微柱凝膠免疫檢測技術(shù)在臨床輸血治療中的應(yīng)用分析

王小燕，強(qiáng)新晨

（1.無錫市錫山醫(yī)院鵝湖分院檢驗科；2.無錫市人民醫(yī)院輸血科，江蘇 無錫 214116）

輸血在臨床診療過程中較為常見,主要應(yīng)用于手術(shù)、低血容量休克以及貧血患者，能夠及時補(bǔ)充患者機(jī)體血容量,有助于維持機(jī)體正常的血氧供應(yīng),在臨床多種疾病診治過程中占有重要地位[1]。受到輸血技術(shù)操作不當(dāng)、血型不符以及血液制品出現(xiàn)問題等多種因素影響,使得輸血反應(yīng)在臨床中較為常見，主要包括發(fā)熱反應(yīng)、過敏反應(yīng)，較嚴(yán)重的表現(xiàn)為溶血反應(yīng)，嚴(yán)重威脅患者的生命安全，應(yīng)予以重視[2]。因此，采取適宜的手段，進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配曲，對降低輸血反應(yīng)，提高輸血安全性尤為重要。以往臨床常采用鹽水試管檢測技術(shù)及凝聚胺法進(jìn)行血型及交叉配血檢查,雖然具有一定的臨床診斷價值,但該種檢測技術(shù)不能夠敏感檢出不完全抗體情況,影響交叉配血檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度及輸血過程的安全性[3-4]。隨著臨床技術(shù)發(fā)展與創(chuàng)新，交叉配血方法研究也取得一定進(jìn)步，其中就包括微柱凝膠免疫檢測技術(shù),該種檢測技術(shù)在臨床鑒定血型及輸血的過程中有一定的診斷價值，但目前臨床上在這方面研究尚少。本次實驗特選擇經(jīng)本院診療需要進(jìn)行輸血治療的患者為研究對象，采用不同的交叉配血檢測技術(shù)進(jìn)行檢查，意在研究微柱凝膠免疫檢測技術(shù)在鑒定血型及輸血的過程中的應(yīng)用價值?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2015年11月-2017年11月期間來我院診療需要進(jìn)行輸血的患者選為研究病例,隨機(jī)選取148例輸血患者分別采用不同的檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定以及交叉配血,根據(jù)檢測方法不同分成鹽水試管組及微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定以及交叉配血。輸血患者納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴思維感受方面正常，簽署了知情同意書；⑵具備完善的臨床資料，其能夠較好的配合完成研究及相關(guān)檢查。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴認(rèn)知功能障礙者及依存性差無法完成本研究者；⑵不能完成治療療程或不愿參加本研究者。供血者健康人群納入標(biāo)準(zhǔn)：近期未出現(xiàn)呼吸道或泌尿系統(tǒng)等感染情況，無藥物及食物等過敏史。輸血患者中，男性患者75例，女性患者73例；年齡24～68歲，平均年齡(36.83±3.67)歲；是否有過輸血史：有輸血史26例，無輸血史122例。供血者中，男性77例，女性71 例；年齡 19～41 歲，平均年齡(31.84±3.54)歲。 經(jīng)過醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)后，本組研究開始實施，研究目的、治療方法均被患者及其家屬了解，臨床資料不公開,保證了其隱私性。兩組研究對象的基線資料比較均衡性較好,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義 （P＞0.05）。

1.2 方法 所有血液標(biāo)本分別給予微柱凝膠免疫檢測技術(shù)及鹽水試管法檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定以及交叉配血檢查。微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫檢測技術(shù)進(jìn)行檢查，血型鑒定方法：醫(yī)務(wù)人員采取靜脈血后，常規(guī)分離輸血患者的血液樣本，在4攝氏度環(huán)境下保存血清，立即送檢，取6支分別標(biāo)注 A、B、C、D、E、F 的凝膠微管,完成后將 0.5%紅細(xì)胞懸液分別滴入A～D管，并將血清以及已知血型的A型及B型的0.5%紅細(xì)胞懸液分別滴入E、F管，采用3000r/min離心5min，由醫(yī)務(wù)人員根據(jù)檢查結(jié)果進(jìn)行肉眼比對。交叉配血方法：醫(yī)務(wù)人員常規(guī)分離供血者及受血者的血液標(biāo)本,完成后并配置成1%紅細(xì)胞懸液，取2支分別標(biāo)注主側(cè)以及次側(cè)的凝膠微管,將50μl供血者紅細(xì)胞懸液及受血者樣本滴入主側(cè)凝膠微管,并將50μl受血者紅細(xì)胞懸液及供血者樣本滴入次側(cè)凝膠微管，在37℃孵育15min，采用3000r/min離心5min離心，醫(yī)務(wù)人員采用肉眼對檢查結(jié)果進(jìn)行比對。鹽水試管組采用鹽水試管檢測技術(shù)及凝聚胺法進(jìn)行檢查。血型鑒定方法：參照鹽水試管法檢測操作規(guī)程進(jìn)行血型鑒定，同時給予陰性對照管，以便能夠排除冷凝集。交叉配血方法：采用凝聚胺法進(jìn)行檢測，常規(guī)分離供血者及受血者的血液標(biāo)本,完成后并配置成5%紅細(xì)胞懸液,進(jìn)行凝集主次側(cè)凝集試驗，采用肉眼對檢查結(jié)果進(jìn)行比對。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察兩組不同檢查方法的檢測結(jié)果,計算血型鑒定正反定型相符的符合率和交叉配血相合成功率。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理 采用spss20.0統(tǒng)計學(xué)軟件對表中數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，用表示計量資料，用檢驗比較計數(shù)資料，采用t檢驗，多組間比較采用方差分析，采用雙側(cè)檢驗所有統(tǒng)計分析，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者血型鑒定檢驗結(jié)果的差異 微柱凝膠免疫組微住凝膠免疫檢測血型鑒定檢查結(jié)果的正反定型符合率與鹽水試管組鹽水試管法正反定型符合率結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 觀察兩組患者交叉配血檢驗結(jié)果的差異 微柱凝膠免疫組采用微柱凝膠免疫法檢測的交叉配血不合率高于鹽水試管組凝聚胺法檢測的交叉配血不合率，差異比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表1 兩組血型鑒定檢驗結(jié)果的差異[n（%）]

表2 觀察兩組交叉配血檢驗結(jié)果的差異[n（%）]

3 討論

輸血治療是臨床常見治療手段，受患者體質(zhì)、多次輸血以及輸血操作等多種因素影響，輸血反應(yīng)較為常見，患者會出現(xiàn)發(fā)熱、過敏以及溶血等不良反應(yīng)。因此，為了降低輸液反應(yīng)發(fā)生情況，進(jìn)行準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血顯得尤為重要。

以往臨床常采用鹽水試管檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定,該種檢測方法對血型鑒定檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性較高,但隨著鹽水試管檢測技術(shù)在臨床中廣泛應(yīng)用，其不足之處也逐漸體現(xiàn)出來[5]。主要表現(xiàn)在鹽水試管檢測技術(shù)操作步驟簡單,能夠較快速出結(jié)果，不影響臨床輸血治療進(jìn)行,但相關(guān)研究顯示，將其應(yīng)用于IgM抗體引起的價差配血不合準(zhǔn)確率尚可,而對IgG抗體引起的較差配血不合會漏診，影響臨床工作效率[6-7]。隨著臨床技術(shù)的快速進(jìn)步，血型鑒定的檢測方法也有一定發(fā)展,微柱凝膠免疫檢測技術(shù)引起醫(yī)務(wù)人員的廣泛關(guān)注,該種檢測方法利用凝膠微柱分子層析原理,使得體積較小的紅細(xì)胞先通過凝膠間隙,并與不規(guī)則的抗體進(jìn)行有效結(jié)合,得以完成血型鑒定[8-9]。微柱凝膠免疫檢測技術(shù)能夠有效提高紅細(xì)胞與不規(guī)則抗體的結(jié)合情況，有較好的敏感度,使得血型鑒定結(jié)果的正反定型符合率較高，可以提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[10]。本次研究結(jié)果顯示,微柱凝膠免疫組患者檢查結(jié)果的正反定型符合率與鹽水試管組比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果說明，微柱凝膠免疫檢測技術(shù)對血型鑒定的檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性與鹽水試管法的準(zhǔn)確度，大致相同，但相關(guān)調(diào)查研究顯示[11]，與鹽水試管檢查技術(shù)相比,微柱凝膠免疫檢測技術(shù)整個流程操作標(biāo)準(zhǔn)化，需要樣本量較少，應(yīng)用于血型鑒定的臨床應(yīng)用價值較優(yōu)。

以往臨床常采用凝聚胺法進(jìn)行交叉配血檢測，雖然該種檢測手段可以快速檢測出配血結(jié)果，但操作步驟也相對較多,需要添加的溶液種類也較多，使得檢測手段相對復(fù)雜[12]。凝聚胺溶液釋放大量正電荷,使得紅細(xì)胞下降進(jìn)而發(fā)生非特異性凝集，再滴入枸緣酸鈉，觀察凝集是否散開，對配血結(jié)果進(jìn)行判斷[13]。凝聚胺法檢查結(jié)果的準(zhǔn)確性較好,特別是對于IgM和IgG抗體引起的配血不合的檢測，可以提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性[10]。但該種檢測方法也存在一定問題,主要表現(xiàn)在凝聚胺法需要較好的操作技能,需要操作人員不僅嚴(yán)格按照流程進(jìn)行操作,同時對檢測結(jié)果的判斷標(biāo)準(zhǔn)要有較好的把握能力。同時，相關(guān)結(jié)果顯示[14]，凝聚胺法進(jìn)行交叉配血檢測的檢查結(jié)果易受到多種藥物以及肝素等影響，使得凝集的紅細(xì)胞散開，使其檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性而不準(zhǔn)確,不利于臨床診斷及緊急救治輸血。鹽水法及凝聚胺法檢測技術(shù)的檢查結(jié)果不易保存，也不易通過圖片保存，不利于臨床工作的記錄,在一定程度上會造成血液樣本不必要的浪費。微柱凝膠免疫檢測技術(shù)利用生物凝膠過濾原理，使紅細(xì)胞表現(xiàn)發(fā)生抗原抗體結(jié)合,從而增大紅細(xì)胞體積,讓配對血型凝集的紅細(xì)胞不能夠通過凝膠間隙，留在凝膠微管中上部，反之配型不符的紅細(xì)胞沉積于凝膠微管底部[15-16]。微柱凝膠免疫檢測技術(shù)不受藥物、低濃度抗體等因素影響，而是通過抗體球蛋白與試劑中抗體特異性結(jié)合的生物學(xué)原理進(jìn)行檢查，該種檢測方法操作簡單，流程標(biāo)準(zhǔn)化，能夠減少血液樣本被污染，安全性較好，同時該種檢測手段特異性較好，檢測結(jié)果較為穩(wěn)定，準(zhǔn)確率較高[17]。本次結(jié)果顯示,微柱凝膠免疫組交叉配血成功率高于鹽水試管組,差異比較具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)果說明，與凝聚胺檢測方法相比，采用微住凝膠免疫法檢測技術(shù)進(jìn)行交叉配血檢查，檢測結(jié)果交叉配血成功率較高,說明檢查結(jié)果的穩(wěn)定性較好,不會受到藥物及其他物質(zhì)影響而出現(xiàn)假陽性，有較優(yōu)的參考意義。與鹽水試管法及凝聚胺法相比，采用微柱凝膠免疫法檢測技術(shù)能夠同時進(jìn)行血型鑒定及交叉配血檢查，操作步驟簡單，需要血液樣本相對較少；能夠有效檢測出是否存在不規(guī)則抗體，有較好的血型鑒定結(jié)果準(zhǔn)確性[18-19]；同時,微柱凝膠免疫法檢測技術(shù)能夠更加準(zhǔn)確的檢查出供血者與受血者配血不合情況,有助于減少溶血反應(yīng)的不良輸液反應(yīng)，提高輸液過程的安全性，提高臨床工作質(zhì)量[20]。本次實驗受到研究時間以及研究對象的限制，存在一定局限性，同時，血型鑒定及交叉配血等各項檢查操作技術(shù)存在細(xì)致差異，對統(tǒng)計結(jié)果會產(chǎn)生一定的影響,需要增加研究樣本數(shù)量，對實驗進(jìn)一步補(bǔ)充及完善。

綜上所述,采用微柱凝膠免疫法檢測技術(shù)進(jìn)行血型鑒定及交叉配血檢查，檢測結(jié)果穩(wěn)定性較好，有較高的準(zhǔn)確性，有助于提高臨床輸血的安全性，對臨床診斷有較優(yōu)的應(yīng)用價值。