不同殺菌劑對油菜菌核病菌的防治效果研究

徐雪亮　劉子榮　黃衍章　劉小娟　陳慶隆　熊煥華　姚英娟　王奮山

摘要：為了篩選適合江西省油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）防治的殺菌劑，采用菌落直徑法和大田常規(guī)噴霧法，分別研究了8種化學(xué)殺菌劑對油菜菌核病菌的室內(nèi)毒力及田間防治效果。結(jié)果表明，菌核病菌對戊唑醇、咪鮮胺、氟啶胺、多菌靈、啶酰菌胺、腐霉利和吡唑醚菌酯均表現(xiàn)出高度敏感，EC50在0.005～0.174 μg/mL，對代森錳鋅不敏感。田間防治效果表明，腐霉利、多菌靈、戊唑醇和吡唑醚菌酯的效果較好，防治效果分別為86.44%、82.48%、81.35%和77.40%。

關(guān)鍵詞：油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）;化學(xué)殺菌劑;毒力;防治效果

中圖分類號：S432.4 ? ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A

文章編號：0439-8114（2019）18-0062-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2019.18.015 ? ? ? ? ? 開放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識碼（OSID）：

Study on the effect of different fungicides on Sclerotinia sclerotiorum

XU Xue-liang1，LIU Zi-rong1，HUANG Yan-zhang2，LIU Xiao-juan1，CHEN Qing-long1，

XIONG Huan-hua1，YAO Ying-juan1，WANG Fen-shan1

（1.Applied Agricultural Micro-organism Research，Jiangxi Academy of Agricultural Sciences，Nanchang 330200，China;

2.College of Plant Protection，Anhui Agricultural University，Hefei 230036，China）

Abstract： In order to select suitable fungicides for the control of rape sclerotinia stem rot（Sclerotinia sclerotiorum） in Jiangxi province， the toxicity of 8 fungicides on Sclerotinia sclerotiorium was tested in laboratory by colony diameter law， and the experiment of controlling effect was carried out in field by conventional spray. The results showed that the Sclerotinia sclerotiorium was highly sensitive to tebuconazole， pochloraz， fluazinam， carbendazim， boscalid， procymidone and pyraclostrobin， EC50 of which were between 0.005 μg/mL and 0.174 μg/mL， but insensitive to mancozeb. Procymidone， carbendazim，tebuconazole， pyraclostrobin showed better controlling effect in field， with efficacy of 86.44%， 82.48%， 81.35% and 77.40%， respectively.

Key words： Sclerotinia sclerotiorum; chemical fungicides; toxicity; controlling effect

油菜（Brassica campestris L.）是世界上主要的油料作物，具有食用和觀賞價值。中國是油菜主產(chǎn)國之一，種植面積約占全球的30%[1]。在油菜整個生育期會發(fā)生多種病害，導(dǎo)致油菜減產(chǎn)，油料品質(zhì)下降，其中危害較重的是油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum），該病原菌為核盤菌，可侵染油菜莖稈、花瓣和果實等地上部分，嚴(yán)重時植株干枯倒伏，角果量減少或發(fā)育不良，千粒重下降。油菜菌核病每年可造成10%～50%的減產(chǎn)，最高發(fā)病率可達(dá)80%[2]。

江西是中國油菜主產(chǎn)省之一，油菜種植面積位列全國前五，但產(chǎn)量不高，低于全國平均水平[1]。據(jù)統(tǒng)計，2016年江西省油菜菌核病的發(fā)生面積為20.15萬hm2，平均病株率為21.61%，實際損失達(dá)1.27萬t[3]，因此，制定有效的油菜菌核病防控措施是提高油菜產(chǎn)量的關(guān)鍵。化學(xué)殺菌劑是目前防治油菜菌核病最直接有效的方法，以多菌靈為代表的苯并咪唑類殺菌劑和以菌核凈為代表的二甲酰亞胺類殺菌劑對菌核病有很好的防治效果，但由于長期單一使用，選擇壓力大，病原菌對這些藥劑產(chǎn)生了抗藥性，并且不同地區(qū)的抗性水平差異較大[4-7]。

本研究以江西省南昌市油菜菌核病菌為研究材料，通過室內(nèi)毒力測定和田間防治效果試驗，分析8種化學(xué)殺菌劑對菌核病菌的抑制效果，以期為江西省油菜菌核病的藥劑防治提供依據(jù)。

1 ?材料與方法

1.1 ?材料

1.1.1 ?供試菌種 ?油菜菌核病菌菌核于2017年采自江西省南昌市，參考許大鳳等[8]的方法，用75%乙醇浸泡10 min，無菌水漂洗3次后，用0.1%升汞浸泡3～5 min，無菌水沖洗3次，在濾紙上吹干。用手術(shù)刀將消毒后的菌核切片，置于PDA平板上，20 ℃培養(yǎng)。7 d后收集平板上的菌核，烘干備用。

1.1.2 ?供試藥劑 ?供試藥劑名稱、生產(chǎn)廠家及田間用藥量見表1。

1.2 ?方法

1.2.1 ?室內(nèi)毒力測定 ?所有藥劑均用無菌水稀釋成母液，再將母液稀釋成不同質(zhì)量梯度預(yù)溶液，加入到PDA培養(yǎng)基中，配制成含有不同濃度農(nóng)藥的培養(yǎng)基。采用菌落直徑法[9]，菌核消毒后，在PDA培養(yǎng)基20 ℃培養(yǎng)4～5 d后，在菌落邊緣取菌餅接到新的PDA培養(yǎng)基培養(yǎng)，1～2 d后在菌落邊緣取菌餅，接種到含藥培養(yǎng)基上，以不含農(nóng)藥的培養(yǎng)基作為對照，每個濃度設(shè)3次重復(fù)，20 ℃培養(yǎng)。用十字交叉法測量菌落直徑，計算生長抑菌率。

抑菌率=（對照菌落直徑-處理菌落直徑）/（對照菌落直徑-菌餅直徑）×100%

1.2.2 ?田間防治效果試驗 ?試驗地點位于江西省南昌縣武陽鎮(zhèn)，試驗地塊平整且常年實行水稻油菜輪作，正常水肥管理，栽培油菜品種為甘藍(lán)型中雙11。每個小區(qū)15 m2（10.0 m×1.5 m），共播種5行（行距0.3 m）。在盛花期采用手動噴霧器進(jìn)行葉面噴霧，每個處理重復(fù)4次，各小區(qū)隨機(jī)排列，噴液量5 L，以噴施清水為空白對照，殺菌劑用量見表1。

分別在盛花末期和角果期進(jìn)行防治效果調(diào)查，每小區(qū)選3個點，每點調(diào)查30株，盛花末期調(diào)查病株數(shù)，角果期調(diào)查病株數(shù)和發(fā)病程度，分級標(biāo)準(zhǔn)見表2。計算病株率、病情指數(shù)和防治效果。

病株率=發(fā)病株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100%

病情指數(shù)=∑（各病情分級代表值×各受害級株數(shù)）/（最高級代表值×調(diào)查總株數(shù)）×100

防治效果=（對照區(qū)病情指數(shù)-處理區(qū)病情指數(shù)）/對照區(qū)病情指數(shù)×100%

1.3 ?數(shù)據(jù)分析

用SPSS軟件分析菌核病菌對不同藥劑的敏感性，以藥劑質(zhì)量濃度的對數(shù)值為x，生長抑制率轉(zhuǎn)換成的幾率值為y，計算毒力回歸方程和EC50。采用DPS v3.01數(shù)據(jù)處理軟件對不同藥劑的田間防治效果進(jìn)行方差分析，將田間病株率和防治效果進(jìn)行反正弦平方根轉(zhuǎn)換，病情指數(shù)不進(jìn)行轉(zhuǎn)換，用Duncans新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較，數(shù)據(jù)后不同小寫字母表示處理間存在顯著差異（P<0.05）。

2 ?結(jié)果與分析

2.1 ?油菜菌核病菌對不同殺菌劑的敏感性

從表3可以看出，油菜菌核病菌對所試藥劑都表現(xiàn)出敏感性，除80%代森錳鋅可濕性粉劑外，對其他藥劑均高度敏感。其中，油菜菌核病菌對25%咪鮮胺乳油、500 g/L氟啶胺懸浮劑、80%多菌靈可濕性粉劑、50%啶酰菌胺水分散粒劑、25%吡唑醚菌酯乳油敏感性最強，EC50在0.036～0.086 μg/mL，其次為430 g/L戊唑醇懸浮劑和50%腐霉利可濕性粉劑，EC50分別為0.129、0.174 μg/mL，對80%代森錳鋅可濕性粉劑的敏感性最差，EC50為22.057 μg/mL。

2.2 ?不同殺菌劑對油菜菌核病的田間防治效果

不同殺菌劑對油菜菌核病的田間防治效果見表4。由表4可以看出，在盛花末期，除80%代森錳鋅可濕性粉劑外，其他殺菌劑處理的病株率均顯著低于對照。其中，25%吡唑醚菌酯乳油、50%腐霉利可濕性粉劑、430 g/L戊唑醇懸浮劑、50%啶酰菌胺水分散粒劑、80%多菌靈可濕性粉劑和500 g/L氟啶胺懸浮劑處理的效果最好，病株率均在2.00%以下;在角果期，不同殺菌劑均表現(xiàn)出不同程度的防治效果，50%腐霉利可濕性粉劑的防治效果明顯優(yōu)于其他藥劑，高達(dá)86.44%。80%多菌靈可濕性粉劑、430 g/L戊唑醇懸浮劑和25%吡唑醚菌酯乳油也有較好的防治效果，分別為82.48%、81.35%和77.40%，而80%代森錳鋅可濕性粉劑的防治效果不理想，僅為16.94%。

3 ?小結(jié)與展望

防治油菜菌核病的措施有農(nóng)業(yè)防治、生物防治、選育抗病品種和化學(xué)防治等，化學(xué)防治是目前最常用最有效的方法[10]。但抗藥性的產(chǎn)生給化學(xué)防治帶來了新的挑戰(zhàn)，自1995年以來，國內(nèi)相繼報道油菜菌核病菌對多菌靈的抗性，之后又發(fā)現(xiàn)菌核凈的抗性菌株，最近的研究發(fā)現(xiàn)，油菜菌核病菌對腐霉利和異菌脲也有很高的抗藥性風(fēng)險[4-6，9，11]。不同地區(qū)病原菌對藥劑敏感性差異較大，因地制宜選用藥劑是菌核病化學(xué)防治的關(guān)鍵。

本研究以江西省南昌市菌核病菌為研究對象，在室內(nèi)毒力測定試驗中，病原菌對戊唑醇、咪鮮胺、氟啶胺、多菌靈、啶酰菌胺、腐霉利和吡唑醚菌酯均表現(xiàn)出高度敏感，對代森錳鋅不敏感。在田間防治效果試驗中，腐霉利、多菌靈、戊唑醇和吡唑醚菌酯對菌核病有顯著防治效果，代森錳鋅的防治效果最差。

綜合室內(nèi)毒力測定和田間防治效果，認(rèn)為腐霉利、多菌靈、戊唑醇和吡唑醚菌酯可以作為防治菌核病的理想藥劑。秦虎強等[12]發(fā)現(xiàn)，腐霉利和戊唑醇可以有效防治陜西省菌核病?？涤獾萚13]也發(fā)現(xiàn)山西省和內(nèi)蒙古自治區(qū)菌核病菌株對腐霉利高度敏感。王志超[14]研究發(fā)現(xiàn)吡唑醚菌酯對菌核病菌具有很強的抑制效果。

本研究中，多菌靈在室內(nèi)和田間試驗中都表現(xiàn)出很強的抑菌效果。中國很多地區(qū)都存在多菌靈的抗性菌株，但由于使用歷史和使用頻率的不同，不同地區(qū)的抗性頻率差異較大，甚至近年來有的省份抗性頻率呈現(xiàn)逐年下降的趨勢[5]。本研究結(jié)果表明，目前南昌市的菌株對多菌靈的抗性較低，這可能是因為使用頻率低，菌株對該藥不易產(chǎn)生抗性，所以多菌靈可以作為江西省油菜菌核病的供選防治藥劑。

已有研究表明，菌核病菌對代森錳鋅敏感性較低[13]，田間防治效果試驗中，代森錳鋅的防治效果也較差[15]，與本研究結(jié)果一致，說明代森錳鋅不適合用于菌核病的防治。

化學(xué)防治雖直接、高效，但是在實際應(yīng)用中，應(yīng)該注意避免長期單一使用同種藥劑，可幾種藥劑交替使用或者復(fù)配使用，同時結(jié)合合理的栽培措施和加強田間管理，減少化學(xué)藥劑的使用量，延緩抗藥性的產(chǎn)生。本研究中防治效果較好的腐霉利、多菌靈、戊唑醇和吡唑醚菌酯是否可以復(fù)配使用，增加防治效果，還有待于進(jìn)一步研究。

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