SLAMF7-SLAMF7信號通路在腫瘤進展中的作用及相關(guān)機制

王園園，查勇，張思宇

0 引言

信號淋巴細胞激活分子成員7（signaling lymphocytes activating molecule factor 7,SLAMF7）是一種相對分子量為66 kDa的跨膜蛋白受體，屬免疫球蛋白超家族成員。其分子結(jié)構(gòu)包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū)三個部分。其中，胞內(nèi)區(qū)帶有富含酪氨酸的免疫受體轉(zhuǎn)換基序（ITSMs；T-V/I-Y-xx-V/I）[1]內(nèi)含兩個保守酪氨酸Y281和Y261，分別參與SLAMF7的激活和抑制信號通路[2]。SLAMF7蛋白可分為兩種主要亞型：SLAMF7-Long型和SLAMF7-Short型。研究發(fā)現(xiàn)，免疫細胞和腫瘤細胞主要表達SLAMF7-Long型。最初研究發(fā)現(xiàn)，SLAMF7受體為自然殺傷細胞（natural killer cells,NK cells）上的激活性受體，參與調(diào)節(jié)NK細胞對靶細胞的裂解功能[3]。后續(xù)研究發(fā)現(xiàn)，正常情況下，SLAMF7蛋白在人類多種免疫細胞上也呈低水平表達，如部分激活的T、B細胞亞群，樹突狀細胞、單核/巨噬細胞、漿細胞等[2,4-5]。研究證實，97%的多發(fā)性骨髓瘤患者SLAMF7表達水平顯著上調(diào)[6]。在進展性多發(fā)性骨髓瘤中，SLAMF7基因頻繁擴增[7]。不僅如此，SLAMF7單克隆抗體——埃羅妥珠單抗（Elotuzumab）治療多發(fā)性骨髓瘤能誘導(dǎo)腫瘤微環(huán)境中表達SLAMF7的NK細胞、單核/巨噬細胞參與多發(fā)性骨髓瘤的抗腫瘤免疫過程，其中NK細胞通過直接激活細胞裂解毒性作用和抗體依賴性細胞介導(dǎo)細胞毒性（antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC）作用，單核/巨噬細胞通過抗體依賴性胞內(nèi)吞噬（antibodydependent cellular phagocytosis,ADCP）作用[8-9]。并且SLAMF7陽性表達的免疫細胞通過彼此之間的相互作用能產(chǎn)生積極的抗腫瘤作用。此外，SLAMF7蛋白在其他腫瘤組織中表達也呈現(xiàn)不同變化，如：和正常細胞相比，漿細胞性淋巴瘤（plasma blastic lymaphoma,PBL）細胞SLAMF7表達上調(diào)；和正常組織相比，結(jié)直腸癌組織SLAMF7表達下調(diào)[10]。本文將對SLAMF7在調(diào)控免疫細胞抑制腫瘤細胞功能方面的研究現(xiàn)狀進行綜述，以期為后續(xù)探討SLAMF7蛋白在腫瘤免疫過程中的作用和機制提供參考。

1 SLAMF7的功能

1.1 參與誘導(dǎo)激活NK細胞的細胞毒性作用和ADCC作用

NK細胞來源于骨髓，通過自然殺傷細胞毒性和ADCC作用在固有免疫應(yīng)答的抗腫瘤、抗感染過程中發(fā)揮著重要作用[11-12]。NK細胞表面受體眾多，可劃分為三個家族受體：NCR家族受體（如：NKp46、NKp44等）、KIR家族受體（如：DNAM-1、TRAIL等）和SLAM家族受體（如：SLAMF4、SLAMF7等）[12]。如前所述，SLAMF7在人體多種免疫細胞呈持續(xù)性低水平表達，包括NK細胞、CD4+T細胞、CD8+T細胞、部分B細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等。但是，SLAMF7在NK細胞中的表達水平高于其他免疫細胞，并且持續(xù)表達于NK細胞的發(fā)育全程[3]。研究發(fā)現(xiàn)，Blimp-1/PRDM1基因能夠與SLAMF7基因啟動子結(jié)合，正性調(diào)控NK細胞SLAMF7的轉(zhuǎn)錄水平[13-14]。

EAT-2（Ewing’s sarcoma-associated transcript-2）蛋白表達于DC細胞、NK細胞、巨噬細胞等多種固有免疫細胞，具有促進DC細胞成熟、單核細胞吞噬作用等功能，對人類固有免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)起著積極作用[15]。SLAMF7受體誘導(dǎo)激活NK細胞需要EAT-2的參與[8]。在人類NK細胞，EAT-2能募集Src激酶來誘導(dǎo)SLAMF7胞內(nèi)區(qū)ITSM結(jié)構(gòu)發(fā)生酪氨酸磷酸化，進而調(diào)控SLAMF7下游的PCLγ1、PLCγ2和PI3K通路，激活NK細胞對靶細胞的細胞裂解毒性[7,11]。NK細胞之間或NK細胞與靶細胞之間的SLAMF7-SLAMF7受體-配體結(jié)合能通過調(diào)控PI3K和PLCγ1、PLCγ2信號通路，誘導(dǎo)激活NK細胞發(fā)揮細胞毒性作用，促進IFN-γ的產(chǎn)生。在鄰近NK細胞之間的SLAMF7受體-配體結(jié)合的同時，MHC-Ⅰ類抑制受體與鄰近NK細胞的結(jié)合，能保證在SLAMF7誘導(dǎo)激活NK細胞毒性過程中，NK細胞之間不互相殺傷。在外周血中，根據(jù)NK細胞表面CD56的熒光強度，NK細胞被分為兩個主要亞群：CD56brightNK細胞和CD56dimNK細胞，其中CD56brightNK細胞以分泌細胞因子功能為主，CD56dimNK細胞以殺傷靶細胞功能為主。研究表明，SLAMF7表達于健康人外周血中幾乎所有的CD56dimNK細胞和大部分CD56brightNK細胞[16-18]。

NK細胞在埃羅妥珠單抗治療多發(fā)性骨髓瘤機制中發(fā)揮著主要作用[8]。埃羅妥珠單抗誘導(dǎo)激活NK細胞對腫瘤細胞的殺傷有兩種方式：CD16依賴性和CD16非依賴性；前者通過埃羅妥珠單抗與多發(fā)性骨髓瘤細胞表面的SLAMF7結(jié)合，與此同時，埃羅妥珠單抗的Fc片段與NK細胞上的FcγRⅢA（CD16）受體結(jié)合，激活NK細胞的抗體依賴性細胞介導(dǎo)的ADCC作用，發(fā)揮對腫瘤細胞的殺傷作用；后者則通過多發(fā)性骨髓瘤細胞和NK細胞之間的SLAMF7-SLAMF7結(jié)合，以及臨近NK細胞之間的SLAMF7-SLAMF7結(jié)合或埃羅妥珠單抗與NK細胞上的SLAMF7之間的直接結(jié)合，對NK細胞起著誘導(dǎo)激活的作用[16,19]。Li等[20]在體外研究發(fā)現(xiàn)，在小鼠正常肝臟組織中，NK細胞和庫普弗細胞（Kupffer cells）均表達SLAMF7，其中肝臟NK細胞上SLAMF7表達豐富，庫普弗細胞SLAMF7表達含量較低，表明在肝臟組織中，SLAMF7受體可能起著重要作用，但仍需進一步研究確定。

1.2 負性調(diào)控固有淋巴細胞的發(fā)育和增強細胞毒性T細胞的活性

研究表明，骨髓來源的CD4+CD8+前體T細胞之間的SLAMF-SLAMF受體-配體作用能夠影響NKT細胞和固有CD8+T細胞的發(fā)育和陽性及陰性選擇[21]。胸腺是T細胞成熟、分化、發(fā)育的重要場所，胸腺基質(zhì)細胞、各種可溶性分子、細胞外基質(zhì)等成分構(gòu)成T細胞發(fā)育的復(fù)雜的微環(huán)境，其中胸腺基質(zhì)細胞包括：胸腺樹突狀細胞、巨噬細胞、上皮細胞、成纖維細胞等。在T細胞發(fā)育成熟的過程中，完成陽性選擇和陰性選擇是T細胞最終發(fā)育成熟過程中的重要步驟之一。動物實驗研究發(fā)現(xiàn)，在SLAMF7基因缺陷小鼠體內(nèi)，脾臟中發(fā)育為CD44hiCD122+CD8+T細胞顯著增多；胸腺中發(fā)育為CD44hi成熟NKT細胞顯著增多[21]。按CD8+T細胞的分化過程，存在四個分化亞群，分別為：幼稚型、中心記憶型、效應(yīng)記憶型和終末分化效應(yīng)記憶型。研究發(fā)現(xiàn)，隨著CD8+T細胞的分化，SLAMF7的表達隨之增加，大部分的效應(yīng)記憶型和終末分化效應(yīng)記憶型CD8+T細胞均表達SLAMF7[22]。

此外，研究還發(fā)現(xiàn)，SLAMF7蛋白的SLAMF7239-247多肽片段能激活細胞毒性T細胞（cytotoxic T lymphocytes,CTLs）對多發(fā)性骨髓瘤細胞的殺傷作用。該研究證實，SLAMF7239-247多肽片段能促進CTL細胞增殖、分泌IFN-γ、CD107a脫顆粒，并增強其對靶細胞的細胞毒性作用[22]。另有研究發(fā)現(xiàn)，SLAMF7能促進CD8+T細胞對病毒抗原肽的免疫應(yīng)答反應(yīng)[23]。

1.3 增強巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用

腫瘤微環(huán)境中腫瘤相關(guān)巨噬細胞（Tumorassociated macrophages,TAMs）是數(shù)量最多的免疫細胞成分，是影響著腫瘤進展和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵[24]。TAM主要分為兩種亞型：M1型和M2型；其中M1型是經(jīng)典活化的巨噬細胞，能夠表達大量的促炎性反應(yīng)因子，如：TNF-α、iNOS等，具有殺滅腫瘤細胞并抑制腫瘤血管、淋巴管生成等作用；M2型是替代性活化的巨噬細胞，具有促進腫瘤血管、淋巴管生成等作用。研究發(fā)現(xiàn)，相較于M2型腫瘤相關(guān)巨噬細胞，SLAMF7高表達于M1型腫瘤相關(guān)巨噬細胞[9]。

據(jù)研究，在運用CD47-SIRPα信號通路阻斷劑治療多發(fā)性骨髓瘤過程中，SLAMF7能增強巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用[5]。CD47-SIRPα信號通路能夠幫助腫瘤細胞逃脫免疫監(jiān)視，躲避巨噬細胞或其他細胞的吞噬作用，阻斷這一信號通路就能產(chǎn)生抗腫瘤效應(yīng)[25]。在阻斷CD47-SIRPα通路產(chǎn)生抗腫瘤作用中，巨噬細胞與瘤細胞之間的SLAMF7-SLAMF7相互作用能夠增強巨噬細胞對瘤細胞的吞噬，其中的機制包括：（1）SLAMF7能促進巨噬細胞和靶細胞之間的黏附；（2）SLAMF7能刺激細胞骨架重建從而激活巨噬細胞的吞噬過程；（3）通過激活免疫受體酪氨酸活化基序（ITAM）相關(guān)蛋白——DAP-12和FcRγ，調(diào)控免疫細胞的激活，進而促進巨噬細胞的吞噬作用；（4）通過Mac-1參與腫瘤靶細胞的識別和激活吞噬信號。然而也有文獻得出不同的結(jié)論：在CD47-SIRPα阻斷治療彌漫性大B細胞性淋巴瘤中，SLAMF7并不影響巨噬細胞對腫瘤細胞的吞噬作用[26]?？梢姡诓煌哪[瘤微環(huán)境中，SLAMF7具有顯著不同的特性。

Kurdi等[9]研究發(fā)現(xiàn)，埃羅妥珠單抗的Fc片段和巨噬細胞表面的Fc受體結(jié)合后，能增強M1型TAM的ADCP作用以參與腫瘤細胞的殺傷。不僅如此，埃羅妥珠單抗還能提高TAM在腫瘤區(qū)域的聚集程度。以上提示，SLAMF7能通過調(diào)節(jié)TAM的功能參與抗腫瘤免疫過程。

2 SLAMF7的臨床價值

2.1 輔助診斷

體內(nèi)外實驗均得出，SLAMF7在幾乎所有的多發(fā)性骨髓瘤細胞中高表達，在絕大多數(shù)實體瘤不表達，在正常免疫細胞呈極低表達[17]，因此，SLAMF7在多發(fā)性骨髓瘤的特異性高表達使它成為輔助診斷多發(fā)性骨髓瘤的新型生物標志物。此外，近年來還發(fā)現(xiàn)，多發(fā)性骨髓瘤患者血清中可檢測到較高濃度的SLAMF7[27]，尤其在晚期患者[22]。有研究認為，健康人中不能檢測到血清SLAMF7，但隨著檢測技術(shù)水平的提高，Postelnek等[28]發(fā)現(xiàn)在健康人中也可檢測到SLAMF7以極低濃度存在，不過在多發(fā)性骨髓瘤中血清SLAMF7濃度顯著增高。以上研究均表明，血清SLAMF7的濃度也可以在一定程度內(nèi)作為輔助診斷多發(fā)性骨髓瘤的參考指標。Shi等[1]研究發(fā)現(xiàn)，SLAMF7也廣泛高表達于漿細胞性淋巴瘤細胞，并可能成為輔助診斷漿細胞性淋巴瘤的生物標志物。

2.2 提示病情進展及預(yù)后

研究表明，血清SLAMF7水平的增加往往提示多發(fā)性骨髓瘤發(fā)生進展[29]，多發(fā)性骨髓瘤患者血清SLAMF7有以下特點：（1）有癥狀者較無癥狀者的血清SLAMF7水平高；（2）Ⅲ期患者較Ⅰ、Ⅱ期患者SLAMF7水平高；（3）血清SLAMF7濃度在抗腫瘤治療后降低。進一步評估后發(fā)現(xiàn)，血清SLAMF7和多發(fā)性骨髓瘤患者的無進展生存期呈負相關(guān)，但和總體生存期無關(guān)。但是對于瘤細胞的SLAMF7表達水平和腫瘤病情進展的關(guān)聯(lián)并無確切定論，未來可能還需要進一步評估。Lee等[10]研究發(fā)現(xiàn)，SLAMF7基因在原發(fā)性和繼發(fā)性結(jié)直腸癌中均下調(diào)，并且其下調(diào)可能促進腫瘤的淋巴管-血管侵犯、周圍神經(jīng)侵犯及腫瘤切緣侵犯，與病情的進展及轉(zhuǎn)移呈負相關(guān)。

2.3 SLAMF7靶向治療

埃羅妥珠單抗的Ⅲ期ELOQUENT-2試驗（編號：NCT01239797）結(jié)果表明，在646例復(fù)發(fā)/耐藥性多發(fā)性骨髓瘤患者中，321例接受“埃羅妥珠單抗+來那度胺+地塞米松”治療，另325例接受“來那度胺+地塞米松”治療。結(jié)果顯示，在四年隨訪期中，兩組的總體生存期分別為48和40月，總體生存率分別為50%和43%（HR=0.78,95%CI:0.6～0.96）。此外，兩組的中位無疾病進展生存期分別為19.4和14.9月（HR=0.71,95%CI:0.59～0.86,P=0.0004）。兩組的客觀應(yīng)答率分別為79%和66%。以上說明，埃羅妥珠單抗可作為治療復(fù)發(fā)/耐藥性多發(fā)性骨髓瘤的有效藥物策略[30]。Kikuchi等[27]研究發(fā)現(xiàn)，“埃羅妥珠單抗+來那度胺+地塞米松”治療方案能有效降低多發(fā)性骨髓瘤患者血清SLAMF7濃度，同時，也可降低瘤細胞中SLAMF7的表達水平（從（98.0±1.5）%降至（73.6±19.1）%）。

近年來，以SLAMF7抗原為靶點的嵌合抗原受體（chimeric antigen receptor,CAR）T細胞療法和NK細胞療法在體內(nèi)外實驗中均證實其對多發(fā)性骨髓瘤細胞有特異性殺傷作用[31-34]。

3 展望

SLAMF7受體主要高表達于血液系統(tǒng)惡性腫瘤，在多種固有免疫細胞也有表達，其中包括NK細胞、DC細胞、CD8+T細胞、B細胞和單核/巨噬細胞等。目前的研究主要集中在多發(fā)性骨髓瘤領(lǐng)域，對免疫細胞的功能和作用機制研究還有限。此外，埃羅妥珠單抗對腫瘤微環(huán)境中多種免疫細胞具有積極調(diào)節(jié)作用并能促進這些細胞參與抗腫瘤免疫過程。其中，SLAMF7是否能調(diào)節(jié)腫瘤微環(huán)境中DC細胞的抗腫瘤能力，是否能促進TAM細胞向M1型極化等都是尚待探討的問題。如何最優(yōu)化利用免疫細胞之間的SLAMF7-SLAMF7信號通路參與抗腫瘤作用將成為未來探討的新問題。