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    區(qū)域微型生物養(yǎng)護(hù)劑對(duì)池塘環(huán)境改善作用研究

    2019-12-23 01:42:48劉春花梁慧麗孫承文陶家發(fā)石存斌吳淑勤
    廣東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年10期
    關(guān)鍵詞:原生動(dòng)物浮游藻類

    劉春花,梁慧麗,孫承文,陶家發(fā),鞏 華,石存斌,吳淑勤

    (1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所,廣東 廣州 510380;2.廣州普麟生物制品有限公司,廣東 廣州 510380)

    【研究意義】水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)常出現(xiàn)區(qū)域特征的大規(guī)模發(fā)病流行,與病害發(fā)生最密切相關(guān)的共性問(wèn)題是養(yǎng)殖水體環(huán)境惡化。水質(zhì)惡化時(shí),正常的微生態(tài)平衡遭到破壞,致病菌被激活、快速繁殖,并分泌毒素侵襲魚體,同時(shí)由于對(duì)環(huán)境變化的應(yīng)激反應(yīng),魚體抵抗力下降,導(dǎo)致疾病暴發(fā)或流行[1]。改善養(yǎng)殖水環(huán)境的傳統(tǒng)技術(shù)手段主要是加大換水量,但這不僅浪費(fèi)水資源,而且外排的養(yǎng)殖污水也會(huì)影響?zhàn)B殖區(qū)周圍的生態(tài)環(huán)境。常規(guī)的藥物調(diào)控方法將水體微生物、原生動(dòng)物、藻類等微型生物作為藥物干預(yù)的主體對(duì)象,雖然對(duì)病害防控有一定效果,但藥物的過(guò)量使用常引起嚴(yán)重的惡性循環(huán),水生態(tài)系統(tǒng)失衡,疾病也因此不斷發(fā)生[2]。而通過(guò)微生物制劑優(yōu)化養(yǎng)殖水體微生物、原生動(dòng)物、藻類等微型生物多樣性,則可以維護(hù)養(yǎng)殖環(huán)境動(dòng)態(tài)相對(duì)穩(wěn)定,促進(jìn)養(yǎng)殖系統(tǒng)各層次關(guān)系的持續(xù)平衡,減少病害發(fā)生。

    【前人研究進(jìn)展】研究表明,水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用微生物制劑不僅能分解和轉(zhuǎn)化水體中的有機(jī)物和無(wú)機(jī)氮等過(guò)剩物質(zhì),提高養(yǎng)殖系統(tǒng)對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化效率,減少水體污染,改善水質(zhì)[3],還可以通過(guò)與有害微生物競(jìng)爭(zhēng)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)及生存繁殖空間等機(jī)制,抑制有害微生物的生長(zhǎng)繁殖,降低水產(chǎn)動(dòng)物的發(fā)病率[4]。但目前應(yīng)用在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中的微生物菌株大多是將農(nóng)業(yè)部允許在畜禽飼料中添加的部分微生物、或從異地養(yǎng)殖區(qū)采集的微生物作為其出發(fā)菌株,將這些原來(lái)在陸地上、畜禽消化道或不同水體環(huán)境中生存的微生物直接用于水產(chǎn)動(dòng)物,或者直接潑灑到養(yǎng)殖水體中,由于動(dòng)物生活環(huán)境與生理狀態(tài)的差異,一方面可能微生態(tài)制劑可發(fā)揮的功效有限,另一方面則有可能引起一些難以預(yù)料的生態(tài)學(xué)問(wèn)題[5]。

    【本研究切入點(diǎn)】區(qū)域池塘水體微型生物養(yǎng)護(hù)劑(簡(jiǎn)稱護(hù)料)[2]是中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院珠江水產(chǎn)研究所研發(fā)的新型微生物制劑,具有區(qū)域?qū)傩裕绅B(yǎng)殖當(dāng)?shù)刎S產(chǎn)池塘分離的土著微生物發(fā)酵當(dāng)?shù)剞r(nóng)業(yè)生產(chǎn)次產(chǎn)品如麩皮、米糠、豆粕等制成,包含養(yǎng)殖池塘泥水、微生物菌群富集培養(yǎng)物和微生物培養(yǎng)料等組分,可根據(jù)不同養(yǎng)殖時(shí)期的需要,調(diào)整培養(yǎng)物料配比制成不同C/N比值的護(hù)料,與飼料關(guān)聯(lián)使用,并適時(shí)調(diào)節(jié)水體總堿度和總硬度,以維持養(yǎng)殖水體生態(tài)環(huán)境動(dòng)態(tài)穩(wěn)定,促進(jìn)健康養(yǎng)殖?!緮M解決的關(guān)鍵問(wèn)題】本研究通過(guò)在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)水族缸模擬的池塘生態(tài)環(huán)境使用護(hù)料,評(píng)價(jià)護(hù)料對(duì)水質(zhì)因子、浮游藻類、原生動(dòng)物及魚體的養(yǎng)護(hù)作用,以探討微型生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖中維持水體生態(tài)環(huán)境動(dòng)態(tài)穩(wěn)定的作用機(jī)理與調(diào)節(jié)機(jī)制。

    1 材料與方法

    1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

    2015年分別從南沙、清遠(yuǎn)草魚養(yǎng)殖池塘采集塘泥及塘水,分裝在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)設(shè)置于南向窗臺(tái)的4個(gè)透光玻璃水族缸(長(zhǎng)49 cm×寬24 cm×高34 cm)中,使缸底鋪滿3~4 cm塘泥,對(duì)各水族缸分別編號(hào),各試驗(yàn)組的采樣背景及建模時(shí)情況見(jiàn)表1,每個(gè)試驗(yàn)組設(shè)置2個(gè)重復(fù)。塘A、塘B位于廣州市南沙,塘A養(yǎng)殖魚體健康,生態(tài)條件良好;塘B養(yǎng)殖魚體發(fā)病,采樣時(shí)已使用抗生素類魚藥;塘C是清遠(yuǎn)的一口荒廢老塘,水體有異味。處理1、處理3均采樣自塘A,但處理1從采樣過(guò)程引入水族缸的時(shí)間較處理3晚,藻體在不利環(huán)境中死亡過(guò)多,建模時(shí)藻類數(shù)量較少。試驗(yàn)期間對(duì)水族缸充氣,以底泥不被吹起為宜。以窗臺(tái)的日照為光源,且每天于8: 30—18: 00開(kāi)燈補(bǔ)充光照,當(dāng)水溫降至18℃以下時(shí),用電暖器室內(nèi)加溫。

    表1 建模時(shí)各試驗(yàn)組情況Table 1 Situation of each experimental group at modeling time

    1.2 實(shí)驗(yàn)魚放養(yǎng)與存活監(jiān)測(cè)

    從廣東肇慶某苗場(chǎng)購(gòu)進(jìn)鳙魚(Aristichthys nobilis)(體長(zhǎng)12±1 cm)、羅非魚(Oreochromis mossambicus)(體長(zhǎng) 10±1 cm)、清道夫魚(Pterygoplichthys multiradiatus)( 體 長(zhǎng) 10±1 cm)等,暫養(yǎng)1周以上,分別向各處理引入健康的鳙魚3尾、羅非魚2尾、清道夫魚2尾,用粗蛋白含量為40%的浮性飼料投喂各處理試驗(yàn)魚,撈出浮于水面未攝食完畢的全部剩料,陰、雨天氣時(shí)少投或停料,魚體死亡后立即撈出,計(jì)數(shù)。

    1.3 微型生物養(yǎng)護(hù)劑的應(yīng)用

    從南沙、清遠(yuǎn)草魚養(yǎng)殖區(qū)的代表性高產(chǎn)魚塘獲得護(hù)料的制備材料,按照專利“一種區(qū)域養(yǎng)殖水體微型生物養(yǎng)護(hù)劑及其制備方法”的方法制成護(hù)料[2]。處理1、2、4使用護(hù)料制成的料水,作為試驗(yàn)組;處理3不使用護(hù)料,作為對(duì)照組。根據(jù)不同養(yǎng)殖時(shí)期的水質(zhì)情況,護(hù)料在不同試驗(yàn)階段的物料成分及C/N比值不同,開(kāi)始模擬護(hù)料養(yǎng)護(hù)試驗(yàn)當(dāng)天記作D1,D1—D24時(shí)護(hù)料的C/N比值平均為18.18,D25—D60時(shí)C/N比值平均為21.75,D60—D90時(shí)C/N比值平均為24.12。

    1.4 指標(biāo)監(jiān)測(cè)

    1.4.1 水質(zhì)指標(biāo)監(jiān)測(cè) 將采樣的泥水裝入水族缸,當(dāng)缸內(nèi)水體澄清開(kāi)始模擬護(hù)料養(yǎng)護(hù)試驗(yàn),分別于 D1、5、10、20、30、40、50、60、90 用美國(guó)維賽儀器YIS ProPlu水質(zhì)分析儀測(cè)量缸內(nèi)pH值、氨氮、溶氧、水溫、亞硝酸鹽等各項(xiàng)水質(zhì)指標(biāo),于D1、D90用廣州普麟生物制品有限公司的總堿度、總硬度檢測(cè)試劑盒分別測(cè)量缸內(nèi)水體的總堿度和總硬度。

    1.4.2 浮游藻類監(jiān)測(cè) 于D1、5、10、20、30、40、50、60、90早上9:30采集水樣,用魯哥氏液固定、保存。計(jì)數(shù)浮游藻類的細(xì)胞數(shù),以公式(1)計(jì)算藻類密度;計(jì)數(shù)密度較大藻類的數(shù)量,計(jì)算優(yōu)勢(shì)種及主要種類的百分比;參考《中國(guó)淡水藻類志》等資料鑒定藻類種類,無(wú)法定種時(shí)鑒定到屬;以公式(2)計(jì)算浮游藻類的Margalef多樣性指數(shù)。

    式中,N為每升水中浮游藻類細(xì)胞數(shù),A為計(jì)數(shù)結(jié)果的平均值,B為計(jì)數(shù)的血球計(jì)數(shù)板中方格數(shù),C為濃縮的倍數(shù)。

    式中,d為多樣性指數(shù),S為種類數(shù),N為個(gè)體數(shù)。

    1.4.3 底棲原生動(dòng)物監(jiān)測(cè) 于D10、20、30、40、50、60采集PFU泡沫(大?。?0 mm×75 mm×65 mm,孔徑:100~150 μm)中的水樣,計(jì)數(shù)原生動(dòng)物數(shù)量,以公式(3)計(jì)算原生動(dòng)物密度;根據(jù)原生動(dòng)物的形態(tài),參考《水生生物學(xué)》等資料記錄底棲原生動(dòng)物的種類;以公式(2)計(jì)算原生動(dòng)物的Margalef多樣性指數(shù)。

    式中,N為每升水中原生動(dòng)物的數(shù)量,VD為沉淀體積,VS為采樣體積,n為計(jì)算個(gè)數(shù),C為計(jì)算體積。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 水體水質(zhì)理化因子

    水體總堿度、總硬度有地域差異(表2),處理1、2、3(南沙)的總堿度、總硬度水平均高于處理4(清遠(yuǎn))。試驗(yàn)期間,各處理pH值、溶氧、氨氮等水質(zhì)理化因子如表3所示,pH值7.1~8.6,溶氧4.03~8.01 mg/L,D1—D10水溫偏高、為 27~28℃,D20—D40 水溫為 23~24℃,D50—D90時(shí)氣溫偏低,通過(guò)在室內(nèi)用電暖器加熱,使水溫保持18~19℃;D1—D10各組的水體氨氮及亞硝酸鹽濃度差異極大,處理2及處理4的氨氮與亞硝酸鹽濃度極高;隨后水體氨氮水平降低明顯,從D20起各處理間無(wú)明顯差異,維持較低水平;亞硝酸鹽水平在處理1、2、3中逐步降低,但處理4在D60前無(wú)明顯變化,D60后降至其他試驗(yàn)處理的水平。

    表2 水體總堿度、總硬度檢測(cè)結(jié)果Table 2 Testing result of total alkalinity and total hardness in water

    表3 微型生物養(yǎng)護(hù)劑對(duì)水質(zhì)因子、浮游藻類及原生動(dòng)物的養(yǎng)護(hù)作用Table 3 Curing effect of micro biological conserving stuff on water quality factors, phytoplanktonand protozoa

    2.2 浮游藻類的平均密度、種類與多樣性

    整個(gè)采樣期間共有141種浮游藻類(圖1),隸屬6門70屬,綠藻門和藍(lán)藻門的種類數(shù)較多,分別有45屬100種、11屬18種,各占總種數(shù)的70.9%、12.8%。藻類的起始平均密度、種類數(shù)、多樣性指數(shù)(表3、圖2)均是處理4>處理3>處理2>處理1,試驗(yàn)過(guò)程中,浮游藻類震蕩增加,在護(hù)料的作用下,試驗(yàn)組比對(duì)照組增速快、變動(dòng)幅度窄,總體增長(zhǎng)更平穩(wěn),尤以來(lái)源于健康養(yǎng)殖塘的處理1特征明顯;D90時(shí)平均密度、種類數(shù)及多樣性指數(shù)分別依次處理4>處理1>處理3>處理2、處理2>處理4>處理1>處理3、處理4>處理2>處理1>處理3;處理1的平均密度及種類數(shù)明顯超出對(duì)照處理3,來(lái)源于不健康水體的處理2、處理4,其種類數(shù)與多樣性指數(shù)明顯增加,處理2的增長(zhǎng)趨勢(shì)比處理4更明顯,但處理2的平均密度仍均低于對(duì)照處理3。藻類優(yōu)勢(shì)種及主要種類的變動(dòng)情況(表4)顯示,使用護(hù)料可將主要浮游藻類種類養(yǎng)護(hù)為綠藻門、硅藻門種類,并降低單一優(yōu)勢(shì)種類的比例。

    圖1 浮游藻類的種類組成Fig.1 Species composition of phytoplankton

    表4 藻類主要種類的變動(dòng)情況Table 4 Changes in major species of phytoplankton

    圖2 不同處理的浮游藻類平均密度(A)、種類數(shù)(B)與多樣性指數(shù)(C)Fig.2 The mean density(A), species number(B)and diversity index(C) of phytoplankton under different treatments

    2.3 底棲原生動(dòng)物的平均密度、種類與多樣性

    試驗(yàn)中,各處理以輪蟲、纖毛蟲為主,使用護(hù)料后水質(zhì)得到改善,輪蟲、纖毛蟲數(shù)量增加。原生動(dòng)物平均密度、種類數(shù)量及多樣性的變動(dòng)情況如表3、圖3所示。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí),各處理原生動(dòng)物的平均密度依次為處理3>處理1>處理2>處理4,種類數(shù)及多樣性指數(shù)均依次為處理3>處理1>處理4>處理2,試驗(yàn)期間呈增長(zhǎng)趨勢(shì),D60時(shí)各處理的平均密度、種類數(shù)量及多樣性指數(shù)均是處理1>處理3>處理2>處理4。在護(hù)料的作用下,處理1的平均密度及多樣性指數(shù)明顯超出對(duì)照處理3;來(lái)源于不健康水體的處理2、處理4,其物種豐富度明顯增加,處理2的增長(zhǎng)趨勢(shì)比處理4更明顯,但平均密度與多樣性指數(shù)仍低于對(duì)照處理3;至D60,處理1、處理2的種類數(shù)各增加3種,處理3、處理4均增加1種。

    2.4 放養(yǎng)魚類的存活情況

    圖3 不同處理的原生動(dòng)物平均密度(A)、種類數(shù)(B)與多樣性指數(shù)(C)Fig.3 The mean density(A), species number(B) and diversity index(C) of protozoa under different treaments

    放養(yǎng)魚類的存活情況如表5所示,使用護(hù)料后,各處理存活率依次為處理1(85.7%)>處理2(57.1%)>平均數(shù)(50.0%)>處理4=處理3(28.6%)。4個(gè)處理中,鳙魚在處理1、處理2中均有1尾存活,在處理3、處理4組中全部死亡;羅非魚在處理1中全部存活,處理2中死亡1尾,處理3、處理4中死亡2尾;清道夫魚在處理1、處理2中全部存活,處理3、處理4中均死亡1尾。

    表5 放養(yǎng)魚類存活情況Table 5 The survival statistics of fish

    2.5 護(hù)料對(duì)健康池塘水體的模擬養(yǎng)護(hù)效果

    處理1、處理3均取樣于南沙一口健康池塘,水質(zhì)良好,水體微生物物種豐富,生態(tài)穩(wěn)定。處理1在采樣后處理過(guò)遲,使得試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)浮游藻類、原生動(dòng)物損失較多,其平均密度、種類數(shù)及多樣性指數(shù)均低于對(duì)照處理3。使用護(hù)料的處理1,浮游藻類D20時(shí)平均密度達(dá)到峰值,在D20—D30期間短暫降低后,藻類數(shù)量持續(xù)快速增長(zhǎng),整個(gè)試驗(yàn)期間小球藻(Chlorella vulgaris)始終維持較高比例。原生動(dòng)物增長(zhǎng)迅速,D20時(shí)即在數(shù)量上超過(guò)對(duì)照處理3;D30時(shí)種類數(shù)達(dá)到最多種,并保持不變,多樣性指數(shù)達(dá)峰值,隨后稍微降低。魚體存活率高達(dá)85.7%,對(duì)水質(zhì)要求較高的鳙魚也存活良好。相比于此,不使用護(hù)料的對(duì)照處理3,采樣后處理及時(shí),浮游藻類及原生動(dòng)物的起始平均密度、種類數(shù)和多樣性指數(shù)均高于處理1,但試驗(yàn)期間浮游藻類平均密度的震蕩幅度大于處理1,D30—D40期間單一種類小球藻占比極高、達(dá)70%,而D50時(shí)又驟降至20%,同時(shí)出現(xiàn)25%藍(lán)藻門藻類銀灰平裂藻(Merismopedia glauca);隨著氣溫降低、陰雨天時(shí)間延長(zhǎng),D60后銀灰平裂藻激增、占比高達(dá)70%。原生動(dòng)物增加強(qiáng)度不如處理1,增速慢,數(shù)量少,穩(wěn)定性低,甚至在D30前的多樣性指數(shù)呈下降趨勢(shì)。魚類存活率低、僅28.6%,遠(yuǎn)低于處理1,且僅剩對(duì)水質(zhì)要求不高的羅非魚及清道夫。試驗(yàn)結(jié)果表明,在健康塘使用護(hù)料后,浮游藻類與原生動(dòng)物得到養(yǎng)護(hù),放養(yǎng)魚類的存活率提高。

    2.6 護(hù)料對(duì)非健康池塘水體的模擬養(yǎng)護(hù)效果

    處理2的泥、水來(lái)自南沙一口發(fā)病池塘,試驗(yàn)起始時(shí)構(gòu)建的模擬生態(tài)條件差,氨氮水平較高,浮游藻類與原生動(dòng)物的平均密度、種類數(shù)、生物多樣性指數(shù)均較低;處理4采樣于清遠(yuǎn)一口荒廢老塘,該塘底為黏土底質(zhì),水體總堿度、總硬度水平偏低,氨氮水平極高,水體有異味,采樣時(shí)藍(lán)藻暴發(fā)。在護(hù)料的作用下,兩個(gè)試驗(yàn)組的整體情況均得到改善,處理4在試驗(yàn)開(kāi)始1周后水體異味消失,處理2、處理4的氨氮水平均在D20時(shí)降低,與來(lái)源于健康塘的處理1、處理3水平相當(dāng),浮游藻類與原生動(dòng)物的種群平均密度提高,種類數(shù)與多樣性指數(shù)明顯增長(zhǎng),處理2的魚類存活率為57.1%,明顯高于未用護(hù)料的對(duì)照處理3。但另一方面,因處理2的來(lái)源背景較差,D60后受氣溫降低的影響,藻類密度緩慢降低,嚙蝕隱藻(Cryptomonas erosa)與赤眼裸藻(Euglena sanguinea)增殖較快,提示水質(zhì)有潛在變差的風(fēng)險(xiǎn)。而處理4起始條件差,且對(duì)水質(zhì)起緩沖調(diào)節(jié)作用的堿度與硬度偏低,魚群結(jié)構(gòu)不合理,隨著后期氣溫降低等多因素的影響下,D50時(shí)開(kāi)始出現(xiàn)較高比例的銀灰平裂藻,在D90時(shí)大量暴發(fā),種群數(shù)量高達(dá)70%,原生動(dòng)物的生物多樣性水平偏低,魚體存活率也很低、僅28.7%。由處理2及處理4的試驗(yàn)結(jié)果可知,只有在使用護(hù)料的同時(shí)結(jié)合調(diào)整魚群結(jié)構(gòu)、適當(dāng)提高堿度、硬度等綜合調(diào)控方式,才能養(yǎng)護(hù)池塘的生態(tài)環(huán)境穩(wěn)定,促進(jìn)健康養(yǎng)殖。

    3 討論

    3.1 護(hù)料對(duì)水質(zhì)理化因子的影響

    養(yǎng)殖水體的自身污染以及對(duì)養(yǎng)殖地區(qū)水域生態(tài)系統(tǒng)的危害已經(jīng)成為當(dāng)前嚴(yán)重的環(huán)境問(wèn)題,利用微生物自身生理特性進(jìn)行水質(zhì)凈化的生物法,可以改善溶解氧,減少pH值波動(dòng),降低氨氮、硫化氫等有害物質(zhì),使水環(huán)境保持相對(duì)穩(wěn)定,有效改善水質(zhì)狀況,使水體中有益菌種成為優(yōu)勢(shì)種群,從而減少病菌的滋生[6-7]。劉春花等[8]在草魚(Ctenopharyngodon idellus)養(yǎng)殖過(guò)程中潑灑一種商業(yè)有益微生物制劑,有利于優(yōu)化養(yǎng)殖水體環(huán)境,與空白對(duì)照組相比,有益微生物組水體中的氨氮、亞硝酸氮鹽含量顯著降低。李曉英等[9]在中國(guó)對(duì)蝦(Fenneropenaeus chinensis)養(yǎng)殖池塘中施放了一種復(fù)合微生態(tài)制劑,可以使水體中的氨氮含量維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),亞硝酸鹽和硫化氫的含量也顯著低于對(duì)照池。本研究使用的護(hù)料是一種復(fù)合微生物制劑,其功能比單一微生物制劑廣泛、作用穩(wěn)定、效果更佳,作用于非健康池塘水體處理2及處理4時(shí),降氨氮的效果顯著,并在模擬試驗(yàn)期間維持各處理的水質(zhì)因子相對(duì)穩(wěn)定。

    3.2 護(hù)料對(duì)浮游藻類的影響

    研究發(fā)現(xiàn),不同的浮游藻類對(duì)氨氮和硝酸鹽的利用情況有差別,Glibert等[10]報(bào)道,硅藻對(duì)硝酸氮的利用超過(guò)氨氮,在硝酸鹽豐富的水體中硅藻往往是優(yōu)勢(shì)種,而在氨氮豐富的水體中,藍(lán)藻和綠藻對(duì)氮的利用效率要高于其他藻類,此時(shí)藍(lán)藻和綠藻將占據(jù)優(yōu)勢(shì)。而微生物則可以分解蝦池中對(duì)藍(lán)藻類等生長(zhǎng)有積極影響的豐富有機(jī)質(zhì),并且微生物的自身分泌物對(duì)不同的藻類有不同影響[11]。莊惠如等[12]發(fā)現(xiàn)光合細(xì)菌(Photosynthetic Bacteria)對(duì)水中藻類有明顯影響,使得有益的硅藻、綠藻數(shù)量增加,藍(lán)藻數(shù)量降低。對(duì)南美白對(duì)蝦(Penaeus vannamei)養(yǎng)殖池塘使用不同微生物制劑,De等[13]發(fā)現(xiàn),浮游植物結(jié)構(gòu)會(huì)受影響,甲藻的生物量降低;Lukwambe等[14]則發(fā)現(xiàn),浮游植物的生物量減少,其中增加了硅藻門的比例,降低了藍(lán)藻門的比例。本研究中,護(hù)料對(duì)模擬池塘水體的浮游藻類有良好的養(yǎng)護(hù)作用,使用護(hù)料后,藻類密度及多樣性指數(shù)增速快、變動(dòng)幅度窄,可將主要浮游藻類種類養(yǎng)護(hù)為綠藻門、硅藻門種類,可能是由于護(hù)料微生物菌株為經(jīng)過(guò)持續(xù)馴化的土著微生物,可有效對(duì)模擬試驗(yàn)組水體中含氮營(yíng)養(yǎng)物進(jìn)行選擇性利用,持續(xù)分解的代謝產(chǎn)物更適合當(dāng)?shù)厮w綠藻門、硅藻門藻類的繁殖,促使藻類穩(wěn)定增長(zhǎng),同時(shí)某些微生物菌株對(duì)特定藻類有抑制或溶解作用,使藍(lán)藻不能暴發(fā)性增長(zhǎng),維持藻相結(jié)構(gòu)的相對(duì)穩(wěn)定。

    3.3 護(hù)料對(duì)原生動(dòng)物的影響

    在池塘生態(tài)系統(tǒng)中,原生動(dòng)物密切地與其生存的環(huán)境直接接觸,能直接、迅速地反應(yīng)環(huán)境變化,發(fā)生規(guī)律性變化[15-16]。池塘投入微生態(tài)制劑后,形成新的微生物群落,從而影響水生態(tài)系統(tǒng)中的營(yíng)養(yǎng)鹽及能量在微生物群落中的流動(dòng)途徑及其各種微生物之間的代謝偶聯(lián)關(guān)系,接種有益微生物的水體中浮游動(dòng)物數(shù)量最多,生物量最大[17]。Zink等[18]將微生物制劑應(yīng)用到褶皺臂尾輪蟲(Brachionus plicatilis)培養(yǎng)中,可以增加輪蟲種群的數(shù)量和種群穩(wěn)定性。這些結(jié)論與本研究相同,原生動(dòng)物的增長(zhǎng)與水體餌料生物(如藻類、細(xì)菌)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(如氮)數(shù)量密切相關(guān),使用護(hù)料的試驗(yàn)組,微生物菌株有效地降解水中有機(jī)物,為浮游藻類的繁殖提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)藻類繁殖,這些藻類的光合作用,又為好氧菌、原生動(dòng)物提供氧氣,從而形成一個(gè)良性的生態(tài)循環(huán),促使原生動(dòng)物的平均密度顯著增加,種類數(shù)變化趨勢(shì)相對(duì)穩(wěn)定,多樣性指數(shù)得以豐富。

    3.4 護(hù)料對(duì)魚體的影響

    微生物制劑一方面通過(guò)在空間、時(shí)間、定居部位和營(yíng)養(yǎng)等展開(kāi)競(jìng)爭(zhēng),抑制致病菌的生存和繁殖[19],另一方面通過(guò)刺激機(jī)體產(chǎn)生干擾素,有效提高免疫球蛋白濃度和巨噬細(xì)胞活性,激發(fā)機(jī)體的免疫機(jī)能,增強(qiáng)機(jī)體免疫力[20],對(duì)水生動(dòng)物的生存起促進(jìn)作用。如芽孢桿菌(Bacillus)成為優(yōu)勢(shì)菌種后能產(chǎn)生枯草素等物質(zhì),可抑制其它細(xì)菌的生長(zhǎng),減少甚至消滅病原體,減少疾病發(fā)生[21]。也有研究報(bào)道,微生物制劑的有益菌可在動(dòng)物腸道內(nèi)繁殖,產(chǎn)生多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),促進(jìn)機(jī)體的消化吸收功能,促進(jìn)水生動(dòng)物的生長(zhǎng)[22]。本研究也進(jìn)一步驗(yàn)證了微生物制劑對(duì)魚體的促進(jìn)作用,使用護(hù)料可顯著提高放養(yǎng)魚類的存活率。

    3.5 護(hù)料的優(yōu)勢(shì)特征分析

    雖然微生物制劑在動(dòng)物的整個(gè)養(yǎng)殖過(guò)程都可以使用,但不同養(yǎng)殖時(shí)期的劑量及作用效果卻不盡相同,在不同的水質(zhì)條件下發(fā)揮出的作用與功效也不一樣,有可能在使用后不適應(yīng)當(dāng)?shù)貧夂?、生態(tài)環(huán)境,導(dǎo)致效應(yīng)期延長(zhǎng)或使用效果不明顯。在改良水質(zhì)環(huán)境時(shí),微生物制劑的菌株不可避免會(huì)與土著菌株發(fā)生競(jìng)爭(zhēng)[23]。而當(dāng)前作為水產(chǎn)用微生態(tài)制劑的出發(fā)菌株大多是來(lái)自畜禽消化道內(nèi)的原籍菌株,這些微生物對(duì)于水產(chǎn)動(dòng)物生理狀況和生存環(huán)境究竟有何種程度的影響,尚缺乏系統(tǒng)研究,也沒(méi)有明確結(jié)論[5]。此外,有研究證明碳氮比能改變養(yǎng)殖水環(huán)境中細(xì)菌群落和功能[24-25],通過(guò)補(bǔ)充碳水化合物以提高水體碳氮比,可促進(jìn)異養(yǎng)微生物利用水體中氮合成自身蛋白,從而降低水體氮化合物、提高飼料利用率[26],一些能抑制有害病菌的益生菌比例則會(huì)隨著碳氮比升高而升高[25,27],而添加不同碳源對(duì)水體水質(zhì)、藻類和微生物群落的調(diào)控存在差異[28]。本研究護(hù)料使用的菌株是經(jīng)持續(xù)馴化的養(yǎng)殖當(dāng)?shù)刎S產(chǎn)池塘的土著菌族,菌株培養(yǎng)基組方C/N動(dòng)態(tài)調(diào)整,以匹配不同養(yǎng)殖時(shí)期的投喂飼料粗蛋白水平與池塘N積累程度?;谒a(chǎn)養(yǎng)殖發(fā)病與區(qū)域水土、氣候、養(yǎng)殖習(xí)慣等關(guān)系密切,往往形成區(qū)域特征的發(fā)病規(guī)律,及養(yǎng)殖結(jié)構(gòu)不盡合理,池塘C/N比值普遍較低(一般低于10)等現(xiàn)象,池塘微生物養(yǎng)護(hù)劑的應(yīng)用關(guān)聯(lián)了“護(hù)料-飼料-濾食性魚類搭配”三元素,在不同養(yǎng)殖時(shí)期,使用承載相應(yīng)期土著微生物族群和相匹配C/N的護(hù)料,優(yōu)化區(qū)域養(yǎng)殖水體微生物、原生動(dòng)物、藻類等微型生物多樣性,以維護(hù)養(yǎng)殖環(huán)境動(dòng)態(tài)穩(wěn)定,進(jìn)而促進(jìn)養(yǎng)殖系統(tǒng)各層次關(guān)系的動(dòng)態(tài)平衡,使得養(yǎng)殖過(guò)程不易發(fā)生疾病。

    4 結(jié)論

    本研究以養(yǎng)護(hù)養(yǎng)殖水體微型生物多樣性為導(dǎo)向,以護(hù)料為載體,將土著良好菌族在同區(qū)域內(nèi)共享,關(guān)鍵銜接養(yǎng)殖對(duì)象、飼料、水體總堿度與總硬度等系統(tǒng)元素,目標(biāo)是促進(jìn)“微生物-原生動(dòng)物-藻類”“養(yǎng)殖對(duì)象-飼料-環(huán)境” “病原-宿主-環(huán)境”等多層次關(guān)系的平衡,使得病原在養(yǎng)殖系統(tǒng)多樣性機(jī)制中共存而不致病。水族缸中模擬的池塘養(yǎng)殖環(huán)境在護(hù)料的作用下,水質(zhì)因子維持在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài),藻類密度及多樣性指數(shù)增速更快、變動(dòng)幅度更窄,更易將主要浮游藻類種類養(yǎng)護(hù)為不產(chǎn)生藻毒素的綠藻門、硅藻門種類,原生動(dòng)物種類和數(shù)量均增加明顯,顯著提高魚體存活率。微生物養(yǎng)護(hù)技術(shù)適合于養(yǎng)殖區(qū)域規(guī)?;?、高效、精準(zhǔn)應(yīng)用,操作簡(jiǎn)單、成本低,有利于水產(chǎn)養(yǎng)殖生態(tài)系統(tǒng)持續(xù)改善,可降低區(qū)域養(yǎng)殖病害發(fā)生率、改善養(yǎng)殖產(chǎn)品品質(zhì)、提高養(yǎng)殖效益。

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