振腹環(huán)揉法對失眠大鼠血清腦腸肽影響的研究

吳彥嬌 于水柔 唐嬋 鄭丹 賈宏梅 張紅石

摘要：本項(xiàng)目是對失眠大鼠進(jìn)行腹部推拿，通過檢測失眠大鼠血清腦腸肽中的p物質(zhì)和β內(nèi)啡肽來研究振腹推拿的方法對失眠大鼠的影響，從而進(jìn)一步對失眠進(jìn)行研究，本項(xiàng)目旨在運(yùn)用推拿手法幫助解決現(xiàn)在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題，減少藥物對身體的損害，提高護(hù)理的保健意識和社會保健意識[1]。

關(guān)鍵詞：振腹環(huán)揉法;失眠大鼠;研究

中圖分類號：G642.0? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A? ? ?文章編號：1674-9324（2019）44-0067-02

失眠是一種十分普遍的疾病，在睡眠障礙中受到主要的關(guān)注，失眠患者的主要表現(xiàn)有入睡困難、睡眠質(zhì)量下降和睡眠時(shí)間減少等表現(xiàn)[2]。不僅如此，長期失眠還可以造成記憶功能下降、注意功能下降、計(jì)劃功能下降，從而導(dǎo)致白天困倦，工作能力降低，在停止工作時(shí)容易出現(xiàn)日間嗜睡現(xiàn)象[3]。

一、實(shí)驗(yàn)材料

1.實(shí)驗(yàn)動物。本實(shí)驗(yàn)動物由長春市億斯實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限責(zé)任公司（動物許可證號：SCXK（吉）-2016-0003，序號201900026508）提供，wistar大鼠30只，體重200—220g。實(shí)驗(yàn)場所：長春中醫(yī)藥大學(xué)針灸經(jīng)絡(luò)研究所。

2.飼養(yǎng)環(huán)境。室內(nèi)溫度控制在20℃—22℃，相對濕度45%—65%，自然光，避免噪聲和其他干擾。將30只大鼠先適應(yīng)性喂養(yǎng)7天，大鼠自由進(jìn)食飼料和水，墊料保持干燥，7天后稱量體重。普通飼料按國家實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)成分統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)配置[4]。

二、實(shí)驗(yàn)分組

大鼠正常喂養(yǎng)1周后，按體重隨機(jī)分組，分為模型組、藥物組、推拿組，每組大鼠按自然序號進(jìn)行標(biāo)記，采用熒光涂抹技術(shù)，在大鼠身上用黃色熒光筆進(jìn)行標(biāo)記[5]。

三、實(shí)驗(yàn)藥物與設(shè)備

（一）實(shí)驗(yàn)藥物

對苯丙氨酸（PCPA），美國Sigma公司，CAS NO.742400-2。人參歸脾丸，貴州同濟(jì)堂制藥有限公司，批號：國藥準(zhǔn)字Z20010033[6]。配水為湯。戊巴比妥鈉，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司，批號：WS20130601。p物質(zhì)試劑盒：南京建成生物工程研究所，p物質(zhì)凍干粉，批號：KIT2019012。β內(nèi)啡肽試劑盒：南京建成生物工程研究所，β內(nèi)啡肽凍干粉，批號：KIT2019016。

（二）實(shí)驗(yàn)儀器

上海精密科學(xué)儀器有限公司JY10001電子秤;賽多利斯科學(xué)儀器北京有限公司BSA124S-CW精密電子秤;酶標(biāo)儀：伯騰酶標(biāo)儀BIOTek-SMAT;恒溫水浴箱：精宏XWTD-8222。

四、實(shí)驗(yàn)方法

（一）實(shí)驗(yàn)動物的失眠造模

30只大鼠同時(shí)進(jìn)行失眠造模，造模采用腹腔注射PCPA混懸液，連續(xù)注射2天，RCPA臨用前按大鼠100mg/kg用量，用弱堿性生理鹽水配置成混懸液備用，第一次腹腔注射36小時(shí)后，大鼠出現(xiàn)晝夜節(jié)律缺失[7]，白天與夜晚皆活動不斷，造模大鼠腹腔注射戊巴比妥30mg/Kg（預(yù)實(shí)驗(yàn)測得引起100%大鼠睡眠的最小劑量）。提起大鼠尾巴[4]，將大鼠腹部朝上放在墊塊上記錄大鼠的睡眠潛伏期及睡眠持續(xù)時(shí)間，以翻正反射消失為發(fā)生睡眠。以翻正反射，提示造模成功。

（二）實(shí)驗(yàn)方法

1.模型組：每天按照正常標(biāo)準(zhǔn)喂食、喂水。

2.藥物組：每天按照人∶大鼠=1∶30的比例，對藥物組大鼠灌胃按體重轉(zhuǎn)毫升數(shù)[8]。

3.推拿組：取穴及部位：中脘、神闕、中極，腹部。手法：摩法、振法。以爽身粉為推拿介質(zhì)，以臍為中心順時(shí)針掌摩全腹5分鐘[9，10]，以調(diào)暢氣機(jī);雙手指腹加團(tuán)揉全腹10分鐘，以調(diào)臟通腑、平衡陰陽;單掌按振中脘穴2分鐘，單掌掌振神闕穴3分鐘，單掌閃振中極穴5分鐘，以健脾和胃，補(bǔ)益氣血;隨呼吸掌按腹部，以神闕穴為中心，吸氣時(shí)深按，吐氣時(shí)輕抬，時(shí)間5分鐘，以引氣歸元，寧心安神。

五、觀測指標(biāo)

1.p物質(zhì)。ELISA檢測法：腹腔靜脈取血5ml，分離血清，用鼠p物質(zhì)ELISA檢測試劑盒檢測血清p物質(zhì)的濃度，嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作。于波長450nm的酶儀上讀取各孔的OD值。

2.β內(nèi)腓肽。ELISA檢測法：腹腔靜脈取血5ml，分離血清，采用β內(nèi)啡肽ELISA試劑盒，嚴(yán)格按照試劑盒要求進(jìn)行操作。于波長450nm的酶儀上讀取各孔的OD值。

六、數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析擬采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件完成。ELISA數(shù)值計(jì)算，采用ELISAAcalc進(jìn)行計(jì)算。數(shù)據(jù)采用成組T檢驗(yàn)，進(jìn)行兩兩對比分析。

七、結(jié)果（見下表）

八、討論

失眠是一種十分普遍的生理心理疾病，有報(bào)道稱全球約一半的成年人受到慢性失眠的影響。長期失眠不僅可以造成免疫力下降、內(nèi)分泌紊亂、心功能下降等軀體機(jī)能的損傷，還會引起焦慮、注意力下降等心理功能的紊亂，本項(xiàng)目是通過振腹推拿的方法研究對失眠大鼠的影響，旨在運(yùn)用推拿手法幫助解決現(xiàn)在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題，對于提高護(hù)理的保健意識和社會保健意識有積極的意義。提高失眠患者對于自身失眠狀態(tài)的認(rèn)識和重視程度，加強(qiáng)自我保健意識，幫助解決現(xiàn)在社會上因生理、心理等原因引起的失眠問題。推拿手法屬于中醫(yī)特色，對身體沒有傷害，屬于保健類的治療方法，和藥物治療相比，安全性較高，無副作用。通過本研究探討推拿和失眠的關(guān)系及對失眠大鼠睡眠的改善情況，為臨床治療失眠提供了相關(guān)依據(jù)。腹部推拿可以提高失眠大鼠的p物質(zhì)和β內(nèi)啡肽水平，對腦組織及晝夜節(jié)律變化有較好的輔助作用。

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