蔬菜中農(nóng)藥殘留的化學(xué)檢驗(yàn)方法

張 吉

（哈爾濱市大工司法鑒定科學(xué)技術(shù)研究所，黑龍江哈爾濱 150001）

新時代需要重視蔬菜噴灑農(nóng)藥，并且70%的農(nóng)藥都是有機(jī)磷農(nóng)藥，那么蔬菜中必定會殘留一些超標(biāo)的物質(zhì)，對人體健康以及安全具有嚴(yán)重影響和威脅。為提升人們身體健康程度，提出了蔬菜農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測工作，對田間蔬菜進(jìn)行普查，做好農(nóng)貿(mào)市場調(diào)查工作，滿足人們實(shí)際需求，做好化學(xué)檢驗(yàn)工作，防止蔬菜中存在過多農(nóng)藥物質(zhì)，影響人體身體健康。

1 化學(xué)速測法

此種方法就是結(jié)合蔬菜中的有機(jī)磷農(nóng)藥氧化還原性進(jìn)行合理檢測和分析，有機(jī)磷農(nóng)藥中存在的物質(zhì)如磷脂酸、磷酸銨等，會在催化劑基礎(chǔ)下發(fā)生水解，轉(zhuǎn)變?yōu)榱姿嵋约按迹⑶易詈蟮乃猱a(chǎn)物和顯色劑發(fā)生反應(yīng)，將紫紅色轉(zhuǎn)變?yōu)闊o色。具體檢測步驟就是，選擇3～4mL農(nóng)藥溶液，和兩小滴紫紅色顯色劑溶液均勻混合在一起，然后向其中添加黃色催化劑，劑量為四滴，將反應(yīng)位置放置5～10min左右，液體發(fā)生褪色則表示農(nóng)藥中殘留物質(zhì)超標(biāo)。此種檢測方法的優(yōu)勢在于屬于化學(xué)反應(yīng)，方法比較穩(wěn)定，操作比較簡單，不需要進(jìn)行前期培訓(xùn)，一次可以完成多個樣品實(shí)驗(yàn)工作，并且檢測消耗的時間是非常短的。不過缺點(diǎn)就是在臨界點(diǎn)周圍存在的顏色變化并不明顯，對特定有機(jī)農(nóng)藥比較敏感，容易受到還原性物質(zhì)的干擾[1]。

2 酶抑制法

此種方法就是有機(jī)磷和氨基甲酸脂農(nóng)藥可特異性的抑制乙酰膽堿酯酶自身的活動，將準(zhǔn)備好的樣品和乙酰膽堿酯酶混合在一起，結(jié)合混合后出現(xiàn)的顏色以及物理信息變化程度進(jìn)行判斷，可以識別出農(nóng)藥中有機(jī)磷以及氨基甲酸脂類殘留?，F(xiàn)在最常用酶抑制法為：速測卡、比色法以及膽堿酯酶生物傳感器法等[2]。速測卡也就是紙卡測試方法，操作十分簡單，使用期間比計(jì)較方便，可以直接使用在田間以及超市中的蔬菜農(nóng)藥殘留物質(zhì)檢測工作中[3]。比色法可以稱之為分光光度法，同樣也是借助有機(jī)磷以及氨基甲酸酯類對農(nóng)藥中存在的乙酰膽堿酯酶抑制作用實(shí)現(xiàn)檢測目的，因?yàn)橐种坡屎娃r(nóng)藥配比濃度之間存在一定關(guān)系，所以可以使用分光光度計(jì)數(shù)和讀書方式進(jìn)行檢測。上述兩種方法都可以在現(xiàn)場即可完成現(xiàn)場檢測工作，迅速得到購買的蔬菜中是否存在殘留的農(nóng)藥物質(zhì)，可以有效避免農(nóng)藥殘留蔬菜進(jìn)入到市場，保證人們食用蔬菜的安全性。酶生物傳感器是通過物質(zhì)進(jìn)行識別，主要是由固定化酶膜和生物點(diǎn)擊組成的，檢測工作原理是借助酶自身存在的專一性特點(diǎn)，以酶促反應(yīng)作為依據(jù)，使得生物點(diǎn)擊可以有效傳輸信息，進(jìn)而完成定量分析工作。酶生物傳感器存在過程迅速，操作容易、靈活度高以及特異性強(qiáng)等基本特征，不過因?yàn)槭褂玫拿冈噭┍４娌环奖?，容易失去活性，所以檢測結(jié)果不夠真實(shí)，數(shù)據(jù)并不穩(wěn)定。

基于此詳細(xì)介紹化學(xué)比色法，在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥會對膽堿酯酶起到一種抑制效果，并且抑制程度和農(nóng)藥自身配比存在一定關(guān)系。一般情況下，酶會對乙酰膽堿進(jìn)行催化，進(jìn)而出現(xiàn)水解反應(yīng)，最終形成的產(chǎn)物會和顯色劑發(fā)生反應(yīng)，進(jìn)而出現(xiàn)黃色物質(zhì)，在分光光度計(jì)處在412nm期間，記錄吸光度隨著時間變化的數(shù)值，通過有效記錄后進(jìn)行計(jì)算，可以得到抑制率，通過抑制率的推算可以判斷蔬菜中是否含有高濃度有機(jī)磷或者氨基甲酸脂類物質(zhì)。檢測具體過程就是，選擇一種蔬菜作為樣品，然后使用清水將蔬菜表層存在的泥土全部清洗干凈，然后使用剪刀將其剪成1cm的碎片，從中選擇1g作為實(shí)驗(yàn)樣品，然后將其放入到燒杯之中，再加入5mL的緩沖液，蓋上蓋子進(jìn)行震蕩，時間控制在1～2min，將提取液提取出來，靜置3～5min左右等待使用?，F(xiàn)在試管中添加2.5mL緩沖液，進(jìn)而加入0.1mL酶液和同等劑量的顯色劑，充分搖勻，在正常溫度下放置15min以上，一定要注意不同批次樣品一定要控制好時間。在加入0.1mL底物搖勻，放入到儀器比色池之中，在3min內(nèi)記錄樣品的吸光度變化數(shù)值[4]。結(jié)合變化的數(shù)值可以計(jì)算出正確抑制率，一旦計(jì)算出的抑制超過了50%，那么蔬菜中則還有該農(nóng)藥殘留物，樣品則體現(xiàn)為陽性結(jié)果。不同檢測機(jī)構(gòu)使用的儀器存在差異性，酶以及底物的差異必定會引起抑制率的差異。

3 植物水解酶法

因?yàn)橐阴Ｄ憠A酯酶一般都是來自動物血液中的，需要的材料非常昂貴，并且保存并不方便，所以近年來人們研究出一種全新物質(zhì)水解酶代替乙酰膽堿酯酶進(jìn)行檢測工作，植物水解能夠加快2，6-二氯乙酰靛酚酶發(fā)生水解，并且植物水解酶可以促進(jìn)α-乙酸萘脂轉(zhuǎn)化為α-萘酚，和Fe3Cl3溶液發(fā)生反應(yīng)，發(fā)生反應(yīng)后會生成紫色配合物，吸光度處在516nm波長范圍內(nèi)，顯色反應(yīng)主要是因?yàn)樵谵r(nóng)藥中被抑制，質(zhì)量濃度也比較大，吸光度的下降則會加快，依據(jù)此關(guān)系可以成為植物水解酶分光光度法檢測蔬菜農(nóng)藥方法。

4 免疫分析法

其工作原理是抗原抗體特異性識別以及結(jié)合反應(yīng)的一種分析形式，農(nóng)藥以及藥物小分子借助碳鏈長度和大載體結(jié)合起來，通常都是指蛋白質(zhì)這類物質(zhì)，才能共價鍵之間有效結(jié)合，最后可以形成人工抗原形式，再將其注射到動物體內(nèi)中，以克隆抗體以及細(xì)胞技術(shù)結(jié)合形式，完成抗體克隆工作，再使用抗原酶標(biāo)記技術(shù)，依據(jù)顯色反應(yīng)程度對蔬菜進(jìn)行合理檢測工作，可以使用三唑酮對黃瓜以及梨等產(chǎn)品進(jìn)行合理檢測。檢測限達(dá)40ug/kg，所以針對農(nóng)藥中殘留物質(zhì)的檢測可以使用免疫分析法，主要是酶免疫、反射免疫、熒光免疫和化學(xué)發(fā)光免疫等，人們最常使用的方式就是酶免疫技術(shù)。

蔬菜農(nóng)藥殘留的有效去除需要使用很多化學(xué)知識，比如可以使用堿水浸泡方式，借助化學(xué)堿性條件加快有機(jī)磷農(nóng)藥的分解，使用加熱分解法使得農(nóng)藥中氨基甲酸酯類殺蟲劑被快速分解，對于一些處理難度大的蔬菜，也可以通過高溫加熱方式對殘留物質(zhì)進(jìn)行去除。貯藏轉(zhuǎn)化法是根據(jù)蔬菜中農(nóng)藥殘留依據(jù)時間變化逐漸分解原理，對于一些容易保存的蔬菜效果比較明顯，可以降低毒性，減少蔬菜中農(nóng)藥殘留物質(zhì)遺留，一直到蔬菜符合人們使用標(biāo)準(zhǔn)后推入市場交易中。也可以借助高頻高電放電，進(jìn)而可以產(chǎn)生大量臭氧，從而真正達(dá)到殺菌效果，與此同時可以保留蔬菜自身味道，延長蔬菜保留時間，便于各種蔬菜的清洗。免疫法操作步驟比較簡單，價格并不昂貴，靈活度十分高以及轉(zhuǎn)移性等優(yōu)勢，可以被廣泛使用在蔬菜農(nóng)藥物質(zhì)檢測中，但不能對多種農(nóng)藥物質(zhì)分析，所以限制了使用領(lǐng)域。

5 結(jié)束語

總而言之，因?yàn)楝F(xiàn)在科學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，蔬菜中農(nóng)藥殘留物質(zhì)會被逐漸水解。現(xiàn)場、快捷的安全檢測方法不斷被研制出來，可以解決農(nóng)藥殘留物質(zhì)的壓力，滿足人們健康飲食需求。在農(nóng)藥檢測中期望研制出更多不需要大型設(shè)備和機(jī)器檢測技術(shù)，可以直接對蔬菜進(jìn)行檢測，提升檢測工作質(zhì)量和效率的同時，促進(jìn)我國農(nóng)產(chǎn)品發(fā)展，提升質(zhì)量的同時，關(guān)注食用安全程度。