奶牛新孢子蟲病研究進(jìn)展

李小曼，曾 澳，劉炳琦，劉桂池，付宜鑫

(黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)動物科技學(xué)院，黑龍江 大慶 163316)

新孢子蟲病是一種全球范圍內(nèi)廣泛流行的原蟲性寄生蟲病，被認(rèn)為是引起全世界牲畜墮胎的主要原因之一，可導(dǎo)致乳制品和肉牛業(yè)的重大經(jīng)濟(jì)損失[1]。犬科動物被認(rèn)為是最終的宿主，因為它們可以通過犬科動物糞便將卵囊排入外界環(huán)境。

新孢子蟲病是一種由犬新孢子蟲寄生在宿主血液內(nèi)的原蟲性疾病。該病首次由挪威獸醫(yī)學(xué)家于1984年在患病幼犬體內(nèi)發(fā)現(xiàn)，初期因其與龔地弓形蟲基因序列相同，故其在1988年才被 Dubey 博士命名為犬新孢子蟲[2]。在我國對新孢子蟲病研究較少，中國農(nóng)業(yè)大學(xué)的劉群教授在國內(nèi)率先開展了奶牛新孢子蟲病的研究。在2001年以來，應(yīng)用進(jìn)口的試劑盒，分別在北京、山西、河北、新疆等地區(qū)的奶牛(牦牛)血清中檢出了新孢子蟲的存在。據(jù)報道，我國各省(市)都有不同程度的新孢子蟲病發(fā)生，給當(dāng)?shù)匦竽琉B(yǎng)殖行業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。研究至今，還沒有效藥物和疫苗用于防治該病。淘汰病牛及定期飼喂驅(qū)蟲藥物是目前該病的防治手段。

1 病原學(xué)

雖經(jīng)過幾十年時間對新孢子蟲的生活史進(jìn)行了研究，但對其生活史的了解并不透徹，因而新孢子蟲的分類地位多年來一直存有爭議，曾經(jīng)認(rèn)為是弓形蟲，也有人認(rèn)為是其它原蟲。1993年 Brindley 等[3]研究發(fā)現(xiàn)新孢子蟲和龔地弓形蟲的16s樣rRNA基因序列相同，但新孢子蟲沒有龔地弓形蟲的三種主要同源基因B1，P22和P30，而且新孢子蟲抗血清與弓形蟲、枯氏住肉孢子蟲、艾美耳球蟲、哈氏哈芒球蟲、隱孢子蟲等只有較低的或無交叉反應(yīng)；隨后應(yīng)用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性 DNA(RAPD)法，對新孢子蟲、弓形蟲、枯氏住肉孢子蟲的基因多態(tài)性進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)新孢子蟲的基因不同于弓形蟲與枯氏住肉孢子蟲，因而認(rèn)為新孢子蟲為一獨立的新屬新種，隸屬于原生動物門(Protozoa)、頂復(fù)亞門(Apicomplexa)、孢子蟲綱(Sporozoa)、球蟲亞綱(Coccidomorpha)、真球蟲目(Coccidiida)、新孢子蟲屬(Neospora)。

新孢子蟲在發(fā)育階段會出現(xiàn)數(shù)種不同的形態(tài)：即速殖子、組織胞囊、卵囊、裂殖體、裂殖子等。

速殖子呈卵圓形、圓形或月芽形，并隨分裂期不同而有所差異，大多數(shù)速殖子寄生于宿主細(xì)胞的胞漿內(nèi)帶蟲空泡中，反復(fù)分裂，可有上百個蟲體存在于蟲體集落內(nèi)。速殖子對宿主細(xì)胞侵入性強，接觸3-5 min即可破入宿主細(xì)胞漿質(zhì)內(nèi)，快的30 s即可侵入宿主細(xì)胞漿，迅速分裂形成蟲體集落。而胞囊主要寄生于腦、脊髓、神經(jīng)元以及宿主的眼視網(wǎng)膜。呈圓形或卵圓形，大小不等。犬感染該原蟲后通過糞便將新孢子蟲呈卵圓形的卵囊排出[4]。剛被排出的卵囊不具備感染能力，其在外界自然環(huán)境中形成孢子化，發(fā)育成孢子化卵囊伴隨感染性。

2 流行病學(xué)

本病一年四季均可發(fā)生，引起的流產(chǎn)呈散發(fā)性或地方性流行，同一母畜感染后會造成復(fù)發(fā)性流產(chǎn)。新孢子蟲病呈世界性分布，北美洲、西歐、亞洲、南非等50多個國家都有流行分布，我國鄰國的日本、韓國、蒙古等國家和我國臺灣地區(qū)也有報道[5]。中國農(nóng)業(yè)大學(xué)劉群教授在國內(nèi)率先開展了奶牛新孢子蟲病的研究，對北京94份和河北地區(qū)55份奶牛血清樣本進(jìn)行檢測發(fā)現(xiàn)，北京地區(qū)奶牛犬新孢子蟲抗體陽性率為18.1 %，河北地區(qū)奶牛犬新孢子蟲抗體陽性率為23.6 %[2]。隨后于晉海等[3]分別檢測了來自國內(nèi)10個省(市、自治區(qū))的312份牛血清，其結(jié)果顯示，新孢子蟲抗體陽性率為34.4 %，證明新孢子蟲病在我國奶牛中感染普遍。

3 臨床癥狀病理變化

動物感染新孢子蟲的主要癥狀為流產(chǎn)、死胎、幼畜癱瘓、幼畜發(fā)育畸形、幼畜肌縮、并伴隨不同的運動神經(jīng)癥狀。牛感染后的癥狀：關(guān)節(jié)無力拘謹(jǐn)、運動性能失調(diào)，頭部伴隨神經(jīng)癥狀，頭蓋骨變形，眼瞼反射遲鈍、眼角膜產(chǎn)生不同程度的混濁等。

病理變化與蟲體的寄生部位有關(guān)，病變可在一處或多處出現(xiàn)。在病變部位?？砂l(fā)現(xiàn)速殖子和組織包囊，可作為診斷的指標(biāo)之一。

4 診斷

當(dāng)發(fā)現(xiàn)母畜流產(chǎn)，幼畜癱瘓，尤其是一群或多群動物中出現(xiàn)此類癥狀時，應(yīng)懷疑為本病，可根據(jù)病原學(xué)檢查、病理檢查、血清學(xué)診斷、分子生物學(xué)檢測等進(jìn)行綜合診斷。根據(jù)新孢子蟲的寄生部位，對新生仔畜的組織進(jìn)行常規(guī)組織學(xué)檢查。檢測是否有新孢子蟲速殖子或組織包囊。

5 防治

本病的治療尚處于探索階段，迄今為止，尚未發(fā)現(xiàn)治療牛新孢子蟲病特效藥物。由于新孢子蟲的生活史尚未被人們認(rèn)識，至今還沒有控制該病的有效方法。目前預(yù)防奶牛新孢子蟲病的有效措施主要是通過流行病學(xué)檢測，凈化牛群，對引進(jìn)的牛只進(jìn)行嚴(yán)格的檢疫、隔離飼養(yǎng)。并對奶牛場內(nèi)及其周圍的犬只進(jìn)行嚴(yán)格的管理，禁止犬類進(jìn)入牛欄，減少奶牛與犬直接接觸的機(jī)會；禁止給犬飼喂牛的胎盤、流產(chǎn)的胎牛，以期切斷傳播途徑而達(dá)到預(yù)防的目的。目前，對新孢子蟲血清學(xué)診斷方法的研究有一定進(jìn)展。檢測牛新孢子蟲抗體的血清學(xué)方法主要包括 IFAT、ELISA、凝集試驗以及 Western blot試驗等。其中 IFAT 和 ELISA 應(yīng)用最廣泛，且檢測結(jié)果的特異性和敏感性都較高[6]。

6 展望

新孢子蟲病是近幾年被世界各國學(xué)者和畜牧業(yè)工作人員廣泛關(guān)注和認(rèn)識的疾病，該病可引起妊娠母牛流產(chǎn)，進(jìn)而造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失[7]。近年來我國養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展迅速，優(yōu)良品種奶牛及肉牛的引進(jìn)力度加大，同時越來越多的國外犬種的引入，并飼養(yǎng)量增加，對我國養(yǎng)殖業(yè)危害極為嚴(yán)重。當(dāng)前我國對牛新孢子蟲病的研究已取得一定進(jìn)展，但對該病的流行情況、生活史需要進(jìn)一步深入研究，除了建立有效的診斷方法之外，還應(yīng)加大該病疫苗的研究力度，無論是弱毒疫苗或是滅活疫苗，都會從根本上去解決新孢子蟲在畜牧養(yǎng)殖行業(yè)的影響，從而建立有效的綜合防制體系，保障養(yǎng)殖業(yè)的順利發(fā)展[8]。