• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    環(huán)狀RNA與甲狀腺癌關(guān)系的研究進(jìn)展

    2020-01-10 19:43:32
    中國(guó)普通外科雜志 2020年11期
    關(guān)鍵詞:外顯子甲狀腺癌靶向

    (貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院 甲狀腺外科,貴州 貴陽(yáng) 550000)

    甲狀腺癌(thyroid carcinoma)是內(nèi)分泌系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤,約占全身惡性腫瘤的1%,近年來(lái)其發(fā)病率在世界各地穩(wěn)步增長(zhǎng),其中甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)發(fā)病率的增長(zhǎng)速度最快,平均發(fā)病年齡更年輕[1-2]。PTC是起源于甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的分化型甲狀腺癌,是甲狀腺癌的最常見(jiàn)病理類型,占所有甲狀腺癌的85%~95%[3-4]。目前PTC的診斷主要依靠病史、??撇轶w、頸部超聲及超聲引導(dǎo)下細(xì)針穿刺細(xì)胞學(xué)活檢(fine needle aspiration,F(xiàn)NA)等檢查[5]。PTC大致可分為惰型和侵襲型兩種類型,惰型病程進(jìn)展緩慢,表現(xiàn)高度惰性,5年生存率>95%,預(yù)后良好,但侵襲型PTC,例如伴有高齡,多灶性腫瘤,腺外侵犯,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移特征的PTC可分化為更具致命性的甲狀腺癌,對(duì)手術(shù)、131I治療及術(shù)后TSH抑制治療等傳統(tǒng)治療效果不理想[6]。目前研究認(rèn)為,PTC的發(fā)生與BRAF基因、RAS基因等癌基因的異常激活及P53抑癌基因失活密切相關(guān),近年來(lái)因高通量RNA測(cè)序的出現(xiàn),發(fā)現(xiàn)一些非編碼RNA,如微小RNA(microRNA,miRNA)、環(huán)狀RNA(circular RNA,circRNA)在甲狀腺癌中表達(dá)異常。

    1 circRNA概述

    circRNA是一類非編碼RNA,最初認(rèn)為mRNA前體剪接錯(cuò)誤產(chǎn)生的無(wú)功能副產(chǎn)物,然而隨著RNA測(cè)序技術(shù)的發(fā)展及高通量RNA測(cè)序的出現(xiàn),發(fā)現(xiàn)其在多個(gè)細(xì)胞系中以及不同生物物種中存在,并根據(jù)不同的細(xì)胞類型,組織和發(fā)育階段顯示特定的表達(dá)模式,于1976年Sanger首次在病毒中發(fā)現(xiàn)[7-8]。circRNA是通過(guò)一種名為從“尾”到“頭”的反剪接機(jī)制產(chǎn)生的,即將基因3'端的外顯子反剪接到基因5'端的外顯子上,結(jié)合形成連續(xù)閉環(huán)的單鏈非編碼RNA分子[9]。根據(jù)circRNA來(lái)源,可大致分為3類,包括外顯子circRNA,內(nèi)含子circRNA以及外顯子和內(nèi)含子基因間circRNA[10-11]。與傳統(tǒng)的線性RNA相比,circRNA是共價(jià)閉合的連續(xù)環(huán),沒(méi)有5'-3'端極性,無(wú)5'端帽子結(jié)構(gòu)和3'端聚腺苷酸尾巴,也沒(méi)有蛋白質(zhì)編碼能力[12-13]。circRNA參與疾病調(diào)控的機(jī)制通常包括:⑴ 作為內(nèi)源性RNA的一部分即“miRNA海綿”調(diào)節(jié)靶基因表達(dá);⑵ 調(diào)節(jié)RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄物的活性;⑶ 調(diào)節(jié)RNA結(jié)合蛋白;⑷ 與核糖體結(jié)合參與蛋白質(zhì)的翻譯[14-15]。

    2 circRNA與甲狀腺癌的關(guān)系

    2.1 circRNA在甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及機(jī)制

    circRNA_RAPGEF5主要位于細(xì)胞核的7號(hào)染色體上,基因組長(zhǎng)度為26 863 bp,剪接后的成熟序列長(zhǎng)度為516 bp,由RAPGEF5基因的5個(gè)外顯子組成。circRNA_RAPGEF5在PTC組織和細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào),表達(dá)上調(diào)的circRNA_RAPGEF5通過(guò)與下游靶標(biāo)miRNA-198結(jié)合使miRNA-198表達(dá)受抑,進(jìn)而上調(diào)下游靶基因成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(FGFR1)的表達(dá),促進(jìn)上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換(epithelial mesenchymal transition,EMT),從而促進(jìn)細(xì)胞的增殖,遷移和侵襲而抑制細(xì)胞凋亡[16]。circRNA_0025033位于12號(hào)染色體上,是轉(zhuǎn)錄因子叉頭框1(FOXM1)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,circRNA_0025033在PTC組織和細(xì)胞中表達(dá)增加,而下游靶標(biāo)miRNA-1231和miRNA-1304則表達(dá)減少,進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn),circRNA_0025033通過(guò)與miRNA-1231和miRNA-1304靶向結(jié)合使其表達(dá)下調(diào),從而促進(jìn)PTC細(xì)胞的增殖,遷移并抑制細(xì)胞凋亡[17]。

    circRNA_0004458位于8號(hào)染色體上,由PSD3-mRNA的第5外顯子和第8外顯子剪接形成,基因組長(zhǎng)度為448 bp,最佳轉(zhuǎn)錄本為NM_015310,最早在胃癌中發(fā)現(xiàn)[18],circRNA_0004458在PTC組織和細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)且miRNA-885-5p是circRNA_0004458的直接靶標(biāo),而RAC1蛋白是miR-885-5p的下游靶標(biāo),RAC1蛋白是一種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)分子,屬于Rho家族小G蛋白,在各種蛋白激酶的細(xì)胞生長(zhǎng),骨架形成,遷移,侵襲和激活中起著關(guān)鍵作用[19]。circRNA_0004458通過(guò)靶向結(jié)合miRNA-885-5p上調(diào)RAC1的表達(dá),從而促進(jìn)PTC的增殖,并抑制細(xì)胞周期停滯和凋亡,相反circ_0004458的沉默則抑制PTC的生長(zhǎng)并誘導(dǎo)PTC細(xì)胞周期阻滯和凋亡,且circRNA_0004458的表達(dá)水平與腫瘤大小、浸潤(rùn)程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、和TNM分期密切相關(guān)[20]。circRNA-NEK6是一種編碼NEK6-mRNA的外顯子circRNA,MiRNA-370-3p和人類卷曲蛋白8(FZD8)是其下游通路中的靶基因,circRNA-NEK6通過(guò)減少M(fèi)iRNA-370-3p的表達(dá)而增加FZD8的表達(dá)并激活Wnt信號(hào)通路,進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖和侵襲,而抑制凋亡[21]。

    2.2 circRNA在甲狀腺癌中的表達(dá)及其與臨床病理的關(guān)系

    2.2.1 表達(dá)上調(diào)的circRNAWei等[22]采用qRT-PCR技術(shù)檢測(cè)了41對(duì)PTC組織及癌旁正常組織的circ_ZFR表達(dá),發(fā)現(xiàn)circ_ZFR在PTC組織中表達(dá)上調(diào),其中III~I(xiàn)V期標(biāo)本的circ_ZFR的表達(dá)顯著高于I~I(xiàn)I期的標(biāo)本,伴有轉(zhuǎn)移標(biāo)本的circ_ZFR表達(dá)比非轉(zhuǎn)移樣本的表達(dá)高,原因?yàn)閏irc_ZFR通過(guò)充當(dāng)下游靶基因miRNA-1261的“miRNA海綿”,靶向結(jié)合C8ORF4蛋白的3'-非翻譯區(qū),使C8orf4蛋白表達(dá)上調(diào),從而促進(jìn)PTC細(xì)胞的的增殖,遷移和侵襲,因此,circ_ZFR在PTC的發(fā)生發(fā)展中起致癌基因的作用。Wang等[23]報(bào)道發(fā)現(xiàn)circ_0067934在甲狀腺癌組織和細(xì)胞中表達(dá)上調(diào),且circ_0067934的表達(dá)水平與腫瘤大小,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、AJCC分期呈正相關(guān),而與患者生存率呈負(fù)相關(guān),和年齡、性別沒(méi)有相關(guān)性,circRNA_0067934通過(guò)激活EMT和PI3K/Akt信號(hào)通路,調(diào)控細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和凋亡,是甲狀腺癌預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。Liu等[24]分析發(fā)現(xiàn),circ_0011385在PTC組織中表達(dá)上調(diào),circ_0011385通過(guò)與miRNA-204-CDH2或miRNA-6777-VC靶向結(jié)合,在此基礎(chǔ)上通過(guò)參與p53信號(hào)通路,細(xì)胞黏附分子途徑等方式參與甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展。

    血清外泌體呈囊狀,帶有雙膜,直徑約100 nm,內(nèi)含轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,主要存在于大多數(shù)細(xì)胞的小內(nèi)分泌囊泡內(nèi)[25]。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)外泌體中circRNA的濃度高于正常細(xì)胞的circRNA濃度,且外泌體中的circRNA可以反映細(xì)胞和組織中circRNA的水平[26]。Yang等[27]應(yīng)用高通量測(cè)序從PTC患者血清中篩選出22個(gè)差異表達(dá)的circRNA,其中3個(gè)circRNA表達(dá)上調(diào),19個(gè)circRNA表達(dá)下調(diào),這些差異表達(dá)的circRNA通過(guò)參與甲狀腺激素信號(hào)通路、PI3K/Akt信號(hào)通路、5'-單磷酸腺苷AMPK信號(hào)通路和磷脂酰肌醇信號(hào)通路等16條信號(hào)通路參與PTC的發(fā)生發(fā)展。因此對(duì)血清外泌體中circRNA的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),有望成為PTC的潛在診斷及治療的分子生物標(biāo)志物。Lan等[28]從90對(duì)PTC及癌旁正常甲狀腺組織行微陣列分析,發(fā)現(xiàn)87個(gè)顯著差異性表達(dá)的circRNA,其中41個(gè)表達(dá)上調(diào),46個(gè)表達(dá)下調(diào);在這些差異表達(dá)的circRNA中,外顯子circRNA 70個(gè),內(nèi)含子circRNA 7個(gè);基因間circRNA 1個(gè),其余9個(gè)來(lái)自轉(zhuǎn)錄重疊區(qū)域,并且這些差異表達(dá)的circRNA通過(guò)調(diào)控親本基因的表達(dá)參與PTC的發(fā)生發(fā)展。甲狀腺球蛋白(TG)是甲狀腺激素合成的基質(zhì),對(duì)甲狀腺激素的合成和分泌具有調(diào)節(jié)作用,TG的突變是導(dǎo)致先天性甲狀腺功能減低癥的重要原因之一。Teng等[29]研究了circRNA與TG之間的關(guān)系,發(fā)現(xiàn)在TG中circTG1-circTG6等6個(gè)circRNA的突變與PTC的不良預(yù)后顯著相關(guān),且同一供體circRNA具有不同的受體,同一宿主基因的不同環(huán)狀RNA其表達(dá)譜具有差異性。

    2.2.2 表達(dá)下調(diào)的circRNAcirc_0137287基因位于8號(hào)染色體上,長(zhǎng)度為284 bp,基因符號(hào)為SLC26A7,主要存在于哺乳動(dòng)物的大腦中[30]。Lan等[31]報(bào)道circ_0137287在PTC組織及細(xì)胞中表達(dá)下調(diào),且表達(dá)下調(diào)的circ_0137287與PTC的腺外侵犯,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移,晚期T期和腫瘤大小等侵襲性臨床病理特征密切相關(guān),尤其與腫瘤大小之間呈負(fù)相關(guān),但與其他臨床病理參數(shù)(例如年齡,性別,TNM分期和腫瘤數(shù)量)之間沒(méi)有相關(guān)性,circ_0137287可作為PTC的診斷、腺外侵犯及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的標(biāo)志物,其敏感度和特異度分別為79.2%、90.0%、64.1%和65.4%、89.3%、38.9%。Ren等[32]對(duì)PTC和與之相匹配的非癌甲狀腺組織進(jìn)行了circRNA微陣列分析,共鑒定出206個(gè)上調(diào)的circRNA和177個(gè)下調(diào)的circRNA,其中上調(diào)和下調(diào)最明顯的是circRNA_007148和circRNA_047771,且circRNA_047771的低表達(dá)與BRAFV600突變,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及晚期TNM分期呈負(fù)相關(guān),而與其他臨床病理因素(包括年齡,性別,橋本甲狀腺炎的病史),甲狀腺影像報(bào)告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)(TI-RAIDS),腫瘤大小和多灶性無(wú)關(guān),相反circRNA_007148的高表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。Peng等[33]通過(guò)微陣列分析和qRTPCR驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),與良性甲狀腺組織相比,PTC組織中circRNA_104566等12個(gè)circRNA表達(dá)明顯上 調(diào),而circRNA_100777、circRNA_104348、circRNA_103454、circRNA_100395等4個(gè)circRNA表達(dá)顯著下調(diào),進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)表達(dá)下調(diào)的circRNA_100395通過(guò)與下游靶標(biāo)miR-141-3p/miR-200A-3p相互作用參與PTC的發(fā)生發(fā)展。

    2.3 circRNA通過(guò)調(diào)控相關(guān)信號(hào)通路中的靶基因的表達(dá)、參與甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展

    Wnt/β-catenin信號(hào)傳導(dǎo)通路是涉及腫瘤發(fā)生的經(jīng)典途徑,Wnt/β-catenin通路的異常激活通常會(huì)導(dǎo)致多種癌癥的發(fā)展,例如重組人β-連環(huán)素蛋白互作蛋白1(CTNNBIP1)是β-連環(huán)蛋白(β-catenin)的相互作用蛋白,對(duì)Wnt/β-catenin通路具有負(fù)調(diào)控的作用[34]。Bi等[35]發(fā)現(xiàn)circRNA_102171在PTC組織和細(xì)胞中高表達(dá),circRNA_102171通過(guò)與CTNNBIP1相互作用,阻止CTNNBIP1與β-catenin/TCF3/TCF4/LEF1復(fù)合物的結(jié)合,而促進(jìn)β-catenin與TCF蛋白結(jié)合形成β-catenin/TCF復(fù)合物啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,從而激活Wnt/β-catenin通路,促進(jìn)甲狀腺甲狀腺癌的進(jìn)展。敲除circRNA_102171能促進(jìn)β-catenin與CTNNBIP1之間的相互作用,抑制Wnt /β-catenin通路的靶基因CCND1,CCND2,MYC和SOX4的表達(dá),抑制PTC細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲,同時(shí)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。Wang等[36]報(bào)道發(fā)現(xiàn)circRNA-ITCH在PTC組織和細(xì)胞中表達(dá)下調(diào),且miR-22-3p是circRNAITCH和CBLmRNA的共同靶基因,circRNA-ITCH通過(guò)與miR-22-3p靶向結(jié)合后促使核b-連環(huán)蛋白的E3連接酶(CBLmRNA)表達(dá)上調(diào),從而抑制Wnt/b-catenin通路的靶基因(MYC、CCND1、SOX4)的表達(dá)并促進(jìn)b-catenin的降解,抑制PTC的侵襲和轉(zhuǎn)移,在甲狀腺癌的進(jìn)展中扮演著抑癌基因的作用。

    單磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)是一種絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,是一種重要的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路,主要通過(guò)p53依賴方式對(duì)細(xì)胞周期進(jìn)行調(diào)控,是一種腫瘤抑制激酶,對(duì)哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)起負(fù)調(diào)控作用[37]。mTOR是一種非典型的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶,是調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)、存活和運(yùn)動(dòng)的重要調(diào)節(jié)因子,mTOR的異常激活能抑制細(xì)胞自噬并增強(qiáng)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖[38]。circRNA_0008274位于11號(hào)染色體上,基因符號(hào)為UGGT2。circRNA_0008274在PTC組織和細(xì)胞系中表達(dá)上調(diào),circRNA_0008274通過(guò)抑制p-AMPK信號(hào)通路的激活并促進(jìn)p-mTOR的表達(dá),激活A(yù)MPK/mTOR信號(hào)通路,進(jìn)而促進(jìn)PTC細(xì)胞的增殖、侵襲及轉(zhuǎn)移并抑制凋亡,此外circRNA_0008274的表達(dá)與TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈正相關(guān),而與年齡,性別,甲狀腺腺外侵犯,原發(fā)腫瘤位置和腫瘤大小無(wú)關(guān)[39]。由notch受體、notch配體及notch的調(diào)節(jié)分子等組成的notch通路在生物進(jìn)化中高度保守,能通過(guò)對(duì)腫瘤微環(huán)境、血管生成、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換、侵襲轉(zhuǎn)移等的調(diào)控參與腫瘤的發(fā)生進(jìn)展[40]。circRNA_0058124位于2號(hào)染色體上,長(zhǎng)度為864 bp,由纖連蛋白1基因組的5個(gè)外顯子組成,在腫瘤較大、甲狀腺腺外侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的PTC患者中的表達(dá)水平顯著增高,而與年齡、性別及病灶數(shù)量之間沒(méi)有相關(guān)性,circ_0058124通過(guò)作為miRNA-218-5p的“miRNA海綿”上調(diào)靶基因numb的表達(dá),而numb是notch通路的一個(gè)強(qiáng)有力的抑制因子,因此上調(diào)的numb抑制notch3/gatad2A通路的激活,增強(qiáng)PTC細(xì)胞的增殖,遷移和侵襲并抑制凋亡,在甲狀腺癌的進(jìn)展中扮演著癌基因啟動(dòng)子的作用[41]。

    3 展 望

    circRNA在甲狀腺癌中表達(dá)紊亂。了解甲狀腺癌中特異性circRNA表達(dá)譜的變化及其生物學(xué)功能的差異,有望應(yīng)用于甲狀腺癌的早期診斷、鑒別診斷、高危人群的普查、腫瘤預(yù)后評(píng)價(jià)、預(yù)測(cè)腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。相信隨著新一代測(cè)序技術(shù)與基因芯片技術(shù)的廣泛應(yīng)用,將有助于更加全面真實(shí)地揭示circRNA的功能和作用機(jī)制,也為甲狀腺癌的無(wú)創(chuàng)診斷、靶向治療提供新的思路及依據(jù)。

    猜你喜歡
    外顯子甲狀腺癌靶向
    外顯子跳躍模式中組蛋白修飾的組合模式分析
    如何判斷靶向治療耐藥
    MUC1靶向性載紫杉醇超聲造影劑的制備及體外靶向?qū)嶒?yàn)
    分化型甲狀腺癌切除術(shù)后多發(fā)骨轉(zhuǎn)移一例
    分化型甲狀腺癌肺轉(zhuǎn)移的研究進(jìn)展
    外顯子組測(cè)序助力產(chǎn)前診斷胎兒骨骼發(fā)育不良
    毛必靜:靶向治療,你了解多少?
    肝博士(2020年5期)2021-01-18 02:50:18
    外顯子組測(cè)序助力產(chǎn)前診斷胎兒骨骼發(fā)育不良
    全甲狀腺切除術(shù)治療甲狀腺癌適應(yīng)證選擇及并發(fā)癥防治
    靶向超聲造影劑在冠心病中的應(yīng)用
    国产精品影院久久| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 久久毛片免费看一区二区三区| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 精品国产乱码久久久久久男人| 免费人妻精品一区二区三区视频| 欧美精品av麻豆av| 韩国高清视频一区二区三区| 日韩电影二区| 国产精品 国内视频| 欧美一级毛片孕妇| 免费日韩欧美在线观看| 午夜免费观看性视频| 国产免费福利视频在线观看| av网站在线播放免费| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲成人国产一区在线观看| 亚洲黑人精品在线| 老司机午夜福利在线观看视频 | 狂野欧美激情性bbbbbb| 欧美激情 高清一区二区三区| 51午夜福利影视在线观看| 国产97色在线日韩免费| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 国产精品影院久久| 久久中文字幕一级| 精品久久蜜臀av无| 777久久人妻少妇嫩草av网站| 国产xxxxx性猛交| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 日韩中文字幕视频在线看片| 亚洲国产精品成人久久小说| 80岁老熟妇乱子伦牲交| 久久精品亚洲av国产电影网| 黄色怎么调成土黄色| 欧美成人午夜精品| 在线精品无人区一区二区三| 国产色视频综合| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲精品成人av观看孕妇| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 高清黄色对白视频在线免费看| 爱豆传媒免费全集在线观看| 亚洲中文日韩欧美视频| 在线观看人妻少妇| cao死你这个sao货| 成人影院久久| 国产成人欧美| 五月开心婷婷网| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 久久中文字幕一级| www.精华液| 美女国产高潮福利片在线看| 国产不卡av网站在线观看| a级毛片在线看网站| 国产激情久久老熟女| 超碰成人久久| 午夜福利一区二区在线看| 国产一区二区三区综合在线观看| 又大又爽又粗| www.熟女人妻精品国产| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 亚洲精华国产精华精| 欧美国产精品一级二级三级| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 久久av网站| 欧美日韩成人在线一区二区| 窝窝影院91人妻| 午夜视频精品福利| 香蕉丝袜av| 各种免费的搞黄视频| 又黄又粗又硬又大视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 最新的欧美精品一区二区| 伦理电影免费视频| 国产一级毛片在线| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 国产欧美日韩综合在线一区二区| 国产亚洲精品一区二区www | 丁香六月天网| 免费女性裸体啪啪无遮挡网站| 国产成人欧美在线观看 | 亚洲中文日韩欧美视频| 免费少妇av软件| 久久99一区二区三区| 亚洲avbb在线观看| 不卡一级毛片| 啦啦啦 在线观看视频| 视频区图区小说| 99久久99久久久精品蜜桃| 精品人妻1区二区| 大陆偷拍与自拍| 国产精品亚洲av一区麻豆| 又黄又粗又硬又大视频| 亚洲,欧美精品.| 欧美人与性动交α欧美精品济南到| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 2018国产大陆天天弄谢| 丁香六月欧美| 久热爱精品视频在线9| 精品亚洲成a人片在线观看| 精品人妻1区二区| 午夜免费观看性视频| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 黄色视频,在线免费观看| 久久精品亚洲av国产电影网| 少妇的丰满在线观看| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲国产精品成人久久小说| 老汉色∧v一级毛片| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 精品一品国产午夜福利视频| 亚洲性夜色夜夜综合| 国产麻豆69| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美 亚洲 国产 日韩一| 另类精品久久| 在线观看人妻少妇| 欧美黄色片欧美黄色片| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲国产av新网站| av天堂久久9| 一本大道久久a久久精品| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 欧美97在线视频| 亚洲人成77777在线视频| 日本av免费视频播放| 777米奇影视久久| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 久久国产精品影院| 国产av一区二区精品久久| 国产精品久久久久久人妻精品电影 | 亚洲人成77777在线视频| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品一区二区三区四区五区乱码| 国产人伦9x9x在线观看| 国产精品熟女久久久久浪| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 久久久欧美国产精品| 最近最新中文字幕大全免费视频| 极品人妻少妇av视频| 国产男女内射视频| 免费在线观看黄色视频的| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 国产老妇伦熟女老妇高清| 青青草视频在线视频观看| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美国产精品一级二级三级| 手机成人av网站| 亚洲欧美色中文字幕在线| 黑丝袜美女国产一区| 午夜老司机福利片| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲三区欧美一区| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 免费观看人在逋| 国产一区二区在线观看av| 一区二区三区四区激情视频| 婷婷成人精品国产| 亚洲男人天堂网一区| 国产福利在线免费观看视频| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 午夜激情久久久久久久| 91大片在线观看| 国产av国产精品国产| 男人爽女人下面视频在线观看| 波多野结衣av一区二区av| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产成人av教育| 亚洲中文日韩欧美视频| 18禁观看日本| 亚洲中文av在线| 美女主播在线视频| 日日爽夜夜爽网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| www.999成人在线观看| 高清黄色对白视频在线免费看| 婷婷丁香在线五月| 久久青草综合色| 欧美+亚洲+日韩+国产| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 精品久久久久久电影网| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 999久久久精品免费观看国产| 搡老岳熟女国产| 国产有黄有色有爽视频| 一区二区av电影网| 黄色毛片三级朝国网站| 欧美亚洲日本最大视频资源| 91精品三级在线观看| 亚洲五月婷婷丁香| 一级毛片电影观看| 又紧又爽又黄一区二区| 精品人妻在线不人妻| 永久免费av网站大全| 成人国语在线视频| 91精品国产国语对白视频| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 他把我摸到了高潮在线观看 | 五月开心婷婷网| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美另类一区| 老司机亚洲免费影院| 男女午夜视频在线观看| 91成年电影在线观看| 久久香蕉激情| 亚洲情色 制服丝袜| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 天堂中文最新版在线下载| 国产国语露脸激情在线看| 黄色a级毛片大全视频| 亚洲精品第二区| 久久亚洲精品不卡| 天天添夜夜摸| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 高清视频免费观看一区二区| 亚洲人成电影观看| 9热在线视频观看99| 亚洲精品国产av成人精品| 老熟女久久久| 欧美日本中文国产一区发布| 久久久久国内视频| 免费av中文字幕在线| 欧美精品啪啪一区二区三区 | videosex国产| 在线观看免费日韩欧美大片| 国产成人啪精品午夜网站| 成年人午夜在线观看视频| 精品人妻一区二区三区麻豆| 欧美黑人欧美精品刺激| 又大又爽又粗| www.熟女人妻精品国产| 国产精品1区2区在线观看. | 丰满迷人的少妇在线观看| 欧美成人午夜精品| 一区二区日韩欧美中文字幕| 国产福利在线免费观看视频| 色综合欧美亚洲国产小说| 欧美人与性动交α欧美软件| 波多野结衣av一区二区av| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产99久久九九免费精品| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 国产三级黄色录像| 欧美成狂野欧美在线观看| 亚洲国产精品一区三区| 国产精品1区2区在线观看. | 国产成人欧美在线观看 | 国产精品偷伦视频观看了| √禁漫天堂资源中文www| 国产精品久久久久成人av| 中文字幕制服av| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 欧美日韩一级在线毛片| 中文字幕av电影在线播放| 好男人电影高清在线观看| videosex国产| 国产一区二区在线观看av| 91精品伊人久久大香线蕉| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 在线天堂中文资源库| 在线观看免费午夜福利视频| av国产精品久久久久影院| 久久久久久久国产电影| 亚洲av日韩精品久久久久久密| 久久久精品国产亚洲av高清涩受| 热re99久久国产66热| 国产在线一区二区三区精| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 9色porny在线观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 国产在线免费精品| 黄色片一级片一级黄色片| 99国产精品99久久久久| 午夜免费成人在线视频| 久久精品人人爽人人爽视色| 国产一区二区在线观看av| 夜夜骑夜夜射夜夜干| 搡老岳熟女国产| 永久免费av网站大全| 亚洲欧洲日产国产| 国产精品一区二区精品视频观看| 两个人免费观看高清视频| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 黄片播放在线免费| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产免费av片在线观看野外av| 中亚洲国语对白在线视频| 国精品久久久久久国模美| 精品视频人人做人人爽| 久久久国产成人免费| 精品国产国语对白av| 国产亚洲精品第一综合不卡| 欧美在线一区亚洲| 青春草亚洲视频在线观看| 国产一级毛片在线| 五月开心婷婷网| 亚洲av男天堂| 日韩免费高清中文字幕av| 美女中出高潮动态图| 18在线观看网站| 久久99热这里只频精品6学生| 91字幕亚洲| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 亚洲情色 制服丝袜| 欧美 日韩 精品 国产| 午夜福利在线免费观看网站| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 一级a爱视频在线免费观看| 99精品欧美一区二区三区四区| 最黄视频免费看| 亚洲专区字幕在线| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 啦啦啦在线免费观看视频4| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 国产有黄有色有爽视频| 欧美中文综合在线视频| 超碰97精品在线观看| 国产精品.久久久| 可以免费在线观看a视频的电影网站| a级毛片黄视频| 蜜桃在线观看..| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 欧美性长视频在线观看| 久久亚洲精品不卡| 亚洲五月婷婷丁香| 欧美久久黑人一区二区| 老汉色∧v一级毛片| 国产男女超爽视频在线观看| 大片电影免费在线观看免费| 久久人人爽人人片av| 99国产精品免费福利视频| 操出白浆在线播放| av不卡在线播放| kizo精华| 欧美日韩视频精品一区| 一级毛片精品| 天天添夜夜摸| 69精品国产乱码久久久| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 国精品久久久久久国模美| 老熟女久久久| 99国产精品一区二区蜜桃av | 久久人妻福利社区极品人妻图片| 大片电影免费在线观看免费| 动漫黄色视频在线观看| 亚洲人成77777在线视频| 国产亚洲欧美精品永久| 麻豆乱淫一区二区| 久久女婷五月综合色啪小说| 可以免费在线观看a视频的电影网站| 老司机在亚洲福利影院| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 日韩大片免费观看网站| av免费在线观看网站| 99国产精品免费福利视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 国产不卡av网站在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 热99国产精品久久久久久7| 青春草视频在线免费观看| 成年人黄色毛片网站| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 免费在线观看完整版高清| 99久久国产精品久久久| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 国产熟女午夜一区二区三区| 美国免费a级毛片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 制服诱惑二区| 亚洲精品国产av成人精品| 久久av网站| 欧美黄色淫秽网站| 国产亚洲av高清不卡| 亚洲av电影在线进入| 久久久久精品国产欧美久久久 | 亚洲人成77777在线视频| 久久久久精品国产欧美久久久 | 老司机影院毛片| 欧美少妇被猛烈插入视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 男女下面插进去视频免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添小说| 日韩电影二区| 中文字幕人妻熟女乱码| av不卡在线播放| www.999成人在线观看| 色综合欧美亚洲国产小说| 免费在线观看影片大全网站| 在线看a的网站| 免费在线观看日本一区| 在线观看一区二区三区激情| 欧美精品一区二区免费开放| 丝袜美足系列| 国产不卡av网站在线观看| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 日韩 亚洲 欧美在线| 日韩,欧美,国产一区二区三区| 欧美中文综合在线视频| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 免费看十八禁软件| 中文字幕高清在线视频| 亚洲视频免费观看视频| 国产精品亚洲av一区麻豆| 久久人人爽人人片av| 丝袜美腿诱惑在线| 精品一区二区三区av网在线观看 | 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 日本av手机在线免费观看| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 国产黄色免费在线视频| 99九九在线精品视频| av视频免费观看在线观看| 三级毛片av免费| 久热爱精品视频在线9| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 黄片播放在线免费| 精品人妻在线不人妻| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 精品久久久久久电影网| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 狠狠婷婷综合久久久久久88av| 国产成人av激情在线播放| 精品一区二区三卡| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 一级黄色大片毛片| 精品国产乱码久久久久久男人| 久久青草综合色| 两个人免费观看高清视频| 精品一区二区三区四区五区乱码| 日韩中文字幕欧美一区二区| 性色av乱码一区二区三区2| xxxhd国产人妻xxx| 国产免费av片在线观看野外av| 少妇的丰满在线观看| 伊人久久大香线蕉亚洲五| 大香蕉久久成人网| a 毛片基地| 久久中文字幕一级| 久久99热这里只频精品6学生| 一区福利在线观看| 成人国语在线视频| 亚洲精品国产av蜜桃| 91国产中文字幕| a级毛片黄视频| 大陆偷拍与自拍| 久久青草综合色| 久久中文看片网| 久久久国产一区二区| 自线自在国产av| 国产熟女午夜一区二区三区| 秋霞在线观看毛片| 99国产综合亚洲精品| 丁香六月欧美| 亚洲av美国av| 99久久99久久久精品蜜桃| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 老司机亚洲免费影院| 色94色欧美一区二区| av在线播放精品| 18禁国产床啪视频网站| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 精品亚洲成国产av| 一进一出抽搐动态| 亚洲精品在线美女| 丝袜人妻中文字幕| 欧美国产精品va在线观看不卡| 久久女婷五月综合色啪小说| 脱女人内裤的视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 久久久国产一区二区| 波多野结衣av一区二区av| 极品人妻少妇av视频| 999久久久国产精品视频| 免费观看a级毛片全部| 久热爱精品视频在线9| cao死你这个sao货| av不卡在线播放| 中文字幕人妻丝袜制服| 国产成人精品久久二区二区免费| 国产欧美日韩精品亚洲av| 国产高清videossex| 久热这里只有精品99| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 久久久国产欧美日韩av| 99久久国产精品久久久| 欧美 日韩 精品 国产| 中文欧美无线码| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 人成视频在线观看免费观看| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 黄片大片在线免费观看| 日韩 亚洲 欧美在线| 99国产精品一区二区蜜桃av | 1024视频免费在线观看| 五月天丁香电影| 中文字幕人妻丝袜制服| 在线观看舔阴道视频| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 亚洲专区国产一区二区| 欧美xxⅹ黑人| av电影中文网址| 91成年电影在线观看| 中文字幕av电影在线播放| 久久久水蜜桃国产精品网| 9色porny在线观看| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 国产精品久久久久久精品电影小说| 久久久国产精品麻豆| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| h视频一区二区三区| 老司机福利观看| 国产野战对白在线观看| 日本wwww免费看| 男人舔女人的私密视频| 日本一区二区免费在线视频| 午夜视频精品福利| 久9热在线精品视频| 亚洲精品国产区一区二| a在线观看视频网站| 久久久久国产精品人妻一区二区| 欧美精品一区二区大全| 黄色视频在线播放观看不卡| 99国产精品一区二区蜜桃av | 免费高清在线观看视频在线观看| 一级a爱视频在线免费观看| 一级片免费观看大全| 老司机深夜福利视频在线观看 | 欧美性长视频在线观看| 欧美xxⅹ黑人| 五月天丁香电影| 久久99一区二区三区| 国产亚洲精品一区二区www | 色婷婷久久久亚洲欧美| 免费观看av网站的网址| 超碰成人久久| 男女下面插进去视频免费观看| 欧美激情久久久久久爽电影 | 成人国产一区最新在线观看| 精品国产乱码久久久久久小说| 亚洲国产成人一精品久久久| 亚洲熟女精品中文字幕| 亚洲精品国产av蜜桃| 日本av免费视频播放| 亚洲三区欧美一区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 国产亚洲av高清不卡| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 十八禁人妻一区二区| 韩国高清视频一区二区三区| 大香蕉久久成人网| 欧美日韩黄片免| 最黄视频免费看| 男人舔女人的私密视频| 日韩制服骚丝袜av| av天堂在线播放| 18禁裸乳无遮挡动漫免费视频| 国产xxxxx性猛交| 美女扒开内裤让男人捅视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 久久久久久久大尺度免费视频| 欧美日韩视频精品一区| 成人av一区二区三区在线看 | 久久久久久久国产电影| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲av男天堂| 日韩电影二区| 欧美精品av麻豆av| 精品少妇黑人巨大在线播放| 真人做人爱边吃奶动态| 99精国产麻豆久久婷婷| 国产精品久久久久成人av| 永久免费av网站大全| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 精品一区在线观看国产| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 精品一区二区三区av网在线观看 | 成年av动漫网址| av片东京热男人的天堂| 欧美精品高潮呻吟av久久| 熟女少妇亚洲综合色aaa.| 亚洲精品一二三| xxxhd国产人妻xxx| 午夜福利在线免费观看网站| 超碰成人久久| 最近最新中文字幕大全免费视频| 97人妻天天添夜夜摸| 91国产中文字幕| 国产高清视频在线播放一区 | 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 两人在一起打扑克的视频| 日韩视频在线欧美| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 日本黄色日本黄色录像| 午夜日韩欧美国产| 亚洲精品中文字幕一二三四区 | 久久人人爽人人片av| 制服诱惑二区| av线在线观看网站| 亚洲第一欧美日韩一区二区三区 | 国产成人欧美| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 久久精品国产亚洲av香蕉五月 |