紅景天提取工藝的優(yōu)化研究

任亞鋒 高姍姍

【摘 要】采用正交試驗法對高山紅景天的提取工藝進(jìn)行設(shè)計，用高效液相色譜法測定提取物中紅景天苷的含量。確認(rèn)提取紅景天中有效成分紅景天苷的最佳工藝條件為：用70%的乙醇，料液比1：10，溫度78℃，提取兩次，提取時間分別為兩小時和一小時。在此提取工藝下，采用微波加熱法萃取快，收率高，是3種預(yù)處理方法中最好的方法，值得推廣使用。

【關(guān)鍵詞】紅景天苷;正交試驗;提取工藝;高效液相色譜法;萃取

一、儀器與試藥

1.儀器：Agilent1100高效液相色譜儀、KQ-3200B型臺式超聲波清洗器（昆山市超聲儀器廠）、SHB-B95型真空泵（鄭州長城科工貿(mào)有限公司）、HH-4恒溫水浴鍋（國華電器有限公司）、DZF-6050型真空干燥箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司）、DHG-9140A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海益恒實驗儀器有限公司）、RE52-98型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（上海亞榮生化儀器廠）、FZ102型植物試樣粉碎機（天津泰斯特儀器有限公司）、WD800G型微波爐（佛山市順德區(qū)格蘭仕微波爐電器有限公司）、TEM-200型超聲波細(xì)胞破碎儀（北京天正通工貿(mào)有限公司）。

2.試藥：紅景天苷對照品（中國藥品生物制品檢定所）、甲醇為色譜純（Merk公司生產(chǎn)）、乙醇為分析純（西安化學(xué)試劑廠）、水為實驗室自制。

3.材料：高山紅景天藥材購自于延邊土特產(chǎn)品經(jīng)銷公司。

二、試驗方法和結(jié)果

（一）優(yōu)選紅景天苷的最佳提取工藝

1.正交試驗設(shè)計

采用正交試驗法，選擇乙醇濃度（40%、70%、95%）、料液比（1：10、1：20、1：30）、溫度（40℃、60℃、78℃）、提取時間（1 h -1 h、1.5 h -2 h、2 h -1 h）作為考察的四個因素，各取三個水平，以紅景天苷的含量作為考察指標(biāo)，按照正交表進(jìn)行實驗。

2.正交試驗方法

粉碎紅景天，精密稱取10.0g紅景天粗粉18份，按實驗設(shè)計方案分別加入不同比例的溶劑，以不同的提取時間及溫度進(jìn)行提取;隨后將濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，殘渣用甲醇洗滌數(shù)次，轉(zhuǎn)移至25mL容量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。精密吸取0.25mL樣品溶液置于5mL容量瓶中，加甲醇至刻度，并用0.45μm微孔濾膜過濾作為供試品溶液備用。

3.正交試驗結(jié)果分析

從右表比較可知，最佳因素排列為：A2B1C3D3，即用70%的乙醇，料液比1：10，溫度78℃，提取兩次，提取時間分別為兩小時和一小時。

（二）選擇藥材預(yù)處理方法

保持提取紅景天苷最佳工藝條件不變，考察了3種藥材預(yù)處理方法對提取紅景天苷收率的影響。

1.純化水浸泡時間對紅景天苷收率的影響

在提取有效成分之前必須先將藥材浸泡一段時間，使藥材充分膨脹，以利于有效成分的浸出。實驗將考察預(yù)處理過程中純化水浸泡時間對紅景天苷收率的影響，取5組分別浸泡2、4、6、8、10小時，取樣檢測計算出收率分別為1.4%、1.5%、1.52%、1.53%、1.52%?？梢姡?h時，紅景天苷收率達(dá)最大值，約1.53%，再延長浸泡時間，紅景天苷收率反而下降。對于某些苷類而言，由于細(xì)胞內(nèi)同時存在著與其相應(yīng)的水解酶，隨著浸泡時間過長，部分苷被水解。因此，如果選擇純化水浸泡法，則純化水浸泡時間選擇8h最適宜。

2.超聲波振動時間對紅景天苷收率的影響

采用不同超聲波振動時間分別對樣品進(jìn)行預(yù)處理，考察超聲波振動時間對紅景天苷收率的影響。取5組分別用超聲波振動3、6、9、12、15分鐘，取樣檢測計算出收率分別為1.5%、1.52%、1.54%、1.542%、1.55%?？梢姡暡▽腆w樣品的預(yù)處理很有利，它不僅促進(jìn)和加速萃取過程，而且還可避免高溫對目標(biāo)成分的破壞，操作方法簡單，副產(chǎn)品少，目標(biāo)產(chǎn)物易分離。超聲波振動15min，紅景天苷收率達(dá)1.55%，獲得比常規(guī)提取法更理想的結(jié)果。

3.微波加熱時間對紅景天苷收率的影響

采用不同微波加熱時間分別對樣品進(jìn)行預(yù)處理，考察微波加熱時間對紅景天苷收率的影響。取5組分別用微波加熱10、15、20、25、30秒，取樣檢測計算出收率分別為1.51%、1.53%、1.54%、1.55%、1.56%?？梢姡褂梦⒉訜?，可以加快紅景天苷的萃取速率，加熱30s時，紅景天苷收率達(dá)1.56%，是3種預(yù)處理方法中收率最高的方法。此技術(shù)應(yīng)用于藥材浸出是一種省時便捷、值得推廣普及的中藥浸出新方法。

三、結(jié)論

用正交試驗法選出提取紅景天有效成分紅景天苷的最佳工藝，即用回流法提取，乙醇濃度為70%，料液比1：10，溫度78℃，提取兩次，提取時間分別為2小時和1小時。該工藝提取紅景天中的紅景天苷工藝簡單、提取率高、操作控制容易、穩(wěn)定性好，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。

考察了3種預(yù)處理方法對紅景天苷收率的影響。結(jié)果表明，微波加熱預(yù)處理技術(shù)萃取速率快、收率高，加熱30s收率達(dá)1.56%，是3種預(yù)處理方法中收率最高的方法。

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