痰真菌培養(yǎng)及涂片鏡檢查在下呼吸道感染中的價值分析

陳贏

【摘要】 目的 探討痰真菌培養(yǎng)及涂片鏡檢查在下呼吸道感染中的價值。方法 收集418份臨床送檢呼吸道標(biāo)本， 生理鹽水漱口后自然咳痰至無菌容器中， 30 min內(nèi)送檢， 進(jìn)行革蘭染色涂片鏡檢與培養(yǎng)鑒定。結(jié)果 418份標(biāo)本中真菌培養(yǎng)陰性349份（83.5%）， 陽性69份（16.5%）。陽性標(biāo)本中白色念珠菌32份

（46.4%）， 熱帶念珠菌19份（27.5%）， 克柔念珠菌11份（15.9%）， 光滑念珠菌5份（7.2%）， 曲霉菌2份（2.9%）;來源科室：呼吸內(nèi)科38份（55.1%）， 神經(jīng)外科13份（18.8%）， 血液內(nèi)科9份（13.0%）， 腎移植科9份

（13.0%）。418份標(biāo)本中痰真菌片鏡檢結(jié)果陰性320份（76.6%）， 陽性98份（23.4%）。陽性標(biāo)本中查見真菌孢子47份（11.2%）， 查見菌絲7份（1.7%）， 查見真菌孢子及菌絲44份（10.5%）。結(jié)論 痰真菌培養(yǎng)及涂片鏡檢查是診斷下呼吸道真菌感染的有效手段， 二者聯(lián)合進(jìn)行具有重要意義。

【關(guān)鍵詞】 痰真菌培養(yǎng);涂片鏡檢查;下呼吸道感染

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2019.34.104

雖然現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展使各種治療手段越來越強(qiáng)， 重癥死亡率降低， 卻也增加了各種并發(fā)癥和繼發(fā)癥的風(fēng)險， 機(jī)會性真菌感染便是其中之一。據(jù)WHO曾做過的數(shù)據(jù)統(tǒng)計顯示， 醫(yī)院感染的發(fā)生率達(dá)到8.7%， 急性腦卒中患者的真菌感染占到27.9%[1]。還有報道顯示， 廣譜青霉素類、第3代頭孢菌素等抗菌藥物的使用會增加曲霉菌感染的風(fēng)險[2]。

總之， 由于多方面因素的因素， 臨床深部真菌感染變得越來越復(fù)雜， 并且成為患者生命的終末感染。研究表明， 由以白色假絲酵母菌感染為典型的真菌感染是導(dǎo)致醫(yī)院感染死亡的一個重要原因[3]。在發(fā)生的全部內(nèi)臟真菌感染中， 肺部真菌感染最多， 并且呈逐年增加的趨勢[4]， 早期診斷鑒別肺部真菌感染具有重要的臨床意義。本研究旨在探討痰真菌培養(yǎng)及涂片鏡檢查在下呼吸道感染中的價值， 報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料來源 收集2018年7月～2019年2月本院418份臨床送檢痰液標(biāo)本， 來源科室：呼吸內(nèi)科309份（73.9%）， 神經(jīng)外科58份（13.9%）， 血液內(nèi)科33份（7.9%）， 腎移植科13份（3.1%）， 腫瘤科5份（1.2%）。所有痰液標(biāo)本在采集前均未使用過抗菌藥物， 以清晨第一口痰為宜， 生理鹽水漱口后自然咳痰至無菌容器中， 或者對于干咳無痰的患者可采用雙管保護(hù)的標(biāo)本毛刷采集下呼吸道分泌物， 30 min內(nèi)送檢。

1. 2 檢測方法 痰液標(biāo)本以無菌接種環(huán)， 取干酪樣或膿性部分的痰涂成均勻薄片， 進(jìn)行革蘭染色涂片鏡檢， 根據(jù)《全國臨床操作規(guī)程》配置革蘭染色液， 儀器為PREVIColorGram12自動革蘭染色儀。同時將痰標(biāo)本在沙保氏培養(yǎng)基（廣州迪景微生物科技有限公司）上連續(xù)劃線涂抹， 置于35℃的孵育箱中培養(yǎng)48 h， 挑取沙保氏培養(yǎng)基上的真菌菌落， 革蘭染色后在顯微鏡（日產(chǎn)尼康）下觀察， 確定為真菌后， 用WalkAway40系統(tǒng)（美國）鑒定。

1. 3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計418份標(biāo)本中真菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果;統(tǒng)計418份標(biāo)本真菌片鏡檢結(jié)果。

2 結(jié)果

2. 1 418份標(biāo)本中真菌培養(yǎng)及鑒定結(jié)果 418份標(biāo)本中真菌培養(yǎng)陰性349份（83.5%）， 陽性69份（16.5%）。陽性標(biāo)本中白色念珠菌32份（46.4%）， 熱帶念珠菌19份（27.5%）， 克柔念珠菌11份（15.9%）， 光滑念珠菌5份（7.2%）， 曲霉菌2份（2.9%）;來源科室：呼吸內(nèi)科38份（55.1%）， 神經(jīng)外科13份（18.8%）， 血液內(nèi)科9份（13.0%）， 腎移植科9份（13.0%）。

2. 2 418份標(biāo)本真菌片鏡檢結(jié)果 418份標(biāo)本中痰真菌片鏡檢結(jié)果陰性320份（76.6%）， 陽性98份（23.4%）。陽性標(biāo)本中查見真菌孢子47份（11.2%）， 查見菌絲7份（1.7%）， 查見真菌孢子及菌絲44份（10.5%）。

3 討論

近些年， 真菌感染的發(fā)生率逐年升高， 假絲酵母菌、酵母菌、曲霉菌是引起深部真菌感染的主要致病菌。真菌感染的易患因素眾多， 主要包括以下幾個方面：①老年及高齡患者， 主要與此年齡階段的人群吸道清除功能減退有關(guān);②廣譜抗菌藥的廣泛使用， 相關(guān)研究表明， 在假絲酵母菌感染的患者中， 有>80%使用過廣譜抗生素治療[5];③骨髓移植， 研究報道， 侵入性的真菌感染是導(dǎo)致白血病患者死亡的重要原因， 特別是白細(xì)胞嚴(yán)重減少的患者[6];④顱內(nèi)感染， 一旦血腦屏障破壞， 加上患者年齡大、侵入性操作、使用抗生素、激素等各種原因， 易發(fā)生真菌感染;⑤化療、激素的使用可削弱機(jī)體的抗感染能力。有研究表明， 化療過程中出現(xiàn)的中性粒細(xì)胞減少癥是真菌感染的重要危險因素[7];⑥中心靜脈導(dǎo)管置管， 研究表明， 導(dǎo)管真菌敗血癥是常見的醫(yī)院感染類型， 其中16.7%為假絲酵母菌所引起。

目前基本一致認(rèn)同， 真菌鏡檢及培養(yǎng)是診斷真菌感染的兩種重要手段， 一旦懷疑為真菌感染， 應(yīng)積極采集標(biāo)本進(jìn)行真菌鏡檢與培養(yǎng)， 并且必要時還要進(jìn)行痰液、胸腹水、尿液、心包積液、腦脊液等多途徑的培養(yǎng)， 以防出現(xiàn)假陰性， 如果發(fā)現(xiàn)有同一致病菌生長， 應(yīng)警惕敗血癥。但目前對于痰標(biāo)本的臨床價值仍存在一定的爭議， 一是有些患者干咳無痰， 無法通過自然咳痰來獲取痰標(biāo)本， 并且因個體差異， 咳痰量也有多有少;再者， 咳出的痰液容易受到上呼吸道定植真菌的污染， 從而影響結(jié)果等。但目前除了自然咳痰外， 還有痰誘導(dǎo)的方法， 成功率約可達(dá)到76.0%～100%， 不過對于基礎(chǔ)肺功能的患者應(yīng)謹(jǐn)慎使用， 以防加重病情。為了消除口腔寄生菌的干擾， 應(yīng)重視漱口和消化痰液的過程。