146.6 （C?3′），146.9 （C?4′），116.3 （C?5′），119.3 （C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［10?11］一致，故鑒定為圣草酚。

化合物6： 淡黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z： 289［M ＋H］＋，分子式C15H12O6。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 4.97 （1H，d，J＝11.5 Hz，H?2），4.54（1H，d，J＝11.5 Hz，H?3），5.88 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6），5.92 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?8），6.83 （2H，dd，J＝2.0，8.5 Hz，H?3′，5′），7.35（2H，d，J＝2.0，8.5 Hz，H?2′，6′）；13C?NMR（CD3OD，125 MHz）δ： 85.0 （C?2），73.7 （C?3），198.6 （C?4），165.4 （C?5），97.4 （C?6），168.8（C?7），96.3 （C?8），164.4 （C?9），101.9 （C?10），129.3 （C?1′），130.4 （C?2′，6′），116.2 （C?3′，5′），159.3 （C?4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［12］ 一致，故鑒定為二氫山柰酚。

化合物7： 淡黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z： 305［M ＋H］＋，分子式C15H12O7。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 4.89 （1H，d，J＝11.5 Hz，H?2），4.50（1H，d，J＝11.5 Hz，H?3），5.88 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6），5.92 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?8），6.96 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?2′），6.80 （1H，d，J＝8.0 Hz，H?5′），6.85 （1H，d，J＝8.0 Hz，H?6′）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ： 85.2 （C?2），73.7 （C?3），198.5 （C?4），165.4 （C?5），97.4（C?6），168.8 （C?7），96.3 （C?8），164.6 （C?9），101.9 （C?10），129.9 （C?1′），115.9 （C?2′），146.4 （C?3′），147.2 （C?4′），116.1 （C?5′），120.9 （C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［13］ 一致，故鑒定為二氫槲皮素。

化合物8： 類白色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z： 321［M ＋H］＋，分子式C15H12O8。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 4.84 （1H，d，J＝11.0 Hz，H?2），4.46（1H，d，J＝11.0 Hz，H?3），5.88 （1H，d，J＝2.5 Hz，H?6），5.91 （1H，d，J＝2.5 Hz，H?8），6.52 （2H，s，H?2′，6′）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ： 85.4 （C?2），73.7 （C?3），198.4 （C?4），165.4 （C?5），97.3 （C?6），168.8 （C?7），96.3 （C?8），164.5 （C?9），101.9 （C?10），129.1（C?1′），108.1 （C?2′，6′），146.9 （C?3′，5′），135.0 （C?4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［14］ 一致，故鑒定為二氫楊梅素。

化合物9： 黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為黃色。ESI?MSm／z： 303 ［M?H］?，分子式C15H12O7。1H?NMR （500 MHz，DMSO?d6）δ： 12.14 （1H，s，5?OH），10.78 （1H，s，7?OH），8.95 （2H，s，3′，5′?OH），8.25 （1H，s，4′?OH），5.31 （1H，dd，J＝12.0，3.0 Hz，H?2），3.10 （1H，dd，J＝17.0，12.0 Hz，H?3α），2.67（1H，dd，J＝17.0，3.0 Hz，H?3β），5.87 （2H，d，J＝2.0 Hz，H?6，8），6.38 （2H，s，H?2′，6′）；13C?NMR （125 MHz，DMSO?d6）δ： 78.9 （C?2），42.6（C?3），196.8 （C?4），163.9 （C?5），96.2 （C?6），167.1 （C?7），95.4 （C?8），163.3 （C?9），102.3（C?10），129.1 （C?1′），106.1 （C?2′，6′），146.4（C?3′，5′），133.8 （C?4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［14］一致，故鑒定為5，7，3′，4′，5′?五羥基二氫黃酮。

化合物10： 類白色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為紫色。ESI?MSm／z： 331［M ＋H］＋，分子式C18H34O5。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 2.27 （2H，t，J＝7.0 Hz，H?2），1.59（2H，m，H?3），1.33 （14H，overlap，H?4，5，6，7，15，16，17），1.54 （4H，overlap，H?8，14），3.30 （2H，m，H?9），3.90 （1H，d，J＝6.0 Hz，H?10），5.70 （2H，overlap，H?11），5.68 （1H，overlap，H?12），4.04 （2H，m，H?13），0.90 （3H，t，J＝7.2 Hz，H?18）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ： 177.8 （C?1），35.7 （C?2），26.9 （C?3），30.4（C?4），30.3 （C?5），30.3 （C?6），30.7 （C?7），26.4 （C?8），75.7 （C?9），76.5 （C?10），136.5（C?11），130.9 （C?12），73.1 （C?13），38.3 （C?14），26.2 （C?15），33.5 （C?16），23.7 （C?17），14.4 （C?18）。以上數(shù)據(jù)與文獻［15］ 一致，故鑒定為 （9S，10R，11E，13R） ? 9，10，13 ?tri?hydroxyoctadec?11?enoic? acid。

化合物11： 類白色固體。UV254下有暗斑，UV365下無熒光，10%硫酸乙醇溶液幾無顯色。ESI?MSm／z： 153 ［M ? H］?，分子式C7H6O4。1H?NMR（500 MHz，CD3OD）δ： 7.43 （1H，brs，H?2），6.79（1H，d，J＝8.5 Hz，H?5），7.42 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ：123.3 （C?1），117.8 （C?2），146.1 （C?3），151.6（C?4），115.8 （C?5），123.9 （C?6），170.4 （?COOH）。以上數(shù)據(jù)與文獻［16］ 一致，故鑒定為原兒茶酸。

化合物12： 黃色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為黃色。ESI?MSm／z： 177 ［M?H］?，分子式C9H6O4。1H?NMR （500 MHz，CD3OD）δ： 7.78 （1H，d，J＝9.5 Hz，H?4），6.93 （1H，s，H?5），6.75 （1H，s，H?8），6.17 （1H，d，J＝9.5 Hz，H?3）；13C?NMR （125 MHz，CD3OD）δ：164.3 （C?2），113.1 （C?3），146.1 （C?4），112.9（C?5），144.6 （C?6），152.1 （C?7），103.7 （C?8），150.5 （C?9），112.5 （C?10）。以上數(shù)據(jù)與文獻［17?18］ 一致，故鑒定為七葉內(nèi)酯。

化合物13： 類白色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z：307 ［M ＋H］＋，分子式C15H14O7。1H?NMR （500 MHz，DMSO?d6）δ： 9.09 （1H，s，5?OH），8.89（1H，s，7?OH），8.70 （2H，s，3′，5′?OH），7.95（1H，s，4′?OH），4.62 （1H，d，J＝4.5 Hz，3?OH），4.65 （1H，s，H?2），3.98 （1H，m，H?3），2.50 （1H，dd，J＝16.5，3.5 Hz，H?4α），2.67（1H，dd，J＝16.5，4.5 Hz，H?4β），5.88 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6），5.71 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?8），6.37 （2H，s，H?2′，6′）；13C?NMR （125 MHz，DMSO?d6）δ： 78.6 （C?2），65.4 （C?3），28.6 （C?4），156.9 （C?5），95.5 （C?6），156.7 （C?7），94.5 （C?8），156.2 （C?9），99.0 （C?10），130.2（C?1′），106.5 （C?2′，6′），145.8 （C?3′，5′），132.6 （C?4′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［19］ 一致，故鑒定為表沒食子兒茶素。

化合物14： 白色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z： 291［M ＋H］＋，分子式C15H14O6。1H?NMR （500 MHz，DMSO?d6）δ： 9.09 （1H，s，5?OH），8.89 （1H，s，7?OH），8.80 （1H，s，3′?OH），8.72 （1H，s，4′?OH），4.66 （1H，d，J＝4.5 Hz，3?OH），4.73（1H，s，H?2），3.99 （1H，m，H?3），2.50 （1H，dd，J＝16.5，3.5 Hz，H?4α），2.67 （1H，dd，J＝16.5，4.5 Hz，H?4β），5.88 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6），5.71 （1H，d，J＝2.5 Hz，H?8），6.89 （1H，d，J＝1.5 Hz，H?2′），6.66 （1H，d，J＝8.0 Hz，H?5′），6.64 （1H，dd，J＝8.0，1.5 Hz，H?6′）；13C?NMR （125 MHz，DMSO?d6）δ： 77.9 （C?2），64.8（C?3），28.1 （C?4），155.7 （C?5），94.9 （C?6），156.4 （C?7），93.9 （C?8），156.1 （C?9），98.4（C?10），130.5 （C?1′），114.6 （C?2′），144.3 （C?3′），144.4 （C?4′），114.8 （C?5′），117.8 （C?6′）。以上數(shù)據(jù)與文獻［20］ 一致，故鑒定為表兒茶素。

化合物15： 黃棕色粉末。UV254下有暗斑，10%硫酸乙醇溶液顯色為橘黃色。ESI?MSm／z：453 ［M ＋H］＋。分子式C21H14O11。1H?NMR （500 MHz，DMSO?d6）δ： 9.14 （1H，s，7?OH），8.82（1H，s，3′?OH），8.73 （1H，s，4′?OH），4.70（1H，d，J＝3.0 Hz，3?OH），4.73 （1H，s，H?2），3.99 （1H，m，H?3），2.50 （1H，d，J＝3.5 Hz，H?4α），2.67 （1H，d，J＝3.5 Hz，H?4β），5.91 （1H，d，J＝2.0 Hz，H?6），5.88 （1H，s，H?8），6.90（1H，d，J＝2.5 Hz，H?2′），6.68 （1H，d，J＝8.5 Hz，H?5′），6.66 （1H，dd，J＝8.5，2.5 Hz，H?6′）；13C?NMR （125 MHz，DMSO?d6）δ： 78.1 （C?2），64.6 （C?3），28.1 （C?4），156.3 （C?5），96.4（C?6），155.3 （C?7），95.1 （C?8），156.7 （C?9），100.8 （C?10），130.4 （C?1′），114.8 （C?2′），144.5 （C?3′），144.4 （C?4′），114.7 （C?5′），117.8 （C?6′），100.6 （glu?C?1），73.2 （glu?C?2），76.9 （glu?C?3），69.5 （glu?C?4），76.7 （glu?C?5），60.6 （glu?C?6）。以上數(shù)據(jù)與文獻 ［21］ 一致，故鑒定為epicatechin?5?O?β?D?glucopyranaoside。

化合物16： 白色片狀晶體 （三氯甲烷）。UV254下無暗斑，UV365下無熒光，10%硫酸乙醇溶液顯粉紅色。與對照品β?谷甾醇共薄層展開，呈現(xiàn)均一斑點，故鑒定為β?谷甾醇。

化合物17： 白色粉末，任何有機溶劑都不易溶，UV254下無暗斑，UV365下無熒光，10% 硫酸乙醇溶液顯紫色。與對照品胡蘿卜苷共薄層展開，呈現(xiàn)均一斑點，故鑒定為胡蘿卜苷。

4 討論

國內(nèi)外學者目前已從文冠果的木部 （文冠木）、果殼、果柄、種皮、花和整個果實中分離得到100 多個化合物，主要為三萜類、黃酮類、酚酸類、甾體等成分。本研究共分離鑒定出17 個化合物，包括6 個黃酮類、6 個二氫黃酮類、1 個香豆素、2 個酸類、2 個甾體類。研究結果亦表明二氫黃酮類化合物是其主要的化學成分類型。