金線蓮組培技術(shù)現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢

韓金龍 張雪峰 單成鋼 儀明霞 鄔爽 王志芬

摘要? ? 本文從消毒劑的選擇與使用、培養(yǎng)基選擇、培養(yǎng)基添加物、光照、移栽條件、肥料等方面對金線蓮組織培養(yǎng)技術(shù)的影響因素進(jìn)行了綜述，同時指出了此技術(shù)面臨的問題，并對未來的發(fā)展展開了討論，以期為金線蓮的組織培養(yǎng)技術(shù)提供科學(xué)依據(jù)，為組培生產(chǎn)者提供參考。

關(guān)鍵詞? ? 金線蓮;組織培養(yǎng);影響因素;展望

中圖分類號? ? Q944.6? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼? ? A

文章編號? ?1007-5739（2019）22-0090-02? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）

Abstract? ? In this paper，the influences of disinfectant selection and using，culture medium selection，culture medium addition，illumination，transplanting conditions，fertilizer on tissue culture technology of Anoectochilus roxburghii were summarized，and the problems faced by this technology were pointed out，and the future development was also discussed.It was expected to provide scientific basis for tissue culture technology and reference for tissue culture producers.

Key words? ? Anoectochilus roxburghii;tissue culture;influence fartor;prospect

金線蓮又名金錢蘭，為蘭科開唇蘭屬植物。金線蓮性喜陰涼、潮濕，尤其喜歡生長在有常綠闊葉樹木的溝邊、石壁及土質(zhì)松散的潮濕地帶，要求溫度20～32 ℃，光照3 000～5 000 lx。光照過強(qiáng)易導(dǎo)致植株莖匍匐;光照過弱易致植株莖細(xì)長。金線蓮具有涼血祛風(fēng)、除濕解毒的功效[1]，被譽(yù)為中草藥中的“藥王”，其氨基酸和抗衰老的微量元素含量高于西洋參。除了藥用價值之外，金線蓮還是極具觀賞價值的室內(nèi)觀賞植物。

金線蓮種子因缺少胚乳在自然條件下很難獨(dú)立萌發(fā)成苗，再加上近年自然環(huán)境遭受嚴(yán)重破壞，人工過度挖掘，鳥、蟲、蛇等危害，使野生金線蓮瀕臨滅絕。因此，金線蓮的人工培養(yǎng)技術(shù)顯得尤為重要。人工培養(yǎng)條件下，種子萌發(fā)成苗仍然是整個培養(yǎng)過程的技術(shù)瓶頸之一。由于缺乏有效的誘導(dǎo)方法，因而現(xiàn)有技術(shù)中金線蓮種子的萌發(fā)率仍較低，嚴(yán)重制約了金線蓮培養(yǎng)技術(shù)的規(guī)模化應(yīng)用。為了解決金線蓮種苗的問題，金線蓮的組培技術(shù)越來越被重視，目前已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了較大規(guī)模工廠化育苗和人工栽培[2]。為此，本文將從培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)基添加物、肥料、光線、不同移栽條件、消毒劑等方面對金線蓮的組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行綜述，以期為組培生產(chǎn)者改進(jìn)技術(shù)措施提供參考。

1? ? 消毒劑的選擇和使用

植物組織培養(yǎng)的材料大多取自戶外，通常具有較多病菌、微生物。容易造成培養(yǎng)基污染，進(jìn)而引起組培失敗。消毒的目的是為了殺菌，因而消毒劑的選取和使用具有重要意義。朱小鵬[3]發(fā)現(xiàn)，二氧化氯在金線蓮組培生產(chǎn)中最適宜的消毒濃度為750倍液，不僅可以減少污染，還可以提高經(jīng)濟(jì)效益。

2? ? 培養(yǎng)基的選擇

在金線蓮的組培過程中，生根培養(yǎng)基對組培苗的生根狀況會產(chǎn)生一定影響，進(jìn)而影響組培苗的成活率。因此，組培過程中培養(yǎng)基的選擇顯得尤為重要。申 剛等[4]分別以1/2MS+NAA和MS+NAA作為金線蓮的生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根率比較試驗(yàn)，結(jié)果表明，1/2MS培養(yǎng)基中金線蓮的生根情況優(yōu)于MS培養(yǎng)基。

3? ? 培養(yǎng)基添加物

唐軍榮等[5]以MS為基本培養(yǎng)基，開展了不同培養(yǎng)基成分以及不同香蕉粉用量對金線蓮組培苗生長及生根的影響試驗(yàn)，結(jié)果表明，大量元素的加倍能夠促進(jìn)苗的生長，且苗生長快、芽粗、整齊，生根時香蕉粉的最佳用量為100 g/L。邵果園等[6]研究發(fā)現(xiàn)，合適的金線蓮壯苗培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+GA3 0.5 mg/L;合適的金線蓮生根培養(yǎng)基為1/2MS+NAA 1.0 mg/L+6-BA 0.2 mg/L+GA3 0.5 mg/L+活性碳1.0 g/L。魏翠華等[7]研究了基本培養(yǎng)基、6-BA、NAA、蔗糖4個因素對金線蓮生長的影響，結(jié)果表明，對不定芽增殖培養(yǎng)的影響由大到小為6-BA>蔗糖>NAA>基本培養(yǎng)基;對生根培養(yǎng)的影響由大到小為蔗糖>6-BA>基本培養(yǎng)基>NAA;最適宜金線蓮增殖培養(yǎng)基為MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+蔗糖20 g/L;最適宜的金線蓮生根培養(yǎng)基為1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.6 mg/L+蔗糖40 g/L。陳長征[8]發(fā)現(xiàn)，以MS為基本培養(yǎng)基并添加激素6-BA 2 mg/L和NAA 0.5 mg/L以增殖繼代培養(yǎng)基的處理效果最優(yōu);在培養(yǎng)基中添加20%香蕉粉對于芽苗的增殖及壯苗的培養(yǎng)均有極大的促進(jìn)作用;液態(tài)培養(yǎng)基顯著優(yōu)于半液態(tài)和固態(tài)培養(yǎng)基。詹杏熔等[9]研究表明，組培金線蓮天然有機(jī)培養(yǎng)基的最優(yōu)成分條件為MS基本培養(yǎng)基倍數(shù)0.53、蘑菇預(yù)煮液濃度0.68%、蔗糖濃度2.89%。江愛明等[10]對金線蓮的組培條件進(jìn)行優(yōu)化，結(jié)果表明，腋芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基以MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L為最佳;叢芽增殖培養(yǎng)基以MS+6-BA 3.0 mg/L為最佳;生根培養(yǎng)基以1/2MS+NAA 1.0 mg/L為最佳?；ǘ喽鄬鹁€蓮組織培養(yǎng)具有一定的影響，牛 歡等[11]以MS與B5作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，添加不同種類和用量的花多多以選出對金線蓮組培壯苗和提高移栽成活率的最優(yōu)培養(yǎng)基。結(jié)果表明，MS+添加物更有利于根、莖生長;而B5+添加物更有利于葉片生長;MS+2 g花多多1號更利于培育壯苗和提高移栽成活率。

4? ? 組培苗生長的影響因素

4.1? ? 光照

魏翠華等[12]研究了不同光照強(qiáng)度對金線蓮生長及產(chǎn)量的影響，結(jié)果表明，在2 000～5 000 lx的中等偏低光照適合金線蓮植株的正常生長并且產(chǎn)量高，低光照降低了植株的成活率。冼康華等[13]研究了光調(diào)控對金線蓮生長發(fā)育的影響，結(jié)果表明，光照為6 h/d時金線蓮單株葉片數(shù)最多;光照為14 h/d處理?xiàng)l件下，金線蓮莖生長最粗，葉綠素含量最多、超氧化物歧化酶（SOD）活性最高;不同單色光處理中，藍(lán)光有利于金線蓮干物質(zhì)的積累，可使植株矮壯;黃光處理金線蓮葉面積最大;紅光處理下金線蓮節(jié)間數(shù)和腋芽數(shù)最多，過氧化物酶（POD）活性、過氧化氫酶（CAT）活性最高，但在所有處理中金線蓮莖最細(xì)。黃光處理最有利于金線蓮組培苗氨基酸的積累，且金線蓮組培苗的氨基酸含量會隨著光照時間的增多而遞減，表明不同光質(zhì)和光周期對金線蓮的生長發(fā)育具有重要的影響。

4.2? ? 移栽條件

有人研究了不同移栽條件對金線蓮組培苗成活率的影響，結(jié)果表明，泥炭與河沙按2∶1混合、種植規(guī)格為3 cm×3 cm、遮蔭率70%、1/4MS營養(yǎng)液的條件下，金線蓮組培苗的成活率高且長勢較好，為金線蓮組培苗的人工栽培提供了良好的技術(shù)方案[14-17]。有部分學(xué)者探究了不同培養(yǎng)基、移栽時間、用種量、移栽密度對金線蓮移栽成活率的影響，結(jié)果表明，4月移栽，基地先鋪一層5 cm厚的朽木，朽木上鋪1層厚約 2 cm的森林腐殖土，用種量3株/窩，行株距10 cm×5 cm，金線蓮的成活率較高[18-21]。

4.3? ? 肥料

部分學(xué)者研究了不同肥料處理對金線蓮生長狀態(tài)、生長量和干物質(zhì)含量的影響，結(jié)果表明，組培苗定植1個月后，開始噴施花多多1號肥1 000倍液，于春、秋季每10 d噴施1 次，夏、冬季每個月噴施1次，金線蓮植株生長良好、不易感病，并且生長指標(biāo)和綜合表現(xiàn)最好[22-24]。陳湘瑜等[25]研究發(fā)現(xiàn)，腐熟的花生殼可以代替腐熟松樹皮作為金線蓮的栽培基質(zhì)。謝 靜等[26]研究表明，以25%粗松樹皮+75%進(jìn)口泥炭土為栽培基質(zhì)的金線蓮生長最好。

5? ? 金線蓮組織培養(yǎng)研究存在的主要問題及展望

5.1? ? 主要問題

由于金線蓮種子萌發(fā)存在的弊端，對其組織培養(yǎng)技術(shù)的研究有很大的意義，不僅提高了金線蓮種植的經(jīng)濟(jì)價值，也提高了社會價值。雖然近幾年對金線蓮組培的研究越來越完善，目前已經(jīng)從培養(yǎng)基的選擇、培養(yǎng)基添加物、光線、不同移栽條件、消毒劑等多方面展開了研究，但是一些問題仍然沒有被解決，比如組培時的溫度、組培苗是否對金線蓮的質(zhì)量和產(chǎn)量產(chǎn)生影響、培養(yǎng)基中添加共生菌是否可以減少病蟲害、組培技術(shù)是否受地域的影響等問題都需要引起關(guān)注。

5.2? ? 展望

金線蓮的藥用價值被越來越多的人關(guān)注，但是由于其種子微小，繁殖困難，野生金線蓮又被肆意挖掘等原因，金線蓮瀕臨滅絕。組織培養(yǎng)技術(shù)解決了金線蓮極難繁殖的問題，目前建立完整的金線蓮組織培養(yǎng)體系、加快人工種植仍應(yīng)是未來金線蓮組培技術(shù)研究的熱點(diǎn)。

6? ? 參考文獻(xiàn)

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