關(guān)于建立子癇前期大鼠小鼠模型的研究進(jìn)展

何岑盈謝瑩?dān)L*徐夢(mèng)婷

(1.青海大學(xué)研究生院,西寧 810016; 2.青海大學(xué)附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科,西寧 810001)

子癇前期(Preeclampsia,PE)在全球的發(fā)病率為2%～8%,每年可致大約70 000 孕產(chǎn)婦和500 000圍產(chǎn)兒死亡[1]。子癇是妊娠期高血壓疾病中最嚴(yán)重的形式,PE 是可以通過(guò)早期診斷、治療達(dá)到預(yù)防進(jìn)展為子癇從而改善母體和圍產(chǎn)兒預(yù)后的一種疾病,由此可見(jiàn)PE 的動(dòng)物模型對(duì)產(chǎn)科領(lǐng)域的研究十分重要。雖然嚙齒類動(dòng)物中的大、小鼠胎盤結(jié)構(gòu)比人類簡(jiǎn)單且胎盤形成機(jī)制與人類不一致,但胎盤結(jié)構(gòu)組成、細(xì)胞種類與人類相似,同時(shí)具備滋養(yǎng)細(xì)胞浸潤(rùn)、子宮螺旋動(dòng)脈重塑的特點(diǎn)[2],再加上大小鼠因經(jīng)濟(jì)、易獲取、生存力強(qiáng)、妊娠周期短等特點(diǎn)受廣大研究者的青睞,故就PE 大、小鼠模型做一綜述。因PE 的發(fā)病機(jī)制尚未明確,大、小鼠PE 模型的制作和表型參差不齊,各有其優(yōu)缺點(diǎn),本文可為不同的研究目的選擇合適的方法制作模型提供參考依據(jù),促進(jìn)PE 的病理生理學(xué)和潛在治療措施研究的進(jìn)步,從而有效的提高PE 孕產(chǎn)婦及圍生兒存活率。

1 子宮血流量減少模型

降低子宮血流量的手術(shù)方法有腹主動(dòng)脈及雙側(cè)子宮血管卵巢支縮窄術(shù)[3]、腹主動(dòng)脈分支雙側(cè)子宮動(dòng)脈縮窄術(shù)[4]、在大鼠妊娠前進(jìn)行腎主動(dòng)脈縮窄術(shù)[5]等。這類動(dòng)物模型具有很多PE 的表型特征:高血壓,蛋白尿,胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限,臍動(dòng)脈血流S/D 值增高,光鏡和電鏡下的胎盤組織病理變化[4],典型腎組織病理改變[4],明顯心肌損傷[6]及胰島素敏感性降低[5]。該模型主要模擬了胎盤缺血導(dǎo)致PE發(fā)生的機(jī)制,在模擬血壓升高、氧化應(yīng)激增強(qiáng)以及胎兒生長(zhǎng)受限表型方面與人類最貼近,避免了用藥制作的模型藥物本身對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響,簡(jiǎn)單易行,缺血部位明確,可以根據(jù)缺血部位的不同導(dǎo)致血壓、蛋白尿的不同變化[7],但系手術(shù)操作,需暴露子宮及胚胎,導(dǎo)致流產(chǎn)風(fēng)險(xiǎn)升高。在大鼠妊娠前進(jìn)行腎主動(dòng)脈縮窄術(shù),可解決研究窗口窄的問(wèn)題,觀察孕鼠整個(gè)妊娠期病理及生理變化,從而研究早期的免疫異常、滋養(yǎng)層細(xì)胞浸潤(rùn)、血管改建等發(fā)病機(jī)制。但無(wú)HELLP 綜合征等嚴(yán)重的PE 并發(fā)癥。

2 炎癥免疫過(guò)度激活模型

Toll 樣受體9(toll-like receptor 9,TLR 9)是參與先天性免疫反應(yīng)的關(guān)鍵模式識(shí)別受體[8],激活后可刺激Th1 淋巴細(xì)胞反應(yīng)和釋放炎癥細(xì)胞因子[9]。He 等[10]研究發(fā)現(xiàn)于小鼠妊娠的第7.5、9.5 和11.5天給腹膜內(nèi)注射TLR9 激動(dòng)劑ODN1826(5 mg/kg),孕鼠可出現(xiàn)收縮壓升高,蛋白尿,腎小球內(nèi)皮增生,脾腫大,胎兒生長(zhǎng)受限和胎盤發(fā)育異常變化。未妊娠小鼠給予相同處理,未出現(xiàn)上述表型,即該模型是妊娠特異性的,且升高的血壓可在分娩后10 d 恢復(fù)正常。

白介素4(Interleukin-4,IL-4)是一種可以促進(jìn)抗炎性Th2 淋巴細(xì)胞分化并抑制促炎性Th1 細(xì)胞分化的細(xì)胞因子。在 Chatterjee 等[11]研究中,IL-4 缺陷(基因敲除)C57BL/6J 小鼠妊娠后出現(xiàn)血清中促炎性細(xì)胞因子白介素6(Interleukin-6,IL-6)和白介素12(Interleukin-12,IL-12)水平升高,胎盤中的炎癥標(biāo)志物細(xì)胞間黏附分子- 1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)表達(dá)顯著增加,高血壓,主動(dòng)脈松弛反應(yīng)減低(內(nèi)皮功能障礙),蛋白尿,脾重量/體重比增加,胎兒發(fā)育遲緩及死亡率增加。該方法同樣具有妊娠特異性。

抗AT1 受體自身抗體(autoantibodies against AT1 receptor,AT1-AAs)存在于PE 患者體內(nèi),可結(jié)合并激活血管緊張素II 受體1a 型(AT1 受體)[12]。通過(guò)將總IgG(大約800 μg 來(lái)自PE 妊娠婦女)或來(lái)自PE 患者的AT1-AAs 在眶內(nèi)注射入妊娠第13 天的小鼠體內(nèi),可出現(xiàn)高血壓,蛋白尿,腎小球內(nèi)皮細(xì)胞病,胎盤異常改變及胎兒生長(zhǎng)受限[12]。該模型可以為PE 是一種自身免疫性疾病提供實(shí)驗(yàn)支持。

3 血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷模型

3.1 炎癥介質(zhì)模型

LIGHT(TNFSF14)是腫瘤壞死因子配體超家族成員[13]。向妊娠第 13～14 天的 C57/BL6 小鼠經(jīng)眼球后靜脈叢注入藥物L(fēng)IGHT(用生理鹽水稀釋,濃度為2 ng/100 μL,劑量為2 ng/d),孕鼠出現(xiàn)了明顯的高血壓,蛋白尿,胎盤和腎組織輕微病理?yè)p傷,胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育遲緩,循環(huán)中可溶性FMS 樣酪氨酸激酶-1(soluble fms-like tyrosine kinase-1,sFlt-1)、內(nèi)皮素-1(Endothelin-1,ET-1)均升高,但血壓及ET-1 在非妊娠小鼠中也可見(jiàn)升高[14],無(wú)妊娠特異性。自妊娠第13 天開(kāi)始,通過(guò)皮下植入微型滲透泵,持續(xù)釋放腫瘤壞死因子-α(tumour necrosis factor-alpha,TNF-α),劑量設(shè)置為 500 ng/(kg·d),直到分娩,C57BL/6JARC 小鼠出現(xiàn)高血壓,蛋白尿,炎癥反應(yīng)分子/天然免疫系統(tǒng)分子 Toll 樣受體3(toll-like receptor 3,TLR-3)、Toll 樣受體 4(toll-likereceptor 4,TLR-4)在胎盤迷路母細(xì)胞間隙的滋養(yǎng)細(xì)胞膜和蛻膜細(xì)胞中表達(dá)上調(diào),以及缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-inducible factor 1 alpha,HIF-1α)在胎盤組織中表達(dá)上調(diào)[15]。該模型表明腫瘤壞死因子失衡引起的Toll 樣受體(toll-like receptor,TLR)和HIF-1α 調(diào)節(jié)失調(diào)可能參與了PE 的發(fā)病機(jī)制。

內(nèi)毒素的毒性成分主要為類脂質(zhì)A,作用于機(jī)體可引起炎癥反應(yīng)。王志堅(jiān)等[16]對(duì)妊娠第15 天的Wistar 大鼠沿尾靜脈緩慢注入內(nèi)毒素(1.0 μg/kg),發(fā)現(xiàn)動(dòng)物出現(xiàn)高血壓,蛋白尿,腎功能損害,胎兒生長(zhǎng)受限及死胎率升高。后其他研究者發(fā)現(xiàn)該方法引起的胎盤慢性炎癥表現(xiàn)包括:迷路帶纖維蛋白沉積、組織核碎裂,基帶炎性細(xì)胞浸潤(rùn),蛻膜帶腫脹增厚等,這些病理變化與人類PE 胎盤表現(xiàn)類似[17]。未見(jiàn)腎病理報(bào)道。相關(guān)試驗(yàn)過(guò)程中未發(fā)生尾靜脈炎,可考慮PE 是內(nèi)毒素引起的廣泛炎癥導(dǎo)致。

脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)的組成成分之一是脂質(zhì)A(或內(nèi)毒素)的疏水域[18]。從妊娠的第13 天開(kāi)始至第18 天每天一次給SD 大鼠腹膜內(nèi)注射LPS,研究表明從20 μg/kg 劑量開(kāi)始每天增加10 μg/kg 是最合適的用LPS 建立PE 動(dòng)物模型的劑量選擇,可保持相對(duì)較高的胎兒存活率,導(dǎo)致母體血清和胎盤炎性細(xì)胞因子升高,胎盤明顯的炎癥病理變化,高血壓,蛋白尿,胎兒生長(zhǎng)受限及早產(chǎn)[19]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道LPS 造模對(duì)母體無(wú)明顯影響[20]。未見(jiàn)腎病理報(bào)道。

合體滋養(yǎng)細(xì)胞微絨毛膜(syncytiotrophoblast microvillous membrane,STBM)是合體滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡時(shí),合體滋養(yǎng)細(xì)胞微絨毛從細(xì)胞表面脫落下來(lái)進(jìn)入到母體循環(huán)中形成的囊泡樣顆粒[21],其可以導(dǎo)致小血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能紊亂[22]。研究者直接采用PE孕婦分娩的胎盤制備STBM,于SD 大鼠妊娠的第7.5 天、第10.5 天、第13.5 天通過(guò)尾靜脈注入生理鹽水量+含STBM 液體量分別為0.3 mL+0.3 mL、0.3 mL+0.3 mL、0.4 mL+0.4 mL,孕鼠出現(xiàn)了高血壓,蛋白尿,肝腎功能損害,血漿中炎癥因子TNF-α、IL-6 升高,胎兒發(fā)育遲緩,血小板減少及腎組織病理?yè)p害[23],但未見(jiàn)胎盤病理報(bào)道。

3.2 一氧化氮合成酶缺乏模型

亞硝基左旋精氨酸甲酯(N-nitro-arginine methyl ester,L-NAME)是一種一氧化氮合成酶抑制劑[24]。過(guò)量sFlt-1 表達(dá)可誘導(dǎo)一氧化氮合成酶缺乏[25]。有研究表明將Wistar 大鼠在妊娠2 周后連續(xù)5 d 注射劑量為200 mg/(kg·d)的L-NAME,可建立 PE 模型。該模型的Th1/Th2 發(fā)生Th1 方向偏移,可模擬PE 免疫抗炎作用失衡的發(fā)病機(jī)制[26]。Feng 等[27]于妊娠第0 天開(kāi)始用L-NAME,劑量為80 mg/(kg·d),給 SD 大鼠灌胃8 d,也成功建立了 PE 模型。Shu 等[28]通過(guò)實(shí)驗(yàn)得出 SD 大鼠從妊娠第9 天開(kāi)始,連續(xù)皮下注射L-NAME,用量為75 mg/(kg·d),建立的模型是一種最符合人類PE 表型的模型。根據(jù)以上文獻(xiàn)及其他相關(guān)報(bào)道可知,孕鼠注射LNAME 可產(chǎn)生與人類PE 類似的表型[29],涵蓋了高血壓,蛋白尿,腎功能損傷,腎小球內(nèi)皮病等典型腎病理,肝功能損傷并伴有肝小葉周邊區(qū)域局灶性壞死的肝病理,胎盤炎性細(xì)胞浸潤(rùn)、纖維素樣壞死及出血性梗死的胎盤病理,自然流產(chǎn)死胎,胎兒發(fā)育受限,仔鼠畸形[29],母鼠腎上腺功能受損,胎鼠腦組織神經(jīng)細(xì)胞損傷及腎上腺、胰腺功能損傷等對(duì)后代產(chǎn)生的各種影響[30]。sFlt-1 具有抗血管生成特性,通過(guò)在妊娠第8 天或第9 天給大鼠尾靜脈注射編碼鼠源sFlt1 基因產(chǎn)物的重組腺病毒,報(bào)道了明顯的高血壓,嚴(yán)重的蛋白尿,腎小球內(nèi)皮細(xì)胞增生,無(wú)妊娠特異性。有趣的是,給予抑制sFlt-1 表達(dá)的對(duì)照組妊娠小鼠未發(fā)生PE,未妊娠小鼠卻出現(xiàn)了PE 表型。sFlt1 在胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞分化和發(fā)育中的作用還有待繼續(xù)探索[31]。

4 血液高凝模型

Omatsu 等[32]向ICR 妊娠小鼠體內(nèi)注入能提供凝血因子酶促反應(yīng)表面的磷脂酰絲氨酸/磷脂酰膽堿(PS/PC)微團(tuán),孕鼠可出現(xiàn)血壓增高、蛋白尿、胎盤絨毛間隙廣泛纖維蛋白沉積等,但血壓升高未達(dá)到140 mmHg。張焱等[33]隨后復(fù)制并優(yōu)化了該模型,ICR 小鼠自妊娠第5.5 天開(kāi)始經(jīng)尾靜脈給予0.1 mL PS/PC(1 mg/d)至妊娠第16.5 天,上述表型均出現(xiàn),還可見(jiàn)宮內(nèi)胎兒生長(zhǎng)遲緩、死胎,其中死胎率為2.10%,高血壓超過(guò)140 mmHg。PE 模型的仔鼠總體表現(xiàn)為勻稱性胎兒生長(zhǎng)受限與臨床PE 類似,伴腦發(fā)育障礙[34]。該模型適合從凝血功能和胎盤病理方面研究PE 發(fā)病機(jī)制[33]。

5 基因修飾模型

5.1 基因敲除模型

APOE 是一個(gè)多功能蛋白,在包裝和轉(zhuǎn)運(yùn)脂類中起主要作用。誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)是一氧化氮合酶(NOS)中的一種類型,激活后能在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生大量的NO[35]。APOE-/-純合子小鼠于妊娠第12 ～16 天出現(xiàn)血壓升高,尿蛋白增加,胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限,明顯的血脂異常,胎盤病理變化,胎盤組織炎癥相關(guān)蛋白 TNF-a、IL-6、NF-κB 表達(dá)水平明顯升高,但血壓未超過(guò) 140 mmHg[35]。APOE-/-iNOS-/-雙基因敲除小鼠可使PE 癥狀較APOE-/-單基因敲除組加重,血壓可超過(guò)140 mmHg,血清及胎盤中 NO 明顯減少[35]。兒茶酚氧位甲基轉(zhuǎn)移酶(COMT)是一種在人體內(nèi)廣泛存在的細(xì)胞內(nèi)酶,主要作用是通過(guò)使雌激素及兒茶酚胺類物質(zhì)降解而避免心血管疾病發(fā)生。有研究發(fā)現(xiàn)COMT 基因缺失的孕鼠可出現(xiàn)高血壓,蛋白尿,腎小球血管內(nèi)皮病變,類似人類胎盤的蛻膜血管病變,血漿中sFlt1 濃度及胎盤中HIF -1α 蛋白表達(dá)明顯升高[36]。以上基因敲除模型可讓研究人員從先天遺傳學(xué)及內(nèi)分泌代謝異常的角度探討PE 發(fā)病機(jī)制。

5.2 H19X siRNA 模型

H19X包括H19基因和非編碼 RNA(non-coding RNA,lncRNA),在胎盤中特異性表達(dá),與胎盤形成及胚胎生長(zhǎng)、發(fā)育密切相關(guān)[37]。大量證據(jù)表明,lncRNA 可以被小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默[38]。給 C57BL/6 孕鼠注射含H19XsiRNA 的精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸肽修飾的聚乙二醇化陽(yáng)離子脂質(zhì)體(arginine-glycine-aspartic acid peptide modified PEGylated cationic liposome,RGDLip),H19XsiRNA 被有效轉(zhuǎn)移到胎盤中,孕鼠可出現(xiàn)血壓升高,尿蛋白/肌酐比率顯著增加,胎盤血管密度及分支減少,典型腎病理變化,明顯的胎兒體重減輕和胎兒吸收[39]。該模型優(yōu)點(diǎn)為無(wú)需手術(shù)即可敲除H19X導(dǎo)致小鼠出現(xiàn)PE 樣癥狀,RGD-Lip 載體的毒性和H19XsiRNA 誘導(dǎo)的炎癥可以忽略,但H19X和PE 之間的確切關(guān)系有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

6 內(nèi)分泌代謝異常模型

6.1 鹽皮質(zhì)激素模型

醋酸去氧皮質(zhì)酮(desoxycorticosterone acetate,DOCA)是鹽皮質(zhì)激素,有類醛固酮作用,可使細(xì)胞外液容積增加。陳雅[40]將SD 大鼠整個(gè)孕期予以0.9%生理鹽水(NS)喂養(yǎng),然后于妊娠第1 天、第8 天、第 15 天經(jīng)腹腔分別給予 DOCA 12.5 mg、DOCA 6.5 mg、DOCA 6.5 mg,出現(xiàn)了平均動(dòng)脈壓升高,蛋白尿,心率升高,腎交感放電活動(dòng)(renal sympathetic nerve activity,RSNA)增強(qiáng)。隨后有研究者繼續(xù)復(fù)制該模型,證實(shí)該模型的平均動(dòng)脈壓、血流的流速和尿蛋白濃度的變化與PE 患者一致,尿液中去甲腎上腺素排出量增加,腦干交感中樞頭端延髓腹外側(cè)區(qū)(rostral ventrolateral medulla,RVLM)中的活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平明顯升高和氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白NADPH氧化酶亞型(NOX4)表達(dá)上調(diào),對(duì)照組微量注射超氧化物歧化酶(SOD)模擬物Tempol(5 nmol)可導(dǎo)致PE 大鼠的血壓,心率和RSNA 顯著降低,表明RVLM 中氧化應(yīng)激過(guò)度激活與交感神經(jīng)過(guò)度活躍及高血壓有關(guān),為PE 發(fā)病機(jī)制的研究提供了一種新的思路[41]。

6.2 雄激素模型

Chinnathambi 等[42]于 SD 大鼠妊娠的第 15 ～19天給予皮下注射丙酸睪丸激素,用量0.5 mg/(kg·d),可模擬人類PE 因睪丸激素水平導(dǎo)致的平均動(dòng)脈壓升高。其他研究結(jié)果還表明,妊娠期間孕鼠睪丸激素水平升高會(huì)導(dǎo)致腎肥大和蛋白尿[43],子宮動(dòng)脈的NO 介導(dǎo)的血管舒張作用減低[44],胎盤的大小、體重減低及氨基酸向胎鼠的轉(zhuǎn)運(yùn)減少但不改變葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)[45-46],胎盤氧合減低及胎兒缺氧[47]。有文獻(xiàn)表明在PE 中觀察到的某些血管和胎盤病變可能是睪丸激素介導(dǎo)的[43]。

6.3 腺苷脫氨酶缺乏模型

在Iriyama 等[48]的實(shí)驗(yàn)中,通過(guò)引入在α-甲胎蛋白調(diào)控下,才能僅在胎兒肝中表達(dá)的ADA 小基因(fLi-Tg)來(lái)產(chǎn)生胎兒肝拯救的腺苷脫氨酶缺陷鼠( fetal liver rescued adenosine deaminase-deficient mice,Ada-/-/fLi-Tg+ mice),研究者通過(guò)Ada-/-/fLi-Tg+ mice 模型評(píng)估了整個(gè)妊娠期間胎盤腺苷升高的影響。他們?cè)O(shè)計(jì)了一種交配策略,即將雄性Ada-/-/fLi-Tg+ mice 與雌性Ada+/-/fLi-Tg+ mice 雜交,獲得一半胎盤被認(rèn)為是ADA 缺陷且腺苷水平升高的懷孕小鼠,發(fā)現(xiàn)該模型從胚胎形成的第15.5 天(E15.5)開(kāi)始表現(xiàn)出平均收縮壓持續(xù)升高,到產(chǎn)后第5 天恢復(fù)正常,在E18.5 尿蛋白顯著升高到產(chǎn)后第7 天恢復(fù)至未孕狀態(tài),胎兒生長(zhǎng)受限,胎盤重量減輕、血管系統(tǒng)受損和循環(huán)中Flt1(fms-like tyrosine kinase-1)基因表達(dá)增加,典型腎病理變化。因?yàn)樘ケP腺苷升高發(fā)生于胎盤脈管系統(tǒng)受損、胎兒生長(zhǎng)受限及母體PE 特征之前,考慮胎盤腺苷升高可能是上述變化的基礎(chǔ),可以推動(dòng)PE 進(jìn)展。

7 低氧模型

HIF-1α 在早孕胎盤低氧環(huán)境中高表達(dá),在胎盤發(fā)育中起著重要作用[49]。通過(guò)給妊娠第8 天的C57BL / 6 J 孕鼠尾靜脈注射穩(wěn)定表達(dá)HIF-1α 的腺病毒,孕鼠可出現(xiàn)顯著高血壓,蛋白尿明顯增多,胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限,胎盤及腎組織病理?yè)p害,HELLP樣綜合征以及肺組織的彌漫性炎癥、血管損傷和出血[50]。Albers 等[51]補(bǔ)充了該模型的PE 表型調(diào)整,包括典型腎病理變化,胎盤血管分支形態(tài)減少和螺旋動(dòng)脈重塑失敗,以及妊娠期高血壓在分娩后可恢復(fù)正常。Lai 等[52]建立了另一種低氧模型,通過(guò)將C57BL/6 小鼠(野生型或IL-10-/-)在妊娠的第7.5～17 天暴露于低氧(9.5%)環(huán)境中均可引起孕鼠出現(xiàn)高血壓,蛋白尿,腎病理?yè)p害,胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限。HIF-1α 的腺病毒產(chǎn)生的HELLP 樣綜合征在妊娠及非妊娠鼠中均存在,考慮HELLP 綜合征與高血壓和腎損害發(fā)展之間對(duì)于胎盤需求的差異可能在于不同的致病機(jī)制[50]。用IL-10 基因敲除小鼠或野生型小鼠在低氧環(huán)境中建立的模型均為妊娠特異性,IL-10 的缺乏可進(jìn)一步加重上述PE 癥狀及病理變化。該模型可以為研究IL-10 與低氧之間的相互作用及對(duì)PE 的影響提供研究基礎(chǔ)。

8 自發(fā)性高血壓并發(fā)PE 模型

Dahl 鹽敏感性大鼠和BPH/5 小鼠都是自發(fā)性高血壓的遺傳模型動(dòng)物[53-54]。SHRSP 大鼠(stroke-prone spontaneously hypertensive rat) 是腦卒中易發(fā)性高血壓癥模型動(dòng)物[55],妊娠后存在異常子宮動(dòng)脈重構(gòu)病變[56]。Dahl 鹽敏感性大鼠在妊娠晚期出現(xiàn)的變化包括血壓較前升高,蛋白尿,胎盤組織及腎組織病理?yè)p害,胎兒生長(zhǎng)受限,胎盤中HIF-1α 和 TNF-α 表達(dá)升高,血漿中 TNF-α、sFlt-1 濃度升高[53]。BPH/5 小鼠懷孕期間觀察到的表型與Dahl 鹽敏感性大鼠的PE 表型相似[53]。用微型泵給SHRSP 大鼠于妊娠的第10.5 天起至足月止持續(xù)輸注血管緊張素Ⅱ(angiotensin II,AngⅡ)500 ng/(kg·min)或 1000 ng/(kg·min),妊娠期間出現(xiàn)血壓顯著升高,蛋白尿,心輸出量降低,子宮動(dòng)脈直徑減小,子宮動(dòng)脈僵硬度增加,胎兒生長(zhǎng)受限等PE 表型[56]。Dahl 鹽敏感性大鼠和BPH/5 小鼠可為心血管疾病合并PE 的遺傳方面的研究提供造模對(duì)象,而SHRSP 大鼠適用于后天獲得性與心血管疾病相關(guān)的PE 研究。

9 小結(jié)及展望

目前雖有手術(shù)、生物制劑誘導(dǎo)、基因敲除、物理治療等方法建立PE 模型,但國(guó)內(nèi)仍以生物制劑誘導(dǎo)造模的應(yīng)用更為廣泛,該方法易操作,過(guò)程簡(jiǎn)單,成功率高。本文章綜述的造模機(jī)制之間具有相關(guān)性,尤其在炎癥免疫過(guò)度激活與血管內(nèi)皮損傷模型中,一系列的炎癥反應(yīng)可以引起血管內(nèi)皮損傷,反之亦然,這也很好地證實(shí)了PE 發(fā)病是多因素相互作用的結(jié)果。不同的方法都可以成功建立PE 模型也可為PE 的發(fā)病機(jī)制及預(yù)防治療提供多種可能性,因造模方式中的生物制劑或基因相關(guān)信號(hào)過(guò)程與PE 發(fā)病相關(guān),可考慮通過(guò)其激動(dòng)(或阻斷)劑,以及對(duì)相關(guān)信號(hào)過(guò)程的修飾來(lái)減輕PE 癥狀從而提高妊娠安全性。國(guó)內(nèi)也有少量將兩種造模方法組合而成功建立PE 模型的研究報(bào)道,一種PE 模型的表型有限,將兩種或者更多方法組合起來(lái)則有望研究出更完善的PE 模型。另外,在胎盤植入過(guò)程中,大鼠的滋養(yǎng)層浸潤(rùn)比小鼠模仿人的胎盤更好[57],因此可能更適用于PE 造模?？偠灾?PE 的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的過(guò)程,目前沒(méi)有一種動(dòng)物模型能完全復(fù)制疾病的自然進(jìn)程,每種造模方法都有其自身的優(yōu)勢(shì)和局限性,實(shí)驗(yàn)者應(yīng)根據(jù)自己的研究方向和實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的PE 模型,從而推進(jìn)人類攻克PE這類疾病的歷史進(jìn)程。