細(xì)胞DNA定量分析聯(lián)合宮頸細(xì)胞涂片在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價值

徐 琭 崇慶國 單錦妹

我國每年新增大約13萬的宮頸癌患者，且有約5萬例患者死于宮頸癌[1]。對宮頸上皮內(nèi)瘤變進(jìn)行早期診斷以及治療是防治宮頸浸潤癌的重要環(huán)節(jié)。近年來，宮頸細(xì)胞學(xué)檢測技術(shù)得到迅速的發(fā)展，特別是在制片以及取材方法上獲得了較大的進(jìn)步，如用液基涂片取代常規(guī)的直接細(xì)胞涂片，用宮頸刷來取代常規(guī)的宮頸刮板[2-3]。本研究對細(xì)胞DNA定量分析聯(lián)合宮頸細(xì)胞涂片在宮頸癌篩查中的應(yīng)用價值進(jìn)行了分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2015年10月至2018年10月我院進(jìn)行宮頸癌篩查且有活檢結(jié)果的3294例患者，患者無任何自覺癥狀或者出現(xiàn)接觸性出血、白帶異常、陰道流血癥狀?；颊吣挲g19 ～ 65歲，平均 (39.72 ± 6.41) 歲；所有患者在就診時均未處于妊娠狀態(tài)，并且均未行子宮切除手術(shù)。

1.2 方法

每位患者均同時制2張宮頸細(xì)胞涂片，其中一張采取 Feulgen 染色法，并進(jìn)行細(xì)胞 DNA定量，具體方法如下：采用貝克曼z2全自動細(xì)胞像分析儀對宮頸細(xì)胞涂片進(jìn)行掃描，選取大約 8000個細(xì)胞核。每個細(xì)胞核可以產(chǎn)生超過100個參數(shù)的特征值。全自動細(xì)胞分析儀通過分析這些細(xì)胞核的特征值，可以自動的實施分類處理。標(biāo)準(zhǔn)：①可疑：增生細(xì)胞數(shù)量占所有檢測到細(xì)胞總數(shù)量的5%～10%，或發(fā)現(xiàn)DNA指數(shù)≥2.5 的倍體異常細(xì)胞1～2個，應(yīng)當(dāng)建議患者半年后開展復(fù)查。②陰性：所有檢測到細(xì)胞中主要為正常的二倍體細(xì)胞，DNA 指數(shù)小于2.5，未發(fā)現(xiàn)任何倍體異常的細(xì)胞，增生細(xì)胞數(shù)量占所有檢測到細(xì)胞總數(shù)量的5%以下，建議患者定期進(jìn)行宮頸癌篩查。③陽性：增生細(xì)胞數(shù)量占所有檢測到細(xì)胞總數(shù)量的10%以上，或發(fā)現(xiàn)超過3個的DNA指數(shù)≥2.5的倍體異常細(xì)胞，建議患者開展進(jìn)一步的臨床活檢或陰道鏡檢查。另外一張采取巴氏染色進(jìn)行常規(guī)的細(xì)胞學(xué) TBS檢測，TBS 的分類標(biāo)準(zhǔn)如下：意義不明的不典型鱗狀上皮細(xì)胞(ASCUS)；正常范圍，未發(fā)現(xiàn)上皮內(nèi)病變或者惡性病變(NILM)；低度鱗狀上皮內(nèi)病變(LSIL)；非典型腺細(xì)胞(AGC)；高度鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)；非典型腺細(xì)胞和鱗狀細(xì)胞癌(SCC)等。

對細(xì)胞學(xué)檢查陽性或者臨床可疑的女性均開展陰道鏡檢查，且對宮頸的可疑部位采取病理活檢，病理報告分為浸潤癌、宮頸炎、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ/原位癌。

特異性=真陰性/(真陰性+假陽性)，敏感性=真陽性/(真陽性+假陰性)，陰性預(yù)測值=真陰性/(真陰性+假陰性)，陽性預(yù)測值=真陽性/(真陽性+假陽性)。

1.3 統(tǒng)計學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 2種檢查方法與病理學(xué)結(jié)果的對照

以病理學(xué)結(jié)果作為診斷的金標(biāo)準(zhǔn)，3294例中共有慢性宮頸炎3177例，宮頸癌7例，67例CINⅠ，22例CINⅡ，21例CINⅢ。細(xì)胞學(xué) TBS檢測對 15例宮頸癌、CINⅡ、CINⅢ患者診斷為 ASCUS，可能會由于建議復(fù)查而推遲病理學(xué)檢查，導(dǎo)致病情貽誤。細(xì)胞 DNA 定量分析對40例宮頸癌、CINⅡ、CINⅢ患者均檢測為陽性，3例CINⅠ患者判定結(jié)果為可疑。細(xì)胞學(xué) TBS聯(lián)合細(xì)胞DNA 定量分析，除了2例 CINⅠ患者判定為可疑外，其余的癌前病變患者均可以被檢出，見表1。

表1 2種檢查方法與病理學(xué)結(jié)果的對照/例

2.2 細(xì)胞DNA定量分析與細(xì)胞學(xué)TBS診斷的準(zhǔn)確性比較

細(xì)胞學(xué) TBS診斷的特異性為65.85%，敏感性為82.56%；細(xì)胞DNA定量分析的特異性為68.75%，敏感性為88.23%；聯(lián)合檢測的敏感性和陰性預(yù)測值均為100.00%，見表2。

表2 細(xì)胞 DNA 定量分析與細(xì)胞學(xué) TBS診斷效能的比較/%

3 討論

定期篩查是預(yù)防宮頸癌的有效方法。宮頸癌早期的癥狀普遍不典型，當(dāng)患者由于身體出現(xiàn)不適而到醫(yī)院檢查時常常病情已發(fā)展至中晚期，而近年來宮頸癌的發(fā)病率迅速升高，嚴(yán)重威脅著女性的健康[4]。宮頸癌患者的疾病發(fā)展過程中可逆轉(zhuǎn)且有較長時間的癌前病變期，需要 5 ～ 15 年的時間，為早發(fā)現(xiàn)和早治療宮頸癌患者創(chuàng)造了有利的時機(jī)[5-6]。降低以及預(yù)防宮頸癌發(fā)生的關(guān)鍵在于對宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變患者的早期診斷。宮頸細(xì)胞學(xué)檢測、巴氏涂片、陰道鏡檢查以及人乳頭瘤病毒-DNA檢測是早期篩查宮頸癌的常用手段。

細(xì)胞學(xué)檢測是篩查及診斷宮頸病變的第一步，在診斷宮頸癌的過程中發(fā)揮著較為重要的作用。但是細(xì)胞學(xué)檢測主要根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)學(xué)進(jìn)行診斷，技術(shù)人員必須具備極為豐富的操作經(jīng)驗，否則可能會造成敏感性降低、假陽性及假陰性發(fā)生率升高[7]。經(jīng)細(xì)胞DNA定量分析技術(shù)通過檢測機(jī)體中的DNA水平，從而可以了解和掌握患者腫瘤細(xì)胞相關(guān)的遺傳基因發(fā)生變異的過程。在較高級別的HSIL和宮頸鱗狀細(xì)胞癌患者中，均可以發(fā)現(xiàn)DNA倍體異常的細(xì)胞[8-9]。細(xì)胞癌變的本質(zhì)在于細(xì)胞快速出現(xiàn)無限的轉(zhuǎn)移以及增殖，檢測細(xì)胞核的DNA含量，能有效診斷惡性腫瘤。如果機(jī)體內(nèi)出現(xiàn)異倍體細(xì)胞，則表明染色體的數(shù)量以及結(jié)構(gòu)發(fā)生率異常的改變，并且也可以作為細(xì)胞發(fā)生癌變的早期臨床特征，異倍體細(xì)胞的數(shù)量越多，表明腫瘤細(xì)胞的惡性度越高，分化程度越低[10]。本研究發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞學(xué) TBS診斷的特異性為92.83%，敏感性為 53.19%；細(xì)胞 DNA 定量分析的特異性為98.69%，敏感性為100.00%；聯(lián)合檢測的敏感性和陰性預(yù)測值均為100.00%。表明細(xì)胞DNA定量分析技術(shù)的敏感性明顯高于細(xì)胞學(xué)TBS診斷，若能把兩種檢測方法聯(lián)合使用，則可以將敏感性提高至100.00%。因此，將細(xì)胞DNA定量分析方法應(yīng)用于宮頸癌的篩查之中，能有效提高敏感性，避免漏診。細(xì)胞 DNA定量分析方法對臨床醫(yī)師掌握技術(shù)的要求程度較低，操作較為簡單，通過短時間的培訓(xùn)后，臨床醫(yī)師就能開展操作，因此與常規(guī)的細(xì)胞學(xué) TBS診斷相比較，更適合用于臨床宮頸癌的篩查。

綜上所述，在常規(guī)的宮頸細(xì)胞涂片細(xì)胞學(xué)檢查中聯(lián)合采取細(xì)胞 DNA 定量分析技術(shù)在宮頸癌篩查中具有較高的應(yīng)用價值。