不同分子亞型乳腺癌患者動態(tài)增強MRI定量參數(shù)：容量轉移(Ktrans)、速率常數(shù)(Kep)的變化研究

趙振江 晉果果 王傳珍 郭智萍

乳腺癌是臨床常見惡性腫瘤，居女性疾病發(fā)病率首位，早期癥狀缺乏特異性，不典型，多數(shù)患者確診時已處于疾病中晚期，錯過最佳治療時機。研究證實乳腺癌是目前唯一可借助影像學手段進行早期篩查的惡性腫瘤，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療可有效降低乳腺癌死亡率，改善患者生活質量[1-2]。與傳統(tǒng)影像學檢查比較，動態(tài)增強磁共振成像(DCE-MRI)在乳腺癌良惡性鑒別及輔助化療的評價中應用較多，具有較高水平的敏感度與特異度[3]。而乳腺癌在分子水平上表現(xiàn)出高度異質性，不同分子亞型乳腺癌患者表現(xiàn)出不同的生物學行為與病理特征，其治療方案與臨床預后亦不盡相同[4]?；蚍中偷难芯渴悄壳芭R床研究的熱點，對影像學檢查亦提出更高要求。本研究旨在探究不同分子亞型乳腺癌患者DCE-MRI定量參數(shù)：容量轉移(Ktrans)、速率常數(shù)(Kep)的變化，報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2015年1月至2018年7月于我院就診的136例乳腺癌患者的臨床病例及影像學資料。136例患者均為女性，年齡32～67歲，平均年齡(46.75±3.43)歲；浸潤性導管癌111例，浸潤性小葉癌8例，導管原位癌7例，乳頭狀癌4例，髓樣癌3例，黏液癌3例。納入標準：①經臨床診斷符合乳腺癌相關標準[5]；②經手術標本或核芯針穿刺得到病理組織確診；③術前1周內行DCE-MRI檢查，且影像學資料完整；④患者自愿參與研究，并簽署知情同意書。排除標準：①檢查前曾接受過放化療或激素替代治療；②檢查前曾行乳腺穿刺活檢；③有單側乳腺切除術史；④月經期、哺乳期女性；⑤患者拒絕參與研究。

1.2 DCE-MRI檢查方法

儀器選擇Signa Excite HD 3.0T超導型磁共振掃描儀(美國GE公司)及8通道乳腺專用線圈?；颊呷「┡P位，足先進，雙乳自然懸垂于線圈內，保持呼吸均勻。先行常規(guī)橫軸位T2WI(TR/TE 4300 ms/61 ms，F(xiàn)OV 159 mm×340 mm，矩陣320×320，層厚4 mm)、T1WI平掃(TR/TE 6.0 ms/2.5 ms，F(xiàn)OV 340 mm×340 mm，矩陣320×320，層厚4.0 mm)及DWI(TR/TE 7500 ms/81 ms，F(xiàn)OV 159 mm×340 mm，矩陣220×220，層厚5.0 mm，b值=50、400、1000 s/mm2)掃描。然后行T1增強前多翻角掃描(TR/TE 5.0 ms/1.7 ms，F(xiàn)OV 340 mm×340 mm，矩陣224×224，層厚1.0 mm，翻轉角5°、15°)、T1動態(tài)增強掃描(VIBRANT 3D序列：TR/TE 5.0 ms/1.7 ms，F(xiàn)OV 340 mm×340 mm，矩陣224×224，層厚1.0 mm，35個時相)。對比劑選擇釓噴酸葡胺注射液(廣州康臣藥業(yè)有限公司，國藥準字H10950272)經肘靜脈注入，注射總量0.2 ml/kg，注射速率4.0 ml/s，注射后使用50 ml生理鹽水以同樣流速沖洗。動態(tài)增強掃描后立即行VIBRANT 軸位延遲期掃描(TR/TE 8.8 ms/4.3 ms，F(xiàn)OV 340 mm×340 mm，層厚1.0 mm)。

1.3 圖像分析

選擇2名高年資影像學醫(yī)師雙盲下閱片，將圖像導入GE AW 4.4后處理工作站處理，避開血管、脂肪、鈣化及壞死區(qū)域，選擇腫瘤實質成分強化最明顯區(qū)作為感興趣區(qū)(ROI)，共選取3個ROI，記錄所測參數(shù)的平均值作為最后參數(shù)值。選擇經典Tofts模型，測量DCE-MRI定量參數(shù)：Ktrans值、Kep值。

1.4 免疫組化測定及分子分型

①乳腺術后標本經甲醛固定、石蠟包埋，切片(4 μm厚)，將切片置于60 ℃烤箱烘烤1 h，脫蠟至水，PBS沖洗(3 min×3次)，室溫下孵育20min，除去組織中內源性過氧化物酶，PBS沖洗(3 min×3次)，滴加普通山羊血清(1∶10)孵育15 min；去除組織切片上血清后，滴加一抗，4 ℃過夜，室溫下靜置1 h，PBS沖洗(3 min×3次)，滴加生物素標記的二抗，室溫下孵育30 min；滴加辣根過氧化物酶，室溫下孵育30 min，PBS沖洗(3 min×3次)，DAB顯色，蘇木精復染，中性樹膠封片。判定標準：雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)染色后陽性細胞≥10%判定為受體陽性[弱陽性(+)：10%～25%；陽性(++)：25%～75%；強陽性(+++)：>75%]，陽性細胞<10%判定為受體陰性(-)；人表皮生長因子受體-2(HER-2)定位于細胞膜，將(-)及(+)判定為HER-2陰性，將(+++)判定為HER-2陽性，(++)者行熒光原味雜交法檢測，將基因擴增者判定為HER-2陽性，反之為HER-2陰性；Ki67定位于細胞核，將陽性細胞≤14%判定為Ki67陰性，將陽性細胞>14%判定為Ki67陽性。②參照St.Gallen國際乳腺癌會議定義的乳腺癌分子分型[6]分為以下亞型：Luminal A型(ER或PR陽性，HER-2陰性，Ki67低表達≤14%)；Luminal B型(ER或PR陽性，HER-2陰性，Ki67高表達>14%)；HER-2+型(ER或PR陽性，HER-2陽性，Ki67任意表達)；三陰性乳腺癌(TNBC)型(ER、PR、HER-2均為陰性，Ki67任意表達)。

1.5 統(tǒng)計學分析

2 結果

2.1 不同分子亞型乳腺癌DCE-MRI定量參數(shù)比較

136例乳腺癌中Luminal A型40例，Luminal B型58例，HER-2+型25例，TNBC型13例。TNBC型患者DCE-MRI定量參數(shù)(Ktrans、Kep)顯著高于Luminal A型、Luminal B型及HER-2+型，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；Luminal A型、Luminal B型、HER-2+型患者DCE-MRI定量參數(shù)(Ktrans、Kep)比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2 不同受體表達與DCE-MRI定量參數(shù)比較

ER陰性組DCE-MRI定量參數(shù)(Ktrans、Kep)顯著高于ER陽性組，PR陰性組DCE-MRI定量參數(shù)(Ktrans、Kep)顯著高于PR陽性組，Ki67高表達組DCE-MRI定量參數(shù)(Ktrans、Kep)顯著高于Ki67低表達組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；HER-2陽性組和HER-2陰性組DCE-MRI定量參數(shù)(Ktrans、Kep)比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 不同分子亞型乳腺癌DCE-MRI定量參數(shù)比較

注：*為與TNBC型比較，P<0.05。

表2 不同受體表達與DCE-MRI定量參數(shù)比較

3 討論

研究證實[7]，乳腺癌的發(fā)生發(fā)展及預后轉歸與腫瘤血管生成情況密切相關。DCE-MRI是一種無創(chuàng)灌注功能性成像的檢查手段，可通過血流動力學相關信息反映腫瘤血管生成情況，為腫瘤定性、診斷及治療方案的制定提供依據(jù)，現(xiàn)已成為反映腫瘤生長、轉移及預后評價的主要影像學檢查方式[8-9]。Ktrans和Kep是DCE-MRI定量動力學參數(shù)，Ktrans指對比劑從血管腔內擴散到組織間隙的滲透率，Kep指對比劑從組織間隙回流到血管腔內的滲透率。有研究發(fā)現(xiàn)[10]，高灌注與高通透性腫瘤患者對新輔助化療的敏感性較高。李麗環(huán)等[11-12]研究均發(fā)現(xiàn)，TNBC患者具高Ktrans值、高Kep值特征，本研究與之相符，其原因可能在于TNBC患者腫瘤血管迂曲、擴張，新生血管較為豐富，血管壁通透性增加，滲透性高。

ER和PR為乳腺癌患者常用診斷指標，可指導內分泌治療方案的制定及患者預后評估[13]。江歌麗等[14]研究發(fā)現(xiàn)，ER、PR均為陽性表達的患者對內分泌治療敏感，治療效果明顯，患者預后生存率更高，而ER、PR均為陰性表達的患者則相反，治療效果并不理想，預后較差。本研究ER陰性及PR陰性患者Ktrans值、Kep值均顯著高于ER陽性與PR陽性患者(P<0.05)，可認為ER陰性及PR陰性患者反流回腫瘤毛細血管腔內的對比劑更多，導致毛細血管通透性增加。張玉洲等[15]研究發(fā)現(xiàn)，ER可下調血管內皮生長因子(VEGF)的表達，從而發(fā)揮抑制腫瘤血管生成的作用。故筆者總結認為ER陰性及PR陰性患者腫瘤新生血管比陽性者更豐富，血流動力學參數(shù)值更高，轉移傾向明顯。

HER-2對調節(jié)細胞生長、分化、增殖具重要作用，正常乳腺腫瘤中為低表達，HER-2過表達則提示腫瘤細胞增殖旺盛，侵襲力強，此類患者多預后較差，復發(fā)率高。同時HER-2的表達情況還可指導妥珠單抗靶向治療等用藥方案的選擇。本研究HER-2陽性組和HER-2陰性組Ktrans值、Kep值比較，差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，與楊晶等[12]研究一致，提示HER-2的表達與腫瘤血管生成及血流動力學參數(shù)無明顯相關性，其原因可能與HER-2蛋白質表達與基因擴增不一致相關。

Ki67是與細胞增殖密切相關的核抗原，Ki67表達程度越高，細胞增殖程度越高，可將其用于評估腫瘤細胞的增殖活性、侵襲性及患者預后情況。本研究Ki67高表達組Ktrans值、Kep值顯著高于Ki67低表達組(P<0.05)，與王世健等[16]研究一致，提示Ki67高表達患者血管成熟度低，腫瘤分化差，血管通透性高，腫瘤局部血流灌注增加，惡性程度較高。

綜上所述，DCE-MRI定量參數(shù)Ktrans、Kep雖不能準確鑒別不同分子亞型的乳腺癌患者，但與其預后因子(ER、PR、HER-2、Ki67)具一定相關性，可反映乳腺癌的生物學行為，間接評估患者預后，為乳腺癌患者臨床診療方案的制定提供參考。