血清白介素10、腫瘤壞死因子-α在前列腺增生及前列腺癌組織中的表達(dá)及意義

張楚龍　唐順利

[摘要]目的 探索血清白介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在前列腺增生（BPH）及前列腺癌（PC）組織中的表達(dá)及意義。方法 選取2012年5月～2018年5月我院治療的20例PC患者（PC組）、19例BPH患者（BPH組）為研究對(duì)象，均行IL-10、TNF-α指標(biāo)檢測(cè)，在通過(guò)PCI圖像分析測(cè)定后，每個(gè)切片測(cè)定五個(gè)視野，并選取平均吸光值作為測(cè)定值，平均吸光度值和表達(dá)強(qiáng)度成正比，隨后分析IL-10、TNF-α在兩組標(biāo)本組織中的表達(dá)和測(cè)量結(jié)果。結(jié)果PC陰性組和BPH陰性組的IL-10、TNF-α差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;PC陽(yáng)性組IL-10、TNF-α低于BPH陽(yáng)性組（P<0.05）;PC組陽(yáng)性者前列腺體積、國(guó)際前列腺癥狀評(píng)分（IPSS）高于BPH組陽(yáng)性者，尿潴留次數(shù)、尿流率、殘尿量多于BPH組陽(yáng)性者（P<0.05）;PC組陰性者前列腺體積、IPSS評(píng)分高于BPH組陰性者，尿潴留次數(shù)、尿流率、殘尿量多于BPH組陰性者（P<0.05）。結(jié)論 IL-10、TNF-α在PC患者中具有一定表達(dá)性，與癌細(xì)胞快速增長(zhǎng)引起的炎癥反應(yīng)有關(guān)，在BPH患者中具有較高意義的表達(dá)，與組織結(jié)構(gòu)破壞、組織增生有關(guān)。

[關(guān)鍵詞]血清白介素10;腫瘤壞死因子-α;前列腺增生;前列腺癌;表達(dá)

[中圖分類號(hào)] R737.25 ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A ? ? [文章編號(hào)] 1674-4721（2019）9（b）-0072-04

Expression and significance of IL-10 and TNF-α in benign prostatic hyperplasia and prostate cancer

ZHANG Chu-long? ?TANG Shun-li

Department of Urology， Zhongshan Chen Xinghai Hospital， Guangdong Province， Zhongshan? ?528415， China

[Abstract] Objective To explore the expression and significance of serum IL-10 （IL-10） and tumor necrosis factor-α（TNF-α） in benign prostatic hyperplasia （BPH） and prostate cancer.（PC）. Methods From May 2012 to May 2015， 20 patients with PC and 19 patients with BPH were selected as subjects. TNF-αindex detection， after measurement by PCI image analysis， five fields were determined for each slice， and the average absorbance value was selected as the measured value. The average absorbance value was proportional to the expression intensity， and then IL-10 and TNF-αwere analyzed. Expression and measurement results in two sets of specimen tissues. Results There was no difference in IL-10 and TNF-α between the PC negative group and the BPH negative group （P>0.05）. The PC positive group IL-10 and TNF-αwere lower than the BPH positive group （P<0.05）. The prostate volume and IPSS scores of the PC group positive were higher than those of the positive persons BPH group， the number of urinary retention， the urinary flow rate， and the residual urine volume were more than those of the negative persons BPH group （P<0.05）; The volume and IPSS scores were higher than those in the BPH group. The number of urinary retention， urinary flow rate， and residual urine volume were more than those in the BPH group （P<0.05）. Conclusion IL-10 and TNF-α have a certain expression in PC patients， which is related to the inflammatory reaction caused by the rapid growth of cancer cells. It has high expression in patients with BPH， which is related to tissue destruction and tissue proliferation.

[Keywords] Serum IL-10; Tumor necrosis factor-α; Benign prostatic hyperplasia; Prostate cancer; Expression

前列腺癌（PC）和前列腺增生（BPH）均屬于臨床常見(jiàn)病，是導(dǎo)致老年男性下尿路癥狀引發(fā)的主要因素，目前關(guān)于PC和BPH的假設(shè)說(shuō)法較多，但任何一項(xiàng)均不具備獨(dú)立解釋發(fā)病機(jī)制的要點(diǎn)。盡管目前發(fā)病機(jī)制尚未完全詮釋，但臨床學(xué)者發(fā)現(xiàn)慢性炎癥在此類疾病發(fā)生、發(fā)展中起到重要作用性[1]。炎性細(xì)胞因子作為免疫反應(yīng)和炎癥反應(yīng)的中介物質(zhì)，對(duì)疾病的歸轉(zhuǎn)、過(guò)程發(fā)揮著重要意義，但在實(shí)際過(guò)程中，患者機(jī)體細(xì)胞因子能預(yù)示疾病狀態(tài)，在疾病調(diào)節(jié)中可發(fā)揮信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑的治療靶點(diǎn)[2]。而本研究旨在探討血清白介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在BPH及PC組織中的表達(dá)及意義，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2012年5月～2018年5月我院治療的19例BPH、20例PC患者作為研究對(duì)象。BPH組平均年齡（56.89±2.45）歲;平均體重（69.86±5.42）kg。PC組平均年齡（56.52±2.97）歲;平均體重（69.55±5.37）kg。兩組的一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)意義（P>0.05），具有可比性。本研究已經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者各項(xiàng)臨床資料齊全，且自愿加入本研究，簽署知情同意書;②患者均無(wú)抵觸情緒;③患者預(yù)計(jì)生存時(shí)間>6個(gè)月。排除標(biāo)準(zhǔn)：①免疫系統(tǒng)疾病患者;②血液性疾病患者;③精神家族史患者。

1.2方法

儀器和試劑：由重慶儀器廠提供臺(tái)式保溫箱PW/10-002型號(hào);免疫組化染色結(jié)果應(yīng)用SAMPLE PCI圖像分析系統(tǒng)進(jìn)行測(cè)量光吸收密度值，且運(yùn)用半定量分析;石蠟切片機(jī)科迪150由浙江金華科迪儀器有限公司提供。YNF-α兔單克隆抗體由北京中山生物工程公司提供;IL-10兔單克隆抗體由北京中山生物工程公司提供。

檢測(cè)方式：對(duì)于實(shí)施手術(shù)患者，需在手術(shù)中，獲取病變組織，首先在反復(fù)使用生理鹽水沖洗后，加入聚甲醛溶液固定，常規(guī)精神包埋、石蠟、備用。將準(zhǔn)備好的免疫組化載玻片24 h浸泡在濃硫酸內(nèi)，隨后沖洗干凈等待6～12 h，再用雙蒸水三遍沖洗、浸泡，放入烤箱內(nèi)烘干，連續(xù)制作成4 μm蠟塊切片，做好相應(yīng)標(biāo)記，分別進(jìn)行免疫組化染色和HE。IL-10、TNF-α在染色陽(yáng)性細(xì)胞的胞膜和胞漿呈現(xiàn)出基本均勻、不同的棕黃色顆粒。

1.3觀察指標(biāo)

分析IL-10、TNF-α在兩組標(biāo)本組織中的表達(dá)和測(cè)量結(jié)果。

比較兩組陰性和陽(yáng)性的前列腺體積、國(guó)際前列腺癥狀評(píng)分（IPSS）（若分?jǐn)?shù)越高，代表當(dāng)前前列腺功能越差）、尿潴留次數(shù)、尿流率、殘尿量。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 21.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，不符合正態(tài)分布者轉(zhuǎn)換為正態(tài)分布后行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 PCI圖像分析

在通過(guò)PCI圖像分析測(cè)定后，每個(gè)切片測(cè)定五個(gè)視野，并選取平均吸光值作為測(cè)定值，平均吸光度值和表達(dá)強(qiáng)度成正比。IL-10、TNF-α在兩組中均存在一定值的表達(dá)，而表達(dá)最強(qiáng)的為BPH，其次為PC。具體如圖1～4。

2.2 IL-10、TNF-α在兩組標(biāo)本組織中的表達(dá)和測(cè)量結(jié)果的比較

BPH組和PC同組的陽(yáng)性和陰性的IL-10、TNF-α差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），PC陰性組和BPH陰性組的IL-10、TNF-α差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）;PC陽(yáng)性組IL-10、TNF-α低于BPH陽(yáng)性組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表1）。

2.3兩組陰性和陽(yáng)性的各項(xiàng)評(píng)估值的比較

BPH組和PC同組的陽(yáng)性和陰性的前列腺體積、尿潴留次數(shù)、殘尿量、IPSS評(píng)分、尿流率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），兩組陽(yáng)性、陰性者的前列腺體積、尿潴留次數(shù)、殘尿量、IPSS評(píng)分、尿流率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），同時(shí)PC組陽(yáng)性者前列腺體積、IPSS評(píng)分高于BPH組陽(yáng)性者，尿潴留次數(shù)、尿流率、殘尿量多于BPH組陽(yáng)性者，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）（表2）。

3討論

BPH和PC發(fā)病機(jī)制存在較多假設(shè)和說(shuō)法，包括基因調(diào)控學(xué)說(shuō)、細(xì)胞凋亡學(xué)說(shuō)、上皮-間質(zhì)細(xì)胞相互作用學(xué)說(shuō)、生長(zhǎng)因子學(xué)說(shuō)、激素-內(nèi)分泌學(xué)說(shuō)，然而作為一種多病因疾病，單方面學(xué)說(shuō)機(jī)制不具有針對(duì)性，無(wú)法詮釋正確的發(fā)病機(jī)制，但隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)慢性炎癥在PC、BPH中均具有較高利用價(jià)值性[3]。

IL-10屬于有效的抗炎性細(xì)胞因子，是由Th2+CD4輔助細(xì)胞亞群產(chǎn)生的18 KD細(xì)胞因子，能抑制促炎細(xì)胞因子產(chǎn)生，對(duì)單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生較強(qiáng)的抑制作用，同時(shí)能減輕炎癥性反應(yīng)，抑制TNF-α、IL-6、IL-1單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，因此目前又稱為細(xì)胞因子合成抑制因子[4]，且在抑制T淋巴細(xì)胞增殖的同時(shí)，還可抑制細(xì)胞介導(dǎo)的遲發(fā)型超敏反應(yīng)和免疫反應(yīng)，促使上皮細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞的非淋巴細(xì)胞和活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生IL-10，進(jìn)一步說(shuō)明IL-10在細(xì)胞免疫中可發(fā)揮重要的負(fù)調(diào)節(jié)因子作用[5]，主要表現(xiàn)為以下幾點(diǎn)：①抑制炎癥細(xì)胞遷移以及Th0細(xì)胞向Th1細(xì)胞轉(zhuǎn)化;②通過(guò)間接或直接作用就是細(xì)胞的輔佐功能，從而促使NK和ThI細(xì)胞的抑制、增殖、活化[6-7];③抑制IFN誘導(dǎo)的抗原呈遞細(xì)胞表面的主要組織，輔助刺激B7的表達(dá)，從而降低抗原遞呈能力;④抑制IL-12、IL-2、IL-1、TNF等巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞驅(qū)化因子合成。上述作用的凈效應(yīng)是通過(guò)抑制T細(xì)胞介導(dǎo)，減輕免疫反應(yīng)，同時(shí)IL-10還能參與體液免疫調(diào)節(jié)，刺激B淋巴細(xì)胞反應(yīng)[8-9]。

TNF-α具有免疫調(diào)節(jié)、炎性介質(zhì)調(diào)節(jié)、抗感染、抗病毒等作用，主要是由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，正常狀態(tài)下的TNF-α能夠促使腫瘤細(xì)胞凋亡，促進(jìn)組織修復(fù)，參與寄生蟲(chóng)感染、病毒感染、細(xì)菌感染等，但一旦機(jī)體出現(xiàn)過(guò)多的TNF-α水平，可導(dǎo)致機(jī)體免疫平衡失調(diào)，釋放大量破壞物質(zhì)，與其他炎癥因子相結(jié)合，從而產(chǎn)生一系列病理?yè)p傷[10-11]。在前列腺疾病中，TNF-α能刺激單核巨噬細(xì)胞和中性粒細(xì)胞，促進(jìn)炎癥反應(yīng)，刺激他們合成TNF-α自身以及IL-8、IL-6、IL-1等，再加上TNF-α本身便具備多種生物學(xué)活性，可通過(guò)與靶細(xì)胞膜TNF受體結(jié)合，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，增加鈣離子濃度，激發(fā)細(xì)胞內(nèi)一系列信號(hào)傳遞，導(dǎo)致DNA降解，激活核酸內(nèi)切酶，促使細(xì)胞凋亡[12-13]。

分析本研究結(jié)果，兩組標(biāo)本組織中均存在不同程度的IL-10、TNF-α表達(dá)，組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），提示IL-10和TNF-α在前列腺疾病中具有較高的表達(dá)，若機(jī)體長(zhǎng)時(shí)間處于持續(xù)表達(dá)狀態(tài)，可繼續(xù)升高IL-10和TNF-α值。有研究表明，IL-10水平值高低與臨床疼痛癥狀加劇具有一定相關(guān)性，但I(xiàn)L-10持續(xù)升高，可導(dǎo)致組織損傷，進(jìn)而引起促炎癥細(xì)胞表達(dá)升高。在本研究中，IL-10在兩組標(biāo)本中均存在一定值的表達(dá)，而表達(dá)最弱為對(duì)照組，最強(qiáng)的為BPH，其次為PC，提示IL-10在PC中表達(dá)低于BPH，反而言之，IL-10的低表達(dá)，可增加癌變的可能性，主要是因?yàn)镮L-10在PC作用中，能夠在抗腫瘤血管生成、抑制腫瘤生長(zhǎng)發(fā)揮著重要作用性。除此之外，TNF-α在兩組中均存在一定值的表達(dá)，而表達(dá)最弱為對(duì)照組，最強(qiáng)的為BPH，其次為PC，提示TNF-α在PC組織中表達(dá)也低于BPH，主要是因?yàn)榘┙M織增長(zhǎng)與炎性反應(yīng)存在明顯相關(guān)性[14-15]。除此之外，本研究中，兩組陽(yáng)性和陰性的前列腺體積、尿潴留次數(shù)、殘尿量、IPSS評(píng)分、尿流率差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），同時(shí)PC組陽(yáng)性者前列腺體積、IPSS評(píng)分高于BPH組陽(yáng)性者，尿潴留次數(shù)、尿流率、殘尿量多于BPH組陽(yáng)性者（P<0.05），提示隨著疾病的嚴(yán)重化，患者尿潴留次數(shù)、前列腺體積明顯增加，相應(yīng)的尿流率、殘尿量也逐漸增多。

綜上所述，IL-10在BPH中存在較高表達(dá)性，與繼發(fā)性炎癥有關(guān)，TNF-α在BPH中也存在較高表達(dá)性，與前列腺組織結(jié)構(gòu)被破壞和組織增生有關(guān)，而IL-10、TNF-α在PC中表達(dá)，與癌細(xì)胞快速增長(zhǎng)引起的炎性反應(yīng)有關(guān)。

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（收稿日期：2019-03-25? 本文編輯：崔建中）