Xklp2靶蛋白在結(jié)直腸癌中的表達及與其臨床病理特征的關(guān)系

賈 樂 尚淑平

數(shù)據(jù)顯示，結(jié)直腸癌屬于消化道常見腫瘤之一，位居惡性腫瘤死亡率第4位[1]。我國近些年結(jié)直腸癌發(fā)病率及死亡率也呈現(xiàn)遞增趨勢，35歲以上人群中結(jié)直腸癌的發(fā)病率約為24～32/10萬，死亡率約為4.0%，位居我國惡性腫瘤發(fā)病第三位和死亡第五位，對居民生命健康造成嚴重威脅[2]。近些年流行病學(xué)及分子生物學(xué)的發(fā)展，使結(jié)直腸癌的高危因素及相關(guān)基因逐漸明確[3]。TPX2是1種受細胞周期嚴格調(diào)控的相關(guān)蛋白，在細胞有絲分裂中發(fā)揮重要作用[4]，本文作者通過研究發(fā)現(xiàn)，TPX2在結(jié)直腸癌患者中呈現(xiàn)高表達狀態(tài)，其表達水平與患者TNM分期、浸潤深度及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在明顯關(guān)聯(lián)，且TPX2表達與患者癌細胞增殖及血管新生過程是否有關(guān)，現(xiàn)詳述如下。

1 材料與方法

1.1 資料

選擇2015年1月至2017年1月于寶雞市中醫(yī)醫(yī)院進行治療的30例結(jié)直腸癌患者與銅川市礦務(wù)局中心醫(yī)院進行治療的37例結(jié)直腸癌患者為研究對象，采集其結(jié)直腸癌組織標本及癌旁組織標本，另選取70例正常結(jié)直腸黏膜作為對照組，67例結(jié)直腸癌患者中男性37例，女性30例，年齡44～68歲，平均年齡(53.06±2.65)歲，70例正常對象中男性35例，女性35例，年齡45～69歲，平均年齡(53.18±1.98)歲，兩組一般資料如性別、年齡等對比差異不具有統(tǒng)計學(xué)意義。

納入標準：①結(jié)直腸癌患者均經(jīng)病理學(xué)診斷確診；②病歷資料齊全；③結(jié)直腸癌患者未接受放化療、免疫治療；④調(diào)研經(jīng)醫(yī)院倫理學(xué)會批準實施；⑤研究對象及其家屬對本次調(diào)研過程、方法、原理等清楚明白并簽署知情同意書。

排除標準：①合并精神障礙者；②合并其他惡性腫瘤者③既往放化療史。

1.2 方法

取結(jié)直腸癌患者癌組織、癌旁組織，取健康對照組患者結(jié)直腸癌黏膜，使用液氮及多聚甲醛進行固定后使用石蠟包埋，連續(xù)切取4 μm切片，逐級脫蠟至水，使用雙氧水沖洗，高溫高壓修復(fù)，加入一抗，放入濕盒內(nèi)，置于4 ℃保存，加入生物素標記，室溫放置20 min，脫水處理后封片，置于電子顯微鏡下觀察；抽取結(jié)直腸癌患者空腹靜脈血5 ml，分離血清后檢測其血清CEA及VEGF水平。

1.3 觀察指標及評測標準

1.3.1 不同組織TPX2表達陽性率檢測 對結(jié)直腸癌組織、癌旁組織及正常結(jié)直腸黏膜TPX2的表達陽性率進行觀測，標本檢測陽性率根據(jù)其免疫組化結(jié)果及陽性細胞比例進行記錄，免疫組化結(jié)果判定選擇如下方式：根據(jù)其著色強度，無色為0分，淡黃色為1分，棕黃色為2分，褐色、黑色為3分；陽性細胞比例按如下標準：≤10%為1分，11%～50%為2分，51%～75%為3分，75%以上為4分，兩項相乘<3分為陰性，≥3分為陽性[5]。

1.3.2 TPX2陽性率與臨床病理關(guān)系 對結(jié)直腸癌患者臨床病理特征進行分析，就其癌組織TPX2表達陽性率與其性別、年齡、TNM分期、是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、分化程度、病灶大小、浸潤深度之間的關(guān)系進行探究。

1.3.3 TPX2表達陽性率與其1年生存率關(guān)系 根據(jù)結(jié)直腸癌患者TPX2表達是否為陽性將其區(qū)分為陽性組與陰性組，對兩組患者進行1年遠期隨訪，對比其生存率。

1.3.4 TPX2表達陽性率與其癌細胞活力及血管新生關(guān)系 根據(jù)結(jié)直腸癌患者TPX2表達是否為陽性將其區(qū)分為兩組，分析對比兩組患者的血清CEA及VEGF水平。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 不同組織TPX2表達陽性率對比

經(jīng)評估對比，癌組織TPX2表達陽性率85.07%(57/67)高于癌旁組織34.33%(23/67)，癌旁組織高于正常組織8.57%(6/70)(P均<0.05)。

2.2 TPX2陽性率與其臨床病理的關(guān)系

經(jīng)評估對比，發(fā)現(xiàn)TPX2表達陽性率與結(jié)直腸癌患者TNM分期、浸潤深度及是否淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系(P<0.05)，與患者性別、年齡、分化程度、腫瘤直徑不存在明顯聯(lián)系(P>0.05)，見表1。

表1 TPX2陽性率與結(jié)直腸癌臨床病理的關(guān)系(例，%)

2.3 TPX2表達陽性與患者1年生存率的關(guān)系

經(jīng)檢查，結(jié)直腸癌中TPX2表達陽性患者為57例，陰性者為10例，隨訪1年示，陽性患者1年生存率為63.16%(36/57)，陰性患者1年生存率為80.00%(8/10)，兩組對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。

2.4 TPX2表達陽性與其癌細胞活力及血管新生關(guān)系

經(jīng)評估對比，TPX2陽性結(jié)直腸癌患者血清CEA及VEGF水平明顯高于陰性組患者，對比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

表2 TPX2表達陽性率與其癌細胞活力及血管新生關(guān)系

3 討論

結(jié)直腸癌是全球三大惡性腫瘤之一，也是我國常見惡性腫瘤，數(shù)據(jù)顯示，30年來我國結(jié)直腸癌發(fā)病率以每年3%～4%的比率不斷攀升，雖然我國2012年結(jié)直腸癌標化發(fā)病率為14.2/10萬，位居世界第75位，暫處非高發(fā)水平，但我國結(jié)直腸癌的發(fā)病和死亡總例數(shù)卻位居世界第一位，據(jù)國家癌癥中心全國腫瘤登記數(shù)據(jù)報告，我國結(jié)直腸癌病死率位居惡性腫瘤第4位，已經(jīng)成為威脅居民生命健康的重要因素[6-7]。早期的檢測及干預(yù)可提高結(jié)直腸癌患者的生活質(zhì)量，延長其生存期的重要手段，以往結(jié)直腸癌病情判斷多依賴病理學(xué)檢查，此方式檢驗周期長、患者較為痛苦，臨床推廣難度也較大。近些年，隨著對腫瘤細胞和分子水平研究的深入，各類腫瘤標志物在惡性腫瘤病情分析及預(yù)后判斷中發(fā)揮出越來越重要的作用[8]。

TPX2是脊柱動物中一類新的紡錘體成分家族，該物質(zhì)為組成紡錘體的微管蛋白，廣泛分布于S期和G2期，在細胞的有絲分裂中發(fā)揮著重要作用，此類物質(zhì)的表達水平受到細胞周期的嚴格調(diào)控，隨著細胞周期的變化而不斷變動，其異常表達往往與細胞核的異常增殖有密切聯(lián)系。學(xué)者熊超[9]通過將42例結(jié)直腸癌組織與癌旁組織進行切片染色對比的方式發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸癌組織TPX2蛋白陽性表達率明顯高于癌旁組織，該學(xué)者分析認為，TPX2能夠與Aurora A激酶相互作用從而促進該蛋白在紡錘體中定位，從而起到啟動有絲分裂及紡錘體聚集的作用，因而其高表達，提示細胞正處于積極分裂狀態(tài)，與癌組織的增殖擴散密切相關(guān)。學(xué)者劉潔等[10]也通過將72例結(jié)直腸癌、68例不典型增生組織及42例正常結(jié)直腸黏膜進行對比分析的方式發(fā)現(xiàn)，TPX2在3組標本中的表達水平呈現(xiàn)明顯差異，表達陽性率分別為66.7%、47.0%及7.1%，同時該研究還指出，TPX2表達與結(jié)直腸癌患者的臨床分期、浸潤深度密切相關(guān)，表明TPX2可能與結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展有聯(lián)系。

本文比對分析發(fā)現(xiàn)，癌組織TPX2表達陽性率高于癌旁組織，癌旁組織高于正常組織，同時本研究還發(fā)現(xiàn)，TPX2表達陽性率與結(jié)直腸癌患者TNM分期、浸潤深度及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在密切聯(lián)系。本文作者分析認為，TPX2的過量表達能夠促進微管的形成，對細胞有絲分裂起促進作用，同時TPX2還能夠從細胞核逃逸以調(diào)解非有絲分裂細胞的微管細胞骨架，因而該物質(zhì)能夠影響細胞周期，現(xiàn)階段已有多項研究證明，TPX2在肝癌、胃癌、胰腺癌、肺癌等都存在多表達狀態(tài)，分析其原因為TPX2能夠使細胞中心體異常擴增，使細胞遲滯于G2/M期，抑制細胞的凋亡，促進細胞增殖，從而促進腫瘤病灶的生長。本文研究同時發(fā)現(xiàn)，TPX2表達陽性患者其血清CEA及VEGF水平明顯高于表達陰性患者，CEA是臨床上常用的腫瘤標志物，能夠反映腫瘤的負荷程度及癌細胞的活力，而VEGF是介導(dǎo)血管新生的重要物質(zhì)，其高表達提示血管正處于積極生長狀態(tài)，與癌組織擴散增殖有密切聯(lián)系，也印證了TPX2與腫瘤生長相關(guān)這一觀點。

總而言之，TPX2在結(jié)直腸癌患者中呈現(xiàn)高表達狀態(tài)，其表達水平與患者TNM分期、浸潤深度及是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在明顯關(guān)聯(lián)，且TPX2表達與患者癌細胞增殖及血管新生過程有一定聯(lián)系，可以將該物質(zhì)作為新的腫瘤標志物，對結(jié)直腸癌患者病情進行判斷。