癲癇患者血清氧化應(yīng)激水平變化及其與癲癇發(fā)作嚴重程度的相關(guān)性

高飛，石少亭，折瀟，張世俊，趙航，高瑩

1 西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院，西安710077；2 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院

癲癇是一種以神經(jīng)元高度異常同步化放電為特征的神經(jīng)系統(tǒng)常見病，臨床表現(xiàn)為反復(fù)出現(xiàn)、突發(fā)突止的短暫神經(jīng)功能異常，全球每年發(fā)病率為61.44/100萬，終身患病率為7.60/1 000[1]，我國有約900萬患者[2]。癲癇的發(fā)病機制目前尚不清楚，動物實驗[3]表明氧化應(yīng)激參與了癲癇的發(fā)病過程。氧化應(yīng)激是指由于體內(nèi)活性氧(ROS)的產(chǎn)生與清除失衡導(dǎo)致的組織和細胞的氧化損傷。生理情況下，氧化應(yīng)激產(chǎn)生的氧自由基(OFR)可通過體內(nèi)抗氧化系統(tǒng)及時清除，而在病理狀態(tài)下氧化應(yīng)激程度加重，OFR的產(chǎn)生超出自身清除能力，損傷細胞膜磷脂造成細胞不可逆損傷，有可能是導(dǎo)致癲癇發(fā)生的原因之一[4]。超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)可清除氧自由基(OFR)，反映機體清除OFR的能力。丙二醛(MDA)是氧化應(yīng)激的代謝產(chǎn)物,可間接體現(xiàn)機體氧化損傷的程度。本研究觀察了癲癇患者血清MDA、SOD、CAT、GSH-px等氧化應(yīng)激水平變化情況，并探討其與癲癇發(fā)作嚴重程度的相關(guān)性?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2016年3月～2018年7月西安醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科收治的癲癇患者68例，記為癲癇組，其中男41例、女27例，年齡(43.73±12.67)歲。納入標準：①癲癇的診斷參考1981年國際抗癲癇聯(lián)盟制定的診斷標準及分類標準；②患者經(jīng)臨床及腦電圖檢查進一步確診；③年齡18～80歲；④過去2個月內(nèi)至少發(fā)作1次；⑤獲得患者或其家屬的知曉，簽署知情同意書，并經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準。排除標準：①經(jīng)頭顱影像學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)顱內(nèi)占位性病變；②3個月內(nèi)有糖皮質(zhì)激素使用史；③妊娠及哺乳期婦女；④合并嚴重的心肝腎功能障礙、造血系統(tǒng)疾病、甲狀腺功能障礙；⑤合并感染性疾病。另選取同期體檢健康者60例，記為對照組，其中男38例、女性22例，年齡(45.24±13.62)歲。兩組受試者性別、年齡資料具有可比性。

1.2 血清MDA、SOD、CAT、GSH-px檢測 采集兩組受試者晨起空腹肘靜脈血5 mL，常溫下靜置1 h，3 000 r/min離心15 min，取上層血清1 mL置于EP管，采用比色法檢測血清MDA、SOD、CAT、GSH-px。

1.3 不同發(fā)作類型、口服不同抗癲癇藥物的癲癇患者血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平觀察 ①依據(jù)癲癇不同發(fā)作類型，將癲癇組分為全身強直陣攣發(fā)作組(28例)、部分性發(fā)作組(38例)、多種發(fā)作類型組(2例)，比較全身強直陣攣發(fā)作組、部分性發(fā)作組血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平。②依據(jù)口服抗癲癇藥物種類的不同，將癲癇組分為卡馬西平單藥治療組(17例)、丙戊酸鈉單藥治療組(32例)，比較兩組血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平。

1.4 癲癇患者血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平與癲癇發(fā)作嚴重程度的相關(guān)性分析 采用國立醫(yī)院癲癇發(fā)作嚴重程度量表(NHS3)對癲癇組患者癲癇發(fā)作嚴重程度進行評價，評分越高表示癲癇發(fā)作嚴重程度越重。使用Pearson相關(guān)分析法分析癲癇患者血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平與癲癇發(fā)作嚴重程度的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1 癲癇組、對照組血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平比較 癲癇組血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平分別為(6.82±3.03)μmol/L、(76.80±16.01)U/mL、(6.51±1.86)U/mL、(91.09±10.50)U/mL，對照組分別為(5.14±1.95)μmol/L、(83.26±12.05)U/mL、(7.77±1.40)U/mL、(111.18±8.51)U/mL，兩組相比，P均<0.05。

2.2 不同發(fā)作類型、口服不同抗癲癇藥物的癲癇患者血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平比較 全身強直陣攣發(fā)作組血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平分別為(6.55±2.65)μmol/L、(74.62±17.12)U/mL、(6.30±1.88)U/mL、(91.92±10.77)U/mL，部分性發(fā)作組分別為(7.02±3.37)μmol/L、(78.50±14.94)U/mL、(6.70±1.89)U/mL、(90.81±10.40)U/mL，兩組相比，P均>0.05?？R西平單藥治療組血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平分別為(6.95±3.53)μmol/L、(80.34±14.67)U/mL、(6.84±1.78)U/mL、(87.68±8.18)U/mL，丙戊酸鈉單藥治療組分別為(6.13±2.42)μmol/L、(76.62±17.33)U/mL、(6.28±2.04)U/mL、(92.48±11.52)U/mL，兩組相比，P均>0.05。

2.3 癲癇患者血清MDA、SOD、CAT、GSH-px水平與癲癇發(fā)作嚴重程度的相關(guān)性 Pearson相關(guān)分析結(jié)果顯示，癲癇患者血清MDA水平與NHS3評分呈正相關(guān)關(guān)系(r=0.299，P<0.05)，癲癇患者血清SOD CAT GSH-px水平與NHS3評分無關(guān)(r分別為-0.150、-0.136、-0.016，P均>0.05)。

3 討論

本研究結(jié)果表明，與對照組相比，癲癇組患者血清MDA水平明顯升高，SOD、CAT、GSH-px水平明顯降低，這種變化在不同發(fā)作類型(全身強直陣攣發(fā)作和部分性發(fā)作)患者之間無明顯差別，與口服抗癲癇藥物的種類(卡馬西平或丙戊酸鈉)也無明顯關(guān)系。癲癇患者血清MDA水平與癲癇發(fā)作的嚴重程度呈正相關(guān)關(guān)系，而SOD、CAT、GSH-px水平與癲癇發(fā)作的嚴重程度無明顯相關(guān)性。

氧化應(yīng)激是由于機體OFR生成增多或抗氧化系統(tǒng)清除能力下降，致使ROS在機體內(nèi)大量堆積而誘發(fā)一系列氧化損傷過程。MDA是OFR與胞膜上的不飽和脂肪酸產(chǎn)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的中間產(chǎn)物,可間接體現(xiàn)機體OFR的代謝狀態(tài)及對組織的氧化損傷程度，是反映機體脂質(zhì)過氧化代謝的重要指標。SOD、CAT、GSH-px可反映機體清除OFR的能力。SOD在清除OFR的過程中有著重要的作用，它可以直接清除超氧陰離子自由基，起到抗氧化作用[5]。CAT、GSH-px可通過清除OFR，保護細胞免受損傷而起到保護作用。盡管目前癲癇的發(fā)病機制尚不清楚，但動物實驗及臨床試驗均表明氧化應(yīng)激存在于癲癇的發(fā)生發(fā)展過程中[3]。

本研究發(fā)現(xiàn)癲癇患者血清MDA水平增高，說明患者機體氧化應(yīng)激的產(chǎn)物OFR水平高于正常，這與唐文等[6]的報道一致，也與我們前期在動物實驗[7]上取得的結(jié)果相類似。癲癇組患者血清SOD、CAT和GSH-px水平在本研究中都顯示出不同程度的下降，說明在癲癇這種病理狀態(tài)下，機體抗氧化的能力明顯下降，也與前期的報道一致[8,9]，進一步證明在癲癇進程中存在脂質(zhì)氧化及抗氧化平衡失調(diào)。D nmezdil等[10]對未經(jīng)藥物治療的30例癲癇患者發(fā)作間期外周血MDA水平進行了研究，發(fā)現(xiàn)外周血MDA水平與健康對照組無明顯差異，有可能抗癲癇藥物對癲癇患者的MDA水平有一定影響。

在本研究中，常用的抗癲癇藥物卡馬西平及丙戊酸鈉單藥治療癲癇患者的MDA、SOD、CAT和GSH-px水平均無明顯差異，表明兩種藥物對癲癇患者氧化應(yīng)激水平的影響無明顯差別。Mesut等[11]對28例丙戊酸和28例卡馬西平治療癲癇患者的外周血GSH的觀察中，也得出相同的結(jié)論。國外的另一項研究[12]也發(fā)現(xiàn)，一線抗癲癇藥物丙戊酸、卡馬西平、苯妥英鈉對癲癇患者外周血MDA水平影響均無明顯差別。我們認為，可能卡馬西平及丙戊酸鈉對癲癇患者的氧化應(yīng)激的影響無明顯差異。研究[13]顯示，治療前癲癇患者外周血CAT、GSH-px水平與治療后的癲癇患者并無差別，而與同時服用的抗癲癇藥物的數(shù)量有關(guān)?？拱d癇藥物種類繁多，作用機制不盡相同，聯(lián)合用藥更有可能對氧化應(yīng)激水平產(chǎn)生復(fù)雜的影響，需在今后的研究中明確。

全身強直陣攣發(fā)作與部分性發(fā)作患者血清MDA、SOD、CAT和GSH-px水平無明顯區(qū)別，提示在不同發(fā)作類型癲癇患者中，都存在類似的氧化應(yīng)激水平。劉鳳英等[8]測定了35例部分性發(fā)作及15例全面性發(fā)作癲癇患者外周血清SOD含量，也未發(fā)現(xiàn)有明顯的差異。在對難治性癲癇和非難治性癲癇患者外周血氧化應(yīng)激水平的研究[14]中發(fā)現(xiàn)，難治性癲癇患者MDA水平高于非難治性癲癇患者，GSH-px水平低于非難治性癲癇患者。我們認為，癲癇患者的氧化應(yīng)激水平可能與發(fā)作類型無關(guān)，而與疾病的嚴重程度有關(guān)。

過度的氧化應(yīng)激產(chǎn)物生成，可以通過影響細胞內(nèi)鈣平衡，從而影響細胞的興奮性及腦內(nèi)神經(jīng)遞質(zhì)的平衡，有可能是導(dǎo)致癲癇反復(fù)發(fā)作、嚴重程度增加的原因之一[15]。本研究表明，血清MDA水平與癲癇發(fā)作嚴重程度呈正相關(guān)，進一步證明氧化應(yīng)激的代謝產(chǎn)物在癲癇的病理生理過程中的重要意義。而清除OFR的指標SOD、CAT和GSH-px的水平與癲癇發(fā)作嚴重程度并無明顯相關(guān)，我們認為可能的原因有：①由于癲癇本身導(dǎo)致機體清除OFR功能下降；②由于OFR產(chǎn)生過多，機體清除OFR功能代償性升高。不同病例存在上述兩種不同的情況，最終可能導(dǎo)致抗氧化指標SOD、CAT和GSH-px的水平與癲癇發(fā)作嚴重程度評分未顯示出明顯相關(guān)性。

由于病例數(shù)的限制以及癲癇患者具體的病因不同，本研究未將癲癇的病因進行分層分析。同時，癲癇的發(fā)生發(fā)展過程中氧化應(yīng)激水平隨著時間的推移有明顯的動態(tài)變化過程[16]，諸多的因素均有可能對結(jié)果造成一定的影響。今后，我們將會進行大樣本臨床研究，進一步明確氧化應(yīng)激在癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。

綜上所述，癲癇患者血清MDA水平增高，SOD、CAT、GSH-px水平降低，且增高的MDA與癲癇發(fā)作嚴重程度正相關(guān)，說明癲癇患者體內(nèi)存在明顯的氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)失衡，氧化應(yīng)激產(chǎn)物的堆積可能是導(dǎo)致癲癇發(fā)作程度嚴重的原因之一。