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    寧夏中寧地區(qū)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖的單糖成分GC-MS分析

    2019-11-21 11:09:12章英才蘇偉東柴雅紅
    生物技術(shù)通報(bào) 2019年11期
    關(guān)鍵詞:阿拉伯糖靈武鼠李糖

    章英才 蘇偉東 柴雅紅

    (1. 寧夏大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院,銀川 750021;2. 寧夏紅棗工程技術(shù)研究中心,靈武 750400)

    近年來(lái),靈武長(zhǎng)棗鮮果保鮮、生理變化、栽培技術(shù)、品種選育等領(lǐng)域已有較深入的研究[1-2],靈武長(zhǎng)棗多糖的研究則僅限于果實(shí)多糖的分離提取、理化性質(zhì)分析、多糖含量及變化規(guī)律等方面[5],而有關(guān)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖中單糖成分分析、不同產(chǎn)地果實(shí)主要有效成分比較方面尚缺乏系統(tǒng)研究。

    在前人研究基礎(chǔ)上,本項(xiàng)目組對(duì)原產(chǎn)于靈武市的靈武長(zhǎng)棗果實(shí)進(jìn)行了多糖中單糖組成分析[10],由于產(chǎn)地不同,果實(shí)多糖的單糖組成可能存在較大的差異,而揭示多糖的單糖組成及其差異對(duì)調(diào)控果實(shí)品質(zhì)及研究靈武長(zhǎng)棗多糖活性等都有重要意義[11]。

    因此,在明確原產(chǎn)地靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖單糖成分的基礎(chǔ)上,本研究選擇寧夏棗產(chǎn)區(qū)之一中寧地區(qū)的靈武長(zhǎng)棗果實(shí)為材料,采用熱水浸提法及GC-MS等方法,分別對(duì)不同發(fā)育時(shí)期的寧夏中寧地區(qū)生產(chǎn)的靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖中單糖成分進(jìn)行定性分析和定量分析,系統(tǒng)研究該地區(qū)不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)多糖中單糖的成分,明確不同地區(qū)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖中單糖組成的差異,旨在為寧夏不同地區(qū)靈武長(zhǎng)棗的開(kāi)發(fā)利用及產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供科學(xué)依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 材料

    以寧夏中寧縣棗園堡生長(zhǎng)的靈武長(zhǎng)棗果實(shí)為試驗(yàn)材料,選擇同期開(kāi)放的花朵進(jìn)行標(biāo)記,試驗(yàn)重復(fù)3次。選取果實(shí)膨大前期(7月10日)、快速膨大期(8月9日)、著色期(9月8日)、完熟期(9月28日)外觀良好健康的果實(shí)上午9:00-11:00進(jìn)行采樣,所采樣品45℃烘干至恒重,粉碎后過(guò)60目篩備用。

    RE-52A型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、SBS-Z100數(shù)控計(jì)滴自動(dòng)部份收集器、YZ1515X恒流泵、FD-4中型冷凍干燥器、日本島津公司GCMS-QP2010氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀等主要儀器。

    六甲基二硅胺烷、三甲基氯硅烷為色譜純,其他試劑均為分析純。DEAE-52纖維素填料(Whatman公司)、TOYOPEARL HW-55S凝膠樹(shù)脂(日本TOSOH公司)。標(biāo)準(zhǔn)單糖:葡萄糖(99.5%),阿拉伯糖、果糖、半乳糖、甘露糖(均>99%)購(gòu)自北京拜爾迪公司;核糖(99.6%),巖藻糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸(>99%),購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)網(wǎng);鼠李糖、木糖(均>98%),購(gòu)自北京化學(xué)試劑公司。

    臨分別,王祥向老道討了個(gè)冥器留作紀(jì)念,雙方各奔東西,既沒(méi)有分贓不均,內(nèi)訌火拼。也沒(méi)有見(jiàn)財(cái)心起,大打出手。雙方是好聚好散,分了手還是好朋友。

    1.2 方法

    1.2.1 不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)多糖的提取和含量測(cè)定 果實(shí)多糖的提取方法參見(jiàn)文獻(xiàn)[10],采用苯酚-硫酸比色法測(cè)定多糖含量[12]。

    1.2.2 不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)粗多糖的分級(jí)純化 將粗多糖溶液過(guò)濾后,加樣至DEAE-52柱,分別用超純水、0.1、0.2和0.3 mol/L NaCl洗脫,以洗脫管數(shù)為橫坐標(biāo),吸光度值為縱坐標(biāo)作洗脫曲線,分別合并各主峰收集管液,濃縮、透析、冷凍干燥后得到各多糖級(jí)分。將多糖各級(jí)分溶解后加樣至HW-55S柱,用0.2 mol/L NaCl溶液洗脫,根據(jù)洗脫曲線收集主峰管液,經(jīng)濃縮、透析、冷凍干燥后得到精制多糖。

    1.2.3 不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)精制多糖中單糖組成分析

    1.2.3.1 精制多糖的GC-MS分析 果實(shí)精制多糖的水解和衍生、GC-MS檢測(cè)條件、以及標(biāo)準(zhǔn)單糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法見(jiàn)文獻(xiàn)[10]。

    1.2.3.2 精制多糖中單糖組成的定性與定量 通過(guò)將多糖各級(jí)分中單糖的出峰時(shí)間與各種標(biāo)準(zhǔn)單糖的出峰時(shí)間對(duì)照,及NIST譜庫(kù)對(duì)照,對(duì)多糖各級(jí)分組成進(jìn)行定性分析。采用外標(biāo)法對(duì)多糖各組分中的阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、巖藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、果糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸進(jìn)行定量分析,根據(jù)各單糖的回歸方程計(jì)算出多糖中單糖的含量。

    1.2.4 數(shù)據(jù)處理 用Microsoft Excel 2010進(jìn)行數(shù)據(jù)計(jì)算,利用SPSS 18.0對(duì)果實(shí)多糖主要成分試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

    2 結(jié)果

    2.1 多糖的提取

    不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)粗多糖的提取得率分別為:膨大前期0.43%、快速膨大期0.527%、著色期0.80%和完熟期0.618%;粗多糖含量分別為:膨大前期32.43%、快速膨大期44.19%、著色期54.33%和完熟期47.15%,著色期>完熟期>快速膨大期>膨大前期。果實(shí)多糖得率和含量隨果實(shí)的發(fā)育進(jìn)程呈現(xiàn)先上升至著色期,然后略下降的趨勢(shì),但總體呈上升趨勢(shì)。

    2.2 不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)粗多糖的分級(jí)純化

    2.2.1 果實(shí)粗多糖的分級(jí) 由圖1知,不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)粗多糖經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析時(shí),多糖樣品各得到4個(gè)洗脫峰,從左到右分別為超純水洗脫所收集組分、0.1、0.2和0.3 mol/L NaCl洗脫所收集組分,分別為Ju-0、Ju-1、Ju-2和Ju-3。峰形較對(duì)稱,各多糖級(jí)分為均一級(jí)分。

    表1 中寧?kù)`武長(zhǎng)棗果實(shí)粗多糖經(jīng)DEAE-52纖維素色譜柱后4個(gè)多糖組分得率的測(cè)定

    圖1 中寧地區(qū)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)粗多糖經(jīng)DEAE-52洗脫曲線

    由表1可知,不同發(fā)育時(shí)期中寧地區(qū)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)4個(gè)多糖級(jí)分中Ju-2經(jīng)DEAE-52纖維素色譜柱分離純化后的得率均為最高,4個(gè)級(jí)分在快速膨大期的得率總體較高。

    2.2.2 果實(shí)粗多糖的純化 HW-55S分子排阻柱層析具有分子篩的作用,各時(shí)期的4個(gè)多糖級(jí)分按分子量的大小先后流出,達(dá)到純化的目的。不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)多糖各級(jí)分經(jīng)HW-55S的洗脫曲線中峰形單一且較對(duì)稱,純化效果較好。

    2.3 不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)精制多糖的單糖成分分析

    2.3.1 單糖標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作 配制不同質(zhì)量濃度梯度的阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、巖藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸各標(biāo)準(zhǔn)單糖溶液(根據(jù)1.2.3單糖的定性與定量方法和研究結(jié)果可知各樣品多糖中不含果糖),對(duì)各標(biāo)準(zhǔn)品衍生后分別進(jìn)行GC-MS分析,得到各標(biāo)準(zhǔn)品衍生物的總離子流圖(圖2)。并繪制各單糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到回歸方程(表2),10種標(biāo)準(zhǔn)單糖均呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

    2.3.2 不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)精制多糖的單糖成分分析 各發(fā)育時(shí)期果實(shí)精制多糖的各多糖級(jí)分水解、衍生后進(jìn)行GC-MS分析,分別得到各樣品總離子流圖(圖3),可見(jiàn)果實(shí)精制多糖各級(jí)分的單糖被成功分離。

    中寧地區(qū)不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)精制多糖各級(jí)分的單糖組成及質(zhì)量如表3所示。

    圖2 混合標(biāo)準(zhǔn)單糖的總離子流圖

    2.3.2.1 針對(duì)不同組分的單糖 Ju-0中,以阿拉伯糖>核糖、半乳糖為主,占單糖總量的60%-78%;Ju-1中,快速膨大期以葡萄糖醛酸>半乳糖醛酸為主,占單糖總量的75%,而其余時(shí)期以阿拉伯糖、半乳糖為主,占單糖總量的48%-52%;Ju-2、Ju-3中,膨大前期以阿拉伯糖>半乳糖>鼠李糖為主,均占單糖總量的77%,而其余時(shí)期均以葡萄糖醛酸>半乳糖醛酸為主,占單糖總量的45%-74%。

    表2 標(biāo)準(zhǔn)單糖的回歸方程

    針對(duì)不同發(fā)育時(shí)期的單糖總量,膨大前期:阿拉伯糖>半乳糖>鼠李糖;快速膨大期:葡萄糖醛酸>半乳糖醛酸>阿拉伯糖>鼠李糖>半乳糖;著色期:葡萄糖醛酸>阿拉伯糖>鼠李糖>半乳糖>半乳糖醛酸;完熟期:葡萄糖醛酸>阿拉伯糖>半乳糖>核糖。

    2.3.2.2 針對(duì)不同發(fā)育時(shí)期單糖總量變化及各組分單糖含量變化 針對(duì)Ju-0,阿拉伯糖、核糖、半乳糖、葡萄糖含量為快速膨大期>完熟期>著色期>膨大前期,鼠李糖、甘露糖為快速膨大期>著色期>完熟期。針對(duì)Ju-1,阿拉伯糖、半乳糖含量隨果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育而不斷升高,即完熟期>著色期>快速膨大期>膨大前期,鼠李糖、巖藻糖為快速膨大期>完熟期>著色期>膨大前期,糖醛酸含量為快速膨大期>完熟期>膨大前期。針對(duì)Ju-2,鼠李糖隨果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育總體是升高的趨勢(shì),即完熟期>著色期>膨大前期>快速膨大期,核糖、巖藻糖、半乳糖為完熟期>著色期>膨大前期>快速膨大期,糖醛酸含量為著色期>完熟期>快速膨大期>膨大前期。針對(duì)Ju-3,阿拉伯糖、鼠李糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖隨果實(shí)的生長(zhǎng)發(fā)育而不斷升高,即完熟期>著色期>快速膨大期>膨大前期,核糖含量為完熟期>快速膨大期>著色期>膨大前期,膨大前期的半乳糖醛酸、葡萄糖醛酸含量遠(yuǎn)小于其他發(fā)育時(shí)期。

    從各單糖總含量來(lái)看,阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖均是隨果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育逐漸增高,即完熟期>著色期>快速膨大期>膨大前期;核糖、巖藻糖均為完熟期>快速膨大期>著色期>膨大前期;甘露糖為快速膨大期>完熟期>著色期>膨大前期;葡萄糖、葡萄糖醛酸為著色期>快速膨大期>完熟期>膨大前期;木糖為快速膨大期>著色期>完熟期>膨大前期;半乳糖醛酸為快速膨大期>完熟期>著色期>膨大前期。

    因此,在膨大前期到完熟期整個(gè)果實(shí)發(fā)育過(guò)程中,單糖含量增加的有阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖,且完熟期總含量阿拉伯糖>半乳糖>鼠李糖,以及核糖、巖藻糖、甘露糖;而完熟期總含量降低的有葡萄糖、葡萄糖醛酸、木糖、半乳糖醛酸。

    2.3.2.3 針對(duì)同一時(shí)期單糖各組分的含量變化 膨大前期,半乳糖醛酸含量大小為Ju-1>Ju-2>Ju-3,葡萄糖醛酸Ju-2>Ju-1>Ju-3,其余各糖均為Ju-2最大,Ju-0、Ju-1、Ju-3含量大小接近。快速膨大期:阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖均為Ju-0>Ju-1>Ju-2>Ju-3,葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸均為Ju-1>Ju-3>Ju-2,鼠李糖和核糖分別為 Ju-1>Ju-0>Ju-3>Ju-2 和 Ju-0>Ju-1>Ju-3>Ju-2。 著 色 期 :阿 拉 伯糖、核糖為 Ju-0>Ju-1>Ju-2>Ju-3,鼠李糖和巖藻糖為 Ju-3>Ju-2>Ju-0>Ju-1,甘露糖、半乳糖為 Ju-1>Ju-0>Ju-2>Ju-3,葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸為Ju-2>Ju-3,Ju-0、Ju-1中無(wú)。完熟期:阿拉伯糖、核糖為Ju-1>Ju-0>Ju-2>Ju-3,鼠李糖為 Ju-2>Ju-3>Ju-1>Ju-0,巖藻糖、半乳糖醛酸為Ju-3>Ju-2>Ju-1,葡萄糖醛酸為Ju-2>Ju-3>Ju-1。

    總之,各組分總含量的變化規(guī)律為:膨大前期 Ju-2>Ju-1>Ju-3>Ju-0;快速膨大期 Ju-1>Ju-0>Ju-3>Ju-2;著 色 期 Ju-2>Ju-3>Ju-0>Ju-1;完 熟 期 Ju-2>Ju-1>Ju-3>Ju-0。

    圖3 完熟期果實(shí)精制多糖各組分總離子流圖

    3 討論

    寧夏靈武地區(qū)是靈武長(zhǎng)棗的主產(chǎn)區(qū),靈武、中寧地區(qū)產(chǎn)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)粗多糖得率和含量隨果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育,總體上均呈現(xiàn)增加的趨勢(shì),但變化趨勢(shì)有所不同。中寧地區(qū)果實(shí)粗多糖得率和含量先上升,在著色期分別達(dá)到最高后完熟期略有下降,而靈武地區(qū)果實(shí)粗多糖得率和含量持續(xù)上升至完熟期達(dá)到最高[10]。趙愛(ài)玲等[13]用苯酚-硫酸法測(cè)定比較了24個(gè)品種棗果實(shí)白熟期、脆熟期和完熟期的多糖含量,發(fā)現(xiàn)其多糖含量呈現(xiàn)遞增的趨勢(shì),在完熟期達(dá)到最高。這與靈武地區(qū)不同發(fā)育時(shí)期多糖含量的增加趨勢(shì)基本一致,也與楊軍等[14]對(duì)靈武地區(qū)果實(shí)多糖含量的研究結(jié)果相同。

    表3 中寧地區(qū)不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)精制多糖的單糖組成(單位:mg)

    中寧和靈武地區(qū)不僅多糖含量的變化趨勢(shì)有所不同,而且相同時(shí)期不同地區(qū)的多糖含量也存在差異,說(shuō)明產(chǎn)地對(duì)靈武長(zhǎng)棗多糖的含量產(chǎn)生影響,這可能與其氣候、土壤條件差異等有關(guān)[15-16]。陳宗禮等[17]分析陜北多個(gè)棗品種多糖含量,發(fā)現(xiàn)同一品種不同產(chǎn)地的棗多糖含量具有差異,在不同產(chǎn)地的狗頭棗和大木棗等均表現(xiàn)出極顯著差異,不同產(chǎn)地間狗頭棗多糖含量最高與最低值相差39.68%,不同產(chǎn)地間大木棗多糖含量最高比最低值高出10.35%。與此不同的是,趙愛(ài)玲等[13]比較了壺瓶棗在不同地區(qū)間多糖含量,發(fā)現(xiàn)相同品種在不同地域間的含量差異比較小,在1 mg/g-3 mg/g之間,這與本研究結(jié)果不同。反映出不同棗品種果實(shí)多糖含量在不同地域間存在差異。

    經(jīng)DEAE-52纖維素柱分離純化,中寧和靈武地區(qū)果實(shí)多糖樣品均分別得到1種中性多糖組分和3種酸性多糖組分,各組分多糖的得率在不同發(fā)育時(shí)期大小不同,在相同發(fā)育時(shí)期不同地區(qū)各不相同。表明靈武長(zhǎng)棗多糖的主要形式為酸性多糖,且各發(fā)育時(shí)期果實(shí)4個(gè)多糖級(jí)分中均是酸性組分2經(jīng)DEAE-52色譜柱分離純化后的得率最高。潘瑩[18]采用DEAE-52纖維素柱對(duì)冬棗多糖進(jìn)行分離,得到1個(gè)中性和1個(gè)酸性組分;劉琳[19]對(duì)臨澤小棗的多糖進(jìn)行DEAE-52纖維素柱分離,得到1個(gè)中性、4個(gè)酸性共5種多糖級(jí)分;戴艷[20]將駿棗多糖的DEAE-52純化后,得到1個(gè)中性、4個(gè)酸性組分,酸性多糖回收率明顯高于中性,且酸性組分2和4回收率最高。總的來(lái)看,都是酸性多糖大于中性,這與本研究結(jié)果一致,但酸性組分?jǐn)?shù)目與本試驗(yàn)所得結(jié)果有所差異,這可能與棗品種不同、采用洗脫液濃度或填料不同等有關(guān)。

    本研究中,采用適用分離多糖的分子量范圍為1×103-2×105的HW-55S凝膠色譜柱,其分離純化效果理想,所得組分均為單一對(duì)稱峰,證實(shí)了各多糖組分為均一多糖。相比目前棗多糖純化常用的Sephadex等凝膠柱,HW樹(shù)脂填料為改性的聚甲基丙烯酸酯,具有更好的耐壓性能,適合棗多糖純化使用。

    GC-MS綜合了GC靈敏度高、分析速度快和MS鑒別能力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),適用于靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖的分析。通過(guò)將多糖各級(jí)分中單糖的出峰時(shí)間與各種標(biāo)準(zhǔn)單糖的出峰時(shí)間對(duì)照,及NIST譜庫(kù)對(duì)照,并根據(jù)各單糖的回歸方程對(duì)多糖各級(jí)分組成進(jìn)行定性和定量分析,結(jié)果準(zhǔn)確可靠。研究表明,中寧地區(qū)果實(shí)阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖等單糖的含量均是隨果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育逐漸增高,但不同地區(qū)或不同發(fā)育時(shí)期之間,糖醛酸含量變化差異較為明顯,不同地區(qū)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖的單糖組成差異主要在于阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖和糖醛酸的動(dòng)態(tài)變化。王東營(yíng)[21]研究灘棗多糖時(shí),發(fā)現(xiàn)灘棗多糖的單糖組成、以及阿拉伯糖含量最高的研究結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果相似,也與靈武地區(qū)果實(shí)的研究結(jié)果基本接近。但石浩等[22]發(fā)現(xiàn)糖棗中木糖醇、葡萄糖、半乳糖所含比例較高,趙智慧等[23]發(fā)現(xiàn)金絲小棗主要組成為半乳糖醛酸,這些研究結(jié)果與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果有差異。并且,中寧地區(qū)和靈武主產(chǎn)區(qū)不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)多糖中均不含有果糖,但金絲小棗和冬棗果實(shí)多糖中卻含有果糖,且果糖含量在各發(fā)育時(shí)期均高于其他單糖[24]。不論是中寧地區(qū)還是靈武地區(qū),不同發(fā)育時(shí)期果實(shí)多糖中單糖含量雖各不相同,但單糖組成種類相同,而金絲小棗和冬棗果實(shí)多糖中單糖的種類隨果實(shí)發(fā)育呈遞增趨勢(shì)[24]。這些研究結(jié)果的差異不僅與棗種類有關(guān),還可能與產(chǎn)地、多糖提取方法、單糖成分分析手段等有關(guān)。

    總之,中寧和靈武地區(qū)雖同處黃河中上游地區(qū),但其地理位置和所處的環(huán)境存在一定的差異。生長(zhǎng)于兩地區(qū)的靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖含量的變化趨勢(shì)、多糖級(jí)分?jǐn)?shù)目和含量以及多糖中單糖的組成等,在不同發(fā)育時(shí)期既存在差異也存在相似或相同。導(dǎo)致同一品種不同產(chǎn)地的果實(shí)多糖產(chǎn)生差異的因素,可能是因?yàn)閷幭牟煌貐^(qū)間土壤、水分存在一定的差異,呈現(xiàn)較大的不均衡性;除此之外,氣溫、地溫也是棗樹(shù)生長(zhǎng)的2個(gè)重要環(huán)境因子,濕度的調(diào)控對(duì)棗樹(shù)的生長(zhǎng)也極為重要;其次光照等因素對(duì)棗樹(shù)的生長(zhǎng)和產(chǎn)量影響也很大。這些可能是導(dǎo)致寧夏不同地區(qū)靈武長(zhǎng)棗品質(zhì)差異的重要因素,還需要在以后的實(shí)驗(yàn)中明確各種因素影響靈武長(zhǎng)棗果實(shí)多糖中單糖組成的深層次機(jī)制,進(jìn)而調(diào)控果實(shí)品質(zhì)。

    4 結(jié)論

    不同發(fā)育時(shí)期寧夏中寧地區(qū)靈武長(zhǎng)棗果實(shí)各精制多糖總共含有阿拉伯糖、鼠李糖、核糖、巖藻糖、木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸10種單糖,不含果糖,以阿拉伯糖、半乳糖、核糖、鼠李糖、糖醛酸含量較高,巖藻糖、葡萄糖含量次之,木糖、甘露糖含量較低,但其含量各組分有差異。

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