樹突狀細(xì)胞疫苗在惡性膠質(zhì)瘤免疫治療中的應(yīng)用

劉鴻宇 沈少平 楊霖 余新光 陳凌

膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最為常見的惡性腫瘤，在中國人群中的年發(fā)病率為5～7/10萬，且呈上升趨勢。膠質(zhì)瘤占全部中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的26%，占顱內(nèi)惡性腫瘤的81%，其中惡性程度最高的類型為膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（WHOⅣ級），占全部膠質(zhì)瘤的56.6%；中樞神經(jīng)系統(tǒng)惡性腫瘤患者平均5年生存率為35%，而膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者5年生存率低于6%［1］。膠質(zhì)母細(xì)胞瘤發(fā)病率高、生存率低，是嚴(yán)重危及生命的重大疾病。目前標(biāo)準(zhǔn)治療方案以手術(shù)切除為主輔以放射治療和藥物化療等多種方式的綜合治療［2］，但復(fù)發(fā)率仍較高，其中位生存期僅為14.6個月［3］。膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的治療困境促使臨床醫(yī)師和科研人員努力尋求新的治療方法［4?6］。既往數(shù)十年，隨著對免疫系統(tǒng)認(rèn)識的不斷深入，研究者對其在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用產(chǎn)生了濃厚興趣［7］，許多新的治療方法聚焦于腫瘤免疫治療［8?12］。

腫瘤免疫治療的本質(zhì)是腫瘤與免疫系統(tǒng)之間的博弈過程，這一過程早在2004年即由Dunn等［13］進(jìn)行系統(tǒng)總結(jié)，提出“3Es假說”，即免疫細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞在消滅（Elimination）、平衡（Equilibrium）和逃逸（Escape）中不斷斗爭，腫瘤細(xì)胞內(nèi)源性或外源性因素參與其中，發(fā)揮對抗免疫系統(tǒng)的作用。但是對于惡性膠質(zhì)瘤而言，腫瘤內(nèi)源性抵抗和適應(yīng)性抵抗均發(fā)揮較強(qiáng)作用，包括免疫抑制因子分泌和免疫檢查點分子過表達(dá)［14?19］、人類白細(xì)胞抗原（HLA）水平降低［20］、調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Treg）數(shù)目增加［21?23］等，導(dǎo)致與其他腫瘤相比，免疫治療難度更大。目前僅有不足10%的膠質(zhì)瘤患者對免疫治療產(chǎn)生反應(yīng)。對膠質(zhì)瘤而言，有效的免疫治療不僅要打破免疫耐受，產(chǎn)生對腫瘤抗原的免疫應(yīng)答，而且還要克服不斷出現(xiàn)的一系列適應(yīng)性和獲得性免疫逃逸機(jī)制。免疫治療通過免疫系統(tǒng)，特別是獲得性免疫系統(tǒng)特異性攻擊腫瘤，樹突狀細(xì)胞（DC）作為專職抗原呈遞細(xì)胞（APC），在固有免疫和適應(yīng)性免疫中均發(fā)揮重要作用，因此樹突狀細(xì)胞疫苗在免疫治療中也占據(jù)一席之地，可以作為針對各種腫瘤的有希望的免疫治療方法［9］，在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤及其他高級別膠質(zhì)瘤的治療中也受到越來越多的關(guān)注。

一、樹突狀細(xì)胞疫苗的作用原理

樹突狀細(xì)胞源于骨髓淋巴細(xì)胞，可定居在全身組織，對周圍環(huán)境進(jìn)行監(jiān)視，并隨時將捕獲的信息傳送至適應(yīng)性免疫系統(tǒng)［T淋巴細(xì)胞（以下簡稱T細(xì)胞）和B淋巴細(xì)胞（以下簡稱B細(xì)胞）］，是表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物（MHC）Ⅰ和Ⅱ類分子的專職抗原呈遞細(xì)胞，是固有免疫和適應(yīng)性免疫的關(guān)鍵關(guān)聯(lián)紐帶［24］。樹突狀細(xì)胞將從外周獲取的抗原內(nèi)化分解為短肽段，以肽段?MHC復(fù)合物形式表達(dá)于樹突狀細(xì)胞表面，這一過程也是樹突狀細(xì)胞成熟的過程，然后載有抗原肽的樹突狀細(xì)胞遷移至二級淋巴器官，在此激活T細(xì)胞［25］。與其他抗原呈遞細(xì)胞相比，樹突狀細(xì)胞抗原提呈效率極高，且可誘導(dǎo)極少數(shù)T細(xì)胞應(yīng)答，成為T細(xì)胞和B細(xì)胞反應(yīng)最有效的內(nèi)源性刺激［26?27］。

動物模型業(yè)已證實，腫瘤周圍樹突狀細(xì)胞可以捕獲腫瘤細(xì)胞釋放的腫瘤抗原，這些抗原來源于死亡的腫瘤細(xì)胞或通過樹突狀細(xì)胞吞噬活的腫瘤細(xì)胞，再將這些抗原交叉提呈給腫瘤以引流淋巴結(jié)內(nèi)T細(xì)胞，從而誘導(dǎo)腫瘤抗原特異性細(xì)胞毒性T細(xì)胞（CTL）的產(chǎn)生，殺傷腫瘤細(xì)胞［28?29］。在這一過程中，腫瘤細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞相互制衡，一方面，死亡的腫瘤細(xì)胞釋放信號如溶血磷脂酰膽堿（LPC）、1?磷酸鞘氨醇（S1P）等，使樹突狀細(xì)胞發(fā)現(xiàn)死亡的腫瘤細(xì)胞并促進(jìn)其吞噬死亡細(xì)胞；同時，腫瘤細(xì)胞也釋放一些信號，如CD47、乳鐵蛋白等，阻礙樹突狀細(xì)胞對腫瘤的吞噬作用。上述因素均是影響樹突狀細(xì)胞疫苗的重要因素。

二、樹突狀細(xì)胞在惡性膠質(zhì)瘤微環(huán)境中的地位

正常腦實質(zhì)中通常不存在樹突狀細(xì)胞，而主要存在于富含血管部位，如脈絡(luò)膜、腦膜等，提示外周循環(huán)中樹突狀細(xì)胞具備轉(zhuǎn)移至中樞神經(jīng)系統(tǒng)的潛力，但其在膠質(zhì)瘤中的作用尚待進(jìn)一步闡明。目前研究顯示，在膠質(zhì)瘤局部免疫微環(huán)境中，樹突狀細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞之間的相互作用十分復(fù)雜，已發(fā)現(xiàn)的可能作用機(jī)制是：樹突狀細(xì)胞在腫瘤局部捕獲腫瘤抗原，并轉(zhuǎn)移至頸深淋巴結(jié)，激活后續(xù)免疫應(yīng)答，同時在腫瘤局部產(chǎn)生趨化因子如CC趨化因子配體9和10（CCL9和CCL10），以募集活化的淋巴細(xì)胞至腫瘤局部，最后在某些細(xì)胞因子如局部T細(xì)胞和自然殺傷（NK）細(xì)胞分泌的干擾素?γ（IFN?γ）作用下，樹突狀細(xì)胞可以產(chǎn)生細(xì)胞因子如白細(xì)胞介素?12（IL?12），進(jìn)一步提升免疫細(xì)胞的抗腫瘤活性。然而在臨床實踐中，由于膠質(zhì)瘤的整體免疫抑制大環(huán)境和腫瘤局部免疫微環(huán)境中多種細(xì)胞相互作用，使得樹突狀細(xì)胞無法順利完成免疫應(yīng)答，而且在腫瘤微環(huán)境中腫瘤細(xì)胞表達(dá)分泌的多種分子可以抑制樹突狀細(xì)胞活化并驅(qū)使樹突狀細(xì)胞向抑制型或調(diào)節(jié)型表型轉(zhuǎn)化，抑制腫瘤的免疫應(yīng)答。因此，盡管對樹突狀細(xì)胞的了解正在逐步完善，但其在膠質(zhì)瘤微環(huán)境中的作用及其機(jī)制仍有待進(jìn)一步探索。

三、樹突狀細(xì)胞疫苗在惡性膠質(zhì)瘤中的臨床試驗

鑒于樹突狀細(xì)胞在固有免疫和適應(yīng)性免疫中的關(guān)鍵作用，以及臨床前研究結(jié)果顯示的樹突狀細(xì)胞疫苗可以成功誘導(dǎo)抗腫瘤免疫反應(yīng)，相關(guān)臨床試驗正逐步開展并初見成效。2010年，美國食品與藥品管理局（FDA）批準(zhǔn)首個樹突狀細(xì)胞疫苗Provenge用于治療難治性前列腺癌［30］；此后，相繼在乳腺癌、膀胱癌、腎癌、結(jié)腸癌和直腸癌、肺癌、黑色素瘤的治療中取得一定療效［31］。上述這些在臨床所取得的初步成果，目前均為高級別膠質(zhì)瘤樹突狀細(xì)胞疫苗臨床試驗的基礎(chǔ)［32?64］。

最早應(yīng)用樹突狀細(xì)胞疫苗治療高級別膠質(zhì)瘤的兩項臨床試驗發(fā)表于2001年。Kikuchi等［32］將手術(shù)切除的腫瘤組織先行處理，獲得自體膠質(zhì)瘤細(xì)胞后用X線照射，然后將經(jīng)過處理的自體膠質(zhì)瘤細(xì)胞作為抗原致敏樹突狀細(xì)胞，回輸至8例復(fù)發(fā)高級別膠質(zhì)瘤患者體內(nèi)，其中2例達(dá)到部分緩解，但該項研究并未報道其生存期。Yu等［33］對9例新發(fā)高級別膠質(zhì)瘤患者（新發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤7例、間變性星形膠質(zhì)瘤2例）接種以自體腫瘤細(xì)胞表面肽為抗原的樹突狀細(xì)胞疫苗，同時選擇42例同期接受相同手術(shù)的高級別膠質(zhì)瘤患者作為對照，結(jié)果顯示，疫苗接種組患者外周循環(huán)和腫瘤局部均產(chǎn)生大量細(xì)胞毒性物質(zhì)，生存分析提示，與對照組相比，疫苗接種組患者中位總生存期（OS）從257天增至455天。初步試驗的良好療效促使一系列樹突狀細(xì)胞疫苗治療高級別膠質(zhì)瘤的Ⅰ期試驗不斷涌現(xiàn)［34?47］，以評價其有效性和安全性。Rutkowski等［37］以12例經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)方案治療后復(fù)發(fā)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者作為觀察對象，每2～4周接種1次樹突狀細(xì)胞疫苗，平均治療5次（2～7次）后評價治療的有效性和安全性，僅1例注射疫苗前有明顯殘留腫瘤的患者治療過程中反復(fù)出現(xiàn)治療相關(guān)瘤周水腫，4例出現(xiàn)輕微不良反應(yīng)，無一例發(fā)生嚴(yán)重不良反應(yīng)；在腫瘤部分切除患者中，1例病情穩(wěn)定、1例腫瘤體積縮小50%，腫瘤全切除患者中2例生存期分別為35和36個月。Yamanaka等［34］的臨床試驗顯示，經(jīng)樹突狀細(xì)胞疫苗治療的膠質(zhì)瘤患者部分瘤內(nèi)淋巴細(xì)胞浸潤增多。Liau等［39］采用樹突狀細(xì)胞疫苗共治療12例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者，治療后腫瘤局部CD3+T細(xì)胞數(shù)目均明顯增加，1例影像學(xué)檢查顯示腫瘤體積明顯縮小，6例外周血抗腫瘤CTL細(xì)胞數(shù)目明顯增加，余未見明顯免疫應(yīng)答，但外周血效應(yīng)性T細(xì)胞（Teff）數(shù)目增加與生存期并無顯著關(guān)聯(lián)性；其中8例經(jīng)歷再次手術(shù)，4例瘤內(nèi)CTL細(xì)胞數(shù)目增加，而瘤內(nèi)Teff細(xì)胞數(shù)目增加與生存期呈正相關(guān)。Yamanaka等［40］完成的Ⅰ期/Ⅱ期試驗是迄今納入病例數(shù)最多的初期臨床試驗，24例高級別膠質(zhì)瘤患者（WHOⅢ級6例、WHOⅣ級18例）均對現(xiàn)有標(biāo)準(zhǔn)治療方案耐藥，皮下注射或皮下聯(lián)合瘤內(nèi)注射樹突狀細(xì)胞疫苗，僅出現(xiàn)注射部位紅腫，未見其他不良反應(yīng)；中位總生存期增至480天，進(jìn)一步研究顯示，T細(xì)胞活性與總生存期延長呈正相關(guān)。

盡管Ⅰ期臨床試驗結(jié)果令人鼓舞，但是由于大部分研究所納入的病例數(shù)較少，臨床療效的可靠證據(jù)并不強(qiáng)，僅能說明樹突狀細(xì)胞疫苗安全可行，有初步效果。在此基礎(chǔ)上，大樣本的Ⅱ期/Ⅲ期臨床試驗逐漸開展。2008 年，De Vleeschouwer等［42］率先完成早期較大規(guī)模的Ⅱ期臨床試驗，共納入56例復(fù)發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者，以腫瘤細(xì)胞裂解物致敏樹突狀細(xì)胞疫苗輔助注射腫瘤細(xì)胞裂解物，并根據(jù)治療頻率進(jìn)行分組，雖然生存率未見明顯提高，但亞組分析提示，每周接種疫苗的患者可獲得生存期延長。2018年，Liau等［64］公布以自體腫瘤細(xì)胞裂解物致敏樹突狀細(xì)胞疫苗DCVax?L聯(lián)合替莫唑胺化療治療新發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的Ⅲ期臨床試驗的中期結(jié)果，331例患者均隨訪至腫瘤復(fù)發(fā)，所有患者均予DCVax?L治療，中位總生存期為術(shù)后23.1個月，其中223例術(shù)后總生存期＞30個月、182例術(shù)后總生存期＞36個月；進(jìn)一步根據(jù)O6?甲基鳥嘌呤?DNA甲基轉(zhuǎn)移酶（MGMT）突變進(jìn)行分層分析顯示，MGMT突變患者（131例）中位總生存期為34.7個月，其中100例達(dá)40.5個月，但未探究預(yù)后相關(guān)影響因素；僅2.11%（7/331）患者出現(xiàn)3或4級不良事件［美國國立癌癥研究所（NCI）通用毒性標(biāo)準(zhǔn)（CTC）］，包括腦水腫3例、癲發(fā)作2例、惡心1例、淋巴結(jié)感染1例，推測可能與接種疫苗有關(guān)。該項研究的Ⅲ期試驗結(jié)果顯示出良好的應(yīng)用前景，表明樹突狀細(xì)胞疫苗可使患者獲得顯著的生存獲益。2019年，Wen等［65］報告其最新樹突狀細(xì)胞疫苗ICT?107治療新發(fā)膠質(zhì)瘤母細(xì)胞瘤的Ⅱ期臨床試驗結(jié)果，并評價其有效性和安全性以及對生存獲益和誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的影響。ICT?107是靶向6個特異性抗原的自體樹突狀細(xì)胞疫苗，分別為人類白細(xì)胞抗原A1（HLA?A1）限制性MAGE?1、AIM?2以及HLA?A2限制性人表皮生長因子受體2（HER2）、TRP?2、gp100、IL?I3Rα2，上述6 個抗原在83%腫瘤細(xì)胞中全部表達(dá)。疫苗接種組納入81例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者，對照組納入43例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者，疫苗接種方案為放化療后4周為誘導(dǎo)期（注射疫苗1次/周），隨后為維持期（替莫唑胺治療第1、3、6、10個療程的第21天注射疫苗1次，以及藥物化療結(jié)束后每6個月注射1次，直至試驗結(jié)束）。結(jié)果顯示，疫苗接種組患者最常見的不良事件為乏力、嘔吐、眩暈，與對照組相比無顯著差異；生存分析提示，兩組患者總生存期差異無統(tǒng)計學(xué)意義（17個月對15個月，P=0.580），而疫苗接種組無進(jìn)展生存期（PFS）優(yōu)于對照組（11.2個月對9個月，P=0.011）；亞組分析顯示，僅在 HLA?A1陽性伴MGMT啟動子區(qū)甲基化患者中，疫苗接種組總生存期優(yōu)于對照組（47.6個月對25.8個月，P=0.049），表明該多靶點疫苗既可改善膠質(zhì)母細(xì)胞瘤免疫抑制微環(huán)境，又能在一定程度上克服腫瘤異質(zhì)性。

但并非所有的臨床試驗均顯示樹突狀細(xì)胞疫苗可使膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者生存獲益。Walker等［43］的Ⅰ期臨床試驗納入9例膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者和4例間變性星形細(xì)胞瘤患者，予樹突狀細(xì)胞疫苗聯(lián)合膠質(zhì)瘤標(biāo)準(zhǔn)治療，再次手術(shù)后腫瘤標(biāo)本中T細(xì)胞浸潤增多，但總生存期并無明顯延長。因此，可能尚有其他因素影響治療效果，這些均需積累更多的數(shù)據(jù)或探索更優(yōu)的治療方案以達(dá)到更穩(wěn)定的療效。

四、樹突狀細(xì)胞疫苗在膠質(zhì)瘤治療中的前景展望

樹突狀細(xì)胞疫苗的療效和相對安全性引起了研究者對這種新療法的極大興趣。目前已發(fā)表的11項樹突狀細(xì)胞疫苗治療新發(fā)高級別膠質(zhì)瘤的臨床試驗中7項表現(xiàn)出生存獲益，但是評價樹突狀細(xì)胞疫苗治療復(fù)發(fā)高級別膠質(zhì)瘤效果的臨床試驗中僅有不足20%的患者生存獲益，究其原因是所納入的病例數(shù)較少而無法得出明確結(jié)論。臨床應(yīng)用樹突狀細(xì)胞疫苗存在諸多困境與挑戰(zhàn)，如疫苗來源、疫苗抗原和佐劑選擇、疫苗靶向優(yōu)化、遷移性限制、聯(lián)合治療等，均有待進(jìn)一步深入研究。

1.疫苗來源 目前，體外制備可應(yīng)用于臨床的樹突狀細(xì)胞疫苗大多通過自體血分離CD14+單核細(xì)胞誘導(dǎo)而來，但存在制備時間長、細(xì)胞數(shù)目有限、制備過程繁瑣、費用高昂等問題。由此可見，解決疫苗來源是最根本問題。晚近有研究者通過誘導(dǎo)型多能干細(xì)胞（iPSCs）、增殖型髓系細(xì)胞等誘導(dǎo)抗原呈遞細(xì)胞，可以制備大量樹突狀細(xì)胞樣細(xì)胞，與骨髓來源樹突狀細(xì)胞功能、表型等一致，可能有望解決樹突狀細(xì)胞疫苗來源的問題。

2.疫苗抗原和佐劑的選擇 目前，構(gòu)建樹突狀細(xì)胞疫苗的抗原多為腫瘤相關(guān)抗原（TAA）或腫瘤細(xì)胞裂解物，其優(yōu)點是制備簡便且有一定療效；此外，腫瘤細(xì)胞來源外泌體作為腫瘤抗原也備受關(guān)注。外泌體是細(xì)胞分泌至細(xì)胞外環(huán)境的一種小囊泡，含有許多抗原提呈所必需的分子，如特異性抗原、MHCⅠ和Ⅱ、共刺激分子和細(xì)胞間黏附分子（ICAM）［66］。腫瘤細(xì)胞來源外泌體顯示出許多優(yōu)于傳統(tǒng)抗原的特性，包括對腫瘤免疫微環(huán)境的抵抗、強(qiáng)大的抗原提呈表型、將抗原從專業(yè)抗原呈遞細(xì)胞轉(zhuǎn)移至其他抗原呈遞細(xì)胞的能力，并能夠長期保存。2017年，Liu等［66］在膠質(zhì)瘤小鼠模型中發(fā)現(xiàn)，以外泌體致敏的樹突狀細(xì)胞疫苗具有更強(qiáng)的抗腫瘤細(xì)胞毒性作用。除優(yōu)化疫苗抗原外，聯(lián)合佐劑治療也可以增強(qiáng)療效，不僅可以激活樹突狀細(xì)胞，還可以激活免疫系統(tǒng)的多個分支，從而對抗腫瘤的免疫逃逸機(jī)制，增強(qiáng)樹突狀細(xì)胞介導(dǎo)的免疫治療。臨床前研究證實有一種細(xì)胞佐劑有較好的應(yīng)用前景，即自然殺傷T細(xì)胞（NKT）。NKT細(xì)胞不僅具有直接攻擊腫瘤細(xì)胞的能力，而且可通過分泌輔助性T細(xì)胞1和2（Th1和Th2）調(diào)節(jié)T細(xì)胞活性，通過CD40L/CD40介導(dǎo)的相互作用促進(jìn)樹突狀細(xì)胞成熟［67?69］。其另一個優(yōu)勢在于對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤微環(huán)境的抗腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用，包括激活免疫細(xì)胞（如B細(xì)胞、T細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞），以及下調(diào)和殺傷腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞（TAMs）和骨髓來源抑 制細(xì)胞（MDSC）［66，70?72］。此外，NKT細(xì)胞與樹突狀細(xì)胞之間的協(xié)同作用可以增強(qiáng)CD4+和CD8+T細(xì)胞活性，在誘導(dǎo)強(qiáng)而持久的免疫應(yīng)答中非常有效［70］。Liu 等［66］通過腫瘤細(xì)胞來源外泌體聯(lián)合恒定自然殺傷T細(xì)胞（iNKT）佐劑構(gòu)建的樹突狀細(xì)胞疫苗在小鼠原位膠質(zhì)瘤模型中驗證了這一點，經(jīng)治療后小鼠存活期明顯延長，表明組合療法可以導(dǎo)致針對膠質(zhì)瘤的協(xié)同細(xì)胞毒性抗腫瘤效應(yīng)。

3.遷移限制 樹突狀細(xì)胞疫苗應(yīng)用過程中面臨的另一棘手問題是疫苗遷移。研究顯示，僅不足5%的樹突狀細(xì)胞疫苗可遷移至淋巴結(jié)［73］，因此，改善樹突狀細(xì)胞淋巴結(jié)歸巢是提高腫瘤抗原特異性樹突狀細(xì)胞療效的重要方法［60］。Mitchell等［60］將 Td類毒素作為一種有效抗原，對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的疫苗接種點進(jìn)行預(yù)處理，使樹突狀細(xì)胞遷移增強(qiáng)，生存率顯著提高。體內(nèi)靶向樹突狀細(xì)胞的研究也顯示出克服樹突狀細(xì)胞遷移能力較差的缺點［74］。樹突狀細(xì)胞疫苗的體內(nèi)接種方法主要是單克隆抗體靶向特異性細(xì)胞表面受體。CD205是介導(dǎo)抗原攝取和提呈的新受體，對黑色素瘤小鼠模型的觀察顯示，注射抗CD205抗體耦聯(lián)的腫瘤抗原可以刺激小鼠體內(nèi)CD4+和CD8+T細(xì)胞的增殖活化，延緩腫瘤生長［75］。Dhodapkar等［76］的人抗 CD205 抗體與腫瘤抗原NY?ESO?1相結(jié)合致敏樹突狀細(xì)胞疫苗的研究也證實人體內(nèi)治療的可行性。涉及單克隆抗體介導(dǎo)的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤抗原向樹突狀細(xì)胞傳遞的體內(nèi)靶向方法尚待進(jìn)一步研究，值得期待。

4.聯(lián)合治療 為提高樹突狀細(xì)胞疫苗的療效，多種免疫治療方法的聯(lián)合應(yīng)用不失為更有效的策略。免疫檢查點抑制劑在改善惡性腫瘤患者預(yù)后方面業(yè)已取得矚目成就［77?80］。盡管單純免疫檢查點抑制劑治療惡性膠質(zhì)瘤的研究結(jié)果并不樂觀，已有Ⅲ期臨床試驗（CheckMate?143）證實其延長生存期的作用并不優(yōu)于貝伐單抗，但與樹突狀細(xì)胞疫苗聯(lián)合應(yīng)用的療效可能有所不同，樹突狀細(xì)胞疫苗可以增加腫瘤局部浸潤T細(xì)胞數(shù)目，免疫檢查點抑制劑可以減少腫瘤局部T細(xì)胞耗竭，二者結(jié)合使治療效果更佳。Keskin等［81］研究發(fā)現(xiàn)，個體化樹突狀細(xì)胞疫苗可以增強(qiáng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤新抗原特異性CD4+和CD8+T細(xì)胞免疫應(yīng)答，使腫瘤局部浸潤的腫瘤浸潤淋巴細(xì)胞（TIL）數(shù)目增加。Garris等［82］的研究也證實免疫檢查點抑制劑發(fā)揮作用需腫瘤局部樹突狀細(xì)胞與T細(xì)胞相互作用。關(guān)于二者聯(lián)合應(yīng)用的臨床試驗?zāi)壳罢谶M(jìn)行中，國內(nèi)也有研究團(tuán)隊開展了這一聯(lián)合治療方法的臨床試驗（試驗編號：ChiCTR1900025835）。

通過優(yōu)化樹突狀細(xì)胞的靶向和抗原負(fù)載、克服遷移性限制、結(jié)合其他免疫治療方法等以改善腫瘤免疫抑制微環(huán)境，有助于提高樹突狀細(xì)胞疫苗治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的療效，有可能在Ⅲ期臨床試驗中取得有希望的結(jié)果，成為重要的臨床治療方法。

五、小結(jié)

樹突狀細(xì)胞在固有免疫和獲得性免疫系統(tǒng)中發(fā)揮重要作用，在膠質(zhì)母細(xì)胞瘤微環(huán)境中具有復(fù)雜的免疫功能。臨床前研究和臨床試驗業(yè)已顯示出樹突狀細(xì)胞疫苗可以增強(qiáng)免疫應(yīng)答并延長患者總生存期。各種協(xié)同佐劑的組合旨在克服膠質(zhì)瘤誘導(dǎo)的免疫抑制，樹突狀細(xì)胞疫苗治療新發(fā)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤患者的Ⅲ期臨床試驗中期結(jié)果證實其有效性、安全性和可行性。尚待進(jìn)一步探討基于此免疫療法的最佳組合，從而使患者有最大獲益。隨著對膠質(zhì)母細(xì)胞瘤免疫基因組學(xué)和腫瘤逃逸途徑的不斷了解，使基于樹突狀細(xì)胞疫苗的免疫療法不斷完善，有助于使基于主動免疫的特異性腫瘤治療成為可能。

利益沖突無