Ael亞型引起產(chǎn)科備血困難2例

吳李萍，羅 敏，劉敏悅，卿克勤

(成都市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川成都 610041)

血型是人體穩(wěn)定的遺傳性狀，正確的血型鑒定結(jié)果是臨床安全用血的重要前提。輸血技術(shù)的提升和廣泛應(yīng)用挽救了更多的生命，也促進(jìn)了輸血研究的長(zhǎng)足發(fā)展，越來越多的血型亞型被發(fā)現(xiàn)，給臨床輸血提出新的挑戰(zhàn)。隨著國(guó)家二胎政策全面放開，高齡、瘢痕子宮、妊娠合并癥等高危妊娠數(shù)量增加，產(chǎn)科和新生兒科輸血風(fēng)險(xiǎn)隨之增加，給輸血帶來了新的挑戰(zhàn)。本科遇遺傳因素引起血型Ael亞型導(dǎo)致產(chǎn)科備血困難2例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 2例孕婦均在本院產(chǎn)科建卡，常規(guī)進(jìn)行血型鑒定正定為O，反定為A型。孕婦1，女，32歲，G1P0，邊緣性前置胎盤?；蜩b定血型為Ael04/O02，行剖宮產(chǎn)備血；孕婦2，女，19歲，G2P0?；蜩b定血型為Ael01/O02，順產(chǎn)備血。

1.2試劑與儀器 ABO和RhD血型鑒定、不規(guī)則抗體篩查與交叉合血IgG凝膠卡購(gòu)自O(shè)rtho-Clinical Diagnostics公司；抗-A、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司；抗-A1、抗-H血清購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司；A、B、O反定型紅細(xì)胞、抗體篩查細(xì)胞購(gòu)自長(zhǎng)春博德生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，均在有效期內(nèi)。

1.3方法 血清學(xué)血型鑒定、吸收放散試驗(yàn)參考操作規(guī)程和文獻(xiàn)[1-2]。血型基因鑒定送至中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所檢測(cè)。

2 結(jié) 果

2.1血型正反定型 用血型卡鑒定孕婦血型，兩者血型均為正定O反定A，結(jié)果見表1。進(jìn)一步用試管法在3組溫度(4 ℃、室溫、37 ℃)條件下驗(yàn)證血型。正定型：將孕婦紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次，分別與抗A、抗B血清反應(yīng)；反定型：2例孕婦血清與A、B、O試劑細(xì)胞反應(yīng)，同時(shí)設(shè)置自身對(duì)照，均為正定O反定A，結(jié)果見表2。

2.2吸收放散試驗(yàn) 以試劑O型紅細(xì)胞做對(duì)照，孕婦壓積紅細(xì)胞洗滌3次后與抗-A血清混勻于4 ℃冰箱吸收1 h，吸收后的孕婦紅細(xì)胞進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)，結(jié)果為陰性；洗滌吸收后細(xì)胞保留末次洗液與A細(xì)胞和O細(xì)胞應(yīng)檢測(cè)，結(jié)果呈陰性；洗滌細(xì)胞與生理鹽水混勻，56 ℃熱放散10 min，離心獲得放散液與A細(xì)胞和O細(xì)胞反應(yīng)，結(jié)果顯示A細(xì)胞反應(yīng)呈強(qiáng)陽性，與標(biāo)準(zhǔn)O細(xì)胞反應(yīng)呈陰性反應(yīng)，提示孕婦紅細(xì)胞上有A抗原，結(jié)果見表3。

表1 2例孕婦ABO、Rh血型卡鑒定結(jié)果

表2 2例孕婦ABO血型試管法檢查結(jié)果

表3 2例孕婦ABO血型吸收放散檢查結(jié)果

2.3基因鑒定 分別采集2例孕婦血液4 mL(乙二胺四乙酸二鉀抗凝管2管)送至中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院輸血研究所進(jìn)行血型基因型檢測(cè)，兩者回報(bào)結(jié)果均為Ael亞型，孕婦1基因血型為Ael04/O02，孕婦2基因血型為Ael01/O02。

2.4臨床備血 由于Ael亞型非常少見，臨床輸血最優(yōu)選擇為與Ael亞型相同紅細(xì)胞血液制品輸注；若血液中心無同型血液制品，臨床用血選擇備O型洗滌紅細(xì)胞懸液，A型新鮮冰凍血漿。

3 討 論

自1901年有研究者發(fā)現(xiàn)ABO血型系統(tǒng)以來，越來越多的血型抗原和亞型被鑒定和報(bào)道。血型是人體穩(wěn)定的遺傳性狀，一個(gè)血型系統(tǒng)為一系列等位基因的產(chǎn)物，血型基因按孟德爾遺傳規(guī)律獨(dú)立遺傳[2]。目前ISBT認(rèn)定的抗原數(shù)量多達(dá)342個(gè)，其中303個(gè)歸類于35個(gè)血型系統(tǒng)[3]。在人類遺傳進(jìn)化過程中，血型遺傳物質(zhì)改變常引起血型變異產(chǎn)生亞型，常導(dǎo)致血型鑒定困難或錯(cuò)誤。

ABO血型系統(tǒng)是臨床輸血最為重要的血型系統(tǒng)，除常規(guī)A、B、O和AB血型外，還包含多種亞型，A型有A2、A3、AX、Ael等，B型有B3、BX、Bel等。其中，Ael亞型常因血型血清學(xué)鑒定為正定O反定A不一致被發(fā)現(xiàn)，經(jīng)吸收放散試驗(yàn)可證實(shí)紅細(xì)胞上有弱的A抗原，分泌型唾液中含H物質(zhì)，不含A物質(zhì)。Ael抗原在白種人中符合孟德爾遺傳規(guī)律進(jìn)行遺傳，吸收放散試驗(yàn)為最佳檢測(cè)方法，放散后最好采用抗-A，而不是抗-A1進(jìn)行檢測(cè)[4]。

早期研究者采用針對(duì)A型寡糖鏈反應(yīng)的單克隆抗A抗體對(duì)Ael細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，掃描免疫電鏡觀察發(fā)現(xiàn)不到5%的Ael細(xì)胞可鑒別標(biāo)記的A抗原，其中一些顯示極強(qiáng)的標(biāo)記，解釋了為什么Ael細(xì)胞能夠吸收大量的抗-A而不被凝集[5]。也有研究者發(fā)現(xiàn)1例Ael02/O04，血清血型檢測(cè)為典型的表型O，具有較強(qiáng)的抗A和抗B抗體。吸收放散試驗(yàn)并未檢測(cè)到Ael抗原，而經(jīng)直接測(cè)序分析證明為Ael02/O04[6]。隨著分子生物學(xué)技術(shù)廣泛應(yīng)用，血型分子機(jī)制得以被闡述，Ael亞型的主要特征為插入與缺失突變[7-8]。由于突變產(chǎn)生轉(zhuǎn)錄物引起轉(zhuǎn)錄早期終止，導(dǎo)致在N端產(chǎn)生功能性Ael糖基轉(zhuǎn)移酶缺失轉(zhuǎn)錄子在細(xì)胞中穩(wěn)定表達(dá)促成了Ael-RBC的弱表達(dá)和弱凝集，且具有多態(tài)性[9]。國(guó)內(nèi)關(guān)于Ael的報(bào)道常見于獻(xiàn)血員血型鑒定、孕婦產(chǎn)檢等，也驗(yàn)證了人群中Ael出現(xiàn)頻率較低且存在多態(tài)性[10-14]。

本次實(shí)驗(yàn)中，2例孕婦均因產(chǎn)科建卡時(shí)血型鑒定正反不一致被發(fā)現(xiàn)。兩者血型正定為O型反定為A型，血清學(xué)方法進(jìn)一步鑒定符合Ael亞型反應(yīng)格局，送基因鑒定證實(shí)為Ael亞型，基因型分別為Ael04/O02和Ael01/O02。臨床輸血最優(yōu)選擇同型紅細(xì)胞血液制品輸注，由于Ael亞型罕見，血液中心常無同型血液制品庫存，產(chǎn)科備血選擇備O型洗滌紅細(xì)胞懸液，A型新鮮冰凍血漿。若提前知曉血型為Ael亞型的適齡女性，臨床用血可能性較大時(shí)，條件具備則可以考慮提前保存自體血備用。值得注意的是，Ael血型母親所生新生兒若有輸血需求，應(yīng)謹(jǐn)慎對(duì)待。理論上新生兒至少有1/2概率遺傳到母親的Ael血型基因，由于新生兒抗體尚未形成或抗體效價(jià)較低，通常只參考正定型結(jié)果，常規(guī)方法則不能被檢出。臨床工作中，Ael亞型和其他弱A亞型患者血型易被誤定為O型，且交叉合血時(shí)與O型獻(xiàn)血員相容無凝集，一旦輸注O型血液制品尤其是血漿，可能產(chǎn)生嚴(yán)重輸血反應(yīng)；若作為供血者，被誤定為O型的Ael血輸入O型患者體內(nèi)也可能導(dǎo)致嚴(yán)重的輸血反應(yīng)[15]。

在Ael亞型報(bào)道極少情況下，短期內(nèi)2例孕婦血型鑒定為Ael亞型，為產(chǎn)科備血帶來了新挑戰(zhàn)。隨著國(guó)家經(jīng)濟(jì)發(fā)展和全面放開二胎，孕婦高齡、瘢痕子宮及妊娠合并癥較以往明顯增加[16-18]，孕婦和新生兒輸血需求相應(yīng)增加。為保障安全用血，尤其是母嬰患者用血安全，提倡孕期建卡時(shí)常規(guī)進(jìn)行血型鑒定。在臨床工作中，血型鑒定應(yīng)十分重視血型正反定型，及時(shí)發(fā)現(xiàn)弱凝集和正反不一致情況。對(duì)血清學(xué)方法鑒定不明確的血型結(jié)果，必要時(shí)應(yīng)進(jìn)行分子生物學(xué)檢查明確基因型，保障患者輸血安全。