邊緣前皮質(zhì)α1受體調(diào)節(jié)帕金森病焦慮模型大鼠杏仁核的活動(dòng)

吳仲恒，李立博，王 濤，李文娟，席 悅，郭方圓，張巧俊

(1. 西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院康復(fù)醫(yī)學(xué)科，陜西西安 710004；2. 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生理學(xué)與病理生理學(xué)系，陜西西安 710061)

帕金森病(Parkinson’s disease, PD)是一種以運(yùn)動(dòng)障礙(運(yùn)動(dòng)遲緩、肌強(qiáng)直和靜止性震顫等)為特征的疾病，同時(shí)還具有廣泛的非運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)表現(xiàn)(如焦慮、抑郁等)[1]。帕金森病患者焦慮癥的患病率為25%～52%，焦慮既可以是抑郁障礙中的特征，也可以獨(dú)立于抑郁發(fā)生，但發(fā)病機(jī)制目前仍不清楚[2-3]。人類和嚙齒類動(dòng)物的研究證據(jù)顯示，內(nèi)側(cè)前額葉皮質(zhì)(medial prefrontal cortex, mPFC)的邊緣前皮質(zhì)(prelimbic cortex, PrL)亞區(qū)通過與杏仁核雙向聯(lián)系調(diào)節(jié)恐懼和焦慮行為的表達(dá)[4]。本課題組前期研究也證實(shí)，6-羥基多巴胺(6-hydroxydopamine, 6-OHDA)單側(cè)損毀內(nèi)側(cè)前腦束(medial forebrain bundle, MFB)的PD模型大鼠產(chǎn)生焦慮樣行為[5-6]，這些改變與PrL中谷氨酸能神經(jīng)元過度活動(dòng)以及杏仁核中多巴胺(dopamine, DA)含量下降有關(guān)[5-7]。PD患者或動(dòng)物模型的5-羥色胺能(serotonin, 5-HT)和去甲腎上腺素能(noradrenaline, NA)遞質(zhì)系統(tǒng)亦受到顯著影響[5-8]。其中，α1腎上腺素受體(α1受體)在與焦慮等情感行為調(diào)節(jié)的mPFC和杏仁核中表達(dá)豐富[9]。僅有少量研究顯示，體循環(huán)給予α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素可以逆轉(zhuǎn)尼古丁所導(dǎo)致的小鼠焦慮樣行為[10]；α1受體拮抗劑哌唑嗪在斑馬魚剝奪睡眠的焦慮模型中可產(chǎn)生抗焦慮樣作用[11]。我們推測，激活或阻斷PrL內(nèi)α1受體可能通過調(diào)節(jié)PrL和杏仁核活動(dòng)參與PD焦慮樣行為的調(diào)節(jié)，但目前尚未見相關(guān)研究報(bào)道。

因此，本研究以6-OHDA損毀的PD模型大鼠為對象，觀察激活或阻斷PrL內(nèi)α1受體對大鼠焦慮樣行為的影響及對杏仁核內(nèi)單胺類遞質(zhì)含量和c-Fos表達(dá)的影響。闡明PrL內(nèi)α1受體激活或阻斷對PD相關(guān)焦慮樣行為及杏仁核活動(dòng)的影響。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇體質(zhì)量240～330 g的雄性Sprague-Dawley大鼠(西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)。動(dòng)物許可證號：SCXK(陜)2012-003。大鼠在標(biāo)準(zhǔn)環(huán)境下飼養(yǎng)[12 h晝/夜循環(huán)，室溫(22±2)℃]并自由飲水、攝食。

1.2 主要試劑與儀器6-OHDA、阿樸嗎啡(apomorphine, APO)、苯腎上腺素(phenylephrine, 選擇性α1受體激動(dòng)劑)和苯那沙坦(benoxathian，選擇性α1受體拮抗劑)等購自美國Sigma公司；酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase, TH)試劑盒、多克隆兔抗c-Fos購自美國Chemicon公司。主要儀器包括腦立體定位儀(SN-2N，日本Narishige公司)、高效液相色譜系統(tǒng)(美國ESA公司)、數(shù)碼攝像機(jī)(HR-550E，日本SONY公司)和微量注射器(上海安亭微量進(jìn)樣器廠)等。

1.3 大鼠PD模型的建立與分組根據(jù)Paxinos-Watson大鼠腦立體定位圖譜確定右側(cè)MFB位置(AP -4.3～4.4 mm，ML 1.2～1.3 mm, DV 7.8 mm距硬腦膜)[12]。模型具體制備過程參照前期的研究[5-7]。模型組大鼠MFB內(nèi)注射6-OHDA(12 μg/4 μL)，假手術(shù)組大鼠注射4 μL生理鹽水作為對照。手術(shù)1周后，采用APO誘發(fā)旋轉(zhuǎn)實(shí)驗(yàn)評估6-OHDA損毀是否成功。大鼠頸部皮下注射APO(0.05 mg/kg)，藥物注射后15 min內(nèi)如果大鼠出現(xiàn)向損毀對側(cè)的持續(xù)旋轉(zhuǎn)行為，且>20圈/5 min判定為合格的PD模型，可用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)[13]。

假手術(shù)組及PD模型組大鼠進(jìn)行隨機(jī)分組如下：生理鹽水/生理鹽水(n=10)、生理鹽水/苯腎上腺素(n=10)、生理鹽水/苯那沙坦(n=10)、苯那沙坦/苯腎上腺素(n=8)。

1.4 導(dǎo)向套管的埋置和PrL內(nèi)藥物注射參考Paxinos-Watson大鼠腦立體定位圖譜確定右側(cè)PrL位置(AP +3.3 mm，ML 0.7 mm，DV 1.8～2.0 mm距硬腦膜)[12]。導(dǎo)向套管埋置過程參考前期的研究[5-6]。大鼠在套管埋置手術(shù)完成后恢復(fù)1周后進(jìn)行導(dǎo)管內(nèi)給藥。拔出內(nèi)芯后將1 μL微量注射器插入導(dǎo)向套管(尖端位于套管末端下1 mm)，每次注射藥物或溶媒0.5 μL，注射時(shí)間60 s，留針60 s后移除。苯那沙坦5 μg/只，苯腎上腺素10 μg/只。藥物注射后10 min開始行為學(xué)實(shí)驗(yàn)測試，注射間隔5 min，劑量選擇基于大鼠在體實(shí)驗(yàn)報(bào)道[14-15]。

1.5 行為學(xué)實(shí)驗(yàn)所有行為學(xué)實(shí)驗(yàn)均在MFB內(nèi)注射生理鹽水或6-OHDA后第4周內(nèi)進(jìn)行。測試時(shí)間定于上午9∶00-12∶00，檢測地點(diǎn)選擇一間隔音的房間。整個(gè)過程用HR-550E數(shù)碼相機(jī)記錄，結(jié)果由2名不了解實(shí)驗(yàn)分組情況的觀察人員進(jìn)行分析。曠場實(shí)驗(yàn)通過測定大鼠在中央?yún)^(qū)內(nèi)停留時(shí)間百分比反映焦慮樣行為[16]。中央?yún)^(qū)停留時(shí)間百分比=[中央?yún)^(qū)停留時(shí)間(s)/300(s)]×100%，該值降低提示焦慮樣行為的出現(xiàn)。

1.6 組織學(xué)與免疫組織化學(xué)檢測行為學(xué)實(shí)驗(yàn)完成后，采用水合氯醛(600 mg/kg, i.p.)對大鼠進(jìn)行深度麻醉，然后應(yīng)用0.01 mol/L PBS溶液150 mL快速心臟灌注，40 g/L多聚甲醛250 mL固定。斷頭、剝離腦組織，將剝離好的腦組織后固定4 h后轉(zhuǎn)移至含蔗糖溶液(質(zhì)量濃度300 g/L)中直至沉底。在恒冷切片機(jī)上行連續(xù)冠狀冰凍切片，片厚30 μm，收集包含PrL結(jié)構(gòu)的組織切片行尼式染色，觀察PrL基本結(jié)構(gòu)、確定套管埋置位置。對包含黑質(zhì)致密部(substantia nigra compacta, SNc)和腹側(cè)被蓋區(qū)(ventral tegmental area, VTA)區(qū)的組織切片行酪氨酸羥化酶(tyrosine hydroxylase, TH)免疫組織化學(xué)染色，觀察DA神經(jīng)元的變性丟失程度評估MFB損毀情況。TH染色后對SNc及VTA中DA能神經(jīng)元計(jì)數(shù)，每只大鼠選取3張切片計(jì)數(shù)，取平均值。

1.7 單胺類遞質(zhì)含量的測定6-OHDA損毀MFB后第4周，采用高效液相色譜-電化學(xué)檢測法(HPLC-ED)測定假手術(shù)組和損毀組大鼠杏仁核DA、NA和5-HT 3種單胺類遞質(zhì)的含量。通過導(dǎo)向套管向假手術(shù)組和PD模型組大鼠PrL內(nèi)注射生理鹽水(n=10)、苯腎上腺素(n=10)、苯那沙坦(n=10)或苯那沙坦/苯腎上腺素(n=8)，容積每只0.5 μL，給藥及檢測方法參照既往研究報(bào)道[17]。

2 結(jié) 果

2.1 PrL內(nèi)的注射位點(diǎn)尼氏染色顯微照片顯示假手術(shù)組大鼠PrL內(nèi)的注射位點(diǎn)(黑色箭頭，圖1)。

圖1 PrL注射位點(diǎn)

Fig.1 The injection site of the PrL

大鼠腦立體定位圖譜顯示PrL冠狀切面模式圖(前囟+3.2 mm，右側(cè))引自Paxinos G and Watson C[12]。標(biāo)尺：500 μm。

2.2 TH陽性神經(jīng)元計(jì)數(shù)在假手術(shù)組大鼠，SNc和VTA區(qū)TH免疫陽性神經(jīng)元的平均密度分別為(163±3)個(gè)/mm2、(291±8)個(gè)/mm2(n=8)；在PD模型組大鼠，SNc和VTA區(qū)TH免疫陽性神經(jīng)元的平均密度分別為(6±4)個(gè)/mm2、(84±5)個(gè)/mm2(n=10)。與假手術(shù)組大鼠比較，PD模型組大鼠SNc和VTA區(qū)TH免疫陽性的神經(jīng)元數(shù)目均下降(t=116.00，P<0.001，圖2、圖3)。

圖2 大鼠SNc和VTA區(qū)TH免疫陽性神經(jīng)元計(jì)數(shù)

Fig.2 Counts of TH immunoreactive positive neurons in the SNc and VTA

與假手術(shù)組比較，***P<0.001。

2.3 6-OHDA損毀、激活和阻斷PrL內(nèi)α1受體對大鼠焦慮樣行為的影響曠場實(shí)驗(yàn)中，各組中央?yún)^(qū)停留百分比符合方差齊性(F=2.864，P<0.05)。雙因素方差分析(損毀×藥物)顯示損毀因素(F1,76=18.859，P<0.001)和藥物因素(F3,76=30.137，P<0.001)均能對大鼠的中央?yún)^(qū)停留時(shí)間百分比產(chǎn)生影響。兩兩比較顯示，與局部注射生理鹽水相比，PrL內(nèi)注射苯腎上腺素降低了假手術(shù)組和PD模型組大鼠在中央?yún)^(qū)停留時(shí)間的百分比(假手術(shù)組P<0.001，PD模型組P<0.05，圖4)，表明誘導(dǎo)焦慮樣反應(yīng)。與苯腎上腺素作用相比，苯那沙坦增加兩組大鼠在中央?yún)^(qū)停留時(shí)間的百分比(假手術(shù)組P<0.001；損毀組P<0.05)，表明抗焦慮樣反應(yīng)。若假手術(shù)組和損毀組大鼠預(yù)先給予苯那沙坦則可以阻斷苯腎上腺素的效應(yīng)(P<0.001，圖4)。

圖3 中腦冠狀位TH免疫組織化學(xué)染色顯微照片

Fig.3 TH immunohistochemical staining of mesencephalic coronal sections

A和B分別為代表性的假手術(shù)組和PD模型組大鼠SNc和VTA的TH染色結(jié)果，左側(cè)為注射側(cè)，右側(cè)為未注射側(cè)。MTN：內(nèi)側(cè)終核(medial terminal nucleus of the accessory optic tract)。

圖4 曠場實(shí)驗(yàn)觀察6-OHDA單側(cè)損毀MFB和PrL內(nèi)注射α1受體激動(dòng)劑或拮抗劑對大鼠焦慮樣行為的影響

Fig.4 Histograms showing the effects of 6-OHDA lesion, intra-PrL injection of the α1-adrenoceptor agonist phenylephrine and antagonist benoxathian on anxiety-like behavior measured by the open field test

與假手術(shù)組(Sham)相比，***P<0.001；與同組內(nèi)注射生理鹽水組(Saline/Saline)相比，#P<0.05，###P<0.001；與同組內(nèi)注射苯腎上腺素組(Saline/Benoxathian)相比，&&&P<0.001。

2.4 6-OHDA損毀、激活和阻斷PrL內(nèi)α1受體對杏仁核單胺類遞質(zhì)含量的影響與假手術(shù)組相比，6-OHDA單側(cè)損毀MFB降低了大鼠損毀側(cè)杏仁核中的DA含量(t=11.073，P<0.001)，而損毀并沒有改變這些腦區(qū)中NA和5-HT的含量(圖5)。

圖5 6-OHDA 單側(cè)損毀MFB對杏仁核DA、NA和5-HT含量的影響

Fig.5 Effects of 6-OHDA lesion on DA, NA and 5-HT in theamygdala

與假手術(shù)組比較，***P<0.001。

PrL內(nèi)局部注射苯腎上腺素對杏仁核中單胺類遞質(zhì)水平的影響見圖6。在假手術(shù)組大鼠，與PrL內(nèi)注射生理鹽水相比，PrL內(nèi)給予苯腎上腺素增加了杏仁核內(nèi)DA水平(P<0.001，圖6A)，但并沒有改變杏仁核內(nèi)NA的水平(圖6C)。苯腎上腺素顯著增加假手術(shù)組大鼠杏仁核內(nèi)5-HT含量(P<0.001，圖6E)。在PD模型組大鼠，相同劑量的苯腎上腺素增加了杏仁核中NA含量(P<0.01，圖6C)，但杏仁核內(nèi)DA水平并未發(fā)生改變(圖6A)。同時(shí)，苯腎上腺素增加PD模型組大鼠杏仁核內(nèi)5-HT水平(P<0.001，圖6E)。

PrL內(nèi)局部注射苯那沙坦對杏仁核中單胺類遞質(zhì)水平的影響見圖6。在假手術(shù)組大鼠，與PrL內(nèi)注射生理鹽水相比，PrL內(nèi)給予苯那沙坦明顯降低了杏仁核內(nèi)DA水平(P<0.001，圖6B)，但并沒有改變杏仁核內(nèi)NA的水平(圖6D)。苯那沙坦降低假手術(shù)組大鼠杏仁核內(nèi)5-HT含量(P<0.001，圖6F)。在PD模型組大鼠，相同劑量的苯那沙坦降低了杏仁核中NA 含量(P<0.001，圖6D)，但杏仁核內(nèi)DA水平并未發(fā)生改變(圖6B)。同時(shí)，苯那沙坦降低損毀組大鼠杏仁核內(nèi)5-HT水平(P<0.001，圖6F)。

2.5 激活和阻斷PrL內(nèi)α1受體對杏仁核c-Fos表達(dá)的影響PrL內(nèi)局部注射苯腎上腺素或苯那沙坦后，對杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元密度的影響見圖7。在假手術(shù)組大鼠，PrL局部注射生理鹽水后，杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的平均密度為(796±21)個(gè)/mm2(n=8)，PrL內(nèi)局部注射苯腎上腺素或苯那沙坦后，杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的平均密度分別為(1 160±46)、(758±30)個(gè)/mm2(n=8)，與注射生理鹽水組相比，局部注射苯腎上腺素后，杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的平均密度顯著增加(n=8，P<0.001)；在PD模型組大鼠，PrL局部注射生理鹽水后，杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的平均密度為(726±40)個(gè)/mm2(n=8)，PrL內(nèi)局部注射苯腎上腺素或苯那沙坦后，杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的平均密度分別為(1 249±12)、(655±78)/mm2(n=8)，與注射生理鹽水相比，局部注射苯腎上腺素后，杏仁核中表達(dá)c-Fos陽性神經(jīng)元的平均密度增多(n=8，P<0.001)。而PrL局部注射苯那沙坦后，兩組大鼠的杏仁核中c-Fos表達(dá)陽性神經(jīng)元的平均密度均未發(fā)生變化。

圖6 PrL內(nèi)給予α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素和拮抗劑苯那沙坦對杏仁核內(nèi)3種單胺類遞質(zhì)含量的影響

Fig.6 Effects of intra-PrL injection of the α1-adrenoceptor agonist phenylephrine and antagonist benoxathian on the levels of three monoamines in the amygdala

與注射生理鹽水組(Saline)大鼠比較，**P<0.01，***P<0.001。

圖7 PrL局部注射α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素或拮抗劑苯那沙坦對mPFC和杏仁核中c-Fos表達(dá)的影響

Fig.7 Effect of intra-PrL injection of the α1-adrenoceptor agonist phenylephrine or antagonist benoxathian on the c-Fos expression in the amygdala

與注射生理鹽水組(Saline)大鼠比較，***P<0.001。

3 討 論

本實(shí)驗(yàn)的主要研究結(jié)果有以下幾方面：①6-OHDA單側(cè)損毀MFB后誘發(fā)大鼠產(chǎn)生焦慮樣行為；②在假手術(shù)組及損毀組大鼠，PrL局部給予α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素可誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生焦慮樣行為，而α1受體拮抗劑苯那沙坦產(chǎn)生了抗焦慮樣效應(yīng)；③6-OHDA損毀MFB后杏仁核內(nèi)DA含量下降；激活或阻斷PrL內(nèi)α1受體在假手術(shù)組大鼠分別增加或降低了杏仁核內(nèi)DA和5-HT含量，而損毀組大鼠則增加或降低了NA和5-HT含量；④激活2組大鼠PrL內(nèi)α1受體后杏仁核內(nèi)c-Fos陽性神經(jīng)元表達(dá)密度增加。

焦慮是PD患者常見的非運(yùn)動(dòng)系統(tǒng)癥狀之一，但PD動(dòng)物模型是否存在類似于人類的焦慮樣行為，目前研究結(jié)果不一致：一些研究顯示PD模型大鼠表現(xiàn)焦慮樣的行為[18-19]，而另一些研究顯示PD模型大鼠無焦慮樣的行為特征[20-21]。出現(xiàn)以上研究分歧的原因可能是：6-OHDA損毀部位(如MFB、SNc或紋狀體)的不同、6-OHDA損毀側(cè)(單側(cè)或雙側(cè)損毀)及損毀程度(完全或部分損毀)的區(qū)別以及行為學(xué)測試方法差異(曠場實(shí)驗(yàn)、高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)或社會(huì)干預(yù))等。本研究結(jié)果顯示，6-OHDA損毀MFB后的PD模型大鼠在曠場中央?yún)^(qū)停留時(shí)間百分比下降，表現(xiàn)出焦慮樣特征，同時(shí)，杏仁核內(nèi)DA含量顯著下降，而NA和5-HT含量無明顯變化。這一結(jié)果與課題組前期研究相一致[5-6]。

神經(jīng)解剖學(xué)研究顯示，PrL發(fā)出谷氨酸能纖維投射到杏仁核[22]，PrL神經(jīng)活動(dòng)的變化可能通過影響杏仁核活動(dòng)并參與焦慮樣行為的調(diào)節(jié)[5-6]。既往行為學(xué)研究表明：體循環(huán)給予α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素可誘發(fā)焦慮樣行為，而哌唑嗪可阻斷α1受體發(fā)揮抗焦慮樣作用[3]。大鼠杏仁中央核內(nèi)局部微量注射α1受體拮抗劑苯那沙坦后，在社會(huì)干預(yù)(social interaction, SI)實(shí)驗(yàn)中阻斷SI時(shí)間下降，表明具有抗焦慮作用[14]。但也有研究者得出不同的結(jié)論，伏隔核殼部微量注射α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素后并未改變高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中開放臂停留時(shí)間及開放臂進(jìn)入次數(shù)等焦慮樣行為[15]。本研究結(jié)果顯示，激活PrL內(nèi)α1受體可誘發(fā)或增強(qiáng)假手術(shù)組和損毀組大鼠焦慮樣行為，而阻斷該受體則發(fā)揮抗焦慮樣作用；同時(shí)，激活或阻斷PrL內(nèi)α1受體在假手術(shù)組大鼠分別增加或降低了杏仁核內(nèi)DA和5-HT含量，而損毀組大鼠則增加或降低了NA和5-HT含量。這里比較有趣的現(xiàn)象是，刺激PrL的α1受體后兩組大鼠杏仁核中5-HT呈同步升高或降低，但DA和NA遞質(zhì)變化不一致，假手術(shù)組主要改變DA含量，而PD模型組主要改變的是NA含量。參考前期的研究，我們發(fā)現(xiàn)，除DA系統(tǒng)受到顯著影響外，PD患者或動(dòng)物模型中縫背核(dorsal raphe nucleus, DRN)的5-HT能遞質(zhì)系統(tǒng)亦受到顯著影響，主要包括：5-HT能神經(jīng)元的丟失、5-HT遞質(zhì)水平下降、5-HT能神經(jīng)元過度活動(dòng)以及多種5-HT受體功能異常等[5-6,23-24]。研究還發(fā)現(xiàn)，PD患者或動(dòng)物模型藍(lán)斑(locus coeruleus, LC)出現(xiàn)顯著退行性改變，LC的NA能遞質(zhì)系統(tǒng)變化可能是對DA遞質(zhì)系統(tǒng)的代償[25]，這種代償機(jī)制可能是刺激模型組大鼠PrL內(nèi)α1受體后主要影響NA而不是DA遞質(zhì)改變。α1受體激活或阻斷參與了PrL內(nèi)DA的神經(jīng)傳遞[5-6,25]。據(jù)此我們推測：激活或阻斷PrL內(nèi)α1受體改變了Glu能神經(jīng)元活動(dòng)，進(jìn)而發(fā)出直接纖維投射或通過影響VTA、LC以及DRN等活動(dòng)間接影響包括杏仁核在內(nèi)的邊緣相關(guān)腦區(qū)三種單胺類遞質(zhì)水平，以及核團(tuán)間復(fù)雜的相互作用，參與了PD相關(guān)焦慮的發(fā)生。

c-Fos是即刻早期基因c-Fos的表達(dá)產(chǎn)物，當(dāng)神經(jīng)元的受體被刺激后，c-Fos的表達(dá)可以短暫性地增強(qiáng)，所以c-Fos陽性細(xì)胞的分布密度可以用來評價(jià)急性的神經(jīng)元活性，常用于研究深部腦刺激對相關(guān)腦區(qū)神經(jīng)元活性的影響[26]。以往及最新的研究均提示mPFC和杏仁核內(nèi)神經(jīng)元活動(dòng)的增強(qiáng)與焦慮行為相關(guān)[27-28]。本實(shí)驗(yàn)通過急性PrL內(nèi)注射α1受體激動(dòng)劑后觀察杏仁核中c-Fos陽性神經(jīng)元密度反映神經(jīng)元活性，結(jié)果顯示，PrL內(nèi)局部注射α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素后，杏仁核中的c-Fos陽性神經(jīng)元密度增加。提示PrL內(nèi)局部注射苯腎上腺素后，杏仁核中神經(jīng)元活性增強(qiáng)，進(jìn)一步解釋了PrL內(nèi)局部注射苯腎上腺素可能通過PrL與杏仁核間纖維聯(lián)系，改變了杏仁核的神經(jīng)活動(dòng)，誘發(fā)焦慮樣行為的產(chǎn)生。

綜上所述，本研究結(jié)果證實(shí)了PrL內(nèi)α1受體在調(diào)節(jié)焦慮行為中的重要作用，闡明了PrL中α1受體通過影響杏仁核的活動(dòng)參與了PD焦慮樣行為的調(diào)節(jié)。