miR-214與細(xì)胞自噬在骨質(zhì)疏松發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用機(jī)制研究進(jìn)展

陳峰 胡建華 吳志宏 仉建國(guó)

（中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院骨科，北京 100730）

骨質(zhì)疏松癥是一種與骨強(qiáng)度降低相關(guān)的代謝性慢性疾病，其特征是骨量減少、骨骼脆性增加、骨組織結(jié)構(gòu)惡化和骨折風(fēng)險(xiǎn)增加。骨質(zhì)疏松癥是老年人骨折最常見(jiàn)的原因，通常癥狀直到骨折發(fā)生時(shí)才出現(xiàn)，甚至輕微的應(yīng)力也可能發(fā)生骨折。已發(fā)現(xiàn)骨質(zhì)疏松癥引起的慢性疼痛嚴(yán)重干擾正?；顒?dòng)。發(fā)達(dá)國(guó)家骨質(zhì)疏松癥的患病率在男性中為2%～8%，在女性中為9%～38%[1]。除了增加活動(dòng)障礙和脆性骨折的風(fēng)險(xiǎn)之外，骨質(zhì)疏松癥可增加骨折等并發(fā)癥相關(guān)的住院風(fēng)險(xiǎn)，從而給公共衛(wèi)生系統(tǒng)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。骨質(zhì)疏松癥是一種多因素、多基因疾病，在任何給定的個(gè)體中可能存在不同的一組機(jī)制共同起作用[2]。骨質(zhì)疏松癥的特征是骨量減少、骨組織微結(jié)構(gòu)改變、骨強(qiáng)度降低和骨折風(fēng)險(xiǎn)增加[3]。骨重建是一種持續(xù)的骨吸收和骨形成過(guò)程，主要由破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞調(diào)控。骨重建期間骨形成減少和/或骨吸收過(guò)度均可導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥[4]。與年齡相關(guān)的成骨細(xì)胞功能障礙可能是由骨骼微環(huán)境中與年齡相關(guān)的變化介導(dǎo)外在機(jī)制引起的，如激素和生長(zhǎng)因子水平的變化[5]，以及由成骨細(xì)胞衰老引起的內(nèi)在機(jī)制[6]。研究表明，在一些骨科疾病的小鼠模型中，骨質(zhì)疏松癥發(fā)病機(jī)制與成骨細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能存在一定的聯(lián)系[7]。然而目前骨質(zhì)疏松癥的發(fā)病機(jī)制并未完全闡明。

絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥屬于Ⅰ型原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥，主要誘因是女性絕經(jīng)后體內(nèi)雌激素水平下降，導(dǎo)致破骨細(xì)胞的骨吸收活性增加，從而引發(fā)骨質(zhì)流失[8]。研究認(rèn)為，雌激素缺乏能夠促使機(jī)體產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子IL-2、IL-6、TNF-α 等，從而導(dǎo)致機(jī)體破骨細(xì)胞活性增加。另外，雌激素可刺激成骨細(xì)胞分泌表達(dá)骨保護(hù)素（osteoclastogenesis inhibitory factor,OPG）[9]，而雌激素的缺乏會(huì)造成RANKL-RANK-OPG信號(hào)途徑的紊亂。人體骨量和骨骼強(qiáng)度下降的基本機(jī)制與年齡變化相關(guān)。近年來(lái)，針對(duì)骨質(zhì)疏松癥分子機(jī)制的研究取得了新進(jìn)展，認(rèn)為造成骨質(zhì)疏松的原因除了性激素水平降低，氧化應(yīng)激的增加也是公認(rèn)的關(guān)鍵因素。活性氧的過(guò)量產(chǎn)生與炎癥、組織損傷有關(guān)，人體在衰老或雌激素水平下降的情況下也會(huì)誘發(fā)氧化應(yīng)激，導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)骨質(zhì)疏松癥狀。Chen等[10]的報(bào)道中表示，隨年齡增加大鼠骨細(xì)胞自噬活性逐漸降低，ULK-1、LC3-11、BECN1 表達(dá)下降，p62 表達(dá)上升，細(xì)胞凋亡增加。因此，自噬水平減弱導(dǎo)致氧化應(yīng)激增加，可能與增齡性骨質(zhì)疏松密不可分。本文將結(jié)合最新文獻(xiàn)，總結(jié)微小RNA 特別是較新的miR-214 及細(xì)胞自噬在骨質(zhì)疏松領(lǐng)域的研究進(jìn)展，闡述骨質(zhì)疏松的相關(guān)發(fā)生機(jī)制，以期提供新的研究思路。

1 微小RNA和miR-214在骨質(zhì)疏松中的作用

微小RNA（microRNA,miRNA）是短的寡核苷酸（約22～25 個(gè)堿基），可在轉(zhuǎn)錄水平上產(chǎn)生抑制性作用，抑制該靶基因mRNA的翻譯或降解目標(biāo)mRNA來(lái)調(diào)控基因表達(dá)[11-13]。miRNA是一種非編碼RNA，在動(dòng)物種系發(fā)生中具有保守序列。miRNA主要源自于蛋白編碼基因序列或蛋白編碼的基因間序列，其5’端攜帶有磷酸基團(tuán)，3’端為羥基[14]。成熟的miRNA 以完全或不完全匹配方式結(jié)合到其互補(bǔ)的mRNA 靶位抑制翻譯和影響mRNA 的穩(wěn)定性。miRNA 具有多種生物學(xué)功能，而這些生物學(xué)功能的實(shí)現(xiàn)主要依賴(lài)于其5’端的“種子序列”與靶基因的3’非編碼區(qū)的相互識(shí)別，隨后通過(guò)完全互補(bǔ)配對(duì)的形式誘導(dǎo)靶基因mRNA 發(fā)生降解從而抑制基因表達(dá)[15]。由于miRNA的遺傳保守性，其與靶向mRNA的3’非翻譯區(qū)(3’un?translated region,3’UTR)結(jié)合，在轉(zhuǎn)錄后水平發(fā)揮調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)與功能的作用。迄今為止在人類(lèi)細(xì)胞中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的miRNA 約有一千多種，但其總量?jī)H約占人類(lèi)基因組的2%，且其中與基因調(diào)控有關(guān)的miRNA約占20%～30%[16,17]。盡管miRNA 在人類(lèi)基因組中占有很小的比例，但其對(duì)人體中的一系列生理過(guò)程有調(diào)控作用，能夠影響將近三分之一基因的表達(dá)，在細(xì)胞誘導(dǎo)分化、增殖、遷移、生長(zhǎng)發(fā)育和凋亡中起著重要的調(diào)節(jié)作用[18]。

在哺乳動(dòng)物中大約60%的基因是各種細(xì)胞產(chǎn)生的miRNA 的靶標(biāo)，miRNA 已經(jīng)被證明是骨骼形成的重要調(diào)節(jié)因子，可對(duì)骨細(xì)胞的增殖、分化及細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮多種調(diào)控作用[19]。Dicer蛋白酶（Dicer）是加工前體miRNA所需的關(guān)鍵酶，前體miRNA通過(guò)Dicer的切割轉(zhuǎn)化為成熟的miRNA，在小鼠骨祖細(xì)胞中敲除Dic?er 后導(dǎo)致胚胎死亡，在成熟成骨細(xì)胞中敲除Dicer 會(huì)使胚胎發(fā)育期間骨形成標(biāo)志物堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,ALP）、Runt 相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（runt-related transcription factor 2,Runx2）的表達(dá)降低，進(jìn)而抑制骨細(xì)胞的生成，延遲圍產(chǎn)期骨形成[20]。敲除Dicer 后會(huì)使miRNA 的形成受到抑制，引起骨代謝的失衡，這表明miRNA 在骨骼發(fā)育和維持骨代謝平衡中有不可或缺的作用。目前越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)miRNA通過(guò)其下游的靶基因調(diào)控成骨分化和破骨細(xì)胞形成影響骨重塑過(guò)程[21]。研究發(fā)現(xiàn)，miRNA 可以通過(guò)RNA 干擾途徑調(diào)控某些自噬相關(guān)基因（autophagy-related gene,ATG）及其調(diào)節(jié)因子。骨形成和骨吸收之間的不平衡是骨質(zhì)疏松癥的主要病因。miRNA作為一種新發(fā)現(xiàn)的調(diào)控因子，在許多細(xì)胞過(guò)程中發(fā)揮重要作用，通過(guò)基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控自噬。相反，自噬起到了調(diào)節(jié)miRNA 穩(wěn)態(tài)的角色[22]。在骨質(zhì)疏松患者的血清中檢測(cè)到一些特異性循環(huán)miRNA，包括miR-21、miR-23a、miR-24、miR-100、miR-125b 也在骨組織中高度表達(dá)[23]。Li 等[24]通過(guò)2 例偶發(fā)的miR?NA-2861 突變的青少年骨質(zhì)疏松患者，證實(shí)了阻斷miRNA-2861 的表達(dá)對(duì)骨質(zhì)代謝及骨質(zhì)疏松病理發(fā)生有重要作用，miRNA-2861通過(guò)下調(diào)組蛋白脫乙酰酶5（histone deacetylase 5,HDAC5）表達(dá)，在成骨細(xì)胞分化中起到重要的生理作用。

已有研究證明miR-214 是肌肉骨骼代謝和疾病的重要調(diào)節(jié)因子。miR-214、miR-199a-2、miR-3120都屬于miR-214家族，miR-214由發(fā)動(dòng)蛋白-3（dyna?min 3，Dnm3）基因互補(bǔ)鏈上的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄而來(lái)，其前體可產(chǎn)生2 個(gè)成熟的miRNAs：miR-214-3p 和miR-214-5p。目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)激活轉(zhuǎn)錄因子-4（activating transcription factor 4，ATF4）、鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子、β-連環(huán)蛋白、c-Jun 氨基末端激酶（c-Jun N-terminal ki?nase,JNK）等成骨分化相關(guān)的基因都是miR-214的靶標(biāo)，此外破骨相關(guān)的基因同源性磷酸酶-張力蛋白（phosphatase and tensin homolog,PTEN）也是miR-214的靶標(biāo)[25]。這表明miR-214 可以介導(dǎo)骨形成和骨吸收，從而對(duì)骨代謝平衡產(chǎn)生影響。骨形成減少或骨吸收增加，會(huì)使骨質(zhì)減少誘發(fā)骨質(zhì)疏松。骨質(zhì)疏松多發(fā)于老年人群中，其主要特征是骨強(qiáng)度降低、脆性增加、骨折風(fēng)險(xiǎn)增加。研究發(fā)現(xiàn)在老年人群中隨著年齡的增加，全血清、血清外泌體和骨組織中miR-214-3p 表達(dá)不斷增加，且血清外泌體破骨細(xì)胞標(biāo)記蛋白CTSK、TRAcP5 等的表達(dá)也均明顯增加，骨鈣素表達(dá)明顯降低，通過(guò)相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，血清外泌體中和骨中miR-214-3p的表達(dá)呈正相關(guān)，血清外泌體中miR-214-3p的表達(dá)與骨中BGLAP的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，該研究還發(fā)現(xiàn)在去卵巢小鼠中血清外泌體中miR-214-3p 的表達(dá)與骨生成速率呈負(fù)相關(guān)，這表明在老年人群中性激素缺乏導(dǎo)致的骨量丟失與miR-214-3p的高表達(dá)存在密切關(guān)聯(lián)[26]。Wang 等[27]對(duì)骨質(zhì)疏松小鼠給予miR-214拮抗劑干預(yù)發(fā)現(xiàn)，抑制miR-214的表達(dá)后小鼠的骨生成速率、骨量和骨密度均明顯增加，此外在后肢懸吊小鼠模型中miR-214 拮抗劑同樣可以提高骨量和骨密度，并使其成骨細(xì)胞百分比提高。這說(shuō)明雌激素缺乏或機(jī)械應(yīng)力刺激減少等誘導(dǎo)骨質(zhì)疏松的因素，可能是通過(guò)上調(diào)miR-214誘導(dǎo)了骨質(zhì)疏松的發(fā)生。Huang 等[28]的研究發(fā)現(xiàn)在激素誘導(dǎo)的股骨頭壞死組織中，lncRNA MALAT1 可以通過(guò)抑制miR-214 來(lái)上調(diào)ATF4 促進(jìn)成骨分化，并且用雙熒光酶素試驗(yàn)驗(yàn)證了miR-214 和ATF4 之間具有靶向關(guān)系。Liu 等[29]的研究發(fā)現(xiàn)，IL-17A 刺激后，RANKL和miR-214 在成骨細(xì)胞中的表達(dá)增加，IL-17A 刺激成骨細(xì)胞后，miR-214 在破骨細(xì)胞中的表達(dá)增加，破骨細(xì)胞活性增強(qiáng)。成骨細(xì)胞來(lái)源的miR-214 可以被轉(zhuǎn)移到破骨細(xì)胞中，進(jìn)而調(diào)節(jié)其活性。Yuan 等[30]研究報(bào)道機(jī)械應(yīng)變能提高堿性磷酸酶活性，促進(jìn)基質(zhì)礦化，上調(diào)成骨因子的表達(dá)，如ATF4，鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子，堿性磷酸酶和β-連環(huán)蛋白，下調(diào)RANKL 和RANK的表達(dá)；過(guò)表達(dá)miR-214不僅可以抑制這些成骨因子的表達(dá)，還可以減弱成骨細(xì)胞的機(jī)械應(yīng)變?cè)鰪?qiáng)成骨作用，表明抑制miR-214可能是運(yùn)動(dòng)預(yù)防骨質(zhì)疏松癥的方式之一。研究發(fā)現(xiàn)在原發(fā)性骨質(zhì)疏松患者中，miR-214 顯著升高，鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子顯著降低。鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子的相對(duì)定量值與性別、體重指數(shù)、電離鈣呈正相關(guān)，與miR-214和C-反應(yīng)蛋白呈負(fù)相關(guān)。因此，miR-214在原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥中的作用可能是通過(guò)抑制骨中鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)，因此miR-214 和鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄因子都可能是未來(lái)治療干預(yù)的靶點(diǎn)[31]。

2 細(xì)胞自噬與骨質(zhì)疏松

自噬是人體的一個(gè)自適應(yīng)分解代謝的過(guò)程，可以被不同形式的代謝應(yīng)激激活，包括營(yíng)養(yǎng)缺乏、生長(zhǎng)因子消耗和缺氧等。已經(jīng)明確的自噬形式包括：分子伴侶介導(dǎo)的自噬、大自噬、小自噬三種[32]。凋亡和自噬性細(xì)胞死亡的區(qū)別在于細(xì)胞退化時(shí)所需要的溶酶體的來(lái)源。自噬除了有維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)的基礎(chǔ)作用，是人類(lèi)以生存為目的的一個(gè)自我應(yīng)激反應(yīng)機(jī)制，也是機(jī)體的一種自我保護(hù)機(jī)制[33]。相對(duì)于生存期較短的破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞，骨細(xì)胞死亡主要隨著年齡增長(zhǎng)伴隨骨強(qiáng)度下降而出現(xiàn)，導(dǎo)致骨細(xì)胞死亡可能的機(jī)制是隨自噬功能衰竭，骨質(zhì)疏松癥很可能是因?yàn)楣羌?xì)胞不能幸免于自噬衰竭這一機(jī)制而發(fā)病，這個(gè)機(jī)制將會(huì)使與年齡相關(guān)的骨細(xì)胞死亡速度加快[34]。人類(lèi)衰老過(guò)程中骨量和骨強(qiáng)度下降的原因有多種，骨細(xì)胞是骨基質(zhì)內(nèi)具備多種功能的長(zhǎng)壽細(xì)胞，由于它們的長(zhǎng)壽，隨著時(shí)間的變化，骨細(xì)胞可能比破骨細(xì)胞或者成骨細(xì)胞積累更多的分子水平的損害。在這個(gè)破壞過(guò)程中，骨細(xì)胞可以利用自噬調(diào)控清除損壞的細(xì)胞器和大分子，從而使正常的細(xì)胞保持功能，使衰老對(duì)骨骼細(xì)胞功能的影響最小化[35]。機(jī)體內(nèi)自噬水平強(qiáng)度隨著年齡增高逐漸下降[36]，而體內(nèi)自噬水平的下降則可能導(dǎo)致因增齡出現(xiàn)的骨量減少[37]。在正常的生理和病理狀態(tài)下，骨吸收和骨形成的不平衡是導(dǎo)致骨質(zhì)疏松癥的根源[38]，自噬在成骨細(xì)胞或破骨細(xì)胞退變過(guò)程中起到重要作用[39]。Chen 等[10]試驗(yàn)證實(shí)，年齡相關(guān)的骨量丟失是老年人骨質(zhì)疏松癥和骨質(zhì)疏松性骨折的主要原因，而其中骨細(xì)胞的自噬可能參與了與年齡相關(guān)的骨質(zhì)丟失進(jìn)程。破骨細(xì)胞是骨重吸收細(xì)胞，過(guò)度活動(dòng)的破骨細(xì)胞導(dǎo)致了骨量丟失和骨質(zhì)疏松癥，因而破骨細(xì)胞自噬的抑制顯然是對(duì)保持骨量有利[40]，成骨細(xì)胞是骨形成細(xì)胞，成骨細(xì)胞或前成骨細(xì)胞自噬功能下降會(huì)導(dǎo)致骨形成減少、骨骼質(zhì)量下降，并最終導(dǎo)致骨質(zhì)疏松發(fā)生[41]。研究發(fā)現(xiàn)，自噬可能在成骨細(xì)胞或破骨細(xì)胞退變過(guò)程中起到重要作用[39]。

哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin,mTOR）在上游影響自噬誘導(dǎo)階段負(fù)性調(diào)控自噬水平，而自噬通過(guò)參與調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞的活性而調(diào)節(jié)骨吸收[42]，mTOR通路的抑制會(huì)促進(jìn)自噬[43]，同時(shí)mTOR的抑制可以降低破骨細(xì)胞的活性，減少破骨細(xì)胞數(shù)量[44]。此外，自噬還通過(guò)mTOR通路的抑制促進(jìn)成骨細(xì)胞的作用調(diào)節(jié)骨形成[45]。葛根素對(duì)破骨細(xì)胞自噬相關(guān)蛋白(LC3 和p62 蛋白)和Akt/mTOR 信號(hào)通路相關(guān)蛋白(Akt、p-Akt 和p-s6 蛋白)表達(dá)的影響，證實(shí)葛根素能有效促進(jìn)破骨細(xì)胞內(nèi)的自噬相關(guān)蛋白質(zhì)的表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)Akt-mTOR信號(hào)通路對(duì)該自噬變化有重要作用。川芎嗪能夠通過(guò)促進(jìn)依賴(lài)于A(yíng)MPK/mTOR信號(hào)通路的自噬延長(zhǎng)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的生存，保留生存能力和抑制凋亡，表明川芎嗪治療和調(diào)節(jié)骨髓基質(zhì)干細(xì)胞的功能會(huì)被認(rèn)為是預(yù)防和治療糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的骨質(zhì)疏松癥（glucocorticoid induced os?teoporosis,GIOP）的一個(gè)重要方法[46]。

3 miR-214調(diào)控自噬的機(jī)制及在骨質(zhì)疏松中的作用

研究發(fā)現(xiàn)，miR-214 可以通過(guò)調(diào)控PI3K/AKT/mTOR 信號(hào)通路影響宮頸癌細(xì)胞增殖、凋亡和侵襲[47]，miR-214還可以通過(guò)PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路促進(jìn)細(xì)胞分裂，抑制食管鱗癌細(xì)胞凋亡[48]。以上研究結(jié)果說(shuō)明miR-214 對(duì)mTOR 具有一定的調(diào)控作用。Wnt 途徑是至關(guān)重要的骨質(zhì)疏松發(fā)病中調(diào)節(jié)骨形成和骨穩(wěn)態(tài)的通路，miR-141-3p 和miR-204/211 通過(guò)Wnt 通路相關(guān)因子在調(diào)節(jié)骨形成過(guò)程中發(fā)揮重要作用[49]。自噬也可以通過(guò)抑制RANKL/RANK 途徑以抑制骨吸收。miR-148a通過(guò)抑制活化T細(xì)胞的核因子等在破骨細(xì)胞分化中起著積極的調(diào)節(jié)作用，通過(guò)MC?SF（myeloid colony stimulating factor）+RANKL（recep?tor activator of NF-κB ligand）途徑負(fù)向調(diào)控RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成[50]。相反情況下，miR-21 促進(jìn)RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞形成[51]。

自噬是一個(gè)在進(jìn)化上相對(duì)保守的過(guò)程，它通過(guò)形成雙膜自噬體以降解受損的細(xì)胞器和衰老的蛋白，自噬的調(diào)控與人體內(nèi)基因相關(guān)。人類(lèi)基因組關(guān)聯(lián)研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，單核苷酸多態(tài)性自噬相關(guān)基因與骨發(fā)育和骨骼疾病相關(guān)聯(lián)。自噬受到自噬相關(guān)基因如自噬相關(guān)基因12（autophagy-related gene 12,ATG12）、ATG5和輕鏈蛋白3（light chain 3,LC3）等的調(diào)控，其對(duì)于維持骨細(xì)胞的正常生理功能具有重要的作用[52]。自噬相關(guān)基因5/7（autophagy related gene 5，ATG5;autophagy related gene 7,ATG7）和微管相關(guān)蛋白1A/1B 輕鏈3（microtubule-associated protein 1A/1B light chain 3，LC3）參與破骨細(xì)胞的形成和骨吸收[53]。自噬通過(guò)自噬相關(guān)基因7（autophagy-related gene 7,ATG7）有條件的失活可以調(diào)節(jié)破骨細(xì)胞活性和破骨細(xì)胞分化[54]。Onal等[37]發(fā)現(xiàn)，骨細(xì)胞自噬等位基因ATG7 的缺失，可以導(dǎo)致6 月齡的小鼠造成骨量降低，松質(zhì)骨體積和皮質(zhì)骨厚度下降，皮質(zhì)骨的孔隙率的增加。成骨細(xì)胞自噬在維持骨質(zhì)量和骨重建中具有重要作用，老齡化導(dǎo)致的成骨細(xì)胞自噬下降可能是骨質(zhì)疏松發(fā)展的一個(gè)致病因素，使用基因敲除ATG7 或ATG5 的小鼠研究骨骼的動(dòng)態(tài)平衡發(fā)現(xiàn)，這些突變小鼠破骨細(xì)胞的溶酶體皺褶緣會(huì)形成缺陷，引起破骨細(xì)胞自噬增加[55]。Piemontese 等[56]通過(guò)敲除基因ATG7，發(fā)現(xiàn)在整個(gè)成骨細(xì)胞譜系缺乏ATG7 的小鼠成骨量減少。Nollet等[57]研究使用自噬相關(guān)基因敲除和成骨細(xì)胞特定自噬缺陷的小鼠證明，自噬缺乏可以降低骨骼礦化能力，缺乏ATG5的原代成骨細(xì)胞礦化能力下降。Wang等[58]研究發(fā)現(xiàn)抑制小鼠自噬后其軟骨細(xì)胞發(fā)育受到抑制，該研究還發(fā)現(xiàn)ATG12與ATG5 的結(jié)合是軟骨細(xì)胞增殖分化所必需的，F(xiàn)G?FR3 可以通過(guò)抑制ATG12 與ATG5 的結(jié)合來(lái)抑制軟骨細(xì)胞自噬，從而導(dǎo)致軟骨發(fā)育不全或遲緩。而有研究發(fā)現(xiàn)miR-214可以通過(guò)抑制ATG12介導(dǎo)的自噬增強(qiáng)了結(jié)直腸癌的放射敏感性[59]，這說(shuō)明miR-214可能通過(guò)抑制ATG12 的表達(dá)，使自噬水平降低從而影響軟骨的發(fā)育。Γ-氨基丁酸A 型受體（GABAA-re?ceptor-associated protein，GABARAP）是一種泛素樣蛋白，屬于A(yíng)TG/LC3家族，是自噬的一個(gè)重要組成部分，它與細(xì)胞質(zhì)囊泡形成有關(guān)，在膜半融合和自噬體的成熟中發(fā)揮關(guān)鍵性的作用[60]。研究發(fā)現(xiàn)miR-214可以通過(guò)抑制自噬增加乳腺癌細(xì)胞對(duì)三苯氧胺和富爾韋司特的敏感性[61]。Li等[62]研究也發(fā)現(xiàn)GABARAP是miR-214 的靶基因，miR-214 可抑制GABARAP 的表達(dá)從而抑制自噬。

綜上所述，目前最新研究提示微小RNA 特別是miR-214可對(duì)自噬產(chǎn)生一定的調(diào)控作用，miR-214可能會(huì)通過(guò)對(duì)骨微環(huán)境中的各種細(xì)胞自噬水平的調(diào)控，進(jìn)而影響骨代謝的平衡。這為進(jìn)一步研究骨質(zhì)疏松形成和進(jìn)展提供了一定的理論基礎(chǔ)，可能成為骨質(zhì)疏松治療的新靶點(diǎn)。